浙江省金華市金華第一中學2023年高三高考一?？荚嚿镌囶}含解析

浙江省金華市金華第一中學2023年高三高考一?？荚嚿镌囶}考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．新型冠狀病毒入侵到機體后，吞噬細胞與T細胞結(jié)合引起T細胞釋放白細胞介素-1。白細胞介素-1能刺激T細胞釋放白細胞介素-2。白細胞介素-2能刺激T細胞釋放更多的白細胞介素-2，也能促進效應T細胞的生成。下列相關敘述錯誤的是（）A．吞噬細胞與T細胞結(jié)合時，將病毒已暴露的抗原傳遞給T細胞B．白細胞介素-2刺激更多白細胞介素-2釋放的過程屬于正反饋調(diào)節(jié)C．上述過程屬于細胞免疫，機體清除該病毒不需要體液免疫的參與D．T細胞增殖分化形成的效應T細胞能識別并裂解感染病毒的細胞2．結(jié)合圖示分析，相關敘述錯誤的是（）A．圖1所示該物質(zhì)跨膜運輸時會出現(xiàn)飽和現(xiàn)象B．圖2所示該物質(zhì)進出細胞時需要消耗能量C．圖3所示該離子通過主動運輸進入細胞，體現(xiàn)了細胞膜的選擇透過性D．圖4所示該植物吸收K+受氧氣的影響，不需要載體蛋白協(xié)助3．下列有關細胞工程的敘述，正確的是（）A．核移植得到的克隆動物，其線粒體DNA來自供卵母體B．動物細胞培養(yǎng)的理論基礎是動物細胞核具有全能性C．骨髓瘤細胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．PEG是促細胞融合劑，可直接誘導植物細胞融合4．癌胚抗原（CEA）因只在癌組織和胚胎組織中表達而得名，廣泛存在于內(nèi)胚層細胞分化而來的癌癥細胞（例如結(jié)腸癌、直腸癌、乳腺癌、肺癌）表面。因此，癌胚抗原是一種廣譜腫瘤標志物。下列關于癌細胞和癌胚抗原的說法，正確的是（）A．癌胚抗原基因只存在于癌細胞中，正常細胞沒有B．可以通過檢測血清中癌胚抗原的含量而確診腫瘤發(fā)生的部位C．早期癌癥患者可通過手術切除、放療、化療等手段進行治療D．惡性腫瘤的發(fā)生只跟致癌因子有關，跟自身的免疫能力無關5．保護生物多樣性是實現(xiàn)人類社會可持續(xù)發(fā)展的基礎，下列關于生物多樣性的說法錯誤的是（）A．生物多樣性是長期自然選擇的結(jié)果B．自然狀態(tài)下的群落演替使生物多樣性逐漸增加C．保護生物多樣性的關鍵是協(xié)調(diào)好人與生態(tài)環(huán)境的關系D．野生動植物的藥用功能體現(xiàn)了生物多樣性的潛在價值6．某農(nóng)業(yè)科研人員探究不同濃度重金屬鉛（Pb）對土壤脲酶和過氧化氫酶活性的影響，結(jié)果如圖所示。下列有關敘述錯誤的是（）A．脲酶和過氧化氫酶均通過降低活化能提高反應速率B．重金屬可能通過影響酶的空間結(jié)構影響酶的活性C．200mg·kg-1的鉛作用后脲酶和過氧化氫酶活性相同D．400mg·kg-1的鉛作用后脲酶仍能與雙縮脲試劑反應7．下列關于種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)的敘述，正確的是()A．當種群的數(shù)量超過K/2時，易導致該種群的豐富度降低B．生態(tài)系統(tǒng)中，生產(chǎn)者的同化量可以用生產(chǎn)者的干重積累量表示C．標志重捕法調(diào)查種群密度時，若標志物部分脫落，則計算出的種群密度比實際值偏大D．捕食者的存在會降低物種的多樣性，外來物種入侵會破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性8．（10分）在細菌培養(yǎng)實驗中進行計數(shù)時，應計數(shù)的是（）A．各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細菌數(shù)B．合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細菌數(shù)C．各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)D．合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)二、非選擇題9．（10分）某小組同學利用圖中裝置探究酵母菌在不同溫度下的發(fā)酵實驗，取200mL不同溫度的無菌水倒入培養(yǎng)瓶，然后加入15g葡萄糖及5g干酵母，混勻后放在相應溫度下水浴保溫，實驗進行20min，觀察現(xiàn)象如下表?；卮鹣铝袉栴}：組別處理方法實驗現(xiàn)象1冰水（0℃）沒有氣泡產(chǎn)生2涼水（10℃）只能看到少量氣泡3溫水（30℃）產(chǎn)生氣泡，由慢到快，由少到多4熱水（55℃）始終沒有氣泡產(chǎn)生（1）分析表格中的實驗現(xiàn)象，其根本原因是溫度影響了____________________，從數(shù)據(jù)中分析________（填“能”或“不能”）得到酵母菌發(fā)酵的最適溫度。（2）實驗組3的裝置中最初液滴未移動，在15min后液滴緩慢向________（填“左”或“右”）移動，整個過程細胞中產(chǎn)生該氣體的場所有_______________________。（3）有的同學認為，實驗組1和實驗組4現(xiàn)象雖然相同，但原理不同，請你說明理由_____________________________。10．（14分）在自然鼠群中，已知毛色由一對等位基因控制，A控制黃色，a1控制灰色，a2控制黑色，顯隱性關系為A＞a1＞a2，且AA純合胚胎致死。請分析回答相關問題。（1）兩只鼠雜交，后代出現(xiàn)三種表現(xiàn)型。則該對親本的基因是______，它們再生一只灰色雄鼠的概率是______。（2）現(xiàn)進行多對Aa1×a1a2的雜交，統(tǒng)計結(jié)果平均每窩出生8只小鼠。在同樣條件下進行許多Aa2×Aa2的雜交，預期每窩平均生出的黑色小鼠占比為______。（3）現(xiàn)有一只黃色雄鼠和多只其他各色的雌鼠，如何利用雜交方法檢測出該雄鼠的基因型？實驗思路及預測結(jié)果：實驗思路：______。預測結(jié)果：若子代表現(xiàn)型及比例為_______，則該黃色雄鼠基因型為Aa1。若子代表現(xiàn)型及比例為_______，則該黃色雄鼠基因型為Aa2。11．（14分）基因打靶技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發(fā)展起來的一種分子生物學技術。請結(jié)合圖示回答下列有關問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導致細胞死亡。（1）將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術將打靶載體導入胚胎干細胞，這樣打靶載體和與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細胞”或“生殖細胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。12．地膜（成分為聚乙烯，一種碳氫化合物）覆蓋技術快速推動了農(nóng)業(yè)的現(xiàn)代化進程，也造成了一定程度的“白色污染”，為解決此問題，分離出能高效降解聚乙烯的微生物就顯得尤為重要。請回答下列相關問題：（1）選擇聚乙烯分解菌的培養(yǎng)基中含有的營養(yǎng)成分有水、無機鹽、_________以及一定量的聚乙烯粉末，為使該培養(yǎng)基呈固態(tài)，需加入______，該培養(yǎng)基具有選擇作用的原因是__________________。（2）經(jīng)篩選得到具有地膜降解特性的桔青霉，為確定土壤中含有的桔青霉數(shù)量，可采用的接種方法是____________。為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)為________的平板進行計數(shù)，此方法得到的數(shù)值比直接運用顯微鏡計數(shù)得到的數(shù)值________，原因是________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解題分析】

