生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)課件

第二章生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)

1第二章生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)1本章內(nèi)容概要：第一節(jié)實(shí)驗(yàn)用純水第二節(jié)常用臨床實(shí)驗(yàn)室器材（自學(xué)/復(fù)習(xí)）第三節(jié)生物化學(xué)檢驗(yàn)試劑概述第四節(jié)參考范圍和醫(yī)學(xué)決定水平第五節(jié)實(shí)驗(yàn)方法與參考物質(zhì)概述第六節(jié)實(shí)驗(yàn)方法的選擇與評(píng)價(jià)第七節(jié)實(shí)驗(yàn)的臨床診斷性能評(píng)價(jià)2本章內(nèi)容概要：第一節(jié)實(shí)驗(yàn)用純水2教學(xué)目的和要求：1、掌握診斷試劑盒的選擇與性能指標(biāo)評(píng)價(jià)，實(shí)驗(yàn)方法與參考物質(zhì)的分級(jí)，實(shí)驗(yàn)誤差、方法學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)以及五種方法學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的目的、原理、操作、計(jì)算及注意事項(xiàng)。

2、熟悉實(shí)驗(yàn)用純水的等級(jí)、制備和純度檢查，化學(xué)試劑的選擇、保存與配制，參考范圍和醫(yī)學(xué)決定水平的基本概念，實(shí)驗(yàn)方法與參考物質(zhì)的基本概念，實(shí)驗(yàn)方法的正確選擇，診斷試驗(yàn)的性能評(píng)價(jià)。3、了解參考范圍的建立，溯源性、測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)、互通性的概念，方法性能判斷。3教學(xué)目的和要求：1、掌握診斷試劑盒的選擇與性能指標(biāo)評(píng)價(jià)，實(shí)驗(yàn)第一節(jié)實(shí)驗(yàn)用純水天然水自來(lái)水實(shí)驗(yàn)用純水經(jīng)簡(jiǎn)單的物理、化學(xué)方法處理，除去懸浮物質(zhì)和部分無(wú)機(jī)鹽經(jīng)蒸餾、離子交換、活性炭吸附、超濾等處理，除去雜質(zhì)(懸浮物,膠體物質(zhì),溶解物質(zhì))4第一節(jié)實(shí)驗(yàn)用純水天然水自來(lái)水實(shí)驗(yàn)用純水經(jīng)簡(jiǎn)單的物實(shí)驗(yàn)室用水等級(jí)純水的制備方法水的純度檢查

內(nèi)容概括：5實(shí)驗(yàn)室用水等級(jí)內(nèi)容概括：5一、實(shí)驗(yàn)室用水等級(jí)表2-1美國(guó)NCCLS等級(jí)純水的規(guī)定及用途(1985)級(jí)別Ⅰ級(jí)Ⅱ級(jí)Ⅲ級(jí)pH未定未定5.0～8.0電阻率(MΩ·cm,25℃,最大量)102.01.0硅(mgSiO2/L,最大量)0.050.11.0微生物含量（每毫升最大菌落數(shù)）10103未定硅（mgSiO2/L，最大量）0.050.11.0微粒0.2μm微孔膜過(guò)濾未定未定有機(jī)物質(zhì)活性碳過(guò)濾未定未定用途原子吸收，火焰光度，熒光，電解質(zhì)，酶，高效層析，電泳，參比液，緩沖液。一般實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，器皿沖洗。器皿洗滌，要求不高的定性試驗(yàn)。美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（nationalcommitteeforclinicallaboratorystandards，NCCLS）

6一、實(shí)驗(yàn)室用水等級(jí)表2-1美國(guó)NCCLS等級(jí)純水的規(guī)定及表2-2中國(guó)國(guó)家驗(yàn)室用水GB6682-2002標(biāo)準(zhǔn)名稱一級(jí)二級(jí)三級(jí)pH范圍(25℃)－（未定）－5.0～7.5

電導(dǎo)率（25℃）ms/m≤

0.010.100.50

電阻率（25℃，MΩ·cm）≥1010.2

可氧化物質(zhì)mg/L

＜（以O(shè)計(jì)）－0.080.40

吸光度（254nm，1cm光程）≤

0.0010.01－

蒸發(fā)殘?jiān)?05±25℃）mg/L≤－1.02.0

可溶性硅（以SiO2計(jì)）mg/L

＜

0.01

0.02－7表2-2中國(guó)國(guó)家驗(yàn)室用水GB6682-2002標(biāo)準(zhǔn)名二、純水的制備方法蒸餾法離子交換法其他方法：活性炭吸附法、電滲透法、超濾膜法混合純化系統(tǒng)8二、純水的制備方法蒸餾法8（一）蒸餾法優(yōu)點(diǎn):設(shè)備簡(jiǎn)單缺點(diǎn):1、揮發(fā)性物質(zhì)難以去除，有離子干擾；2、耗能大，耗水多；3、需注意管道清潔純度：Ω·cm（25℃）的蒸餾水（deionizedwater，DW）

9（一）蒸餾法優(yōu)點(diǎn):設(shè)備簡(jiǎn)單缺點(diǎn):1、揮發(fā)性物質(zhì)難以去除，有離(二)離子交換法定義：將自來(lái)水通過(guò)離子交換樹脂以除去水中雜質(zhì)離子，稱為離子交換法。

原理：擴(kuò)散離子交換吸附10(二)離子交換法定義：將自來(lái)水通過(guò)離子交換樹脂以除去水中雜氫型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂

(R—SO3H，R為母體)

，其中的H+與Ca2+、Na+等金屬離子發(fā)生交換反應(yīng)，而將鈣、鈉離子除去

氫氧型強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂(R′—NOH，R′為母體)，其中的OH-與水中的CL-、碳酸根等陰離子發(fā)生交換反應(yīng)，而將它們除去：

離子交換反應(yīng)11氫型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂

(R—SO3H，R為母體)

，其中優(yōu)點(diǎn):除了可去除雜質(zhì)離子以外兼具吸附電中性雜質(zhì)和過(guò)濾顆粒雜質(zhì)的作用。缺點(diǎn):

純度：5MΩ·cm（25℃）以上的去離子水DW

2、由于離于交換為可逆反應(yīng)，故去離子水并非絕對(duì)不含離子

1、設(shè)備較復(fù)雜，成本較高；（目前實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用普遍）12優(yōu)點(diǎn):缺點(diǎn):純度：5MΩ·cm（25℃）以上的去離子水D（三）其他方法：

在電場(chǎng)作用下水中各種陽(yáng)離子趨向陰極，各種陰離子趨向陽(yáng)極．但陽(yáng)離子只能透過(guò)陽(yáng)膜而被相鄰的陰膜所阻，陰離子與此相反．這樣，在一些隔間內(nèi)集中了陽(yáng)離子和陰離子，即形成含鹽多的濃水，在另一些隔間內(nèi)由于陰、陽(yáng)離子的遷出降低了含鹽量形成淡水

電滲透法13（三）其他方法：在電場(chǎng)作用下水中各種陽(yáng)離子趨向1、不需要消耗化學(xué)藥品，設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便。消耗電能，當(dāng)原水中鹽濃度過(guò)低時(shí)，溶液電阻大，用電滲析也不經(jīng)濟(jì)

純度:25℃時(shí)104～105Ω·cm2、對(duì)于含鹽量高的海水等用此法比用離子交換法更為經(jīng)濟(jì)．優(yōu)點(diǎn):缺點(diǎn):電滲透法評(píng)價(jià)14消耗電能，當(dāng)原水中鹽濃度過(guò)低時(shí)，溶液電阻大，用電滲純度:炭吸附法:活性炭是一種非常優(yōu)良的吸附劑，它是利用木炭、各種果殼和優(yōu)質(zhì)煤等作為原料，通過(guò)物理和化學(xué)方法對(duì)原料進(jìn)行破碎、過(guò)篩、催化劑活化、漂洗、烘干和篩選等一系列工序加工制造而成。15炭吸附法:活性炭是一種非常優(yōu)良的吸附劑，它是利用木炭、各1、設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便。純水制備效率低,僅作為各種制備純水配套的一種措施.

2、它具有物理吸附和化學(xué)吸附的雙重特性,可以有選擇的吸附氣相、液相中的各種有機(jī)物質(zhì).優(yōu)點(diǎn):缺點(diǎn):炭吸附法評(píng)價(jià):161、設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便。純水制備效率低,僅作為各種制備純水配超濾膜法特點(diǎn):僅能除去膠體細(xì)菌等大分子物質(zhì)和懸浮物,所得水還需進(jìn)一步純化.也是作為各種制備純水配套的一種措施.17超濾膜法特點(diǎn):僅能除去膠體細(xì)菌等大分子物質(zhì)和懸浮物,所得水還混合純化系統(tǒng)醫(yī)用超純水設(shè)備實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng)櫥下式全自動(dòng)逆滲透純水機(jī)特點(diǎn):多種方法混合純化,可獲得純度很高的二級(jí)甚至一級(jí)純水.電阻率大于2.0MΩ·cm（25℃）。

18混合純化系統(tǒng)醫(yī)用超純水設(shè)備實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng)櫥下式全自動(dòng)逆滲三、水的純度檢查水電阻率或電導(dǎo)率檢查檢測(cè)殘留物含量

1.電阻率工具：電導(dǎo)儀或兆歐表

2.可溶性硅限量試驗(yàn)：以SiO2計(jì)。3.細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)表示：電導(dǎo)率為每cm長(zhǎng)的電導(dǎo)(S/cm)，電導(dǎo)儀的表頭讀數(shù)單位為μS/cm，因此電導(dǎo)儀讀數(shù)為1時(shí)，電阻率為1×106Ω·cm=1MΩ·cm步驟：19三、水的純度檢查水電阻率或電導(dǎo)率檢查檢測(cè)殘第二節(jié)常用臨床實(shí)驗(yàn)室器材一、微量加樣器的使用微量加樣器又稱微量移液器、微量進(jìn)樣器。其下端為可裝卸、可更換的尖管形移液嘴（吸頭），上方是控制采樣的推進(jìn)按鈕。

