鹽酸貝那普利含量有關(guān)物質(zhì)方法確認(rèn)方案

目的(Purpose)對(duì)鹽酸苯那普利USP含量有關(guān)物質(zhì)分析方法進(jìn)行方法確認(rèn)。范圍(Scope)含量分析法的確認(rèn)內(nèi)容包括方法的專屬性和重現(xiàn)性。2.2有關(guān)物質(zhì)分析法由兩個(gè)實(shí)驗(yàn)構(gòu)成：Test1:苯那普利雜質(zhì)A,Test2：苯那普利雜質(zhì)B,C,D,E,F,和G。 有關(guān)物質(zhì)分析法的確認(rèn)內(nèi)容包括方法的專屬性，方法的重現(xiàn)性，和定量限(LOQ)。所配含量標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液的穩(wěn)定性也將予于考察。職責(zé)(Responsibilities)3.1質(zhì)量管理部(QADept.)QA經(jīng)理負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案和報(bào)告的批準(zhǔn)；負(fù)責(zé)監(jiān)督管理整個(gè)確認(rèn)活動(dòng)，確保確認(rèn)按進(jìn)度計(jì)劃進(jìn)行。QA人員負(fù)責(zé)過(guò)程監(jiān)督，確保按批準(zhǔn)的方案進(jìn)行，確保質(zhì)量管理的原則體現(xiàn)在確認(rèn)過(guò)程之中。注冊(cè)部審核方案和報(bào)告與cGMP的符合性?；?yàn)室(QCDept.)負(fù)責(zé)確認(rèn)方案的起草,確認(rèn)過(guò)程的實(shí)施,并完成驗(yàn)證報(bào)告。確認(rèn)試驗(yàn)所用標(biāo)準(zhǔn)品和樣品(TestArticles)標(biāo)準(zhǔn)品USP鹽酸苯那普利工作對(duì)照品,或昌明自制工作對(duì)照品USP鹽酸苯那普利有關(guān)物質(zhì)A,B,C,D,E,F,G工作對(duì)照品，或昌明自制工作對(duì)照品。樣品鹽酸苯那普利,批號(hào)；生產(chǎn)廠家：浙江昌明藥業(yè)有限公司含量分析方法確認(rèn)試驗(yàn)(VerifcationForAssaymethod)含量分析方法重現(xiàn)性試驗(yàn)QC檢驗(yàn)員按照附錄含量分析方法用相同批的鹽酸苯那普利(批號(hào)：)配制6個(gè)鹽酸苯那普利供試品溶液。5.1.1.2按照附錄含量分析方法(HPLC)對(duì)每個(gè)樣品溶液進(jìn)行含量分析。按照附錄含量分析方法規(guī)定的進(jìn)樣程序進(jìn)樣。每個(gè)樣品溶液重復(fù)進(jìn)樣兩針,并且每隔12針樣品溶液和進(jìn)樣程序完成后進(jìn)1針程序控制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。5.1.2數(shù)據(jù)有效性標(biāo)準(zhǔn)滿足附錄含量方法規(guī)定的系統(tǒng)適應(yīng)性要求同一樣品溶液重復(fù)進(jìn)樣的面積比率在0.980和1.020之間可接受標(biāo)準(zhǔn)樣品的分析結(jié)果都應(yīng)該滿足產(chǎn)品的質(zhì)量要求6個(gè)樣品的含量的RSD不得超過(guò)2.0%6有關(guān)物質(zhì)分析-Test1方法確認(rèn)（鹽酸苯那普利雜質(zhì)A）（VerificationForBenazeprilRelatedCompoundA）專屬性（Specificity）:試驗(yàn)6.1.1.1根據(jù)附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1方法，準(zhǔn)備分離度溶液（鹽酸苯那普利約1.0mg/ml，雜質(zhì)A約0.005mg/ml）。6.1.1.2按附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1中的色譜方法，進(jìn)1針流動(dòng)相（準(zhǔn)備分離度溶液的稀釋液）。6.1.1.3按附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1中的色譜方法，進(jìn)1針?lè)蛛x度溶液?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)6.1.2.1鹽酸苯那普利與鹽酸苯那普利雜質(zhì)A的分離度不小于2.06.1.2.2流動(dòng)相（稀釋液）色譜行為對(duì)鹽酸苯那普利和鹽酸苯那普利雜質(zhì)A的色譜峰沒(méi)有明顯的干擾。LOQ確認(rèn)：6.2.1試驗(yàn)6.2.1.1根據(jù)附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1方法.，準(zhǔn)備稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液（苯那普利雜質(zhì)A濃度約1^g/ml）。