體液免疫過程為：（1）除少數(shù)抗原可以直接刺激B細胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞，再由T細胞呈遞給B細胞；（2）B細胞接受抗原刺激后，開始進行一系列的增殖、分化，形成記憶細胞和漿細胞；（3）漿細胞分泌抗體與相應的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應。細胞免疫過程為：（1）吞噬細胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細胞；（2）T細胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細胞和效應T細胞，同時T細胞能合成并分泌淋巴因子，增強免疫功能。（3）效應T細胞發(fā)揮效應?！绢}目詳解】A、病毒侵入機體后，被吞噬細胞處理，使內(nèi)部的抗原暴露，被吞噬細胞處理的抗原傳遞給T細胞，A正確；B、T細胞釋放白細胞介素-2，白細胞介素-2能刺激T細胞釋放更多的白細胞介素-2，該過程屬于正反饋調(diào)節(jié)，B正確；C、病毒過寄生生活，當病毒入侵靶細胞后，機體需要通過細胞免疫裂解靶細胞，重新暴露出病毒，病毒和抗體結(jié)合，最終被吞噬細胞吞噬消化，需要體液免疫的參與，C錯誤；D、T細胞受抗原刺激后增殖分化形成的效應T細胞能識別病毒入侵的靶細胞，效應T細胞能與靶細胞特異性的結(jié)合，使得靶細胞裂解死亡而被清除，D正確。故選C。【題目點撥】本題以新型冠狀病毒為素材，考查了特異性免疫的相關知識，要求考生能夠掌握體液免疫和細胞免疫的過程，明確細胞免疫發(fā)揮作用的機理。2、D【解題分析】

