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中藥鑒定基本知識與技能山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校制作人民衛(wèi)生電子音像出版社出版中藥鑒定技術(shù)學(xué)習(xí)課件主要內(nèi)容第一章中藥鑒定的概念和任務(wù)第二章中藥鑒定技術(shù)發(fā)展概況第三章中藥的采收、加工與貯藏第四章中藥鑒定的依據(jù)與基本程序第五章中藥鑒定的方法第一章中藥鑒定的概念和任務(wù)山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校制作人民衛(wèi)生電子音像出版社出版中藥鑒定技術(shù)學(xué)習(xí)課件一、中藥鑒定技術(shù)含義中藥:在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下,用以防治疾病和醫(yī)療保健的藥物。包括:中藥材:取自天然的未經(jīng)加工或經(jīng)過簡單產(chǎn)地加工的原料藥。中藥飲片:廣義指可直接供中醫(yī)臨床調(diào)配處方使用的所有藥物;狹義指切制成一定規(guī)格的片、絲、塊、段等形狀的藥物。中成藥:以中藥材或飲片為原料,根據(jù)臨床處方的要求,采用相應(yīng)的制備工藝和加工方法,制備成的隨時可以應(yīng)用的劑型。一、中藥鑒定技術(shù)含義中藥鑒定,是指對中藥品種和質(zhì)量進(jìn)行的檢驗,包括來源鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定、理化鑒定等方法;涵蓋藥品標(biāo)準(zhǔn)中的“性狀”、“鑒別”、“檢查”、“浸出物”及“含量測定”等項目。中藥鑒定技術(shù)是一門依據(jù)國家藥品標(biāo)準(zhǔn),鑒定中藥真?zhèn)蝺?yōu)劣的綜合性應(yīng)用技術(shù)。二、中藥鑒定的任務(wù)1.鑒定中藥的真?zhèn)?.鑒定中藥的優(yōu)劣

3.保護(hù)與開發(fā)中藥資源4.制定中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)5.整理中藥復(fù)雜品種

1.鑒定中藥的真?zhèn)沃兴幍恼鎮(zhèn)?--指中藥品種的真假?!罢妗奔凑?--指符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的品種;“偽”即“偽品”或“假藥”---指不符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的品種。

1.鑒定中藥的真?zhèn)巍端幤饭芾矸ā芬?guī)定:有下列情形之一的,為假藥:①藥品所含成分與國家藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的成分不符的。②以非藥品冒充藥品或者以他種藥品冒充此種藥品的。1.鑒定中藥的真?zhèn)斡邢铝星樾沃坏乃幤?,按假藥論處:①SFDA規(guī)定禁止使用的。②依照《藥品管理法》必須批準(zhǔn)而未經(jīng)批準(zhǔn)生產(chǎn)、進(jìn)口,或者依照《藥品管理法》必須檢驗而未經(jīng)檢驗即銷售的。③變質(zhì)的。④被污染的。⑤使用依照《藥品管理法》必須取得批準(zhǔn)文號而未取得批準(zhǔn)文號的原料藥生產(chǎn)的。⑥所標(biāo)明的適應(yīng)證或者功能主治超出規(guī)定范圍的。除上述第⑤種情形外,其他情形在藥材商品中都曾發(fā)現(xiàn)過。2.鑒定中藥優(yōu)劣中藥的優(yōu)劣實指中藥的質(zhì)量的好壞,包括中藥的商品質(zhì)量和工作質(zhì)量。前者主要表現(xiàn)為中藥商品的有效性、安全性、穩(wěn)定性、均一性等方面,通常采用藥典(現(xiàn)行版)規(guī)定的方法進(jìn)行檢查、浸出物和含量測定,應(yīng)符合規(guī)定。后者綜合地反映中藥生產(chǎn)、經(jīng)營等過程對達(dá)到中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的保證程度。2.鑒定中藥優(yōu)劣《藥品管理法》規(guī)定:藥品成份的含量不符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的,為劣藥。有下列情形之一的藥品,按劣藥論處:①未標(biāo)明有效期或者更改有效期的。②不注明或者更改生產(chǎn)批號的。③超過有效期的。④直接接觸藥品的包裝材料和容器未經(jīng)批準(zhǔn)的。⑤擅自添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑及輔料的。⑥其他不符合藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的。