有固定式和可調(diào)式兩種類型，規(guī)格有μl級(jí)、ml級(jí)。20第二節(jié)常用臨床實(shí)驗(yàn)室器材一、微量加樣器的使用微量工作原理微量加樣器利用排代原理由活塞的定程運(yùn)動(dòng)形成負(fù)壓吸入定量的液體，其吸液量由活塞在活塞套內(nèi)移動(dòng)的距離來(lái)確定，再按下按鈕使活塞向下移動(dòng)，排出活塞腔內(nèi)的氣體而將吸頭內(nèi)的液體排出。21工作原理微量加樣器利用排代原理由活塞的定程運(yùn)動(dòng)形成負(fù)1.選擇在移液范圍內(nèi)的加樣器，若為可調(diào)式則先將容量調(diào)節(jié)到所需的容量上。2.將吸頭套在加樣器的下端，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)后牢固地套上，確保密封。3.正式使用前需連續(xù)按動(dòng)數(shù)次（不吸液體），以保持腔內(nèi)外氣壓一致。4.用手垂直握住加樣器，拇指將按鈕壓至第一停點(diǎn)（第一檔位），并將吸頭浸入到液面下1～3mm，再緩慢地放松按鈕使之復(fù)位，等待1～2s后從液體中取出時(shí)拖靠掉吸頭外部殘液于被取出的容器內(nèi)壁中。注意避免吸頭與其他任何東西碰撞。5.將吸頭移到加樣容器內(nèi)壁上，輕輕地將按鈕壓至第一停點(diǎn)將液體排出，等待1～2s，再把按鈕壓至第二停點(diǎn)（第二檔位），排盡全部液體后，吸頭應(yīng)沿容器壁向上滑動(dòng)取出，此時(shí)拖靠吸頭內(nèi)部殘液于加樣容器內(nèi)壁中。再放松按鈕使之復(fù)位，卸下吸頭，完成一次操作過(guò)程。操作方法22操作方法22第三節(jié)生物化學(xué)檢驗(yàn)試劑概述化學(xué)試劑的種類與保存化學(xué)試劑的配制試劑盒的選擇及評(píng)價(jià)23第三節(jié)生物化學(xué)檢驗(yàn)試劑概述化學(xué)試劑的種類與保存23

一、化學(xué)試劑的種類與保存

1.一級(jí)優(yōu)級(jí)純（G.R）又稱保證試劑，綠色標(biāo)簽，該級(jí)別純度最高、雜質(zhì)含量最低，適用于科研和配制校準(zhǔn)溶液.2.二級(jí)分析純（A.R）又稱分析試劑，紅色標(biāo)簽，該級(jí)別純度較高、雜質(zhì)含量較低，適用于定性和定量分析.3.三級(jí)化學(xué)純（C.P），藍(lán)色標(biāo)簽，該級(jí)別質(zhì)量略低于二級(jí)品，適用于一般定量分析和定性試驗(yàn).4.四級(jí)實(shí)驗(yàn)試劑（L.R），黃色標(biāo)簽，該級(jí)別試劑質(zhì)量較低、但比工業(yè)用高，適用于一般定性實(shí)驗(yàn).普通生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確的定量分析或配制校準(zhǔn)溶液

（一）化學(xué)試劑的種類

24一、化學(xué)試劑的種類與保存1.一級(jí)優(yōu)級(jí)純（G.R）又（二）化學(xué)試劑的保存保存原則:①按液體、固體性狀分類，同時(shí)按序排列并作好登記，貯于干燥陰冷處。②對(duì)于易燃、易揮發(fā)的藥品應(yīng)用蠟封瓶塞，貯于干燥陰冷處或冰箱內(nèi)。③強(qiáng)酸、強(qiáng)堿試劑應(yīng)分別存放。④劇毒藥品則應(yīng)由專人管理，每次使用應(yīng)記錄用量并做好登記。

25（二）化學(xué)試劑的保存保存原則:25二、化學(xué)試劑的配制配制方法：

直接配制法：適用于校準(zhǔn)液和一般試劑的配制。

間接配制法：適用于不易恒重的固體試劑和含量不準(zhǔn)的液體試劑，即先配制大概濃度，然后再用校準(zhǔn)液標(biāo)定出準(zhǔn)確濃度。

26二、化學(xué)試劑的配制配制方法：直接配制法：適用于校準(zhǔn)液和一①固體試劑恒重后準(zhǔn)確稱量②液體試劑取量時(shí)選擇合適的量器準(zhǔn)確吸取要求的體積③試劑配制的溶劑一般為蒸餾水或去離子水，應(yīng)注意對(duì)蒸餾水的要求，若需其他溶劑則需注明清楚。④各類試劑分別溶解后按要求順序混合，最后稀釋至刻度。⑤配制好的試劑應(yīng)在其容器上注明名稱、濃度以及配制時(shí)間。

注意事項(xiàng)：27①固體試劑恒重后準(zhǔn)確稱量注意事項(xiàng)：27三、試劑盒的選擇及評(píng)價(jià)試劑盒定義：用于檢驗(yàn)項(xiàng)目測(cè)定的含有使用說(shuō)明書的所有配套試劑的組合。

28三、試劑盒的選擇及評(píng)價(jià)試劑盒定義：用于檢驗(yàn)項(xiàng)目測(cè)定的含有使用（一）試劑盒的選擇生化檢驗(yàn)商品試劑盒包裝類型：液體、干粉（片）、凍干。液體型試劑盒：?jiǎn)卧噭┗螂p試劑

優(yōu)點(diǎn)：均一性好、瓶間差異較小、重復(fù)性好、不需復(fù)溶而可避免外源性水質(zhì)的影響、測(cè)定結(jié)果較為準(zhǔn)確等

不足：之處在于保存時(shí)間較短（特別是酶試劑）、不便于運(yùn)輸

29（一）試劑盒的選擇生化檢驗(yàn)商品試劑盒包裝類型：液體、干粉（片凍干型試劑：試劑溶解后先分裝成液體，再經(jīng)凍干處理而成

。干粉（片）型試劑：各種干燥的化學(xué)試劑經(jīng)粉碎混合（壓片）而成優(yōu)點(diǎn)：易于保存。不足：分裝過(guò)程中的稱量以及加工過(guò)程中的混合均易造成瓶間差；復(fù)溶對(duì)水的質(zhì)與量要求較高，同時(shí)復(fù)溶后的保存期較短、穩(wěn)定性較差，易造成浪費(fèi)。優(yōu)點(diǎn)：易于保存，各組份的混合相當(dāng)均勻不足：試劑中殘留的含水量不易準(zhǔn)確控制，易造成瓶間差；復(fù)溶對(duì)水的質(zhì)與量要求較高復(fù)溶后的保存期較短、穩(wěn)定性較差，易造成浪費(fèi)。30凍干型試劑：試劑溶解后先分裝成液體，再經(jīng)凍干處理而成。干（二）試劑盒的評(píng)價(jià)

完整牢固的內(nèi)外包裝詳盡明確的說(shuō)明書優(yōu)良的試劑外觀

2.性能指標(biāo)評(píng)價(jià)（根據(jù)國(guó)家衛(wèi)生部頒發(fā)的試劑盒質(zhì)量檢定標(biāo)準(zhǔn)）

準(zhǔn)確度精密度干擾線性范圍穩(wěn)定性反應(yīng)時(shí)間曲線

評(píng)價(jià)前校正儀器、量器，嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，由熟練的技術(shù)人員操作

31（二）試劑盒的評(píng)價(jià)完整牢固的內(nèi)外包裝2.性能指標(biāo)評(píng)價(jià)（穩(wěn)定性試驗(yàn)穩(wěn)定性試驗(yàn)是指試劑盒的不同狀態(tài)在不同條件下貯存后所能保持測(cè)定準(zhǔn)確性的性能。狀態(tài)：原包裝及配制的工作液，條件：室溫、冰箱溫度，最終指標(biāo)：有效期（一般指標(biāo)為試劑空白和高值樣本吸光度的變化范圍等）。32穩(wěn)定性試驗(yàn)穩(wěn)定性試驗(yàn)是指試劑盒的不同狀態(tài)在不同條件下第四節(jié)參考范圍和醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍33第四節(jié)參考范圍和醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍33臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果的臨床意義

正常還是異常，是否及如何給予醫(yī)療措施，療效如何等

醫(yī)學(xué)決定水平

臨界值：確定病情、判斷療效和預(yù)后項(xiàng)目參考范圍區(qū)間：解釋結(jié)果正常與否34臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果的臨床意義正常還是異常，是否及如何、參考范圍（一）參考范圍的建立（了解）建立包含內(nèi)容：參考個(gè)體參考總體參考抽樣組（參考樣本）參考值參考分布參考值范圍參考值區(qū)間等35、參考范圍（一）參考范圍的建立（了解）建立包含內(nèi)容：參考個(gè)體(所有參考值剔除離群值并補(bǔ)充數(shù)據(jù)后在95％的分布范圍)（參考范圍）36(所有參考值剔除離群值并補(bǔ)充數(shù)據(jù)后在95％的分布范圍)（參建立的注意事項(xiàng)：①參考抽樣組人數(shù)一般為100例以上；

②離群值的判斷與處理；

③項(xiàng)目偏高、偏低均屬異常的為雙側(cè)參考值區(qū)間，項(xiàng)目只偏低或只偏高屬異常的則取單側(cè)參考值區(qū)間，正態(tài)：x－或x

＋1.65s；偏態(tài)：P5或P95的參考限；④參考值范圍、參考值區(qū)間、參考范圍；⑤參考范圍并非一成不變的，不能機(jī)械地進(jìn)行比較。

37建立的注意事項(xiàng)：①參考抽樣組人數(shù)一般為100例以上；②離（二）參考范圍概念的正確使用正常值”、“正常值范圍”、“正常范圍（不合理）

參考范圍（IFCC推薦）“正常范圍”等使用不合理的原因在于：

①“正?！笔窍鄬?duì)的。②是正常的人被判為“不正?！?。③不正常的人被納入“正?！?。38（二）參考范圍概念的正確使用正常值”、“正常值范圍”、“正常二、醫(yī)學(xué)決定水平概念：是指臨床上按照不同病情給予不同處理的指標(biāo)閾值。MDL，DL（或用XC表示）可以用來(lái)除外或確定某一臨床情況或預(yù)告將會(huì)出現(xiàn)的某一生理變化現(xiàn)象。圖2-1健康與疾病的理論分布健康人群疾病患者DL1、DL2分別為低值、高值醫(yī)學(xué)決定水平，DL1左側(cè)的數(shù)值可除外B組疾??；DL2右側(cè)的數(shù)值可確定患者存在B組疾病；DL1與DL2之間則表明健康與疾病存在交叉

