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文檔簡介
檢測生物組織中的還原糖脂肪和蛋白質(zhì)第1頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)還原性糖的鑒定
脂質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定Clicktoaddtitleinhere4123檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)4淀粉的鑒定第2頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月(一)還原糖的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理
NaOH+CuSO4
→Cu(OH)2
藍(lán)色沉淀+……Cu(OH)2
+還原糖→Cu2
O磚紅色沉淀+……(水浴條件:50℃---65℃)葡萄糖等還原糖分子中存在醛基等還原性基團(tuán)能與斐林試劑作用生成磚紅色沉淀。斐林試劑:甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ml的CuSO4溶液第3頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月材料TextinhereTextinhereTextinhere①材料要含有豐富還原糖②材料顏色為白色或近于白色以免造成干擾選材原則富含還原糖富含蔗糖含淀粉但還原糖很少顏色干擾富含蔗糖富含還原糖第4頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月2、實(shí)驗(yàn)步驟反應(yīng)初始反應(yīng)結(jié)束磚紅色對照藍(lán)色棕色磚紅色第5頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月3、注意事項(xiàng)要選擇含還原糖豐富,顏色為白色或近于白色的植物組織斐林試劑不穩(wěn)定,一般配成甲液、乙液來分別配制、儲(chǔ)存。使用時(shí)將甲液、乙液等量混合均勻,現(xiàn)配現(xiàn)用1、材料選取2、斐林試劑對試管中的溶液進(jìn)行加熱時(shí),試管底部不要觸及燒杯底部;試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者3、水浴加熱第6頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)還原性糖的鑒定
脂肪的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定Clicktoaddtitleinhere4123檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)4淀粉的鑒定第7頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月(二)淀粉鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理2、選材選擇淀粉含量高,顏色近于白色的生物組織,如馬鈴薯塊莖研磨液淀粉遇碘會(huì)變成藍(lán)色3、過程及結(jié)果向2ml組織樣液中加兩滴碘液,搖勻后變成藍(lán)色第8頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月(三)脂肪的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理脂肪可被蘇丹Ⅲ染成橘黃色
蘇丹Ⅳ染成紅色蘇丹Ⅲ第9頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月材料選擇富含脂肪且比較大的種子,成熟花生種子是最好的選擇,實(shí)驗(yàn)前浸泡3~4小時(shí)時(shí)間過長:組織太軟,切下的薄片,不易成形時(shí)間過短:不容易切片第10頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月2、實(shí)驗(yàn)步驟第11頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月注意事項(xiàng)切片要盡可能薄,觀察時(shí)要找最薄處,最好只有1~2層細(xì)胞染色后一定要用體積分?jǐn)?shù)為50﹪的酒精溶液洗去浮色用蘇丹Ⅲ染色時(shí)間不宜過長,否則脂肪會(huì)溶解在蘇丹Ⅲ溶液中的酒精里3、注意事項(xiàng)123第12頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)還原性糖的鑒定
脂肪的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定Clicktoaddtitleinhere4123檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)4淀粉的鑒定第13頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月(四)蛋白質(zhì)的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)與雙縮脲具有相同的結(jié)構(gòu)------肽鍵,能在堿性環(huán)境下與雙縮脲試劑中的Cu2+產(chǎn)生紫色絡(luò)合物雙縮脲試劑A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ml的CuSO4溶液注:雙縮脲與雙縮脲試劑不同。第14頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月材料:浸泡1~2天的大豆種子(或豆?jié){)或雞蛋蛋白,也可用鮮肝提取液第15頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月2、實(shí)驗(yàn)步驟第16頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月3、注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)樣液要留出一份作為對照(還原糖、淀粉的鑒定也要留出樣液進(jìn)行對照)使用雙縮脲試劑時(shí),應(yīng)先加A液造成堿性環(huán)境,再加B液若使用蛋清,必須按要求稀釋,如果稀釋不夠會(huì)粘附于試管壁上,不易洗刷123第17頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月拓展:斐林試劑與雙縮脲試劑的對比
斐林試劑雙縮脲試劑鑒定成分還原糖蛋白質(zhì)鑒定原理還原糖中的醛基在加熱條件下能將Cu(OH)2中的Cu2+還原成Cu+,從而生成磚紅色Cu2O沉淀雙縮脲在堿性溶液中能與Cu2+結(jié)合生成紫色絡(luò)合物,蛋白質(zhì)分子中含有與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因而也能與Cu2+作用試劑濃度甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/mol的NaOH溶液,乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/mol的CuSO4溶液A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ml的CuSO4溶液使用方法甲液、乙液等量混合均勻后再加入樣液先加A液造成堿性環(huán)境后,再加B液使用條件水浴加熱(50℃---65℃)不加熱實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象淺藍(lán)色
棕色
磚紅色紫色
第18頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月唯一用到顯微鏡的實(shí)驗(yàn)——脂質(zhì)的鑒定唯一需要加熱的實(shí)驗(yàn)——還原糖的鑒定非還原糖中加入斐林試劑現(xiàn)象:不是無色而是藍(lán)色第19頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月
典型例題分析:
1、在“檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)”的實(shí)驗(yàn)中提供了如下備選實(shí)驗(yàn)材料:蘋果、白蘿卜、大米、韭菜的葉、核桃、油菜籽、黃豆。
【分析】實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵之一是科學(xué)選擇實(shí)驗(yàn)材料,具體分析如下:第20頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月(1)檢測還原糖時(shí),為什么不選取白蘿卜或韭菜的葉?提示:白蘿卜含還原糖很少,不符合選材的要求;韭菜的葉中含有葉綠素,不利于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察。(2)檢測脂肪時(shí),為什么不選取核桃?提示:核桃的種子雖然含有豐富的脂肪,但核桃的果皮堅(jiān)硬,種皮又有顏色,不容易去除。(3)如果把黃豆浸泡萌發(fā)成黃豆芽,能利用黃豆芽檢測蛋白質(zhì)嗎?提示:不能,因?yàn)辄S豆萌發(fā)成黃豆芽,消耗了蛋白質(zhì)。第21頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月2.鑒定某脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,不需用的化學(xué)試劑是()A.斐林試劑B.蘇丹Ⅲ染液C.雙縮脲D.甲基綠【解析】選D。甲基綠是對DNA染色,染成綠色。拓展:健康人體中,能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)的是()尿素胃液汗液唾液第22頁,課件共23頁,創(chuàng)作于2023年2月3.以花生子葉為材料進(jìn)行脂肪的檢測時(shí),制作臨時(shí)裝片的正確步驟是()①
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