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中醫(yī)臨床常用實驗?zāi)P偷慕?/p>

1中醫(yī)證候動物模型的準(zhǔn)備1.1中醫(yī)證證論此前,該模型涵蓋了廣泛的綜合征綜合征模型,如八項辨證、臟腑辯證法、氣氣辯證、氣、血液循環(huán)辯證法、六經(jīng)辯證法、衛(wèi)氣營血辯證法等。其中,按照臟腑辨證,包括:腎虛證(腎陰虛、腎陽虛證)動物模型、脾虛證動物模型、肝臟證候(肝郁、肝陽上亢)動物模型、心臟證候動物模型(心氣虛)、肺臟證候動物模型等。按照氣血津液辨證,包括:氣虛證動物模型、血虛證動物模型、血瘀證動物模型等。按照六淫辨證,包括:寒證、熱證動物模型,按照衛(wèi)氣營血辨證,包括溫病動物模型。另外還有痹證動物模型、厥脫證動物模型等。各種模型以脾虛、腎虛、血瘀證最多。1.2建模方法:通常分為三種類型1.2.1建立溫病濕溫之現(xiàn)實中阻模型在中醫(yī)病因?qū)W說的基礎(chǔ)上,利用各種病證模型,如冷水浴制造陽虛模型;溫濕箱加高糖高脂飲食制作溫病濕溫之濕熱中阻模型。還有利用中藥四氣五味特性制成的特色模型,如青皮、枳殼、附子制作的糖尿病氣陰兩虛證動物模型。1.2.2中醫(yī)證候模型發(fā)現(xiàn)某些藥物的毒性反應(yīng)、或手術(shù)后的不良反應(yīng)所致特異病理改變與中醫(yī)某些證候中典型的病理改變相一致的,于是將該種病理模型納為中醫(yī)證候模型。典型者如利血平造模形成的脾虛證模型。1.2.3哲學(xué)基礎(chǔ)及方法綜合上述兩種模型的優(yōu)勢,較貼近理想的中醫(yī)病證模型。如呂愛平等以Ⅱ型膠原免疫所致關(guān)節(jié)炎動物模型為基礎(chǔ),以風(fēng)寒濕痹證為外因、腎虛為痹證內(nèi)因的學(xué)說為依據(jù),利用中西醫(yī)結(jié)合腎本質(zhì)研究的成果,采用復(fù)合因子方法制作痹證動物模型。但由于中、西醫(yī)的發(fā)病機制不同,具體相關(guān)性尚有待深入研究,故該種模型目前應(yīng)用較少。2中醫(yī)證候動物模型的辯證依據(jù)2.1微色圖聯(lián)體觀察其寒熱、飲食、二便、面色、活動度、神色、舌r值、爪r值、尾r值、體重、形體虛實、毛色、呼吸、眼神、耳、鼻、唇、腹、二陰、爪和尾顯微拍照(顏色、胖瘦、光澤、爪舒展、爪伸展、爪老嫩、爪潔凈、爪潰爛);聞氣味等。2.2用法2.3病理改變2.4變學(xué)改變和腦虛證所涉及的指標(biāo)目前實證的生化指標(biāo),主要根據(jù)具體病變系統(tǒng)和器官而定。如中風(fēng)血瘀證觀察血液流變學(xué)改變和腦虛證所涉及的指標(biāo)以免疫學(xué)相關(guān)指標(biāo)為主,其它指標(biāo)相對較少。具體體現(xiàn)在:氣虛證以研究免疫學(xué)相關(guān)指標(biāo)為主,血虛證以研究外周血象及骨髓造血細(xì)胞為主,陰陽虛證以研究肝脾腎組織化學(xué)及各種酶、核酸為主,如cAMP、cGMP。2.5基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)目前在中醫(yī)藥科研中得到廣泛應(yīng)用。當(dāng)使用證的動物模型,或在疾病模型基礎(chǔ)上通過辨證區(qū)分為不同的證,對主要的病變組織了解后,便可以利用基因芯片技術(shù),觀察有關(guān)組織基因的變異,以了解證與證、證與病、證與體質(zhì)之間的差異。沈自尹關(guān)于腎本質(zhì)的研究,可作為這方面代表。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)、生命科學(xué)的發(fā)展,這樣的研究會取得更多成績。2.6治療綜合征3對于中醫(yī)證候模型的研究,其基本觀點提出一般而言,成功的模型建立必須滿足三個條件:(1)模型與原型之間有相似關(guān)系。(2)模型能夠代替原型。(3)對模型的研究,應(yīng)該能夠得出原型的信息。就中醫(yī)證候動物模型而言,所謂原型就是指中醫(yī)證候以及具有中醫(yī)特色病證結(jié)合的病理反應(yīng)。田金洲等也提出證候模型應(yīng)該符合中醫(yī)四診信息所表達的證候表現(xiàn)特征,而不是用想象的某些生物指標(biāo)來替代。