參考范圍39二、醫(yī)學(xué)決定水平概念：是指臨床上按照不同病情給予不同處理的指特點(diǎn)：不同指標(biāo)的ＭＤＬ的數(shù)量和數(shù)值不同40特點(diǎn)：不同指標(biāo)的ＭＤＬ的數(shù)量和數(shù)值不同40血清清蛋白（Alb）有三個(gè)DL，分別是20g/L、35g/L、52g/L。其中20g/L表示肝病患者的預(yù)后嚴(yán)重；35g/L為檢查低清蛋白血癥的界值；52g/L則稍高于參考范圍上限，可除外許多假陽(yáng)性。

醫(yī)學(xué)決定水平舉例：血清鈣有三個(gè)DL，分別是1.75mmol/L、2.75mmol/L、3.38mmol/L。1.75mmol/L作為低血鈣抽搐的第一個(gè)決定性水平值，等于或低于1.75mmol/L時(shí)，應(yīng)加做其他檢查以明確病人發(fā)生抽搐的可能性，并采取預(yù)防措施；2.75mmol/L作為觀察副甲狀腺功能是否亢進(jìn)的血清鈣低限值，等于或高于該值時(shí)，應(yīng)加做其他檢查以確診或排除原發(fā)性副甲亢的診斷；若大于3.38mmol/L則考慮為高血鈣昏迷，應(yīng)及時(shí)做出診斷，不得延誤

41血清清蛋白（Alb）有三個(gè)DL，分別是20g/L、35g/L第五節(jié)實(shí)驗(yàn)方法與參考物質(zhì)概述實(shí)驗(yàn)方法（測(cè)量方法）

測(cè)量程序

下一級(jí)方法

下一級(jí)測(cè)量程序

常規(guī)樣品

產(chǎn)生

定值

校準(zhǔn)

評(píng)價(jià)同一級(jí)參考物質(zhì)

定值

下一級(jí)參考物質(zhì)

42第五節(jié)實(shí)驗(yàn)方法與參考物質(zhì)概述實(shí)驗(yàn)方法（測(cè)量方法）測(cè)量決定性方法參考方法常規(guī)方法43決定性方法參考方法常規(guī)方法43一、實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)

（一）相關(guān)基本概念（ISO定義）1．測(cè)量方法(methodofmeasurement)進(jìn)行測(cè)量時(shí)所用的、按類別敘述的邏輯操作次序

2．測(cè)量程序(measurementprocedure)用于特定測(cè)量的、根據(jù)給定的測(cè)量方法具體敘述的一組操作3．真值與給定的特定量的定義一致的值稱為真值(truevalue)。在實(shí)際工作中經(jīng)常使用的是約定真值

4．約定真值對(duì)于真值具有適當(dāng)?shù)牟淮_定度，賦予特定量的值，有時(shí)它是通過(guò)約定而被采用的值，稱為約定真值(conventionaltruevalue)，常用某量多次測(cè)量的平均值來(lái)確定約定真值

5．不確定度(uncertainty)，評(píng)價(jià)方法的屬性，與測(cè)量結(jié)果的分散性相聯(lián)系的參數(shù)測(cè)量結(jié)果的分散性

非重復(fù)測(cè)量因素造成的結(jié)果不確定性

+44一、實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)（一）相關(guān)基本概念（ISO定義）1．測(cè)量（二）實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)分級(jí)依據(jù)：IFCC根據(jù)分析方法的準(zhǔn)確性與精密度的不同。決定性方法參考方法常規(guī)方法分為三級(jí)：45（二）實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)分級(jí)依據(jù)：IFCC根據(jù)分析方法的準(zhǔn)確性與1.決定性方法（definitivemethod）定義：

是指準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過(guò)詳細(xì)的研究，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法，其測(cè)定結(jié)果與“真值”最為接近。主要方法：重量分析法、中子活化法、同位素稀釋-質(zhì)譜分析法（ID-MS）461.決定性方法（definitivemethod）定義：主應(yīng)用：由于技術(shù)要求太高，費(fèi)用昂貴只用于產(chǎn)生一級(jí)測(cè)量程序、評(píng)價(jià)參考方法。不直接用于鑒定常規(guī)方法的準(zhǔn)確性儲(chǔ)氫重量分析儀一級(jí)參考物質(zhì)一級(jí)測(cè)量程序決定性方法產(chǎn)生

定值（注：一級(jí)測(cè)量程序適合純物質(zhì)的鑒定，不適合作生物基質(zhì)樣品的分析）

47應(yīng)用：儲(chǔ)氫重量分析儀一級(jí)參考物質(zhì)一級(jí)測(cè)量程序決定性方法產(chǎn)生2.參考方法（reference

method）定義：是指準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)被充分證實(shí)，且經(jīng)公認(rèn)的權(quán)威機(jī)構(gòu)（國(guó)家主管部門、相關(guān)學(xué)術(shù)團(tuán)體和國(guó)際性組織等）頒布的方法。這類方法干擾因素少，系統(tǒng)誤差很小，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異度、較寬的分析范圍并且線性良好，重復(fù)測(cè)定中的隨機(jī)誤差可以忽略不計(jì)。主要方法：

原子吸收分光光度法、火焰光度法、免疫化學(xué)法，離子交換層析法等分類：①公認(rèn)的參考方法②推薦的參考方法

482.參考方法（referencemethod）定義：主要方應(yīng)用：

主要用于鑒定常規(guī)方法，評(píng)價(jià)其偏差、干擾因素，并決定是否可以被接受；產(chǎn)生二級(jí)參考測(cè)量程序（適合于分析復(fù)雜生物樣品）用于鑒定二級(jí)參考物和為質(zhì)控物定值；用于商品試劑盒的質(zhì)量評(píng)價(jià)；參考方法可以產(chǎn)生出更低等級(jí)的廠家選定測(cè)量程序、廠家常務(wù)測(cè)量程序、用戶常規(guī)測(cè)量程序，分別為廠家工作校準(zhǔn)物、廠家產(chǎn)品校準(zhǔn)物和常規(guī)標(biāo)本定值。49應(yīng)用：49國(guó)際約定參考測(cè)量程序(internationalconventionalreferencemeasurementprocedure)

它們得出的結(jié)果不能溯源至SI單位，但被廣泛承認(rèn)。其可以為廠家工作校準(zhǔn)物定值。應(yīng)用：一級(jí)、二級(jí)、國(guó)際約定參考測(cè)量程序可統(tǒng)稱為參考測(cè)量程序定義：比二級(jí)參考測(cè)量程序等級(jí)低的一類程序。50國(guó)際約定參考測(cè)量程序它們得出的結(jié)果不能溯源至SI單位3．常規(guī)方法（routinemethod）定義：

應(yīng)具有足夠的精密度、準(zhǔn)確度和特異度，有適當(dāng)?shù)姆治龇秶?jīng)濟(jì)實(shí)用，其性能指標(biāo)符合臨床或其它目的的需要。主要方法：溴甲酚綠法雙縮脲法J-G法等偏差已知方法偏差未知方法分類：根據(jù)準(zhǔn)確度確定與否

513．常規(guī)方法（routinemethod）定義：主要方法應(yīng)用：臨床常規(guī)檢驗(yàn)使用常規(guī)方法在作出評(píng)定以后，經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可，可以作為推薦方法（recommendedmethod

）

產(chǎn)生用戶常規(guī)測(cè)量程序

我國(guó)臨床檢驗(yàn)中心推薦的常規(guī)方法是葡萄糖氧化酶法,己糖激酶法是國(guó)際上推薦的參考方法。52應(yīng)用：我國(guó)臨床檢驗(yàn)中心推薦的常規(guī)方法是葡萄糖氧化酶法,己糖激二、參考物質(zhì)的分級(jí)（一）相關(guān)基本概念（ISO定義）1．參考物質(zhì)：具有一種或幾種理化性質(zhì)已經(jīng)充分確定的特性，用以校準(zhǔn)儀器、評(píng)價(jià)測(cè)量方法或給材料賦值的一種材料或物質(zhì)，稱為參考物（referencematerialRM）。國(guó)內(nèi)多稱為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)物、標(biāo)準(zhǔn)品。

2．測(cè)量系統(tǒng)(measuringsystem)：完成一個(gè)項(xiàng)目所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)物、測(cè)量程序、質(zhì)量控制、保養(yǎng)計(jì)劃等的組合，又稱檢測(cè)系統(tǒng)。3．溯源性(traceability)、溯源鏈：4．參考實(shí)驗(yàn)室參考測(cè)量實(shí)驗(yàn)室的簡(jiǎn)稱，是運(yùn)行參考測(cè)量程序、提供有給定不確定度的測(cè)量結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室。

53二、參考物質(zhì)的分級(jí)（一）相關(guān)基本概念（ISO定義）1溯源性(traceability)、溯源鏈定義：通過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國(guó)家或國(guó)際測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)相聯(lián)系起來(lái)的特性，稱為溯源性。其不間斷的比較鏈稱為溯源鏈。

特點(diǎn)：溯源性是測(cè)量結(jié)果（包括測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)即校準(zhǔn)物的測(cè)量結(jié)果）的屬性，不宜用于測(cè)量方法或測(cè)量程序。了解54溯源性(traceability)、溯源鏈定義：通過(guò)一條具有溯源鏈的理想終點(diǎn)是SI單位的定義，但目前只有少部分檢驗(yàn)項(xiàng)目可以溯源至SI單位

