第4章 食用菌菌種生產(chǎn)

第4章食用菌菌種生產(chǎn)第一節(jié)菌種概述

第二節(jié)菌種生產(chǎn)設(shè)備

第三節(jié)菌種培養(yǎng)基

第四節(jié)接種

第五節(jié)菌種培養(yǎng)與質(zhì)量鑒定

第六節(jié)菌種保藏與復(fù)壯第一節(jié)菌種概述一、菌種概念二、菌種類型三、菌種生產(chǎn)程序返回本章一、菌種概念菌種擔(dān)孢子或子囊孢子野生擴大繁殖后的純次生菌絲體栽培來歷野生菌馴化

原菌株改良

生物技術(shù)創(chuàng)新優(yōu)良

菌株擴大

繁殖用于

生產(chǎn)實行純培養(yǎng)

不含任何雜菌基本

要求返回本節(jié)二、菌種類型一級菌種二級菌種

三級菌種級別按保藏用種實驗用種

生產(chǎn)用種目的狀態(tài)：固體菌種、液體菌種返回本節(jié)（一）級別不同的菌種1.一級種（母種）用分離法首次得到的

純次生菌絲體

概念概況培養(yǎng)環(huán)境試管、斜面培養(yǎng)基用途再生母種擴大原種

保藏用種菌絲弱而少、不可直接栽培特點返回本節(jié)返回本節(jié)2.二級種（原種）將母種擴大至粗放培養(yǎng)基上

形成的菌種概念概況培養(yǎng)環(huán)境菌絲較多而壯、適應(yīng)性較強特點用途擴大栽培種大口瓶、較粗放的

液體或固體培養(yǎng)基返回本節(jié)返回本節(jié)3.三級種（栽培種）將原種擴大至粗放培養(yǎng)基上

形成的菌種概念概況培養(yǎng)環(huán)境菌絲多而壯、適應(yīng)性強特點用途栽培生產(chǎn)菌種袋、較粗放的

液體或固體培養(yǎng)基不可再擴返回本節(jié)返回本節(jié)生產(chǎn)總過程母種栽培種栽培原種子實體返回本節(jié)返回本節(jié)菌種簡介（二）狀態(tài)不同的菌種

用固體基質(zhì)培養(yǎng)的菌種1.固體

菌種概念特點設(shè)備、工藝簡單

菌齡長而不一

發(fā)酵率較低用液體基質(zhì)培養(yǎng)的菌種2.液體

菌種概念特點設(shè)備、工藝較復(fù)雜

菌齡短而一致

發(fā)酵率高

易老化和自溶返回本節(jié)生長勢的區(qū)別液體菌種固體菌種返回本節(jié)返回本節(jié)三、菌種生產(chǎn)程序四大步驟制培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)接種返回本節(jié)第二節(jié)主要生產(chǎn)設(shè)備一、制培養(yǎng)基設(shè)備二、滅菌設(shè)備三、接種設(shè)備四、培養(yǎng)設(shè)備五、保藏設(shè)備六、菌種廠布局返回本章一、制培養(yǎng)基設(shè)備

（一）原料處理設(shè)備切片粉碎兩用機切片粉碎兩用機鍘草機粉碎機返回本節(jié)拌料機返回本節(jié)裝袋機（二）培養(yǎng)基分裝設(shè)備返回本節(jié)裝瓶機挖瓶機返回本節(jié)菌種袋頸圈返回本節(jié)菌種瓶返回本節(jié)二、滅菌設(shè)備高

壓

鍋外鍋：裝水

內(nèi)鍋：裝物（有壁管）鍋蓋安全閥

排氣閥

壓力表返回本節(jié)常壓返回本節(jié)密閉性好要

求1.

接

種

箱用

法

清潔、放物品→

消毒噴霧

熏蒸

紫外燈特

點簡易、利移動

對人體低害

效果好、工效低

三、接種設(shè)備

（一）接種環(huán)境返回本節(jié)觀察窗紫外燈操作孔接種箱返回本節(jié)

2.接種室緩沖間：2~3m2

接種間：5~6m2面積7~9m2高2.2~2.5m要求6個面平滑

兩門錯開、平拉式

頂裝紫外燈清潔→物品放緩沖間→消毒

→移物至接種間→噴消毒液

→

10min后接種→消毒液清潔

使用返回本節(jié)返回本節(jié)使一定工作區(qū)達(dá)到相對無菌、無塵狀態(tài)的電器3.超凈工作臺雙人單人返回本節(jié)要求:前端為導(dǎo)熱性好的金屬材料槍匙鉤鏟鑷耙針環(huán)接種4.接種工具返回本節(jié)固