6.2.1.2按附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1中的色譜方法，進(jìn)1針稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液50山。6.2.1.3按附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1中的色譜方法，進(jìn)1針稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液，進(jìn)樣體積減少到25山。6.2.1.4從兩針色譜中，計(jì)算苯那普利雜質(zhì)A的信/噪比S/N。接受標(biāo)準(zhǔn)6.2.2.1當(dāng)進(jìn)樣體積為50山，信噪比S/N三10。6.2.2.2報(bào)告進(jìn)樣體積為25山時(shí)的信噪比S/N。重現(xiàn)性：6.3.1.試驗(yàn)QC檢驗(yàn)員按照附錄苯那普利雜質(zhì)A分析方法用相同批的鹽酸苯那普利（批號(hào)：）配制3個(gè)鹽酸苯那普利供試品溶液。按照附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1中的色譜方法，對(duì)配制的3個(gè)鹽酸苯那普利供試品溶液進(jìn)行苯那普利雜質(zhì)A分析（每個(gè)供試品溶液進(jìn)樣一針）。6.3.1.2配制標(biāo)準(zhǔn)加入溶液：精確稱取約50mg鹽酸苯那普利（批號(hào)：）并移取1.0ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液置同一50ml容量瓶中。加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。標(biāo)準(zhǔn)加入溶液中，鹽酸苯那普利約為1.0mg/ml，苯那普利雜質(zhì)A約為0.001mg/ml。按照附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1中的色譜方法，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)加入溶液重復(fù)進(jìn)樣6針。數(shù)據(jù)有效性標(biāo)準(zhǔn)6.3.2.1滿足附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test1中的規(guī)定的系統(tǒng)適應(yīng)性要求可接受標(biāo)準(zhǔn)3針鹽酸苯那普利供試品溶液進(jìn)樣色譜圖中色譜峰相對(duì)保留時(shí)間RRT和峰形相似。6.3.3.2報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)加入溶液重復(fù)6針進(jìn)樣色譜圖中雜質(zhì)A峰面積的RSD。7有關(guān)物質(zhì)分析-Test2方法確認(rèn)（鹽酸苯那普利雜質(zhì)B,C,D,E,F,和G）（VerificationForBenazeprilRelatedCompoundsB，C，D，E，F(xiàn)，G）專屬性Specificity試驗(yàn)7.1.1.1根據(jù)附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test2中的色譜方法配制系統(tǒng)適應(yīng)性溶液（鹽酸苯那普利約400憾/ml、雜質(zhì)B約400|ig/ml）。7.1.1.2根據(jù)附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test2中的色譜方法配制工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液（雜質(zhì)B,C,D,E,F,G各約10:g/ml）。7.1.1.3按附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test2中的色譜方法進(jìn)2針流動(dòng)相空白。7.1.1.4按附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test2中的色譜方法進(jìn)工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液。7.1.1.5按附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test2中的色譜方法進(jìn)系統(tǒng)適應(yīng)性溶液?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)7.1.2.1鹽酸苯那普利與雜質(zhì)B的分離度三1.7。流動(dòng)相（稀釋液）色譜行為對(duì)鹽酸苯那普利和鹽酸苯那普利雜質(zhì)的色譜峰沒(méi)有明顯的干擾。