hplc法測(cè)定阿利吉侖片的含量

hplc法測(cè)定阿利吉侖片的含量

阿里斯林是一種具有有效口服有效腎素濃度的非洲酰胺類(lèi)固醇。2007年美國(guó)f王批準(zhǔn)上市，2007年歐盟批準(zhǔn)上市，2009年日本批準(zhǔn)上市，2010年中國(guó)辯證法批準(zhǔn)進(jìn)口。是美國(guó)FDA批準(zhǔn)的全球首個(gè)口服非肽類(lèi)腎素抑制劑，為十多年來(lái)首個(gè)全新作用機(jī)制的抗高血壓藥?？蓡为?dú)或與其他降壓藥聯(lián)合治療高血壓1儀器和試劑盒1.1超聲清洗儀器高效液相色譜儀(water公司)；KQ-300超聲清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司)；色譜柱WaterXBridgeC18(4.6mm×250mm,5μm)。1.2測(cè)試劑對(duì)照品(供含量測(cè)定用的1批對(duì)照品，自制)；甲醇為色譜純，水為純凈水，其他試劑均為分析純，阿利吉侖片(3批樣品，自制)。2方法和結(jié)果2.1色譜柱及色譜柱采用WaterXBridgeC18(4.6mm×250mm,5μm)色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-水(40∶60)(用磷酸調(diào)pH為3.0)，稀釋液：甲醇水(1∶1)，流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm2.2溶液的制備2.2.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和溶液的制備精密稱(chēng)取阿利吉侖對(duì)照品適量，加甲醇-水(1∶1)制成阿利吉侖濃度為0.1mg/mL的對(duì)照品貯備液。2.2.2超聲提取g阿利吉侖的制備取本品20片，精密研細(xì)，精密稱(chēng)定相當(dāng)于10mg阿利吉侖置于100mL量瓶中，加40mL稀釋液超聲提取15min，冷至室溫用稀釋液稀釋至刻度搖勻，過(guò)0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即得。2.3回歸方程的建立線性溶液配制：分別精密量取對(duì)照貯備液0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2mL分別至10mL量瓶中，用稀釋液稀釋至刻度。精密吸取上述對(duì)照品溶液各進(jìn)20μL記錄峰面積，以峰面積Y為縱坐標(biāo)，濃度X(μg/mL)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得阿利吉侖的回歸方程分別為：Y=1.46E+04X+3.42E+04(r=0.9996)；結(jié)果表明阿利吉侖濃度在70～120μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。2.4峰面積進(jìn)樣檢測(cè)取阿利吉侖片(一批，自制)的供試品溶液，分別于(0、1、2、4、8、12、24h)進(jìn)樣20μl記錄峰面積，結(jié)果阿利吉侖的峰面積的RSD小于2%。結(jié)果表明，供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。2.5精密度測(cè)試2.5.1重復(fù)試驗(yàn)分別按上述供試品溶液配制溶液，平行6份，記錄峰面積計(jì)算。結(jié)果阿利吉侖含量RSD為0.6%。2.5.2注射精度分別按上述對(duì)照品溶液和供試品溶液配制溶液分別連續(xù)進(jìn)樣6針，記錄峰面積，阿利吉侖的峰面積RSD分別為0.6%、0.8%。2.5.3阿利吉侖的測(cè)定不同儀器、不同天測(cè)試同一批樣品(自制)，結(jié)果阿利吉侖含量的RSD分別為0.5%、0.4%，精密度結(jié)果的RSD均小于2.0%，表明本法精密度良好。2.6供試品溶液配制按配方比例，精密稱(chēng)取混合輔料和阿利吉侖對(duì)照品適量，按供試品溶液制備項(xiàng)下操作配成80、100、120μg/mL供試品溶液，平行3份，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。3超聲法與甲醇法比較(1)配制對(duì)照品溶液，進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，結(jié)果在280nm處有最大吸收，所以選取280nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。(2)在提取過(guò)程中，比較采用甲醇-水(1∶1)和甲醇超聲提取、過(guò)濾盒離心提取法兩種不同的方法，結(jié)果表明甲醇-水(1∶1)超聲法效果較好，簡(jiǎn)單完全。(3)為了使所檢測(cè)的色譜峰分離度好，出峰時(shí)間合理，試用甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70)及