3.保護(hù)與開發(fā)中藥資源(1)中藥資源(2)尋找和擴(kuò)大新藥源(3)中藥資源的保護(hù)(1)中藥資源中藥資源---是指在一定空間范圍內(nèi),自然狀態(tài)存在或人工制造的,可作為中藥使用的植物、動物、礦物及加工品的種類與蘊(yùn)藏量的總和。野生北沙參(2)尋找和擴(kuò)大新藥源發(fā)掘民間草藥;根據(jù)生物親緣關(guān)系,在同科屬植物中尋找新藥源;根據(jù)有效成分尋找新藥源;以藥理篩選結(jié)合臨床療效尋找新藥源;從古本草中尋找;根據(jù)地理分布尋找新藥源。(3)中藥資源的保護(hù)《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》1981《野生藥材資源保護(hù)管理條例》1987《國家重點保護(hù)野生藥材名錄》1987重點保護(hù)的野生藥材物種分為三級:一級:瀕臨滅絕狀態(tài)的稀有珍貴野生藥材物種,如虎、豹、賽加羚羊;二級:分布區(qū)域縮小,資源處于衰竭狀態(tài)的重要野生藥材物種,如甘草;三級:資源嚴(yán)重減少的主要常用藥材物種,如川貝母、豬苓等。76種重點保護(hù)的野生藥材物種如下:一級保護(hù)物種(4種):虎、豹、賽加羚羊、梅花鹿。二級保護(hù)物種(27種):馬鹿、林麝、馬麝、原麝、黑熊、棕熊、穿山甲、中華大蟾蜍、黑眶蟾蜍、中國林蛙、銀環(huán)蛇、烏梢蛇、五步蛇、蛤蚧、甘草、脹果甘草、光果甘草、黃連、三角葉黃連、云連、人參、杜仲、厚樸、凹葉厚樸、黃皮樹、黃檗、劍葉龍血樹。三級保護(hù)物種(45種):川貝母、暗紫貝母、甘肅貝母、棱砂貝母、新疆貝母、伊犁貝母、刺五加、黃芩、天門冬、豬苓、條葉龍膽、龍膽、三花龍膽、堅龍膽、防風(fēng)、遠(yuǎn)志、卵葉遠(yuǎn)志、胡黃連、肉蓯蓉、秦艽、麻花秦艽、粗莖秦艽、小秦艽、北細(xì)辛、漢城細(xì)辛、細(xì)辛、新疆紫草、紫草、五味子、華中五味子、蔓荊、單葉蔓荊、訶子、絨毛訶子、山茱萸、環(huán)草石斛、馬鞭石斛、黃草石斛、鐵皮石斛、金釵石斛、新疆阿魏、阜康阿魏、連翹、羌活、寬葉羌活。思考題1.解釋名詞:中藥、中藥資源、中藥材、中藥飲片中成藥、假藥、劣藥、道地藥材、統(tǒng)貨2.分析影響中藥質(zhì)量的因素。3.開發(fā)和擴(kuò)大新藥源的方法和途徑主要有哪些?4.解決中藥品種混亂的途徑主要有哪些?第二章中藥鑒定技術(shù)發(fā)展概況山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校制作人民衛(wèi)生電子音像出版社出版中藥鑒定技術(shù)學(xué)習(xí)課件第一節(jié)古代中藥鑒定知識神農(nóng)本草經(jīng):東漢后期,365,已知最早的藥物學(xué)專著。本草經(jīng)集注:梁·陶弘景,730,以藥物的自然屬性分類。新修本草:唐·蘇敬等,850,我國和世界最早的藥典。證類本草:宋·唐慎微,1746,我國現(xiàn)存最早的完整本草。本草綱目:明·李時珍,1892,是自然分類的先驅(qū)。本草綱目拾遺:清·趙學(xué)敏,921,新增藥物最多的古本草。植物名實圖考:清·吳其濬,1714,為植物學(xué)專著。第二節(jié)中藥鑒定技術(shù)發(fā)展概況1.中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化研究2.中藥鑒定新技術(shù)、新方法研究3.中藥材GAP標(biāo)準(zhǔn)研究4.中藥材資源開發(fā)研究5.現(xiàn)代中藥的開發(fā)研究中藥鑒定的發(fā)展方向思考題1.解釋概念:生藥本草2.寫出下列本草著作的成書年代、編著者、載藥數(shù)量及主要特點:本草經(jīng)集注新修本草證類本草本草綱目本草綱目拾遺3.試分析中藥鑒定技術(shù)的發(fā)展方向。第三章中藥的采收加

工貯藏中藥鑒定技術(shù)學(xué)習(xí)課件山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校制作人民衛(wèi)生電子音像出版社出版第一節(jié)中藥的采收

根據(jù)有效成分在藥用植(動)物體內(nèi)消長變化的規(guī)律、藥材的產(chǎn)量和采收的難易等,確定適宜的采收時間(季節(jié)、生長年限)和方法,對于提高藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量,具有重要意義。一、傳統(tǒng)采收原則1.根、根莖、根皮類:秋冬季2.莖木類:秋冬季3.莖皮類:春末夏初(春夏之交)4.葉類:開花前或果實未成熟前5.花類:花蕾;花初開;花盛開6.果實類:成熟;成熟經(jīng)霜;未成熟;幼果。7.種子類:果實成熟時采8.全草類:莖葉茂盛時采。二、現(xiàn)代采收原則1.在有效成分含量為最大值時采收2.在有效成分的總含量為最大值時采收3.在有效成分的總含量為最大值、毒性成分的含量為最小值時采收

第二節(jié)中藥的加工1.挑選2.洗滌3.修整與去皮4.漂5.切片6.蒸、煮、燙7.熏硫8.發(fā)汗9.干燥第三節(jié)中藥的貯藏一、中藥常見的變質(zhì)現(xiàn)象二、中藥的貯藏保管方法一、中藥常見的變質(zhì)現(xiàn)象1.蟲蛀2.霉變3.變色4.走油5.氣味散失、粘結(jié)、潮解、風(fēng)化等。二、中藥的貯藏保管方法1.冷藏法2.化學(xué)藥劑貯藏法殺蟲劑的條件:揮發(fā)性強(qiáng);強(qiáng)烈的滲透性;效力確實;作用迅速;對人毒性小,對藥材質(zhì)量沒有影響3.經(jīng)驗貯藏法對抗貯藏;谷糠貯藏;噴酒貯藏;密閉貯藏:4.氣調(diào)貯藏法(氣調(diào)養(yǎng)護(hù)法)等思考題1.解釋術(shù)語:發(fā)汗走油遮光密閉密封熔封陰涼處2.寫出下列類別藥材的采收原則:根及根莖類中藥皮類中藥花類中藥3.藥材最佳采收期的確定,通常應(yīng)綜合考慮哪些因素?4.藥材常用的干燥方法有哪些?說出各自的適用范圍。5.藥材常見的變質(zhì)現(xiàn)象有哪些?如何防治?第四章中藥鑒定的依據(jù)和基本程序中藥鑒定技術(shù)學(xué)習(xí)課件山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校制作人民衛(wèi)生電子音像出版社出版一、中藥鑒定的依據(jù)中藥鑒定的依據(jù)是國家藥品標(biāo)準(zhǔn),包括《中國藥典》和國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)頒布的藥品標(biāo)準(zhǔn)(簡稱《局版藥品標(biāo)準(zhǔn)》)。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)是國家對藥品質(zhì)量和檢驗方法所作的技術(shù)規(guī)定,是藥品生產(chǎn)、經(jīng)營、使用、檢驗和監(jiān)督管理部門必須共同遵循的法定依據(jù)。二、中藥鑒定的基本程序1.取樣----代表性;足夠的數(shù)量2.鑒定----依據(jù)國家藥品標(biāo)準(zhǔn)對檢品的真實性、純度、質(zhì)量進(jìn)行評價和檢定。3.結(jié)果判斷---填寫檢驗報告書。思考題1.解釋名詞術(shù)語四分法、藥品檢驗報告書、恒重、空白試驗、精密稱定、最粗粉、細(xì)粉、溶解度2.中藥鑒定的依據(jù)是什么?其基本程序包括哪幾部分?3.簡述藥典載藥材拉丁名的命名方法。4.簡述2010年版藥典主要有哪些特點?5.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的含義是什么?它有哪些特性?第五章中藥鑒定的方法山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校制作人民衛(wèi)生電子音像出版社出版中藥鑒定技術(shù)學(xué)習(xí)課件中藥鑒定的方法第一節(jié)來源鑒定第二節(jié)性狀鑒定第三節(jié)顯微鑒定第四節(jié)理化鑒定第五章中藥鑒定的方法