小分子物質(zhì)的運輸方式及其特點：運輸方式運輸方向是否需要載體是否消耗能量示例自由擴散高濃度到低濃度否否水、氣體、脂類（因為細胞膜的主要成分是脂質(zhì)，如甘油）協(xié)助擴散高濃度到低濃度是否葡萄糖進入紅細胞主動運輸?shù)蜐舛鹊礁邼舛仁鞘菐缀跛须x子、氨基酸【題目詳解】A、圖1說明該物質(zhì)跨膜運輸時需要載體協(xié)助，因而會出現(xiàn)飽和現(xiàn)象，A正確；B、圖2所示物質(zhì)可以從低濃度向高濃度運輸，說明此物質(zhì)進入細胞的方式是主動運輸，所以需要消耗能量，B正確；C、圖3所示該離子進入細胞需要載體蛋白的協(xié)助，且消耗能量，說明其運輸方式為主動運輸，體現(xiàn)了細胞膜的選擇透過性，C正確；D、圖4K+跨膜運輸受氧氣的影響，說明需要消耗能量，則其運輸方式為主動運輸，因此需要載體蛋白的協(xié)助，D錯誤。故選D。3、A【解題分析】

細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié)，而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。【題目詳解】A、核移植是將供體的細胞核移植到去核的卵細胞中，因此得到的克隆動物，其線粒體DNA來自供卵母體，A正確；B、動物細胞培養(yǎng)的理論基礎是細胞分裂，B錯誤；C、骨髓瘤細胞不能產(chǎn)生抗體，需和B淋巴細胞融合形成雜交瘤細胞才能獲得單克隆抗體，C錯誤；D、PEG是促細胞融合劑，可直接誘導動物細胞融合，而植物細胞含有細胞壁，不能直接融合，D錯誤。故選A。4、C【解題分析】

癌細胞形成的外因主要是三類致癌因子，即物理致癌因子、化學致癌因子和病毒致癌因子；內(nèi)因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變．其中內(nèi)因是癌變的根本原因．癌細胞的主要特征有：1、在適宜條件下，能夠無限增殖；2、細胞形態(tài)結(jié)構發(fā)生顯著變化（如扁梭形的纖維細胞癌變后變成球形）；3、細胞表面糖蛋白等物質(zhì)減少，粘著性降低，容易在體內(nèi)分散轉(zhuǎn)移?！绢}目詳解】A、根據(jù)題干“癌胚抗原（CEA）因只在癌組織和胚胎組織中表達而得名”，故癌胚抗原基因存在于癌細胞中，也存在于正常的胚胎組織細胞中，A錯誤；

