kx-21n血細(xì)胞分析儀線性范圍評價方法的探討

kx-21n血細(xì)胞分析儀線性范圍評價方法的探討

線性區(qū)域或分析測量范圍是檢測系統(tǒng)的主要性能之一。“實驗室管理方法”要求實驗室在評估和驗證檢測系統(tǒng)的分析測量范圍時進行評估和驗證。在文獻中，有許多關(guān)于線性區(qū)域評估方法的報告。雖然操作過程簡單，但統(tǒng)計分析復(fù)雜，需要特定的統(tǒng)計基礎(chǔ)。為此我們采用了北京中創(chuàng)易達公司開發(fā)的MVS軟件,依據(jù)CLSI的EP6-A文件要求對KX-21N主要檢測項目(RBC、Hb、HCT、WBC、PLT)進行了線性范圍的評價,現(xiàn)報道如下。1材料和方法1.1材料表面1.1.1儀器和試劑1.1.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1.1.3樣品為日常工作中隨機選擇的病人新鮮全血,有高值和中值樣品,參考EP6-A文件對高、中值樣品進行等比稀釋。1.2方法1.2.1機器校準(zhǔn)先對KX-21N進行一次日常保養(yǎng),再用SCS-1000校準(zhǔn)品對KX-21N進行一次校準(zhǔn),使KX-21N處于最佳狀態(tài)。1.2.2樣品等比及測定(1)RBC、Hb、HCT、WBC(中低值)、PLT(中低值)線性范圍的評價:選取4個血型相同,RBC、Hb、HCT、WBC及PLT檢測結(jié)果正常的4份病人新鮮全血樣品,混勻后離心吸出3.0ml血漿,設(shè)3.0ml血漿為低值(L)樣品,剩余部分樣品為高值(H)樣品,再按EP6-A文件中附件A的要求進行等比稀釋成9個樣品,每個樣品重復(fù)測定兩次,分別記錄RBC、Hb、HCT、WBC(中低值)、PLT(中低值)結(jié)果。(2)WBC、PLT高值段線性范圍的評價:選取一個WBC、PLT計數(shù)值均很高的慢粒病人,取靜脈血樣4ml用EDTA-K2抗凝,離心分離出血漿和血細(xì)胞,吸取血漿為低值(L)樣品,剩余部分為高值樣品(H),參考EP6-A文件附件A的要求進行等比稀釋成9個樣品,每個樣品重復(fù)測定兩次,分別記錄WBC、PLT(高值)的檢測結(jié)果。1.2.3統(tǒng)計處理采用MVS軟件對RBC、Hb、HCT、WBC、PLT檢測的結(jié)果按EP6-A文件要求進行多項式回歸分析。2結(jié)果3本研究項目的線性范圍sysmex公司生產(chǎn)的KX-21N血細(xì)胞分析儀及配套的釋稀液和溶血素。為配套校準(zhǔn)品SCS-1000,批號為:0938242.14個檢測值正常病人新鮮全血樣品處理后作等比稀釋的9個樣品RBC、Hb、HCT、WBC(中低值)、PLT(中低值)檢測結(jié)果見表1。2.2慢粒病人新鮮全血樣品處理后作等比稀釋得9個樣品WBC(高值)、PLT(高值)兩個項目檢測結(jié)果見表2。2.3用MVS軟件對上述RBC、Hb、HCT、WBC(中低值)和WBC(高值)、PLT(中低值)和PLT(高值)檢測數(shù)據(jù)進行多項回歸分析,結(jié)果見表3。2.4對表3中統(tǒng)計分析為非線性的項目剔除一端或兩端的數(shù)據(jù)后再次運用MVS軟件進行多項式回歸分析,其結(jié)果見表4。3.1本研究是按照EP6-A文件的方法進行樣品處理分析,采用了北京中創(chuàng)易達公司的MVS軟件進行統(tǒng)計分析,結(jié)果表明KX-21N檢測RBC、Hb、HCT,RBC在0.01~6.14×1012/L、Hb在24~175g/L、HCT在0.071~0.54L/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,而在對WBC、PLT線性范圍評價時由于很難找到合適的樣品而采用了兩個濃度段(高值和中低值)的兩個樣品進行研究,結(jié)果表明KX-21N在檢測WBC時在0.1~5.2×109/L,10.1~86.3×109/L范圍內(nèi)呈線性,這里提示W(wǎng)BC在5.2~10.1×109/L之間是否呈線性有待研究。血小板在6~863×109/L呈線性而中值樣品的研究結(jié)果是在51.5~167.5×109/L范圍內(nèi)呈線性,與高值樣品研究結(jié)果相矛盾,這是否是由于實驗誤差引起有待進一步分析。3.2本研究中各項目線性范圍的高值是否是KX-21N測定各項目線性范圍的最高點回答是否定的,這只是由于本研究僅能取到此高值處的樣品而已。3.3線性范圍是檢測系統(tǒng)最重要的性能指標(biāo)之一,樣品的檢測結(jié)果在線性范圍之內(nèi)時檢測結(jié)果可靠,如超過線性范圍,就要對樣品進行稀釋或濃縮,否則檢測的結(jié)果與真值的誤差就超過了臨床可接收的允許范圍。因此對檢測系統(tǒng)線性范圍的評價是非常必要的。熟悉所用檢測系統(tǒng)的線性范圍的評價方法是對檢驗人員的基本要求。3.4很多文獻有線性范圍評價方法的報道,有目測法、斜率法和EP6-A文件的評價