證候動物模型目前面臨的問題包括:3.1外濕和內(nèi)濕上濕中醫(yī)病因多為非特異性的因素,一種病因可致多種病證,多種病因又可致同一種證,中醫(yī)傳統(tǒng)病因并不一定是能直接引起相應(yīng)中醫(yī)證候的客觀因素,如濕溫中濕熱中阻模型,單獨外濕未必能造成該種證候,只有“外濕與內(nèi)濕相合”才能形成其濕熱中阻證。由此導(dǎo)致中醫(yī)證候模型的可重復(fù)性差,可信度不高。3.2毒性反應(yīng)模型諸多病理模型,伴有明顯癥狀體征和理化指標(biāo)的變化,造模成功率高、易于觀察、總結(jié),但實際上造模結(jié)果多為一些藥物、手術(shù)等的繼發(fā)反應(yīng)或不良反應(yīng),甚至毒性反應(yīng),且這種模型的制作并無臨床病因?qū)W支持,與中醫(yī)臨床更無甚聯(lián)系,而毒性反應(yīng)所導(dǎo)致的癥狀和指標(biāo)改變,停藥后可能自愈,故該類模型在中醫(yī)藥研究中越來越受懷疑。另外,利用西藥副作用制作的病理模型還可能導(dǎo)致同一藥物導(dǎo)致不同甚至相反證型的尷尬:如甲狀腺素造模,有的定為腎陰虛、有的定為陰虛、有的定為陽虛;用糖皮質(zhì)激素造模,有的出現(xiàn)腎陰虛、有的出現(xiàn)腎陽虛,這種矛盾固然與用藥劑量、用藥時間有關(guān),但也與藥物副作用廣泛、不確定有關(guān)。3.3不同一品的藥代動力學(xué)由于缺乏統(tǒng)一的動物模型標(biāo)準(zhǔn),在許多新藥實驗中曾廣泛使用以方驗證的模式。但在臨床新藥實驗中可以出現(xiàn)不同方藥對于同一疾病模型效果一樣的情況,如對同一潰瘍模型,清熱止血方藥與溫中止血方藥均可顯示減輕胃黏膜損傷,縮短出凝血時間等相同效果,那么該模型性質(zhì)按照中醫(yī)辨證觀點,究竟屬寒性還是熱性?由此看來,由藥物反證模型證候?qū)傩?不完全可靠。3.4中藥特異性與特異性的關(guān)系證候?qū)嵸|(zhì)研究的傳統(tǒng)目標(biāo)是追求研究指標(biāo)的高特異性,而其研究結(jié)果的特點卻恰恰是其弱特異性。以脾虛證研究為例,實驗指標(biāo)有70余種,涉及消化系統(tǒng)、植物神經(jīng)系統(tǒng)、能量代謝、免疫、內(nèi)分泌、造血功能等方面,特異性相對較高的僅有酸刺激后唾液淀粉酶活性下降和木糖吸收率下降兩個。多年來為克服弱特異性,中醫(yī)證候?qū)嵸|(zhì)研究者作出不懈的努力,但實踐結(jié)果收效甚微。4解決現(xiàn)有中醫(yī)證候模型問題的對策4.1創(chuàng)設(shè)新的檢測方法對動物的辨證指標(biāo),盡量采用可動態(tài)觀察、非創(chuàng)傷性的原則。因為對證候演變的觀察是中醫(yī)疾病診斷的特色之一,而任何創(chuàng)傷性的檢測,對于動物都是一個惡性刺激,改變了原有的“證”,不利于這種動態(tài)觀察。但由于人與動物的交流障礙,將臨床的四診合參完全照搬到動物身上,不切實際,所以我們要盡量發(fā)明、創(chuàng)造這樣一些檢測儀器和方法,以收集到動態(tài)、真實、客觀的動物癥狀。在這方面,方肇勤課題組已經(jīng)有多年探索與經(jīng)驗,已取得一定成果。4.2加強臨床基礎(chǔ)研究4.3動物證候模型計算,根據(jù)掌握動物證候模型的辨識和模型建立動物證候模型參照臨床的辨證標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合動物自身特點,制定動物證候模型的辨證指標(biāo)。將臨床辨證標(biāo)準(zhǔn)與動物特性相結(jié)合,指定可操作的特定種屬動物的證候模型辨證標(biāo)準(zhǔn)。4.4中醫(yī)證候動物模型的研究,既是中醫(yī)科研的特色,雖然動物模型在中醫(yī)證候的研究中仍然有許多缺憾和不足,但其在中醫(yī)學(xué)科研中起到的不可替代的作用,對實現(xiàn)中醫(yī)現(xiàn)代化做出的巨大貢獻。只是,為了讓動物模型更符合中醫(yī)整體觀、辨證論治的特色,使研究成果能有效運用于中醫(yī)臨床,我們只能既要堅持中醫(yī)特色、理解中醫(yī)經(jīng)典,又掌握先進科學(xué)技術(shù)、靈活運用于中醫(yī)科研中。繼承不泥古、創(chuàng)新不離宗。對中醫(yī)證候動物模型的研究,我們?nèi)匀沃囟肋h(yuǎn)。體溫、步態(tài)、心率、舌、脈,肌力,神

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