B、癌胚抗原是一種廣譜腫瘤標志物，不能通過檢測血清中癌胚抗原的含量而確診腫瘤發(fā)生的部位，B錯誤；

C、早期癌癥患者可通過手術切除、放療、化療等手段進行治療，C正確；

D、免疫系統(tǒng)可以監(jiān)控并清除自身病變的細胞，惡性腫瘤的發(fā)生跟致癌因子有關，也與自身的免疫能力有關，D錯誤。

故選C。5、D【解題分析】

1、群落演替是隨著時間的推移，一個群落被另一個群落代替的過程。2、保護生物多樣性，關鍵是要協(xié)調(diào)好人與生態(tài)環(huán)境的關系，如控制人口的增長、合理利用自然資源、防治環(huán)境污染等。保護生物多樣性，還要加強立法、執(zhí)法和宣傳教育，使每個人都理性地認識到保護生物多樣性的意義，自覺形成符合生態(tài)文明的行為和習慣。保護生物多樣性只是反對盲目地、掠奪式的開發(fā)利用，而不意味著禁止開發(fā)和利用。3、生物多樣性的價值：①潛在價值，目前人類尚不清楚的價值；②間接價值，對生態(tài)系統(tǒng)起到重要調(diào)節(jié)功能的價值，如森林和草地對水土的保持作用，濕地在蓄洪防旱、調(diào)節(jié)氣候等方面的作用；③直接價值，對人類有食用、藥用和工業(yè)原料等實用意義的，以及有旅游觀賞、科學研究和文學藝術創(chuàng)作等非實用意義的價值?！绢}目詳解】A、自然選擇是生物進化的動力之一，導致多種生物的出現(xiàn)，因而生物多樣性是長期自然選擇的結(jié)果，A正確；B、自然狀態(tài)下的群落演替使生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構更復雜，生物多樣性增加，B正確；C、保護生物多樣性，關鍵是協(xié)調(diào)好人與生態(tài)環(huán)境的關系，如控制人口的增長、合理利用自然資源、防止環(huán)境污染等，C正確；D、野生動植物的藥用功能體現(xiàn)了生物多樣性的直接價值，D錯誤。故選D?！绢}目點撥】本題主要考查對生物多樣性內(nèi)涵的理解以及對生物多樣性價值的掌握。6、C【解題分析】

本題考查酶的本質(zhì)和特性。酶是活細胞產(chǎn)生的，在細胞內(nèi)外都起作用，酶對生物體內(nèi)的化學反應起催化作用與調(diào)節(jié)人體新陳代謝的激素不同；雖然酶的催化效率很高，但它并不被消耗；酶大多數(shù)是蛋白質(zhì)，它的合成受到遺傳物質(zhì)的控制?！绢}目詳解】A、酶提高化學反應速率的機理是通過降低化學反應的活化能，A正確；B、重金屬導致酶的空間結(jié)構變化，從而影響酶的活性，B正確；C、222mg·kg-2的鉛作用后脲酶的活性是2．22mg·kg-2·h-2，過氧化氫酶的活性是2．47mL·g-2，C錯誤；D、脲酶變性后肽鍵沒有斷裂，仍能與雙縮脲試劑反應，D正確。故選C。7、C【解題分析】

標志重捕法誤差歸納：(1)統(tǒng)計值比實際值偏大的原因：①標志物易脫落：可導致重捕個體中帶標志的個體數(shù)據(jù)偏小，據(jù)計算公式N總＝初捕數(shù)×重捕數(shù)/重捕中標記數(shù)推知，重捕中標記數(shù)若減小則N總會比真實值偏大。②被捕獲一次后，難以被再次捕獲：可導致再次捕獲的個體中標記數(shù)偏小，最終統(tǒng)計結(jié)果偏差應與①相同，即比真實值偏大。(2)統(tǒng)計值比真實值偏小的原因：①標志物影響了動物活動，導致更易被捕捉：可導致再次捕獲的個體中標記數(shù)偏大，依據(jù)公式可推知，計算所得結(jié)果比真實值應偏小。②調(diào)查期間有較多個體死亡或遷出，則統(tǒng)計值將偏??；反之則導致統(tǒng)計值偏大?！绢}目詳解】A、當種群的數(shù)量超過K/2時，種內(nèi)斗爭加劇，而物種豐富度是指群落中物種數(shù)目的多少稱為豐富度，A錯誤；B、生態(tài)系統(tǒng)中，生產(chǎn)者的同化量是生產(chǎn)者固定的太陽能總量，B錯誤；C、種群中的個體數(shù)=第一次捕獲數(shù)×第二次捕獲數(shù)÷重捕標志個體數(shù)，標志物部分脫落，則計算出的種群密度比實際值偏大，C正確；D、捕食者的存在會增加物種的多樣性，外來物種入侵或引種不當（如引入我國的水葫蘆、食人魚等），則首先會減少當?shù)氐奈锓N，從而破壞當?shù)氐纳锒鄻有裕ㄖ饕ㄟ^破壞食物鏈的方式造成其他物種消失或者是瀕危），降低生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，D錯誤。故選C8、D【解題分析】