四大鑒別法適用范圍:來源鑒定--完整的植、動、礦物類藥材性狀鑒定--藥材、飲片顯微鑒定--破碎藥材、粉末、中成藥理化鑒定(現(xiàn)代儀器分析)----有效成分、指標(biāo)成分分析;浸出物測定;純凈程度、有害或有毒物質(zhì)限量檢查涵蓋《中國藥典》中的項目:性狀鑒別檢查浸出物測定含量測定第一節(jié)來源鑒定觀察植物形態(tài)各器官(繁殖器官)熱水浸泡軟化展平借助放大鏡或解剖鏡借助顯微鏡核對文獻(xiàn)將檢品的特征與書籍中記載的內(nèi)容相比較,并加以分析原始文獻(xiàn)是指第一次發(fā)現(xiàn)該種(新種)植物的植物工作者,描述其特征,予以初次定名的文獻(xiàn)。核對標(biāo)本模式標(biāo)本(發(fā)表新種時所被描述的植物標(biāo)本)第五章中藥鑒定的方法第五章中藥鑒定的方法唇形科植物地瓜兒苗Lycopus

lucidus

Turcz.

澤蘭藥材人參白術(shù)原動物鑒定(鹿茸)第五章中藥鑒定的方法鹿茸

為脊索動物門哺乳綱鹿科動物梅花鹿或馬鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角。前者習(xí)稱“花鹿茸”(黃毛茸);

后者習(xí)稱“馬鹿茸”(青毛茸)。馬鹿本品為節(jié)肢動物門蛛形綱鉗蝎科動物東亞鉗蝎Buthus

martensii

Karsch的干燥體。全蝎(東亞鉗蝎)第五章中藥鑒定的方法桑螵蛸本品為節(jié)肢動物門螳螂科昆蟲大刀螂Tenodera

sinensisSaussure、小刀螂Statilia

maculata(Thunberg)或巨斧螳螂Hierodula

patellifera(Serville)的干燥卵鞘。雄黃:本品為硫化物類礦物雄黃族雄黃。主含二硫化二砷(As2S2)。第五章中藥鑒定的方法朱砂:本品為硫化物類礦物辰砂族辰砂主含硫化汞(HgS)。

第五章中藥鑒定的方法第二節(jié)性狀鑒定一、含義

通過眼看、手摸、鼻聞、口嘗、水試、火試等十分簡便的方法,來鑒定中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣的方法。黃連-味苦、色黃的小檗堿,傳統(tǒng)認(rèn)為黃連“以色黃、味苦者為佳”;薄荷-揮發(fā)油,香氣越濃,揮發(fā)油含量越高,傳統(tǒng)認(rèn)為薄荷“以香氣濃者為佳”。

性狀鑒定技術(shù)是藥學(xué)工作者必備的基本功。經(jīng)驗鑒別:用簡便易行的傳統(tǒng)方法觀察藥材的顏色變化、浮沉情況、以及爆鳴、火焰等特征。經(jīng)驗鑒別術(shù)語形象而生動,易懂易記,值得繼承和發(fā)展。第五章中藥鑒定的方法二、內(nèi)容形狀大小色澤表面質(zhì)地斷面氣味水試

火試第五章中藥鑒定的方法1.形狀圓柱形(白芍)

羚羊角圓錐形弓形彎曲第五章中藥鑒定的方法澤瀉(卵圓形)第五章中藥鑒定的方法天麻(橢圓形)海馬(馬頭,蛇尾,瓦楞身)麥冬(紡錘形)猴頭三七第五章中藥鑒定的方法不規(guī)則塊狀安息香琥珀第五章中藥鑒定的方法

粉防己形似“豬大腸”白及扁圓形,有爪狀分枝

草烏太子參何首烏黃連延胡索人參(園參)山參肉桂黃柏厚樸2.大小大小指藥材的長短、粗細(xì)(直徑)和厚度等;觀察并測量較多的樣品;允許有少量高于或低于規(guī)定的數(shù)值;對細(xì)小的種子或果實類,每10粒排成1行,用毫米刻度尺測量其總長度,然后計算其平均值。第五章中藥鑒定的方法3.色澤色澤系指在日光下觀察的藥材顏色及光澤度。紅色(枸杞子)綠色(番瀉葉)皮部紅棕色木部黃色(防風(fēng))珍珠樣光澤(彩光)

(石決明)第五章中藥鑒定的方法色澤為藥材質(zhì)量的重要標(biāo)志藥材的顏色若為復(fù)合色調(diào),描述的顏色應(yīng)以后一種色調(diào)為主,前一種為輔自然光線或日光燈下觀察第五章中藥鑒定的方法4.表面特征

表面特征指藥材表面是光滑還是粗糙,有無皺紋、皮孔、環(huán)節(jié)、毛茸、鱗葉或其他附屬物等。第五章中藥鑒定的方法瘤狀突起毛茸光滑環(huán)紋黑白相間環(huán)紋銀柴胡三七根頭部略膨大,有多數(shù)密集呈疣狀突起的芽苞、莖或根莖的殘基,習(xí)稱“珍珠盤”;表面淺棕黃色至淺棕色,有扭曲的縱皺紋、支根痕及孔穴狀或盤狀小凹坑(習(xí)稱“砂眼”)。