7.1.2.3報(bào)告每個(gè)苯那普利有關(guān)物質(zhì)相對(duì)保留時(shí)間RRT。7.1.2.4報(bào)告已知相鄰峰的分離度。LOQ（0.02%）確認(rèn)：7.2.1試驗(yàn)7.2.1.1用流動(dòng)相稀釋工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液得到稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液（雜質(zhì)B,C,D,E,F,G各約1:g/ml）。7.2.1.2用流動(dòng)相稀釋系統(tǒng)適應(yīng)性溶液得到LOQ溶液（苯那普利和雜質(zhì)B各約0.2:g/ml）。7.2.1.3稀釋液，LOQ溶液和稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)樣。7.2.1.4在LOQ溶液進(jìn)樣色譜圖中，計(jì)算苯那普利峰和雜質(zhì)B峰的信噪比S/N。7.2.1.5在稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)樣色譜圖中，分別計(jì)算苯那普利雜質(zhì)B,C,D,E,F,G峰的信噪比S/N。可接受標(biāo)準(zhǔn)7.2.2.1在LOQ溶液進(jìn)樣色譜圖中，苯那普利峰和雜質(zhì)B峰的信噪比S/N三10。7.2.2.2報(bào)告稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)樣色譜圖中相關(guān)峰的信噪比S/N。7.3雜質(zhì)分析重現(xiàn)性試驗(yàn)7.3.1.1華海QC化驗(yàn)員按照有關(guān)物質(zhì)分析-Test2分析方法用相同批的鹽酸苯那普利（批號(hào) ）配制3個(gè)鹽酸苯那普利供試品溶液。7.3.1.2按照附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test2中的色譜方法，進(jìn)行苯那普利雜質(zhì)分析（每個(gè)供試品溶液進(jìn)一針）。數(shù)據(jù)有效性標(biāo)準(zhǔn)7.3.2.1滿足附錄有關(guān)物質(zhì)分析-Test2中的規(guī)定的系統(tǒng)適應(yīng)性要求可接受標(biāo)準(zhǔn)3針鹽酸苯那普利供試品溶液進(jìn)樣色譜圖中色譜峰相對(duì)保留時(shí)間RRT和峰形相似。計(jì)算3個(gè)鹽酸苯那普利供試品溶液總雜質(zhì)的平均值。每個(gè)供試品溶液總雜質(zhì)與平均值的絕對(duì)偏差W0.5%。8溶液穩(wěn)定性（SolutionStability）在檢測(cè)環(huán)境條件下來(lái)評(píng)估含量分析工作標(biāo)準(zhǔn)溶液和含量分析樣品溶液的穩(wěn)定性。雜質(zhì)分析標(biāo)準(zhǔn)溶液和雜質(zhì)分析樣品溶液是新鮮配制，所以不在這個(gè)方案中研究。分析溶液的穩(wěn)定性含量分析工作標(biāo)準(zhǔn)溶液、含量分析樣品溶液是第5部分（實(shí)驗(yàn)室內(nèi)重現(xiàn)性）配制，這個(gè)樣品放置在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境條件下的試驗(yàn)臺(tái)上，放置一定的時(shí)間，以評(píng)估樣品的穩(wěn)定性。放置的溶液將在第1天、2天、3天、4天、5天（120小時(shí)）各檢測(cè)一次。儲(chǔ)存溶液必須要求由新鮮配制的標(biāo)準(zhǔn)品溶液來(lái)計(jì)算，儲(chǔ)存的標(biāo)準(zhǔn)品溶液和樣品溶液要重復(fù)進(jìn)樣。數(shù)據(jù)有效性標(biāo)準(zhǔn)滿足系統(tǒng)適應(yīng)性要求。含量分析工作標(biāo)準(zhǔn)溶液、含量分析樣品溶液重復(fù)進(jìn)樣峰面積的比率在0.980~1.020之間。接受標(biāo)準(zhǔn)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)試的含量分析工作標(biāo)準(zhǔn)溶液和含量分析樣品溶液結(jié)果與初始的結(jié)果相比偏差在±2%以內(nèi)，表明樣品和標(biāo)準(zhǔn)品溶液是穩(wěn)定的。確認(rèn)報(bào)告（VerificationReport）本方案完成后，由驗(yàn)證小組長(zhǎng)負(fù)責(zé)總結(jié)確認(rèn)數(shù)據(jù)，并完成確認(rèn)報(bào)告附錄方法（Attachments）10.1含量分析方法（Assay）10.2有關(guān)物質(zhì)分析方法（RelatedCompounds）附錄（Attachments）1含量分析方法（Assay）1.1色譜條件：儀器：Waters2695/2996,自動(dòng)進(jìn)樣器，紫外檢測(cè)器，或與之相當(dāng)?shù)囊合嗌V檢測(cè)系統(tǒng)。