微生物的研究通常包含微生物的獲得、分離純化、培養(yǎng)以及保存等。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法，常用于分離獲得單菌落。稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞。計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)。【題目詳解】在細菌培養(yǎng)實驗中進行計數(shù)時，應對樣品進行不同程度的稀釋，計算培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，太多菌落可能堆集成一個，太少不利于統(tǒng)計，因此選擇合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)進行計數(shù)。故選D。二、非選擇題9、酵母菌細胞內(nèi)酶的活性不能右線粒體基質(zhì)和細胞質(zhì)基質(zhì)前者低溫酶的結(jié)構沒有破壞，后者高溫酶的結(jié)構已破壞【解題分析】

溫度可以影響酵母菌的呼吸酶活性進而影響其呼吸強度；酵母菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型：（1）在有氧條件下，反應式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在無氧條件下，反應式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。在有氧條件下，酵母菌消耗的氧氣與產(chǎn)生的二氧化碳量相等；在無氧條件下，酵母菌不消耗氧氣但產(chǎn)生二氧化碳?！绢}目詳解】（1）溫度影響了酵母菌細胞內(nèi)酶的活性，進而影響有氧呼吸和無氧呼吸的強度；從表中數(shù)據(jù)判斷，該實驗中，在30℃時氣體產(chǎn)生量最快、最多，各組溫度差異較大，不能得到酵母菌發(fā)酵的最適溫度；（2）實驗3的裝置中最初液滴未移動，證明酵母菌進行有氧呼吸，消耗的氧氣與產(chǎn)生的二氧化碳量相等。在15min后，氧氣消耗完畢，酵母菌進行無氧呼吸，沒有氧氣消耗，卻產(chǎn)生了二氧化碳，所以液滴緩慢向右移動，整個過程細胞中產(chǎn)生該氣體的場所有線粒體基質(zhì)和細胞質(zhì)基質(zhì)；（3）實驗組1和實驗組4都沒有氣泡產(chǎn)生，但原理不同，前者低溫酶的結(jié)構沒有破壞，后者高溫酶的結(jié)構已破壞?！绢}目點撥】本題考查酵母菌的細胞呼吸方式，考查對細胞呼吸過程、影響因素的理解，解答此題，應根據(jù)細胞呼吸反應式理解實驗裝置中液滴的移動方向，進而判斷細胞呼吸方式。10、Aa2×a1a21/41/3選用該黃色雄鼠與多只黑色雌鼠雜交，統(tǒng)計后代毛色及比例黃色：灰色=1：1黃色：黑色=1：1【解題分析】

根據(jù)題意分析可知：三種表現(xiàn)型對應的基因型如下表現(xiàn)型黃色灰色黑色基因型Aa1Aa2a1a1a1a2a2a2【題目詳解】（1）由后代有黑色a2a2可推知親代均有a2，又因后代有3種表現(xiàn)型，故親本的基因型為Aa2和a1a2；它們再生一只灰色（a1a1、a1a2）雄鼠的概率為1/2×1/2=1/4；（2）Aa2和a1a2所生的后代全部存活，而Aa2和Aa2的后代有1/4AA胚胎致死，即2只死亡，則每窩生出的黑色小鼠為1/3；；（3）要通過雜交方法檢測出黃色雄鼠的基因型（Aa1或Aa2），可用測交的方法，即將該黃色雄鼠與多只黑色（a2a2）雌鼠雜交并觀察后代毛色；如果后代出現(xiàn)黃色：灰色=1:1，則該黃色雄鼠的基因型為Aa1；如果后代出現(xiàn)黃色：黑色=1:1，則該黃色雄鼠的基因型為Aa2。【題目點撥】本題考查基因分離規(guī)律的相關知識，解題關鍵是根據(jù)題干信息判斷各表現(xiàn)型對應的基因型，據(jù)此分析作答。11、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細胞【解題分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術導入胚胎干細胞，這樣打靶載體與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性