連續(xù)的比較鏈?zhǔn)侵赣?jì)量學(xué)級(jí)別由低到高的、交替出現(xiàn)的測(cè)量程序和校準(zhǔn)物。55溯源鏈的理想終點(diǎn)是SI單位的定義，但目前只有少部分檢（二）參考物質(zhì)的分類與分級(jí)分類：按功能參考物質(zhì)

校準(zhǔn)物質(zhì)：又稱校準(zhǔn)物(calibrator)，是在校準(zhǔn)函數(shù)中其值被用作自變量的參考物質(zhì)(對(duì)測(cè)量系統(tǒng)校準(zhǔn)或?qū)Σ牧腺x值)。

正確性質(zhì)控物質(zhì)：（國(guó)內(nèi)多稱為質(zhì)控物、質(zhì)控品、控制物）是用于評(píng)價(jià)一種測(cè)量系統(tǒng)的測(cè)量偏差的參考物質(zhì)

質(zhì)控物不能當(dāng)作校準(zhǔn)物使用，校準(zhǔn)物也不能當(dāng)作質(zhì)控物使用

定值血清非定值血清凍干質(zhì)控物（血清）混合血清液體質(zhì)控物（血清）按有無(wú)測(cè)定值按物理形狀56（二）參考物質(zhì)的分類與分級(jí)分類：按功能參考物質(zhì)校準(zhǔn)物質(zhì)：又參考物質(zhì)可以是純的或混合的液體、固體（如鐠釹濾光片）或氣體（如標(biāo)準(zhǔn)的CO2氣體）。57參考物質(zhì)可以是純的或混合的液體、固體（如鐠釹57分級(jí)：根據(jù)參考物質(zhì)的校準(zhǔn)性質(zhì)分為：1．一級(jí)參考物質(zhì)（一級(jí)校準(zhǔn)物、原級(jí)參考物、一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品）

定義：是一種高度穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，所含的雜質(zhì)已經(jīng)定量。具有最高計(jì)量學(xué)特性的參考物質(zhì)，是測(cè)量單位的具體體現(xiàn)。其值由決定性方法產(chǎn)生的一級(jí)參考測(cè)量程序確定。應(yīng)用：校準(zhǔn)二級(jí)參考測(cè)量程序以及為二級(jí)參考物質(zhì)定值。一級(jí)參考物質(zhì)、二級(jí)參考物質(zhì)、工作校準(zhǔn)物三級(jí)58分級(jí)：根據(jù)參考物質(zhì)的校準(zhǔn)性質(zhì)分為：1．一級(jí)參考物質(zhì)（一級(jí)校準(zhǔn)（二級(jí)校準(zhǔn)物、次級(jí)參考物、二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品）2．二級(jí)參考物質(zhì)定義：由二級(jí)參考測(cè)量程序定值，可以是與實(shí)際臨床樣品基質(zhì)相似的物質(zhì)。應(yīng)用：校準(zhǔn)試劑盒廠家選定測(cè)量程序。在發(fā)達(dá)國(guó)家的二級(jí)參考物質(zhì)通常是有證參考物質(zhì)。需要強(qiáng)調(diào)的是，只有對(duì)于可溯源至SI單位的小分子檢驗(yàn)項(xiàng)目，才可分為一級(jí)參考物質(zhì)和二級(jí)參考物質(zhì)。

59（二級(jí)校準(zhǔn)物、次級(jí)參考物、二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品）2．二級(jí)參考物質(zhì)定義：3．工作校準(zhǔn)物(workingcalibrator)(一般參考物質(zhì)）工作校準(zhǔn)物

分類：廠家工作校準(zhǔn)物廠家產(chǎn)品校準(zhǔn)物（主要）廠家選定測(cè)量程序廠家常務(wù)測(cè)量程序定值定值有證參考物質(zhì)和一般參考物質(zhì)的區(qū)別是前者有明確的溯源性和不確定度要求

603．工作校準(zhǔn)物(workingcalibrator)(一般國(guó)際約定校準(zhǔn)物質(zhì)定義：它們的量值不能溯源至SI單位，但屬于國(guó)際約定的，因而也被廣泛承認(rèn)。由國(guó)際約定參考測(cè)量程序定值。應(yīng)用：校準(zhǔn)廠家選定測(cè)量程序。

61國(guó)際約定校準(zhǔn)物質(zhì)定義：它們的量值不能溯源至SI單位，但屬于決定性方法參考方法常規(guī)方法國(guó)際約定校準(zhǔn)物質(zhì)國(guó)際約定參考測(cè)量程序62決定性方法參考方法常規(guī)方法國(guó)際約定校準(zhǔn)物質(zhì)國(guó)際約定參考測(cè)量程第六節(jié)實(shí)驗(yàn)方法的選擇與評(píng)價(jià)

實(shí)驗(yàn)方法為臨床提供準(zhǔn)確可靠的信息臨床生化檢驗(yàn)分析保證應(yīng)用實(shí)驗(yàn)方法的選擇和評(píng)價(jià)63第六節(jié)實(shí)驗(yàn)方法的選擇與評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)誤差方法學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)實(shí)驗(yàn)方法選擇與評(píng)價(jià)的原則、內(nèi)容和步驟方法學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)

方法性能判斷主要內(nèi)容：64實(shí)驗(yàn)誤差主要內(nèi)容：64、實(shí)驗(yàn)誤差（一）概念實(shí)驗(yàn)誤差簡(jiǎn)稱誤差（error），指測(cè)量結(jié)果與被測(cè)量的真值的差異。（約定真值）周期性系統(tǒng)誤差圖2-3誤差的分類誤差系統(tǒng)誤差隨機(jī)誤差恒定系統(tǒng)誤差可變系統(tǒng)誤差比例系統(tǒng)誤差復(fù)雜系統(tǒng)誤差已定系統(tǒng)誤差未定系統(tǒng)誤差（二）分類根據(jù)變化性質(zhì)不同，誤差可以分為系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差兩大類65、實(shí)驗(yàn)誤差（一）概念實(shí)驗(yàn)誤差簡(jiǎn)稱誤差（error），指測(cè)量結(jié)1.系統(tǒng)誤差（systematicerror，SE）

定義：相當(dāng)于不準(zhǔn)確度（inaccuracy）或偏倚（bias），指重復(fù)多次測(cè)量的結(jié)果均值（X）與真值（T）之差。

特點(diǎn):①具有單向性，而沒有隨機(jī)性，常有一定的大小和方向；

②增加測(cè)定次數(shù)也不能消除。661.系統(tǒng)誤差（systematicerror，SE）定義系統(tǒng)誤差分類：按變化規(guī)律

恒定系統(tǒng)誤差（CE）：由干擾物引起的大小恒定的誤差，該誤差與被測(cè)物濃度無(wú)關(guān)，而與干擾物濃度相關(guān)，因此有正負(fù)之分。能夠修正可變系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差（PE）：周期性系統(tǒng)誤差復(fù)雜系統(tǒng)誤差指與被測(cè)物濃度的變化而成比例變化的誤差，能夠修正。

周期性出現(xiàn)的誤差，能夠修正。

方向和大小未知或部分未知但通常可以估計(jì)其界限，其中的一部分可以在測(cè)試中加以消除。67系統(tǒng)誤差分類：按變化規(guī)律恒定系統(tǒng)誤差（CE）：由干擾物引造成系統(tǒng)誤差的主要原因：①方法誤差：主要是由于方法分析性能存在固有缺陷所致如方法特異性不高、樣本中非測(cè)定成分的干擾物等；

②儀器和試劑誤差：主要見于儀器波長(zhǎng)未經(jīng)校正、量器不準(zhǔn)、試劑質(zhì)量不好等造成。

最嚴(yán)重，最難避免68造成系統(tǒng)誤差的主要原因：①方法誤差：主要是由于方法分析性能2.隨機(jī)誤差（randomerror，RE）定義：相當(dāng)于不精密度（imprecision），或絕對(duì)偏差（di），指某次測(cè)量值（xi）與重復(fù)測(cè)量的結(jié)果均值（X）之差

特點(diǎn):①可正可負(fù)、大小不定

；

②分析步驟越多，造成這種誤差的機(jī)會(huì)就越多。③增加測(cè)定次數(shù)，其算術(shù)均值接近于真值，數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布

。④不可避免、必然出現(xiàn)的，但可控制在一定范圍內(nèi)。692.隨機(jī)誤差（randomerror，RE）定義：相當(dāng)于常用表示方法：最常見的：標(biāo)準(zhǔn)差（s）、變異系數(shù)（CV）

造成隨機(jī)誤差的原因：①技術(shù)人員的操作不規(guī)范②儀器、試劑、環(huán)境因素等條件的突然改變。70常用表示方法：最常見的：標(biāo)準(zhǔn)差（s）、變異系數(shù)（CV）造成系統(tǒng)誤差隨機(jī)誤差引起兩種誤差的原因是相對(duì)的71系統(tǒng)誤差粗大誤差（parasiticerror）定義：指錯(cuò)讀示值、使用有缺陷的計(jì)量器具、計(jì)量器具使用不正確、環(huán)境干擾等造成的大誤差，稱為粗大誤差，或稱為疏失誤差、過(guò)失誤差、粗差。處理：粗大誤差為離群值，要被剔除72粗大誤差（parasiticerror）處理：粗大誤差為（三）誤差的表示方法1.絕對(duì)誤差（偏差）：指某次測(cè)量值（xi）與真值（T）之差：絕對(duì)誤差＝xi－T（單次）或bias＝x－T（平行）

2.相對(duì)誤差指絕對(duì)誤差占真值的百分比：描述準(zhǔn)確度描述準(zhǔn)確度描述精密度73（三）誤差的表示方法1.絕對(duì)誤差（偏差）：指某次測(cè)量值（x描述精密度1.標(biāo)準(zhǔn)差即標(biāo)準(zhǔn)偏差(standarddeviation，s)的簡(jiǎn)稱。它是方差（s2）的平方根值。其單位與原始數(shù)據(jù)單位相同，測(cè)定次數(shù)一般要求20次（n=20）以上。