流動(dòng)相：甲醇：四丁基溴化銨溶液=64:36溶解0.81g四丁基溴化銨于360ml含有0.2ml冰醋酸的色譜級(jí)水中，加入640ml甲醇?；靹?。色譜柱：Waters:BondapakC18,3.9mmX30cm,10:m柱溫：30°C流速：1.0ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm運(yùn)行時(shí)間：15分鐘進(jìn)樣量：25:l溶液配制：系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：精密稱取鹽酸苯那普利對(duì)照品和苯那普利雜質(zhì)B對(duì)照品各4mg置同一10ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。（鹽酸苯那普利約0.4mg/ml、雜質(zhì)B約0.4mg/ml）供試品溶液:精密稱取約20mg鹽酸苯那普利樣品置100ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。標(biāo)準(zhǔn)品溶液：精密稱取鹽酸苯那普利對(duì)照品約20mg置100ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。（鹽酸苯那普利約0.2mg/ml）進(jìn)樣程序：系統(tǒng)適應(yīng)性要求：重復(fù)進(jìn)五針系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；鹽酸苯那普利與雜質(zhì)B的分離度三1.7,鹽酸苯那普利與雜質(zhì)B各自對(duì)應(yīng)的五針?lè)迕娣e相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）都不得大于2.0%待系統(tǒng)適應(yīng)性建立后分別進(jìn)一針標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液。1.3.3每進(jìn)12個(gè)供試品溶液和序列的最后進(jìn)1針程序控制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。系統(tǒng)運(yùn)行（系統(tǒng)適應(yīng)性溶液+程序控制標(biāo)準(zhǔn)品溶液）中鹽酸苯那普利與雜質(zhì)B各自對(duì)應(yīng)峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）都不得大于3.0%計(jì)算：%鹽酸苯那普利（以干基計(jì)）=a城W（i0O%-W%）stdspl其中：A忙供試品溶液中鹽酸苯那普利峰面積；splAtd:標(biāo)準(zhǔn)溶液中鹽酸苯那普利峰面積；stdWspl:稱取鹽酸苯那普利供試品粉末的重量（mg）；Wstd:稱取鹽酸苯那普利標(biāo)準(zhǔn)品的重量（mg）；P： 鹽酸苯那普利標(biāo)準(zhǔn)品的純度因子；W%：干失測(cè)定值。2有關(guān)物質(zhì)分析方法（RelatedCompounds）2.1雜質(zhì)A（對(duì)映異構(gòu)體）：色譜條件：儀器：Waters2695/2996,自動(dòng)進(jìn)樣器，紫外檢測(cè)器，或與之相當(dāng)?shù)囊合嗌V檢測(cè)系統(tǒng)流動(dòng)相：pH6.0磷酸鹽緩沖液：甲醇=80:20pH6.0磷酸鹽緩沖液:溶解9.66gKH2PO4和2.68gNa2HPO4?7H2O于900ml水中，并用水稀釋到1000ml。色譜柱：ChiralPakAGP,4.0mmX10cm,5:m柱溫：30°C流速：0.9ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm運(yùn)行時(shí)間：30min進(jìn)樣量：50:l溶液配制：空白溶液：流動(dòng)相標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液：精密稱取約5mg鹽酸苯那普利雜質(zhì)A對(duì)照品置10ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。移取5ml該溶液置50ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，混勻。（雜質(zhì)A約0.05mg/ml）分離度溶液：精密稱取約50mg鹽酸苯那普利對(duì)照品置50ml容量瓶中，移取5ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液置該容量瓶，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。（鹽酸苯那普利約1.0mg/ml，雜質(zhì)A約0.005mg/ml）標(biāo)準(zhǔn)品溶液:精密移取5ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液置50ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。