主根呈類圓錐形或圓柱形,頂端有莖痕,周圍有瘤狀突起,形似“猴頭”,習(xí)稱“猴頭三七”;表面灰褐色或灰黃色,有斷續(xù)的縱皺紋、支根痕及少數(shù)皮孔。

白頭翁

根頭部有白色毛茸

(葉柄殘基)珍珠表面具特有的彩色光澤第五章中藥鑒定的方法切面淺棕色,近邊緣1~4mm處有一條棕黃色隆起的環(huán)紋或條紋。金毛狗脊

表面深棕色,殘留金黃色絨毛;蘄蛇脊索動物門爬行綱蝰科動物五步蛇Agkistrodon

acutus(Güenther)的干燥體第五章中藥鑒定的方法吻端“翹鼻頭”

背部

背部

背部

背部“方勝紋”

腹部“連珠斑”

尾端“佛指甲”

烏梢蛇脊部高聳成屋脊?fàn)?,俗稱“劍脊”第五章中藥鑒定的方法5.質(zhì)地質(zhì)地系指用手折試藥材所感知到的特征。一般用堅韌、疏松(或松泡)、黏性、粉性、致密、油潤、綿性、角質(zhì)等術(shù)語加以描述粉性:指含有多量的淀粉,折斷時常有粉塵散落油潤:指其質(zhì)地柔軟,含油而潤澤角質(zhì):指質(zhì)地堅實,斷面略呈半透明狀或有光澤黏性:指含有黏液質(zhì),嚼之顯黏性,如石斛。

第五章中藥鑒定的方法附子-角質(zhì)樣山藥-粉性松泡-南沙參

油潤-當(dāng)歸

6.斷面折斷面:主要觀察和描述自然折斷時的現(xiàn)象皮部與木部的比例,橫切面:主要觀察維管束的排列方式,射線的分布,油點的有無等特征

第五章中藥鑒定的方法斷面特征:白絲齒輪紋第五章中藥鑒定的方法同心環(huán)棕白相間紋理層狀部分藥材的斷面特征(貫眾、赤芍、防己、白芷)7.氣指通過嗅聞藥材的氣識別藥材藥材的氣不強(qiáng)烈時,可將其破碎、折斷或揉搓后再聞;或置于有蓋的杯子里,用熱水濕潤或浸泡后再聞(薄荷、丁香)。第五章中藥鑒定的方法木香麝香8.味

是指口嘗藥材后的味感藥材性狀中的“味”與性味中的“味”不同(真實味感,葛根味微甜;甘,辛,發(fā)散風(fēng)熱)舌各部位對味覺的敏感程度不同藥材的部位不同,味道可能不同對有強(qiáng)烈刺激性和劇毒的藥材,口嘗時要謹(jǐn)慎藥材的味感與其所含成分密切相關(guān)第五章中藥鑒定的方法

藥材的味感與其所含成分密切相關(guān)

—辛辣:常含揮發(fā)油

—澀:常含鞣質(zhì)

—酸:常含有機(jī)酸

—甜:常含多糖類成分

—咸:常含無機(jī)鹽

—苦:常含生物堿及苷類

—麻舌:常含生物堿等毒性成分9.水試

是利用某些藥材在清水中溶解度的不同及產(chǎn)生各種特殊的變化來鑒定藥材的一種方法。西紅花加水浸泡后,水液染成金黃色;蘇木投入熱水中,水液顯鮮艷的桃紅色;第五章中藥鑒定的方法10.火試是指以火燒或煅藥材,根據(jù)所產(chǎn)生的現(xiàn)象以鑒定藥材的方法。有些藥材用火燒后,能產(chǎn)生特殊的氣味、顏色、煙霧、閃光和響聲等現(xiàn)象。降香微有香氣,點燃則香氣濃烈,有油流出,燒后留有白灰;血竭粉末置白紙上,用火隔紙烘烤即熔化,但無擴(kuò)散的油跡,對光照視色澤鮮紅如血;海金沙撒于火焰上可發(fā)出爆鳴聲及閃光,而松花粉及蒲黃無此現(xiàn)象,可資區(qū)別。第五章中藥鑒定的方法用“磁石召鐵”以鑒定含鐵類藥材;“琥珀拾芥”,即指琥珀經(jīng)摩擦可產(chǎn)生靜電引力,可吸引芥子;龍骨、龍齒、天竺黃以舌舔之有吸力等。在實際工作中,常用四級法代替摩氏硬度計的十級,粗略求得礦物的硬度:指甲相當(dāng)于2.5級;銅鑰匙約3級;小刀約5.5級;鋼銼7級。染甲(掛甲)鑒別;對光照視法鑒定;熔化試驗;條痕鑒別第五章中藥鑒定的方法利用藥材的某一突出特征進(jìn)行鑒定性狀鑒定小結(jié)形狀大小色澤表面質(zhì)地斷面氣味水試火試第五章中藥鑒定的方法

①呈橢圓形或長條形,略扁,皺縮而稍彎曲,長3~15cm,直徑1.5~6cm,厚0.5~2cm。②表面黃白色至淡黃棕色,有縱皺紋及由潛伏芽排列而成的多輪橫環(huán)紋,習(xí)稱“竹節(jié)環(huán)紋”;頂端有殘留莖基(春麻)或紅棕色至深棕色鸚嘴狀的芽苞(冬麻),習(xí)稱“鸚哥嘴”,另一端有圓臍形疤痕,習(xí)稱“肚臍疤”。③質(zhì)堅硬,不易折斷,斷面較平坦,黃白色至淡棕色,角質(zhì)樣。④氣特異,味甘。復(fù)習(xí)思考題1.簡述中藥性狀鑒定的含義及內(nèi)容。2.運(yùn)用植物形態(tài)術(shù)語及經(jīng)驗術(shù)語描述大黃、丹參、黃芪及丁香的性狀特征。3.簡述進(jìn)行性狀鑒別時的注意事項。4.說出角質(zhì)、粉性、柴性等經(jīng)驗術(shù)語的含義。第五章中藥鑒定的方法第三節(jié)顯微鑒定1.含義利用顯微鏡觀察藥材的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀以及內(nèi)含物的特征,用以鑒定藥材的真?zhèn)巍⑵焚|(zhì)和純度。