體

菌

種

接

種

槍液體菌種接種槍返回本節(jié)四、菌種培養(yǎng)沒備1.培養(yǎng)箱

培養(yǎng)少量菌種的恒溫電器（20~40℃）返回本節(jié)2.培養(yǎng)室

培養(yǎng)大量菌種的恒溫房要求光線暗

密閉好、通風(fēng)性強

能升溫、降溫（空調(diào)機）有培養(yǎng)架返回本節(jié)貯藏室遠(yuǎn)離污染源低溫（4~8℃）干燥、通風(fēng)、遮光

用前要嚴(yán)格消毒殺蟲地面常撒石灰粉保藏原種、栽培種：五、菌種保藏設(shè)備

保藏母種：冰箱（4℃）左右返回本節(jié)六、菌種廠的布局

根據(jù)菌種生產(chǎn)流程合理設(shè)置倉庫配料室滅菌室接種室培養(yǎng)室辦公室栽培棚門口曬料場返回本節(jié)第三節(jié)菌種培養(yǎng)基一、概述

（一）概念及要求

（二）培養(yǎng)基的類型二、各級菌種的培養(yǎng)基

（一）母種培養(yǎng)基

（二)原種、栽培種培養(yǎng)基三、培養(yǎng)基的滅菌返回本章一、培養(yǎng)基的概述（一）概念及要求概念人工配制的適于菌種生長的營養(yǎng)基質(zhì)要

求營養(yǎng)種類、比例、水分、pH適宜；

保持無菌狀態(tài)。返回本節(jié)類

型天然：天然有機物

合成：已知成分的化學(xué)藥品

半合成：？原料

來源狀態(tài)液體：營養(yǎng)液固體固體：天然固體原料

固化：加1.5%~2%瓊脂表面形狀斜面培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基（二）培養(yǎng)基的類型返回本節(jié)粉狀條狀屬天然植物多糖

融點96℃以上

凝點40℃以下

冷水中不溶

透明度好、粘著力強

不被微生物分解利用特性返回本節(jié)返回本節(jié)二、各級菌種的培養(yǎng)基（一）母種培養(yǎng)基1.通用配方2.配制過程PDA馬鈴薯200g、葡萄糖20g

瓊脂15~20g、水1000m返回本節(jié)煮沸20min，取定量濾液制馬鈴

薯濾液濾液沸時加入，融后加余料融化瓊脂調(diào)解pH勿污管口，控制裝量分裝試管準(zhǔn)備滅菌扎捆10%NaOH或HCL返回本節(jié)返回本節(jié)母種的培育（二）原種、栽培種培養(yǎng)基主料棉籽殼87，麥麩10輔料白糖1，石灰1，過磷酸鈣1配方（%）棉殼、麥麩干混

余料溶于水后澆入主料

清水翻拌至含水量配制1.種類

(1)棉籽殼培養(yǎng)基返回本節(jié)主料麥粒、玉米粒等98.5%輔料石膏粉1%,碳酸鈣0.5%調(diào)pH

與分裝

pH：一般為8.0左右

原種培養(yǎng)基裝大口瓶

栽培種培養(yǎng)基裝菌種袋外緊內(nèi)松，上緊下松配方（%）顆粒洗凈，1%石灰水泡脹

文火煮沸15~20min

晾至無明水后拌入余料配制(2)顆粒培養(yǎng)基返回本節(jié)返回本節(jié)原種培養(yǎng)基的配制視頻栽培種的裝袋返回本節(jié)三、培養(yǎng)基的滅菌（一）母種培養(yǎng)基的滅菌

無菌檢驗

約30℃條件下→空白培養(yǎng)2~3天滅菌與擺斜面擺斜面1kg/cm2(103kpa、121℃）20~30min返回本節(jié)母基滅菌與擺斜面返回本節(jié)母種培養(yǎng)基的滅菌（二）原種、栽培種培養(yǎng)基的滅菌高壓滅菌1.5kg/cm2（152kpa、128.1℃）(蒸汽)滅菌1~2h