（雜質(zhì)A約5:g/ml）稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液：精密移取1ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液置50ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。（雜質(zhì)A約1:g/ml）供試品溶液：精密稱取約50mg鹽酸苯那普利樣品置50ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。進(jìn)樣程序：系統(tǒng)適應(yīng)性要求：2.131.1進(jìn)一針?lè)蛛x度溶液，相對(duì)于鹽酸苯那普利，鹽酸苯那普利雜質(zhì)A的相對(duì)保留時(shí)間為約2.3,鹽酸苯那普利與鹽酸苯那普利雜質(zhì)A的分離度三2.0。2.1.3.1.2進(jìn)2針流動(dòng)相。空白圖譜在鹽酸苯那普利和苯那普利雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品出峰位置無(wú)明顯干擾。2.1.3.1.3進(jìn)1針稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液，要求信噪比S/N2102.1.3.1.4重復(fù)進(jìn)樣6針標(biāo)準(zhǔn)品溶液（系統(tǒng)適應(yīng)性溶液）并紀(jì)錄峰面積，6針標(biāo)準(zhǔn)品溶液苯那普利雜質(zhì)A峰面積RSDW10%2.1.3.2待系統(tǒng)適應(yīng)性建立后每個(gè)供試品溶液進(jìn)樣1針。2.1.3.3每進(jìn)12個(gè)樣品溶液和序列的最后進(jìn)1針程序控制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。系統(tǒng)運(yùn)行（系統(tǒng)適應(yīng)性溶液+程序控制標(biāo)準(zhǔn)品溶液）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）不得大于15%計(jì)算：AXW X50XPX100%鹽酸苯那普利雜質(zhì)A=A X肪X（100%-W%）X10000std-Aspl其中：AlA：供試品溶液中鹽酸苯那普利雜質(zhì)A峰面積；spl-AAtdA：標(biāo)準(zhǔn)溶液中鹽酸苯那普利雜質(zhì)A峰面積；std-AW：稱取鹽酸苯那普利雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品重量（mg）；std-AW]:稱取鹽酸苯那普利供試品粉末的重量（mg）；splP：標(biāo)準(zhǔn)品純度因子W%：干失測(cè)定值。2.2有關(guān)物質(zhì)（雜質(zhì)B、C、D、E、F、G）：2.2.1色譜條件：同2.1.1色譜條件，運(yùn)行時(shí)間：45分鐘。溶液配制：系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：精密稱取鹽酸苯那普利對(duì)照品和苯那普利雜質(zhì)B對(duì)照品各4mg置同一10ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。（鹽酸苯那普利約0.4mg/ml、雜質(zhì)B約0.4mg/ml）標(biāo)準(zhǔn)品溶液：精密稱取以下對(duì)照品各5mg置同一10ml容量瓶中：雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)F、雜質(zhì)G。加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。移取1ml該溶液置50ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，混勻。（雜質(zhì)各約0.01mg/ml）供試品溶液：精密稱取50mg樣品置50ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋到刻度，混勻。進(jìn)樣程序：系統(tǒng)適應(yīng)性要求：進(jìn)2針流動(dòng)相空白。2.331.2重復(fù)進(jìn)五針系統(tǒng)適應(yīng)性溶液。鹽酸苯那普利與雜質(zhì)B的分離度三1.7，鹽酸苯那普利與苯那普利雜質(zhì)B各自對(duì)應(yīng)的五針?lè)迕娣e相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）都不得大于2.0%2.331.3進(jìn)一針標(biāo)準(zhǔn)品溶液。相對(duì)于鹽酸苯那普利，雜質(zhì)E（S-氨基物水解物）相對(duì)保留時(shí)間約為0.4