74描述精密度1.標(biāo)準(zhǔn)差即標(biāo)準(zhǔn)偏差(standarddev2.變異系數(shù)(coefficientofvariation，CV)指樣本標(biāo)準(zhǔn)差與樣本均值的百分比，它主要用于比較各組數(shù)據(jù)間的離散度，沒有單位。CV值越大，反映各組數(shù)據(jù)間的變異越大，精精密度越差。

752.變異系數(shù)(coefficientofvariatio4．平均偏差：指各絕對(duì)偏差（di）取絕對(duì)值后的算術(shù)平均值5．相對(duì)偏差指某次測(cè)量的絕對(duì)偏差占測(cè)定均值的百分比：

6．相對(duì)平均偏差指平均偏差占測(cè)定均值的百分比：3.絕對(duì)偏差指某次測(cè)量值（xi）與重復(fù)測(cè)量的結(jié)果均值（X）之差764．平均偏差：指各絕對(duì)偏差（di）取絕對(duì)值后的算術(shù)平均值5二、方法學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)精密度準(zhǔn)確度靈敏度、檢測(cè)限與生物檢測(cè)限互通性、特異性與干擾線性范圍與測(cè)量范圍

77二、方法學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)精密度77（一）精密度定義：精密度(precision)表示對(duì)同一樣本在規(guī)定條件下多次重復(fù)測(cè)量結(jié)果之間或各次結(jié)果與均值之間的符合程度。它反映的是隨機(jī)誤差的大小。表示方法：標(biāo)準(zhǔn)差（s）、變異系數(shù)（CV）[需注明重復(fù)次數(shù)（n）和均值（X）]

分類及評(píng)價(jià)方法：普通化學(xué)分析方法的精密度生化檢驗(yàn)方法的精密度78（一）精密度定義：精密度(precision)表示對(duì)同一樣本

（1）平行雙樣的相對(duì)偏差：一個(gè)樣本分成兩管同步平行測(cè)定

（2）一組測(cè)量值的標(biāo)準(zhǔn)差：一個(gè)樣本分成n份同一批測(cè)定

79（1）平行雙樣的相對(duì)偏差：一個(gè)樣本分成兩管同步平行測(cè)定（（3）重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差（sr）定義：是指同一觀測(cè)者在同一實(shí)驗(yàn)室對(duì)同一樣本用同一儀器、同一試劑和校準(zhǔn)物（試劑盒）在盡可能短的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)量結(jié)果的一致性（“五同一短”）。計(jì)算：在相同條件下，對(duì)某一樣本進(jìn)行m輪n次的重復(fù)測(cè)定，各輪重復(fù)測(cè)量次數(shù)n相同，可計(jì)算重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差（sr）表示重復(fù)性精密度： r r

（i=1，2，3，…..m）（i=1，2，3，…..n）80（3）重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差（sr）計(jì)算：在相同條件下，對(duì)某一樣本進(jìn)行（4）再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差（sR）（多用于實(shí)驗(yàn)室間的質(zhì)量評(píng)價(jià)）定義：在改變了的測(cè)量條件下，考察同一樣品的各測(cè)量結(jié)果的一致性（“一同”）。改變了的測(cè)量條件包括：觀測(cè)者、實(shí)驗(yàn)室、時(shí)間、方法、儀器、試劑、校準(zhǔn)物等，也可以保持方法不變來(lái)考察。最后報(bào)告統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)時(shí)要詳細(xì)說(shuō)明測(cè)量條件。

計(jì)算：假定對(duì)同一樣本在不同的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量，或者同一實(shí)驗(yàn)室在不同時(shí)期測(cè)量，進(jìn)行了m輪n次的重復(fù)測(cè)定，以sR表示再現(xiàn)性精密度（reproducibilityprecision，復(fù)現(xiàn)性精密度）計(jì)算各輪的標(biāo)準(zhǔn)差si；計(jì)算重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差（sr）；計(jì)算室間（組間）標(biāo)準(zhǔn)差sL；計(jì)算再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差（sR）；（i=1，2，3，…..m）R81（4）再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差（sR）（多用于實(shí)驗(yàn)室間的質(zhì)量評(píng)價(jià)）定義2.生化檢驗(yàn)方法的精密度（1）常見的精密度試驗(yàn)（重復(fù)性試驗(yàn)）

1）操作選擇高低濃度的2個(gè)穩(wěn)定樣本（濃度水平數(shù)可以是3個(gè)，種類可以是混合血清、質(zhì)控物），做批內(nèi)和天間（即日間）重復(fù)測(cè)量。批內(nèi)：將2個(gè)評(píng)價(jià)樣本隨機(jī)插入病人樣本序列同時(shí)測(cè)定，一批各20次。天間：每天隨同病人樣本測(cè)定2個(gè)評(píng)價(jià)樣本各1次，各累積20次

2）計(jì)算將2個(gè)水平的樣本結(jié)果分別按批內(nèi)、天間排序，分別計(jì)算均值（X）、標(biāo)準(zhǔn)差（s）、變異系數(shù)（CV）

3）不精密度的判斷標(biāo)準(zhǔn)

①推薦標(biāo)準(zhǔn)：批內(nèi)不精密度CV、天間不精密度CV應(yīng)分別小于允許分析誤差（EA）的1/4、1/3(EA,CLIA′88)

s≤EA

③其它標(biāo)準(zhǔn)：822.生化檢驗(yàn)方法的精密度（1）常見的精密度試驗(yàn)（重復(fù)性試8383（2）平行樣本測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)差：適用于平時(shí)做得很少的樣本，或很難保存的樣本，或者沒有合適的質(zhì)控物

1）操作隨機(jī)選取10份（n=10）高低濃度的新鮮病人樣本，每份平行做2次

2）計(jì)算計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差。標(biāo)準(zhǔn)差的計(jì)算公式

3）評(píng)價(jià)該法受樣本例數(shù)n、濃度的影響很大，得到的標(biāo)準(zhǔn)差不穩(wěn)定。僅做了一批試驗(yàn)，不能代表天間變異84（2）平行樣本測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)差：1）操作隨機(jī)選取10份（n=1（3）美國(guó)NCCLS的精密度評(píng)價(jià)方案（總精密度試驗(yàn)）EP5-A

取高低濃度的2個(gè)穩(wěn)定樣本，每個(gè)樣本每天測(cè)定2批次（批間間隔不得少于2h），每次測(cè)定均作雙份，共做20天。因此一共是20×2×2＝80個(gè)結(jié)果。按EP5-A的公式計(jì)算批內(nèi)、批間、天間、總標(biāo)準(zhǔn)差，及相應(yīng)的變異系數(shù)。判斷：批內(nèi)、批間、總CV應(yīng)分別小于1/4EA、1/3EA、EA（EA來(lái)自于CLIA′88）；同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)差估計(jì)和F檢驗(yàn).

操作與計(jì)算:85（3）美國(guó)NCCLS的精密度評(píng)價(jià)方案（總精密度試驗(yàn)）EP5-（二）準(zhǔn)確度（accuracy）定義：指測(cè)定值與真值（T）之間的符合程度,采用多次反復(fù)測(cè)定的平均值（x）即約定真值來(lái)代表真值。表示方法：1.絕對(duì)誤差（偏差）：指某次測(cè)量值（xi）與真值（T）之差：絕對(duì)誤差＝xi－T（單次）或bias＝x－T（平行）

2.偏差系數(shù)或相對(duì)誤差指絕對(duì)誤差占真值的百分比：86（二）準(zhǔn)確度（accuracy）定義：指測(cè)定值與真值（T）之評(píng)價(jià)方法：即方法學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)?；厥赵囼?yàn)干擾試驗(yàn)方法比較試驗(yàn)線性范圍試驗(yàn)87評(píng)價(jià)方法：即方法學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)?；厥赵囼?yàn)87（三）靈敏度、檢測(cè)限與生物檢測(cè)限1.靈敏度（sensitivity，S）定義：是指檢測(cè)信號(hào)變化量（Δy）與被測(cè)物變化量（Δx）的比值，又稱為敏感度意義：反映儀器、試劑對(duì)樣本濃度變化的反應(yīng)能力88（三）靈敏度、檢測(cè)限與生物檢測(cè)限1.靈敏度（sensitiv應(yīng)用：吸收光譜分析中A-C曲線呈線性時(shí)的斜率（ΔA/ΔC）即為反應(yīng)的靈敏度，顯色反應(yīng)的顏色越深，則靈敏度越高。特點(diǎn)：①吸光系數(shù)與靈敏度成正比，靈敏度有計(jì)量單位；②靈敏度的高低應(yīng)按照其樣品的醫(yī)學(xué)決定水平（Xc）來(lái)選擇合適的化學(xué)反應(yīng)，并不是靈敏度愈高愈好。89應(yīng)用：特點(diǎn)：892.檢測(cè)限（DL、D；或LOD）相對(duì)檢測(cè)限（質(zhì)量）絕對(duì)檢測(cè)限（濃度）定義：在給定的置信水平上能夠檢出被測(cè)物的最小濃度或最小質(zhì)量，又稱檢出限、檢測(cè)低限、檢出低限。表示方法：檢測(cè)出信號(hào)為3sb時(shí)的樣本濃度=Δyk值取3（99.7%可能）902.檢測(cè)限（DL、D；或LOD）相對(duì)檢測(cè)限（質(zhì)量）定義：3.生物檢測(cè)限（BLD，生物檢出限）表示方法：定義：某濃度的樣本單次檢測(cè)所具有的最小響應(yīng)信號(hào)剛大于空白檢測(cè)限響應(yīng)信號(hào)，其濃度稱為生物檢測(cè)限，或稱為生物檢出限測(cè)定方法：