2.適用范圍(1)藥材組織特征明顯或特殊,可用以區(qū)別類似品或偽品者(2)藥材外形相似,單憑性狀不易鑒別時(3)粉末狀或易破碎藥材(4)含粉末藥材的中成藥第三節(jié)顯微鑒定3.主要內(nèi)容(1)顯微制片(2)顯微化學(xué)鑒定(3)顯微測量(4)顯微攝影顯微制片1.橫切片或縱切片制片

2.粉末制片

3.解離組織制片

4.表面制片

5.花粉粒與孢子制片

6.磨片制片

顯微化學(xué)鑒定(一)細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒別1.木質(zhì)化細(xì)胞壁:間苯三酚+鹽酸1滴紅色或紫紅色2.木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁:蘇丹Ⅲ試液橘紅色至紅色(二)細(xì)胞內(nèi)含物性質(zhì)的鑒別1.淀粉粒

2.糊粉粒

3.菊糖

4.結(jié)晶

5.黏液

6.脂肪油、揮發(fā)油或樹脂

三、顯微測量1.目微尺

2.臺微尺

3.目微尺的標(biāo)定目微尺每小格所相當(dāng)?shù)拈L度(μm)=4.測量方法目的物長度(μm)=目微尺每小格所相當(dāng)?shù)拈L度(μm)×目的物占目微尺格數(shù)

附:顯微攝影技術(shù)利用顯微攝影裝置拍攝顯微鏡(或解剖鏡)視野中物象的技術(shù)稱為顯微攝影。顯微攝影技術(shù)主要包括兩個方面:

拍攝:需要一套完備的顯微攝影裝置

洗印放大:需要一個較好的暗室和成套的洗印放大設(shè)備。進(jìn)行顯微攝影最基本的儀器是:顯微鏡顯微鏡攝影儀一、儀器與設(shè)備1.顯微攝影的要求(1)載物臺能在照相進(jìn)行時粗微調(diào),且堅固,不松動。載物臺最好能作平面轉(zhuǎn)動。(2)座架和支架均需穩(wěn)固,能穩(wěn)固地安裝顯微攝影儀,不易受外部振動的影響。(3)能進(jìn)行聚光器的定心調(diào)整,并有孔經(jīng)光闌與視場光闌。(4)須有內(nèi)藏式光源,可調(diào)節(jié)光亮度,從低倍到高倍都能得到均稱的照明,在高倍時能得到十分明亮的光。并備有放置濾色鏡的地方。(5)具有優(yōu)質(zhì)的物鏡和目鏡。2.顯微攝影儀的必備條件(1)要有能夠連接顯微照相機(jī)的裝置。(2)有一觀察鏡,能對顯微鏡視野進(jìn)行觀察,從觀察鏡中能清晰地看標(biāo)本。(3)物象在觀察鏡中調(diào)至清晰時,也是膠片成象最清晰之時。(4)成象質(zhì)量好,能較好地體現(xiàn)出原標(biāo)本的情況。

(好的顯微攝影儀還附有測光強(qiáng)、測色溫、自動控制曝光時間的裝置)(5)顯微攝影裝置應(yīng)放置在灰塵少,振動少,干燥,半暗的房間中。放顯微鏡的桌子要堅固平穩(wěn)。1.材料(1)活植物材料如幼小器官,活的組織切片,細(xì)胞和原生質(zhì)體,細(xì)胞團(tuán)、愈傷組織、植物表面等。材料新鮮無異物。(2)死植物材料如各種植物組織的永久切片(見樹脂切片),被分離的細(xì)胞與細(xì)胞器,染色體的壓片等。切片清潔無塵,無氣泡。所攝部份完整清晰。二、材料與試劑

2.試劑顯微攝影后膠卷需沖冼,顯微攝影常用顯定影液的配方見下表:三、操作方法及注意事項1.安裝顯微攝影裝置將相機(jī),顯微鏡和照明設(shè)備連一起,并能在觀察鏡中看到所要拍攝的標(biāo)本。安裝時,需先細(xì)讀說明書,熟悉儀器結(jié)構(gòu)和功能,連接部位要穩(wěn)固。2.調(diào)整好顯微鏡(1)聚光器和光源燈的調(diào)中顯微攝影通常采用中心亮視野透射照明法,攝影前,要把聚光器和光源燈調(diào)中,使聚光器中心與視場光闌的中心處于同一光軸上。光源燈的燈絲照明于視野中心。聚光器的調(diào)中步驟:①轉(zhuǎn)動聚光器升降旋鈕使聚光器升至頂點位置;②接通光源燈的電源開關(guān);③將被攝的制片標(biāo)本,放在載物臺上,用4×或10×低倍鏡聚焦在樣品上;④縮小鏡座上的視場光闌,在視野中可見邊緣模糊的視場光闌圖象;⑤微降聚光器,至視場光闌的圖象清晰聚焦止;⑥用聚光器兩個調(diào)節(jié)螺桿推動聚光器,使縮小的視場光闌圖象調(diào)至視野中心;⑦開放視場光闌,使多角形的周邊與視野邊緣完全重合;⑧反復(fù)縮放視場光闌數(shù)次,確認(rèn)光闌中心和邊緣與視野完全重合;⑨使聚光器回復(fù)頂點位置。光源燈調(diào)中方法可采用下法:在視場光闌上面的濾色鏡座上,放一毛玻璃,用以觀察燈絲位置,轉(zhuǎn)動光源燈位置,使燈絲位于視場光闌中心,然后固定光源燈。(2)正確使用光闌顯微鏡的兩種可變光闌,即孔徑光闌和視場光闌。①視場光闌的調(diào)節(jié)使用:

視場光闌位于鏡座之中,其作用:一是根據(jù)物鏡的倍率給予不同直徑的光束面積二是在顯微攝影時起著增減影象反差的作用。當(dāng)光擴(kuò)大到一定程度,照射到標(biāo)本上的光即會有反射與不規(guī)則的散射,造成影象反差的損失。當(dāng)視場光闌收縮到取景框邊緣外的時候,攝影圖象的反差就會改進(jìn)。如果視場光闌收縮得過于接近取景框,圖象的四角將被切去。因此,視場光闌應(yīng)比取景框稍大些。②孔徑光闌的調(diào)節(jié):安裝在聚光鏡中的光闌叫孔徑光闌。它的作用是使圖象的分辨率、反差和焦深處在最佳狀態(tài)。大多數(shù)的標(biāo)本,如想得到高質(zhì)量的照片,孔徑光闌要調(diào)節(jié)在物鏡數(shù)值孔徑的60%~80%之間(見右上圖)。在顯微攝影時,通常用縮小孔徑光闌方法來提高影象反差。視場光闌隨孔徑光闌而變,總是外切孔徑光闌??讖焦怅@的功能孔徑光闌放大,照片反差變小??讖焦怅@收縮過小,照片反差增大,但分辨率變小。孔徑光闌收縮不得低于物鏡數(shù)值孔徑的60%。3.底片選擇(1)底片種類:攝影用的底片有硬片(透明玻璃上涂以感光乳劑而成)和軟片(膠片與膠卷)。膠卷常用的規(guī)格有135和120。(2)底片性能:彩色底片:反轉(zhuǎn)片和負(fù)片,又可分別分為日光型、燈光型和日光燈光兩用型。黑白底片:色盲片只感受藍(lán)紫和紫外光的底片稱為(適用于黑白、藍(lán)紫色色光影象的攝影,而不能用來拍攝紅、綠、黃等色的影象);分色片能感受藍(lán)紫、黃綠光的底片(除紅橙色標(biāo)本外,可廣泛用于顯微攝影);全色片能感受光譜中全部可見光的底片稱(對景物明暗層次能較好表現(xiàn),黑白層次多,反差小)。感光度:底片對光的敏感程度。感光度單位:定(DIN)制,每相差三定感光速度就相差一倍,如21定為18定的二倍,依次類推。標(biāo)準(zhǔn)制(ASA),它規(guī)定數(shù)值增一倍,感光速度也增加一倍,如ASA100為ASA50的二倍。21定相當(dāng)于ASA100。顯微攝影力求使用感光度低的膠片。(3)底片的選擇和應(yīng)用①大型顯微攝影機(jī)選用硬片,小型顯微攝影機(jī)選用軟片。②小型機(jī)相所拍底片需要放大,所以選用銀粒細(xì)的底片。③顯微攝影要求反差大就選中速(17~19)定和慢速(14~16)定,甚至特慢速(9~13)定底片,一般以18定(ASA50)以下為宜。④色盲片和分色片很適合于顯微攝影,特別是顯微攝影以分色片最好,全色片也可用于顯微攝影,但往往要用適當(dāng)顏色的濾光片,以增加反差,才能達(dá)到良好效果。⑤選用燈光型或日光燈兩用型彩色底片拍攝具有色彩的樣本。4.曝光的確定曝光是顯微攝影的一個關(guān)鍵。曝光過度,使底片密度很大,昏暗不清,喪失影紋細(xì)節(jié),反差太小。曝光不足,整個底片密度很小,比較透明,雖然最大密度部分影紋分明,但最小密度和灰霧密度一樣,沒有影紋存在,缺乏正常反差。這類底片,根本不能印放出合格的照片。曝光最重要的問題就是判定曝光時間,確定快門速度。顯微攝影的視野,亮度變化極大,曝光時間的變化范圍寬廣,正確估計曝光時間比普通野外攝影要困難得多。常用的估計影象亮度來確定曝光時間的方法,往往因人眼對光強(qiáng)度的顯著變化不會有科學(xué)的定量分析而致使發(fā)生錯誤。(1)影響曝光的因素考慮影響曝光因素的著眼點是分析它們對被攝影象的還是削弱。亮度是加強(qiáng)時要減少曝光量。1)照明光源電壓高,功率大的燈泡,光強(qiáng)度高,色溫高,使膠片感光快,曝光時間要短。2)膠片的感光度感光度高的膠片對光敏感,曝光時間可短一些。膠片超過有效期,或保存條件不佳,膠片的感光度會降低,使用時要酌情增加曝光時間。3)物鏡的數(shù)值孔徑和目鏡的放大倍數(shù)物鏡的數(shù)值孔徑大,進(jìn)光量多,影象亮度大,曝光時間要短;目鏡放大倍數(shù)大,視野相對加大,影象的亮度相應(yīng)的減小,曝光時間要長。4)濾光片的顏色

濾光片減弱了光源的照明強(qiáng)度。在攝影時必須給予補(bǔ)償,以達(dá)正確的曝光。5)標(biāo)本的差異標(biāo)本的厚度與顏色的變化影響到光的透過和吸收。另外,在同一標(biāo)本中,各部分的光量程度也不同,因而也影響曝光時間。(2)確定曝光時間的方法1)經(jīng)驗法:除經(jīng)驗非常豐富的人外,一般不宜采用。2)試攝法:這是一種簡單、易行、準(zhǔn)確、可靠的確定曝光時間的方法。方法是用同一標(biāo)本在相同條件下,按幾何級數(shù)增加曝光時間拍得不同曝光時間的試攝底片,經(jīng)顯影和定影后,根據(jù)底片情況決定正確的曝光時間。3)測光表法:顯微攝影中可使用的測光表有四種類型:①手持光電測光法;②顯微攝影用的光電測光表;③顯微攝影裝置內(nèi)裝或外接式全自動曝光控制表;④裝在普通相機(jī)內(nèi)部的測光表。前兩種可以通用,但不夠精確,后兩種方便而準(zhǔn)確。顯微攝影曝光參考表上表以感光度為21定即ASA100的135膠卷為最佳5.取景對焦和拍攝(1)屈光度的調(diào)節(jié)在側(cè)視目鏡取景器內(nèi)有一玻璃屏,上刻雙十字線。調(diào)節(jié)時,左右轉(zhuǎn)動屈光度調(diào)節(jié)環(huán),使側(cè)視目鏡取景器鏡筒的前端伸縮,改變焦距,至清晰地分辨出雙十字線止(見右圖)。雙十字線校準(zhǔn)后,不能隨意變動屈光度調(diào)節(jié)環(huán),以防焦距改變。取景聚焦,只需使用顯微鏡調(diào)焦螺旋。