返回本節(jié)常壓滅菌100℃滅菌10h左右→再悶12h要求攻頭、控中、保尾返回本節(jié)第四節(jié)菌種的接種一、無菌操作二、母種的接種

(一）分離法

1.組織分離

2.孢子分離

（二）轉(zhuǎn)管法三、原種、栽培種的接種返回本章概念：菌種移至新培養(yǎng)基上的過程

關(guān)鍵：無菌操作接種在嚴(yán)格消毒滅菌條件下進(jìn)行的操作概念一、無菌操作接種環(huán)境消毒滅菌酒精棉球消毒清洗后的雙手開啟的管口、瓶口靠近燈焰拔出的棉塞勿觸及任何地方動作快，接種時間勿太長要點必備返回本節(jié)返回本節(jié)無菌操作特點簡便，易成功保持原菌種性狀重復(fù)多易退化不適于耳類1.組織分離組織PDA次生菌絲培養(yǎng)（一）分離法步驟返回本節(jié)步驟選種菇外觀典型、大小適中、無病蟲害、

八成熟、第1~2茬的子實體取接組織縱剖（撕）菇體

尖頭鑷取柄蓋交界處綠豆粒大的組織

放入新斜面中部種菇消毒用燃燒的酒精棉球迅速擦拭返回本節(jié)2.孢子分離(有性繁殖）孢子

特點菌齡小

生命力強

變異率高孢子

分離法難度較大單孢分離多孢分離較簡易單孢分離

的菌落返回本節(jié)多孢分離概念使許多孢子在同一培養(yǎng)基上，

萌發(fā)后自由交配成次生菌絲的方法步驟種菇消毒采收孢子接種孢子整菇插種法

鉤懸法

孢子印法返回本節(jié)1.種菇

消毒菌柄去2/3苞被有：75%酒精棉球擦0.25%新潔爾滅浸2~3min

無菌紗布吸干表面水分

無返回本節(jié)2.采收孢子整菇

插種法種菇插在孢子收集器中

使孢子散落于培養(yǎng)皿內(nèi)的方法用

前

滅

菌25℃、24h現(xiàn)孢子粉

取出分離材料

培養(yǎng)皿蓋嚴(yán)返回本節(jié)鉤懸法25℃、24h現(xiàn)孢子粉

取出分離材料返回本節(jié)孢子印法返回本節(jié)接種孢子用接種環(huán)

蘸孢子液或孢子粉

涂布于平板上返回本節(jié)返回本節(jié)母種分離（二）轉(zhuǎn)管法注意種塊勿太大原老種塊勿再接入傳代次數(shù)勿太多將母種移入新的試管的過程概念過程接種環(huán)取綠豆粒大母種

移入新斜面中部返回本節(jié)轉(zhuǎn)管返回本節(jié)轉(zhuǎn)管三、原種、栽培種的接種接原種用接種耙取蠶豆大母種

放于瓶中料面上返回本節(jié)返回本節(jié)原種接種接栽培種用接種匙（鑷、鏟）取棗大原種放于袋的兩端或瓶中料面上注意表面老菌絲及

老種塊勿接入返回本節(jié)栽培種接種返回本節(jié)栽培種接種第五節(jié)菌種培養(yǎng)與質(zhì)量鑒定一、菌種培養(yǎng)（一）培養(yǎng)條件

（二）技術(shù)環(huán)節(jié)二、菌種質(zhì)量鑒定（一）母種質(zhì)量鑒定

（二）原種和栽培種質(zhì)量鑒定返回本章(一)培養(yǎng)條件場所清潔空氣清新光線暗空氣濕度

60%~70%溫度約25℃一、菌種培養(yǎng)返回本節(jié)（二）技術(shù)環(huán)節(jié)1.母種

培養(yǎng)及時挑揀污染管分離的母種要純化→出菇試驗→使用控制菌齡（即將長滿斜面）培養(yǎng)時間5~10天返回本節(jié)母種培養(yǎng)返回本節(jié)母種培養(yǎng)

2.原種

栽培種

的培養(yǎng)培養(yǎng)時間：約30天勿堆放過擠及時挑揀污染瓶（袋）栽培種的菌袋缺氧時可刺孔增氧控制菌齡（菌絲長滿后7~10天使用）返回本節(jié)返回本節(jié)刺孔點返回本節(jié)食用菌接種技術(shù)二、菌種質(zhì)量的鑒定形態(tài)特征、生理特性、

栽培性狀、經(jīng)濟效