用空白血清溶解校準(zhǔn)物，配制一系列從最低到逐漸升高的校準(zhǔn)液，加試劑反應(yīng)后測(cè)定響應(yīng)信號(hào)，按式2.16求出檢測(cè)限D(zhuǎn)并找到相應(yīng)濃度管，再求出各個(gè)比其濃度漸升的校準(zhǔn)液的響應(yīng)信號(hào)與3s檢測(cè)限樣本的差值，與檢測(cè)限D(zhuǎn)進(jìn)行比較，≥D的最低校準(zhǔn)液濃度即為BLD。檢測(cè)限與靈敏度的關(guān)系913.生物檢測(cè)限（BLD，生物檢出限）表示方法：定義：某濃度（四）互通性、特異性與干擾互通性(commutability)指用不同測(cè)量程序測(cè)定參考物質(zhì)時(shí)的測(cè)定結(jié)果之間的數(shù)字關(guān)系，與測(cè)定臨床樣品時(shí)測(cè)定結(jié)果的數(shù)字關(guān)系的一致程度，又稱為互換性、替換性等?；|(zhì)效應(yīng)(matrixeffect，基體效應(yīng)、介質(zhì)效應(yīng))：被測(cè)物以外的某種樣品特性對(duì)測(cè)定因而對(duì)被測(cè)物的值的影響。影響量①干擾(interference)干擾物本身不產(chǎn)生測(cè)定信號(hào)，但它增大或減小測(cè)定值。②非特異性(unspecificity)影響量本身產(chǎn)生測(cè)定信號(hào)特異性(specificity)即專一性，指在特定實(shí)驗(yàn)條件下分析試劑只與被測(cè)物起反應(yīng)，而不與其它結(jié)構(gòu)相似的非被測(cè)物發(fā)生反應(yīng)。92（四）互通性、特異性與干擾互通性(commutability線性范圍（linearrange）指檢測(cè)信號(hào)與被測(cè)物濃度呈線性時(shí)的被測(cè)物濃度范圍。測(cè)量范圍（measuringrange，分析范圍）指在允許誤差極限內(nèi)所能檢測(cè)的被測(cè)物濃度范圍。線性范圍測(cè)量范圍線性測(cè)定方法線性范圍應(yīng)該足夠?qū)?，至少?yīng)包含95％的臨床樣本。太窄后容易導(dǎo)致系統(tǒng)誤差。（五）線性范圍與測(cè)量范圍93線性范圍（linearrange）指檢測(cè)信號(hào)與被測(cè)物濃度呈三、實(shí)驗(yàn)方法選擇與評(píng)價(jià)的原則、內(nèi)容和步驟（一）實(shí)驗(yàn)方法選擇的原則指所選的方法簡(jiǎn)便、快速、價(jià)廉、安全等。指所選的方法相對(duì)精密、準(zhǔn)確、特異、穩(wěn)定、靈敏且有較寬的測(cè)量范圍，能夠保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性符合方法的允許誤差。94三、實(shí)驗(yàn)方法選擇與評(píng)價(jià)的原則、內(nèi)容和步驟（一）實(shí)驗(yàn)方法選擇的（二）實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)的基本內(nèi)容實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)的基本內(nèi)容：

通過(guò)一系列評(píng)價(jià)試驗(yàn)，檢測(cè)能表示其精密度和準(zhǔn)確度的相應(yīng)誤差類型及大小與規(guī)定的性能指標(biāo)相比較，決定候選方法能否可以接受。95（二）實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)的基本內(nèi)容實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)的基本內(nèi)容：95（三）實(shí)驗(yàn)方法選擇與評(píng)價(jià)的步驟查閱文獻(xiàn)確定候選方法初步評(píng)價(jià)試驗(yàn)最后評(píng)價(jià)試驗(yàn)評(píng)價(jià)后試驗(yàn)方法應(yīng)用96（三）實(shí)驗(yàn)方法選擇與評(píng)價(jià)的步驟查閱文獻(xiàn)96四、方法學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)（一）重復(fù)性試驗(yàn)（二）回收試驗(yàn)

（三）干擾試驗(yàn)（四）線性范圍試驗(yàn)（五）方法比較試驗(yàn)（對(duì)比試驗(yàn)）97四、方法學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)（一）重復(fù)性試驗(yàn)97重復(fù)性試驗(yàn)?zāi)康模簷z測(cè)候選方法的隨機(jī)誤差，考察其精密度。方法：將同一材料分成數(shù)份，對(duì)其進(jìn)行反復(fù)多次的測(cè)定，計(jì)算出均值（x）、標(biāo)準(zhǔn)差（s）、變異系（CV）。原理：批內(nèi)重復(fù)性測(cè)定是將1份穩(wěn)定樣本隨機(jī)插入臨床血清樣本序列中測(cè)定，做批內(nèi)重復(fù)測(cè)量，所得的批內(nèi)不精密度CV應(yīng)小于允許分析誤差（EA）的1/4為合格。EA采用CLIA′88可接受范圍指標(biāo)。98重復(fù)性試驗(yàn)?zāi)康模簷z測(cè)候選方法的隨機(jī)誤差，考察其精密度。989999

一般要求批內(nèi)CV＜5％

實(shí)驗(yàn)操作100一般要求批內(nèi)CV＜5％實(shí)驗(yàn)操作100注意事項(xiàng)（了解）4.不能單獨(dú)將重復(fù)樣本設(shè)為一組測(cè)定20次，而應(yīng)該與臨床血清樣本隨機(jī)排序后穿插測(cè)定。Ga.n101注意事項(xiàng)（了解）Ga.n101回收試驗(yàn)?zāi)康模河脕?lái)考察候選方法對(duì)加入到常規(guī)分析樣品中的純分析物含量進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定的能力，其目的是檢測(cè)候選方法的比例系統(tǒng)誤差（PE），以恒量該方法的準(zhǔn)確度。意義：測(cè)得的比例系統(tǒng)誤差（PE）值隨被測(cè)物濃度的增加而增加。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容102回收試驗(yàn)?zāi)康模阂饬x：實(shí)驗(yàn)內(nèi)容102原理：

將濃度已知的含被測(cè)物的各校準(zhǔn)液加入至病人樣品（原樣品）中成為一系列分析樣品（回收樣品），在原樣品中加入相同體積的無(wú)被測(cè)物的溶劑作為基礎(chǔ)樣品，用候選方法對(duì)這些樣品進(jìn)行同步測(cè)定，計(jì)算回收率、平均回收率，考察候選方法的比例系統(tǒng)誤差。一般項(xiàng)目的平均回收率應(yīng)在95％～105％之間。103原理：103試劑：

收集無(wú)肝炎病毒污染、無(wú)溶血、無(wú)脂濁的人（或動(dòng)物）血清，采用候選方法測(cè)定其濃度，并用生理鹽水稀釋至3.0mmol/L。濃度分別為：36.0mmol/L、70.0mmol/L。GOD-POD法測(cè)定血糖試劑104試劑：104操作步驟：1.樣品制備：

原樣品：混合血清

基礎(chǔ)樣品：混合血清0.9ml+蒸餾水0.1ml

回收樣品1：混合血清葡萄糖校準(zhǔn)液

回收樣品2：混合血清葡萄糖校準(zhǔn)液2.血糖濃度測(cè)定按照GOD-POD法對(duì)以上各樣品進(jìn)行雙份檢測(cè)，結(jié)果取平均吸光度值、平均濃度值。105操作步驟：105計(jì)算：1.計(jì)算公式：106計(jì)算：1.計(jì)算公式：1062.將所有計(jì)算結(jié)果填入表1072.將所有計(jì)算結(jié)果填入表107注意事項(xiàng)：1.樣品類型：基礎(chǔ)樣本和回收樣本體積一致；2.所加校準(zhǔn)液的基質(zhì)：盡量與樣本基質(zhì)一致，避免基質(zhì)效應(yīng)；3.加入校準(zhǔn)液的體積：不超過(guò)體積的10%；4.準(zhǔn)確加量：吸量不準(zhǔn)確影響計(jì)算；5.加入校準(zhǔn)液的濃度：比欲增加的濃度高10倍，加入后使被測(cè)物濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平。108注意事項(xiàng)：1.樣品類型：基礎(chǔ)樣本和回收樣本體積一致；1086.重復(fù)測(cè)定次數(shù)：依加入濃度的高低和方法學(xué)本身的隨機(jī)誤差而定；7.可用比較方法測(cè)定回收率：可估計(jì)回收試驗(yàn)結(jié)果的可靠性，還可評(píng)價(jià)操作誤差。：考察被測(cè)物濃度是否達(dá)到Xc，考察稀釋過(guò)程的準(zhǔn)確性，計(jì)算該法測(cè)得樣本的準(zhǔn)確值。9.評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：一般的實(shí)驗(yàn)方法要求回收率在95％～105％之間。理想的回收率為100％。比例系統(tǒng)誤差＝平均回收率－100％，理想的比例系統(tǒng)誤差為0。1096.重復(fù)測(cè)定次數(shù)：依加入濃度的高低和方法學(xué)本身的隨機(jī)誤差而定如果某回收率為98％，原樣本的測(cè)定值為10.0mmol/L，求該法的比例系統(tǒng)誤差，比例系統(tǒng)誤差值，用該法測(cè)得原樣本的準(zhǔn)確值。

回收試驗(yàn)習(xí)題110如果某回收率為98％，原樣本的測(cè)定值為回收干擾試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容目的：

意義：

誤差的大小與被測(cè)物濃度無(wú)關(guān)，只隨干擾物的濃度而變化。當(dāng)樣本中干擾物濃度一定時(shí)，產(chǎn)生恒定量的誤差。

干擾試驗(yàn)用于檢測(cè)某物質(zhì)（干擾物）加到樣品中所產(chǎn)生的恒定系統(tǒng)誤差。該試驗(yàn)可同時(shí)考察非特異性與干擾，從而評(píng)價(jià)候選方法的準(zhǔn)確性。111干擾試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容目的：意義：干擾試驗(yàn)用于檢測(cè)某物質(zhì)（原理：

將可能引起干擾的物質(zhì)配成一系列濃度的溶液加到病人樣品中成為若干個(gè)干擾樣本，在原樣品中加入相同量的無(wú)干擾物質(zhì)的溶劑作為基礎(chǔ)樣品，均用候選方法測(cè)定，各干擾樣本與基礎(chǔ)樣品結(jié)果之差表示一定濃度下該干擾物質(zhì)產(chǎn)生的干擾值（偏差）。