(2)取景在顯微攝影中要根據(jù)研究目的進(jìn)行取景,取景的涵義是確定拍攝范圍和物體影象在底片上大小(倍數(shù))。專用顯微攝影設(shè)備,在刻有雙十字線的側(cè)視目鏡取景器的玻璃屏上刻有數(shù)種規(guī)格的長方形取景框。底片所能攝下的范圍,并非視野所見的全部,僅是圓形視野中長方形部分(見右圖)。取景時,要使被攝的物體影象中心位于長方形取景框的對角線中心,并使兩者的長短相應(yīng)。需要90°調(diào)整時,轉(zhuǎn)動載物臺或攝影裝置,讓影象的長軸和取景框橫軸平行。影象的大小可采用調(diào)換物鏡和目鏡來控制。(3)聚焦與拍攝轉(zhuǎn)動顯微鏡的粗細(xì)調(diào)焦螺旋,改變物鏡和被檢物體的距離,使視野中物體影象的焦點聚于暗箱的焦平面上??v橫移動鏡臺的制片標(biāo)本,尋找拍攝的圖象;上下轉(zhuǎn)動調(diào)焦螺旋,辯清標(biāo)本的細(xì)微結(jié)構(gòu)。取景聚焦,需幾經(jīng)反復(fù)。底片影象的清晰度決定于拍攝前的最終一次準(zhǔn)焦。取景聚焦完畢,立即撳下快門按鈕,任何有關(guān)操作,都要在聚焦前完成。準(zhǔn)焦后的微小顫動,也會引起焦點的改變,致使拍出的底片影象模糊不清。6.記錄由于顯微攝影是記錄科學(xué)研究結(jié)果的一種方法,因此在顯微攝影中,每拍一張或每拍一批都要詳細(xì)記錄已拍底片的拍攝條件和情況,如被攝標(biāo)本特點、儀器組合、照片條件、曝光時間、底片型號等,以作往后工作參考。(1)清潔對顯微鏡機(jī)械、電路、光學(xué)元件、相機(jī)以及自動曝光控制裝置清詰。不僅要嚴(yán)格要求儀器的潔凈,而且對桌、椅、地板也保持干凈,室內(nèi)盡量少灰塵。(2)接電源

將LEICADMLB型顯微鏡和LEICAMPS30/60型自動曝光控制器接上穩(wěn)壓器的輸出電源接線板插座210V~215V上。(3)打開開關(guān)

顯微鏡底座左邊露出半圓黑色轉(zhuǎn)板,將其向外轉(zhuǎn)到1~2V的點上,再打開鏡座左邊前沿的紅色開關(guān),鏡座上透射出的微弱的光亮,待燈絲預(yù)熱1~2分鐘后再調(diào)用。

(4)調(diào)雙目鏡同焦

先對左邊目鏡,旋動粗調(diào)焦螺旋,使載物臺的載玻片靠近10×物鏡,再用左眼看左邊目鏡,邊看邊下調(diào)載物臺,當(dāng)看到標(biāo)本組織的清晰像后,再微調(diào)到最清晰為止。然后調(diào)右邊目鏡,這時就不去調(diào)粗,細(xì)調(diào)焦螺旋,僅調(diào)右目鏡上的上下移動螺紋,使右目鏡焦距調(diào)到視野中標(biāo)本組織像最清晰為止。這時,左、右兩目鏡即能適應(yīng)您的雙眼的同焦。(5)調(diào)瞳距

將雙目鏡筒用雙手拿住,邊往里外伸縮,邊用雙眼觀察視野標(biāo)本,使兩個視野合并到一個圓視野為止。(6)調(diào)視場光闌

收縮視場光闌,將聚光鏡向上升到頂后,接近載物臺往下降,直至看到多邊形的視場光闌像為止,轉(zhuǎn)動調(diào)中螺絲將視場光闌調(diào)正中,然后將視場光闌像多邊形邊緣放大到視野圓的外切。(7)調(diào)孔徑光闌

取下目鏡,放入輔助望遠(yuǎn)鏡,旋動輔助望遠(yuǎn)鏡,以看清孔徑光闌像為止。調(diào)節(jié)對中螺絲,使孔徑光闌處在正中。再開大孔徑光闌到60%~80%。也可按刻度標(biāo)記計算,如利用物鏡10×,其數(shù)值孔徑(NA)為0.25,即0.25×80%=0.2,即將孔徑光闌調(diào)在刻度的0.2上。如是物鏡40×,NA為0.65,即0.65×80%=0.52,即調(diào)在刻度0.52上。(8)放入照相目鏡

選用配置好的照相目鏡(目鏡上有“PHOTO”)倍數(shù)為10×。(9)選用物鏡

可選用平消色差物鏡(NPLAN,PLAN)、熒石物鏡(半平揚(yáng)復(fù)消色差PLFLUOTAR)物鏡或平場復(fù)消色差物鏡(PLAPO),但以后者為最好。

(10)調(diào)雙直線用調(diào)標(biāo)本焦點照相的那只眼睛,邊觀察取景筒,邊調(diào)節(jié)取景筒上螺旋,直至“+”字雙線的雙線間分開得非常清晰為止。(11)取景以“24×36”的方框內(nèi)選取組織部位作為拍攝范圍。(12)裝入底片打開攝影裝置上相機(jī)后背,按順序插入膠卷,左手按著片頭送入收片軸,使膠片卷入收片軸,穩(wěn)妥后,關(guān)上后蓋,等待2~3秒種后,即聽到馬達(dá)轉(zhuǎn)動齒輪聲,它將膠卷片頭送入收片軸繞轉(zhuǎn)住,約拉過膠卷上24個齒孔(三張畫面長度),相機(jī)正面上的畫幅記數(shù)窗口即呈現(xiàn)出“01”數(shù)字。(13)放濾光鏡用黑白全色片拍一般H.E染色組織片用綠色濾光鏡(燈泡電壓一般用6~9V);日光型彩色片用DLF濾光鏡(燈泡電壓要調(diào)在10.5V以上);燈光型彩色片不用濾光片,而只將燈泡電壓調(diào)在10.5V以上。