112原理：112試劑：

同回收試驗(yàn)的混合血清。濃度為：4.5mmol/L和9.0mmol/L。稱取90mg碳酸鋰（AR）溶于40ml蒸餾水中，加熱至60℃使其完全溶解。準(zhǔn)確稱取的尿酸1513mg（分子量為168.11）溶于熱碳酸鋰溶液中，冷至室溫，轉(zhuǎn)入100ml容量瓶加蒸餾水至刻度，濃度為9.0mmol/L，棕色瓶貯存。臨用前取出1.0ml用蒸餾水作對(duì)倍稀釋后為4.5mmol/L。GOD-POD法測(cè)定血糖試劑

113試劑：113操作步驟：1.樣本制備：

原樣品：混合血清

基礎(chǔ)樣品：

干擾樣本1

干擾樣本22.血糖濃度測(cè)定對(duì)以上各樣品按GOD-POD法雙份測(cè)定，結(jié)果取平均吸光度值、平均濃度值。114操作步驟：114計(jì)算：1.計(jì)算公式：115計(jì)算：1.計(jì)算公式：1152.將所有計(jì)算結(jié)果填入表1162.將所有計(jì)算結(jié)果填入表116注意事項(xiàng)：1.干擾物質(zhì)：方法的化學(xué)反應(yīng)原理找出可能的干擾物2.可疑干擾物濃度：確定造成分析結(jié)果影響臨床應(yīng)用價(jià)值的最低可疑物濃度值3.干擾物溶液體積與測(cè)定次數(shù)：同回收試驗(yàn)①設(shè)立樣品和試劑空白②采用各種物理、化學(xué)的方法分離③采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)法④若誤差太大而又無(wú)法消除，則應(yīng)改進(jìn)或更換方法117注意事項(xiàng)：1.干擾物質(zhì)：方法的化學(xué)反應(yīng)原理找出可能的干擾物5.設(shè)置原樣品的作用①考察稀釋過(guò)程的準(zhǔn)確性②計(jì)算該方法消除偏差后對(duì)樣品所測(cè)得的準(zhǔn)確值

若干擾值即偏差≤允許誤差（EA）的臨界值，則干擾物所引起的偏差可以初步接受，進(jìn)一步判斷見后述的方法性能判斷。1185.設(shè)置原樣品的作用118干擾試驗(yàn)習(xí)題某血糖測(cè)定樣本濃度為6.5mmol/L，通過(guò)干擾試驗(yàn)求得每mmol/L的尿酸的平均干擾值為，求當(dāng)尿酸濃度為0.4mmol/L時(shí)，該法測(cè)得的恒定系統(tǒng)誤差值以及血糖標(biāo)本的實(shí)際濃度。119干擾試驗(yàn)習(xí)題某血糖測(cè)定樣本濃度為6.5mmol線性范圍試驗(yàn)?zāi)康模菏强疾旌蜻x方法的準(zhǔn)確性和實(shí)用性，通過(guò)線性范圍的測(cè)定選擇該線性分析方法的分析范圍。應(yīng)用：在吸收光譜分析中，測(cè)定一定實(shí)驗(yàn)條件下的被測(cè)物符合比爾定律的濃度范圍（即線性范圍），使具有臨床意義的測(cè)定值都能夠限定在此范圍之內(nèi)。偏離比爾定律的原因：①化學(xué)偏離；②儀器偏離120線性范圍試驗(yàn)?zāi)康模菏强疾旌蜻x方法的準(zhǔn)確性和實(shí)用性，通過(guò)線性原理：配制一系列不同濃度的葡萄糖校準(zhǔn)液，采用GOD-POD法測(cè)定各自的吸光度。然后以校準(zhǔn)液濃度為橫坐標(biāo)、相應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)繪制出校準(zhǔn)曲線，以了解候選方法的線性范圍。121原理：121操作：122操作：122二、繪制A-C曲線在坐標(biāo)紙上，以吸光度A為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度C為橫坐標(biāo)繪制A-C曲線123二、繪制A-C曲線123方法比較試驗(yàn)?zāi)康模菏菣z測(cè)候選方法的系統(tǒng)誤差，包括恒定系統(tǒng)誤差和比例系統(tǒng)誤差，以評(píng)價(jià)候選方法的準(zhǔn)確度，是考核候選方法可否被接受的重要試驗(yàn)。原理：利用候選方法與比較方法即準(zhǔn)確度已知的參考方法，同時(shí)測(cè)定一組病人樣品，觀察兩者之間的差異，以評(píng)價(jià)侯選方法測(cè)定某指標(biāo)的總系統(tǒng)誤差。124方法比較試驗(yàn)?zāi)康模菏菣z測(cè)候選方法的系統(tǒng)誤差，包括恒定系統(tǒng)誤操作步驟：125操作步驟：125三、統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)1、相關(guān)與回歸：計(jì)算出a、b、r及t值，進(jìn)行r的t檢驗(yàn)。126三、統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)1262、配對(duì)t檢驗(yàn)：計(jì)算出d、sd及t值，進(jìn)行兩種方法間的配對(duì)t檢驗(yàn)。注意事項(xiàng)：1272、配對(duì)t檢驗(yàn)：注意事項(xiàng)：127五、方法性能判斷方法的選擇方法的評(píng)價(jià)方法性能判斷常規(guī)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)誤差某一確定的允許誤差某一確定的允許誤差方法性能標(biāo)準(zhǔn)(PS):運(yùn)用統(tǒng)計(jì)方法制定出一系列醫(yī)學(xué)決定水平上的９５％標(biāo)本允許誤差限度128五、方法性能判斷方法的選擇方法的評(píng)價(jià)方法性能判斷常規(guī)檢驗(yàn)?zāi)常ㄒ唬┓椒▽W(xué)性能標(biāo)準(zhǔn)：１、允許分析誤差：依據(jù)Westgard制定的９５％標(biāo)本的允許誤差限度，或者９５％的病人標(biāo)本其誤差應(yīng)小于這個(gè)限度，用ＥＡ表示。ＥＡ是大量研究,運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法制定出的。２、醫(yī)學(xué)決定水平：對(duì)臨床病人的診療具有醫(yī)學(xué)判斷作用的臨界分析物濃度，用Ｘc表示。Ｘc代表一個(gè)閾值。每個(gè)檢測(cè)指標(biāo)有一個(gè)或多個(gè)閾值。性能指標(biāo):ＥＡ和Ｘc組成某方法的性能指標(biāo)。即某方法在一定XC下的ＥＡ值。129（一）方法學(xué)性能標(biāo)準(zhǔn)：１、允許分析誤差：依據(jù)Westgard

制定性能標(biāo)準(zhǔn)，要反映臨床應(yīng)用與解釋結(jié)果的要求（醫(yī)學(xué)效用限度），又要基本符合實(shí)驗(yàn)室所能做到的技能狀態(tài)。方法學(xué)性能標(biāo)準(zhǔn)制定原則130制定性能標(biāo)準(zhǔn)，要反映臨床應(yīng)用與解釋結(jié)果的要求（醫(yī)學(xué)效用限目前所采用的標(biāo)準(zhǔn)：查表時(shí)將靶值T換為EA值即可

131目前所采用的標(biāo)準(zhǔn)：查表時(shí)將靶值T換為EA值即可131（二）方法性能判斷指標(biāo)（了解）判斷標(biāo)準(zhǔn)：各種誤差值＜確定的允許誤差值ＥＡ

：

方法可以接受任何一項(xiàng)各種誤差值＞

確定的允許誤差值ＥＡ：

方法不能接受性能判斷指標(biāo)：兩套第一套：?jiǎn)沃蹬袛嘀笜?biāo)：簡(jiǎn)單，用于初步估量第二套：可信區(qū)間判斷指標(biāo)：復(fù)雜，對(duì)方法性能評(píng)價(jià)更客觀，用于最后判斷132（二）方法性能判斷指標(biāo)（了解）判斷標(biāo)準(zhǔn)：各種誤差值＜確定１、單值判斷指標(biāo)133１、單值判斷指標(biāo)1332.可信區(qū)間判斷指標(biāo)EU代表誤差的可信上限，EL代表誤差的可信下限，采用95%可信上限和95%可信下限計(jì)算各項(xiàng)試驗(yàn)誤差1342.可信區(qū)間判斷指標(biāo)EU代表誤差的可信上限，EL代（1）若EU＜EA，以95%的可能性接受候選方法。（2）若EL＞EA，以95%的可能性拒絕候選方法。候選方法必須改進(jìn)，以減少誤差，否則被拒絕使用。（3）若出現(xiàn)EU＞EA且EL＜EA時(shí)，則說(shuō)明此時(shí)僅有的數(shù)據(jù)不足以做出任何有關(guān)可接受或可拒絕的結(jié)論，還需要進(jìn)一步試驗(yàn)以增加數(shù)據(jù)，再做較完整的估量?？尚艆^(qū)間判斷原理方法的原理、儀器、試劑、具體操作規(guī)程、各項(xiàng)性能指標(biāo)（三）評(píng)價(jià)試驗(yàn)的書面報(bào)告（了解）135（1）若EU＜EA，以95%的可能性接受候選方法。可信區(qū)間判第七節(jié)實(shí)驗(yàn)的診斷性能評(píng)價(jià)（熟悉）方法的選擇方法的評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的診斷性能評(píng)價(jià)方法性能判斷方法學(xué)評(píng)價(jià)診斷學(xué)評(píng)價(jià)臨床診斷實(shí)驗(yàn)室診斷試驗(yàn)的特性、臨床診斷價(jià)值

136第七節(jié)實(shí)驗(yàn)的診斷性能評(píng)價(jià)（熟悉）方法的選一、臨床診斷試驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)與指標(biāo)應(yīng)用臨床流行病學(xué)原理和方法對(duì)診斷試驗(yàn)進(jìn)行科學(xué)的研究和評(píng)價(jià)，為臨床醫(yī)師提供各種診斷試驗(yàn)的特性、臨床診斷價(jià)值。評(píng)價(jià)過(guò)程和目的：137一、臨床診斷試驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)與指標(biāo)應(yīng)用臨床流行病學(xué)原（一）金標(biāo)準(zhǔn)與診斷試驗(yàn)定義

診斷試驗(yàn)：指一般臨床實(shí)驗(yàn)檢查方法，費(fèi)用低、操作簡(jiǎn)單，對(duì)病人無(wú)損害，快速等優(yōu)點(diǎn)。

金標(biāo)準(zhǔn)：通過(guò)活檢、尸檢、外科手術(shù)、隨訪等所作出的決定性診斷，公認(rèn)最可靠，即確診試驗(yàn)。138（一）金標(biāo)準(zhǔn)與診斷試驗(yàn)定義金標(biāo)準(zhǔn)：通過(guò)活檢、尸檢、外科手診斷試驗(yàn)和金標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用：診斷試驗(yàn)金標(biāo)準(zhǔn)臨床上診斷：提供病人患病的可能性金標(biāo)準(zhǔn)診斷試驗(yàn)診斷結(jié)果為患者和非患者診斷性試驗(yàn)的性能評(píng)價(jià)：診斷結(jié)果為患者和非患者測(cè)得其陰性或陽(yáng)性結(jié)果拿不準(zhǔn)進(jìn)行各種分析139診斷試驗(yàn)和金標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用：診斷試驗(yàn)金標(biāo)準(zhǔn)臨床上診斷：提供病人患140140（二）診斷試驗(yàn)的常見評(píng)價(jià)指標(biāo)1．靈敏度與漏診率

TP代表真陽(yáng)性，指金標(biāo)準(zhǔn)確診為有該病的病例組中經(jīng)診斷試驗(yàn)檢出的陽(yáng)性例數(shù)，將其分別設(shè)為分母、分子的比率為靈敏度(Se)，又稱為真陽(yáng)性率（如僅用“陽(yáng)性率”稱呼則不嚴(yán)格）。FN代表假陰性，指金標(biāo)準(zhǔn)確診為有該病的病例組中經(jīng)診斷試驗(yàn)檢出的陰性例數(shù)，將其分別設(shè)為分母、分子的比率為假陰性率（漏診率）。141（二）診斷試驗(yàn)的常見評(píng)價(jià)指標(biāo)1．靈敏度與漏診率141理想的診斷靈敏度為100%。臨床上診斷靈敏度越高則漏診率越低，靈敏度＝1－漏診率。靈敏度高的診斷試驗(yàn)主要用于：①疾病漏診可造成嚴(yán)重后果者，通過(guò)普查或定期健康體驗(yàn)進(jìn)行篩選某疾病，以防止漏診。②擬診為某疾病時(shí)，可起到排除某病的診斷或早期確診。142理想的診斷靈敏度為100%。臨床上診斷靈敏度越高則漏診率越低2．特異度與誤診率TN代表真陰性，指金標(biāo)準(zhǔn)確診為無(wú)該病的對(duì)照組中經(jīng)診斷試驗(yàn)檢出的陰性例數(shù)，將其分別設(shè)為分母、分子的比率為特異度(Sp)，又稱為真陰性率（如僅用“陰性率”稱呼則不嚴(yán)格）。FP代表假陽(yáng)性，指金標(biāo)準(zhǔn)確診為無(wú)該病的對(duì)照組中經(jīng)診斷試驗(yàn)檢出的陽(yáng)性例數(shù)，將其分別設(shè)為分母、分子的比率為假陽(yáng)性率（誤診率）。1432．特異度與誤診率143理想的診斷特異度為100%。臨床上診斷特異度越高的試驗(yàn)則誤診率越低，特異度＝1－誤診率。特異度高的診斷試驗(yàn)主要用于：①擬診疾病嚴(yán)重但療效與預(yù)后均不好的疾病，以防誤診，盡早解除病人的壓力。②擬診患有某病的概率較大時(shí)，以便確診。144理想的診斷特異度為100%。臨床上診斷特異度越高的試驗(yàn)則誤診3．準(zhǔn)確度（accuracy）又稱診斷效率，指診斷試驗(yàn)檢出的真陽(yáng)性和真陰性例數(shù)之和占全部受檢者的百分率。理想的診斷試驗(yàn)準(zhǔn)確度應(yīng)為100%。1453．準(zhǔn)確度（accuracy）又稱診斷效率，指診斷試驗(yàn)檢出4．預(yù)測(cè)值（predictivevalue，PV）又稱預(yù)告值，指一項(xiàng)診斷試驗(yàn)?zāi)軌虼_定或排除某疾病存在與否的診斷概率（1）陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(＋PV)由診斷試驗(yàn)檢出的全部陽(yáng)性例數(shù)中，真正患病的例數(shù)所占的百分率，也稱為試驗(yàn)后診斷為患病的可能性。表示確定診斷的概率。（2）陰性預(yù)測(cè)值（－PV）由診斷試驗(yàn)檢出的全部陰性例數(shù)中，非患病的例數(shù)所占的百分率。表示排除診斷的概率。1464．預(yù)測(cè)值（predictivevalue，PV）又稱預(yù)5．流行率（prevalence，P）指被檢查的全部對(duì)象中由金標(biāo)準(zhǔn)劃分的病例人群所占的百分比，也稱為試驗(yàn)前診斷為患病的可能性或患病率。1475．流行率（prevalence，P）指被檢查的全部對(duì)象中二、受試者工作曲線ROC曲線的主要作用：①選擇合適的診斷閾值②比較兩種不同診斷試驗(yàn)對(duì)同種疾病診斷的可靠性。148二、受試者工作曲線ROC曲線的主要作用：148kqwBHNTZ*16ciouAGLRX%+5agmsyEKPV!)39fkqwCIOTZ*17djouAGMSY%+5bhnsyEKQW$)39flrxCIOU#(17djpvBGMSY&06bhntzFKQW$-4aflrxDJPU#(28ejpvBHNTY&06ciotzFLRX$-4agmsxDJPV!)28ekqwBHNTZ*16ciouAGLRX%+5agmsyEKPV!)39fkqwCIOTZ*17djouAGMSY%+5bhnsyEKQW$)39flrxCIOU#(17djpvBGMSY&06bhntzFKQW$-4aflrxDJPU#(28ejpvBHNTY&06ciotzFLRX$-4agmsxDJPV!)28ekqwBHNTZ*16ciouAGLRX%+5agmsyEKPV!)39fkqwCIOTZ*17djouAGMSY%+5bhnsyEKQW$)39flrxCIOU#(17djpvBGMSY&06bhntzFKQW$-4aflrxDJPU#(28ejpvBHNTY&06ciotzFLRX$-4agmsxDJPV!)28ekqwBHNTZ*16ciouAGLRX%+5agmsyEKPV!)39fkqwCIOTZ*17djouAGMSY%+5bhnsyEKQW$)39flrxCIOU#(17djpvBGMSY&06bhntzFKQW$-4aflrxDJPU#(28ejpvBHNTY&06ciotzFLRX$-4agmsxDJPV!)28ekqwBHNTZ*16ciouAGLRX%+5agmsyEKPV!)39fkqwCIOTZ*17djouAGMSY%+5bhnsyEKQW$)39flrxCIOU#(17djpvBGMSY&06bhntzFKQW$-4aflrxDJPU#(28ejpvBHNTY&06ciotzFLRX$-4agmsxDJPV!)28ekqwBHNTZ*16ciouAGLRX%+5agmsyEKPV!)39fkqwCIOTZ*17djouAGMSY%+5bhntyEKQW$)39flrxCIOU#(27djpvBGMSY&06bhntzFLQW$-4aflrxDJPU#(28ekpvBHNTY&06ciotzFLRX%-4agmsxDJPV!)28ekqwCHNTZ*16ciouAGLRX%+5bgmsyEKPV!)39fkqwCIOUZ*17djouAGMSY%+5bhntyEKQW$)39flrxCIOU#(27djpvBGMSY&06bhntzFLQW$-4aflrxDJPU#(28ekpvBHNTY&06ciotzFLRX%-4agmsxDJPV!)28ekqwCHNTZ*16ciouAGLRX%+5bgmsyEKPV!)39fkqwCIOUZ*17djouAGMSY%+5bhntyEKQW$)39flrxCIOU#(27djpvBGMSY&06bhntzFLQW$-4aflrxDJPU#(28ekpvBHNTY&06ciotzFLRX%-4agmsxDJPV!)28ekqwCHNTZ*16ciouAGLRX%+5bgmsyEKPV!)39fkqwCIOUZ*17djouAGMSY%+5bhntyEKQW$)39flrxCIOU#(27djpvBGMSY&06bhntzFLQW$-4aflrxDJPU#(28ekpvBHNTY&06ciotzFLRX%-4agmsxDJPV!)28ekqwCHNTZ*16ciouAGLRX%+5bgmsyEKPV!)39fkqwCIOUZ*17djouAGMSY%+5bhntyEKQW$)39flrxCIOU#(27djpvBGMSY&06bhntzFLQW$-4aflrxDJPU#(28ekpvBHNTY&06ciotzFLRX%-4agmsxDJPV!)28ekqwCHNTZ*16ciouAGLRX%+5bgmsyEKPV!)39fkqwCIOUZ*17djouAGMSY%+5bhntyEKQW$)39flrxCIOU#(27djpvEKQV!)39flqwCIOUZ*17djpuAGMSY&+5bhntyEKQW$-39flrxDIOU#(27djpvBHMSY&06chntzFLQW$-4aglrxDJPV#(28ekpvBHNTZ&06ciouzFLRX%-4agmsyDJPV!)38ekqwCHNTZ*17ciouAGMRX%+5bgmsyEKQV!)39flqwCIOUZ*17djpuAGMSY&+5bhntyEKQW$-39flrxDIOU#(27djpvBHMSY&06chntzFLQW$-4aglrxDJPV#(28ekpvBHNTZ&06ciouzFLRX%-4agmsyDJPV!)38ekqwCHNTZ*17ciouAGMRX%+5bgmsyEKQV!)39flqwCIOUZ*17djpuAGMSY&+5bhntyEKQW$-39flrxDIOU#(27djpvBHMSY&06chntzFLQW$-4aglrxDJPV#(28ekpvBHNTZ&06ciouzFLRX%-4agmsyDJPV!)38ekqwCHNTZ*17ciouAGMRX%+5bgmsyEKQV!)39flqwCIOUZ*17djpuAGMSY&+5bhntyEKQW$-3