(14)核對在曝光前要核對“+”字雙直線,取景范圍,對標(biāo)本焦點,電壓數(shù),ASA(膠卷感光度),CAL(曝光指數(shù)),AUTO(自動曝光模式),F(xiàn)IX(手控曝光模式),檢查無誤后再拍攝。LEICAMPS30/60型自動曝光控制器開機(jī)后的默認(rèn)方式是自身識別膠卷的感光度,CAL為1.00,曝光模式為AUTO。(15)曝光

按LEICAMPS30/60型自動曝光控制器的“EXPO”鍵,邊按鍵,邊觀察相機(jī)的供片軸是否響動,畫幅數(shù)字窗口是否顯示出遞增數(shù)字,如有響動和顯示遞增數(shù)字則表示自動曝光控制器運(yùn)轉(zhuǎn)正常,以后,繼續(xù)拍攝2~36張,即按第12步~16步常規(guī)進(jìn)行。如沒有響動或不遞增數(shù)字,即出故障。每拍攝一張應(yīng)記錄好標(biāo)本名稱、拍攝內(nèi)容和放大倍數(shù)等。

(16)倒片膠卷拍完后,相機(jī)會自動倒片,直至全卷倒完。(如一卷只拍了十幾張不拍,需要將拍過膠卷部分取出來,這時要按相機(jī)正面上的倒片黑按鈕進(jìn)行倒片,記錄當(dāng)時拍的張數(shù),以供下次接著拍剩余膠卷),當(dāng)轉(zhuǎn)到有片頭響聲后,才能打開相機(jī)后蓋,取出膠卷。攝完的膠卷要用黑紙或底片盒裝好,待沖洗。底片盒上要注明拍攝內(nèi)容、拍完日期四、洗印和放大1.顯影罐法

(一)底片沖洗顯影停影定影清洗晾干采用化學(xué)的方法(已感光的乳劑與顯影液起化學(xué)反應(yīng))使底片上的潛影成為可見影象(不穩(wěn)定)的過程。顯影前最好先向罐中倒入20℃左右的清水,浸洗1~2min,使底片的全部藥膜均勻浸濕后,倒出清水。1.顯影罐法

(一)底片沖洗顯影停影定影清洗晾干停顯液作用:一是制止顯影后底片乳劑膜中殘存的顯影液繼續(xù)發(fā)生作用,防止底片顯影過度產(chǎn)生斑痕或灰霧等現(xiàn)象;二是防止顯影液內(nèi)堿性物質(zhì)帶入定影液,并與定影液中的酸性物或礬類作用產(chǎn)生亞硫酸鋁的白色沉淀。常用停顯液為1.34%醋酸水溶液,搖動幾下,約半min倒出停顯液。1.顯影罐法

(一)底片沖洗顯影停影定影清洗晾干用定影劑溶解感光乳劑中未感光的鹵化銀,使不穩(wěn)定影象變?yōu)榉€(wěn)定影象的過程。加入等量定影液,約15~20min后,倒出定影液。1.顯影罐法

(一)底片沖洗顯影停影定影清洗晾干定影后的底片上還殘留許多硫代硫酸鈉或銀的絡(luò)合物。必須經(jīng)充分水洗,以避免底片發(fā)黃或變色。中速流水沖洗時,膠卷不少于20min。用于制作單色幻燈片的電影正片水洗干凈后即可轉(zhuǎn)入染色處理至少要30min以上。1.顯影罐法

(一)底片沖洗顯影停影定影清洗晾干科研底片或暫時不染色的幻燈片底片,水洗后可用片夾夾住膠卷兩端,其中一端懸起,拭干底片水珠,用夾子夾住涼干。置通風(fēng)陰涼而無塵處晾干。2.盆中顯影法取三只搪瓷盤或塑料盤,排成一排,依次加入20℃顯影液、停影液和定影液。要注意設(shè)法使溫度保持20℃左右,如有空調(diào)設(shè)備最理想。要求暗室內(nèi)全暗,除彩色片外,也可在暗紅或深暗綠色的安全燈下操作。取出底片使藥膜面向上,迅速而均勻地浸入顯影液中,然后不斷使盆中藥液移動,顯影時間根據(jù)底片情況而定。顯影結(jié)束后,洗相夾住底片邊緣,投入停顯液中約半min,再取出放入定影液中約15~20min后,這時可開燈,檢查底片上乳白色是否完全消除,再放15min,就可取出在流水中沖洗半小時以上。最后用夾子夾住底片涼干。(二)放大技術(shù)照片放大是利用透過底片的光線,通過放大鏡頭的集光作用,把底片的影象放射到放大機(jī)外面。這時放大機(jī)中心垂直的某一平面上,即形成與底片相同且倍數(shù)較大影象。若這個平面是放大紙,由于的感光作用,就能將這個影象記錄下來。放大機(jī)結(jié)構(gòu)見右圖。一般大光圈對焦。小光圈曝光。1.放大紙的選擇(1)放大操作首先要準(zhǔn)確鑒別底片的密度的反差能選配適當(dāng)?shù)姆糯蠹埡陀∠嗉?。然后根?jù)需要放大尺寸調(diào)整機(jī)身的位置。(2)放大時紙的選配也相當(dāng)重要。目前國產(chǎn)放大紙分為4號:1號(性能軟);2號(較軟或中性);3號(較硬);4號(硬)。一般是底片反差偏小時,選用偏硬的放大紙,就可得到適中的照片,如底片反差偏大時,則選用偏軟的放大紙,也可得到反差適中的照片。常用3號放大紙。(3)選好放大紙后剪小塊紙作幾次不同曝光時間和紙型的試放,從而確定正式的放大紙型和曝光時間。放大時,紙要稍大于放大尺寸。曝光計時最好用定時器。2.使用放大機(jī)的注意事項(1)底片和感光紙的平面必須同鏡頭相平行,底片的中心必須對著鏡頭的光軸。(2)底片要擺在放大機(jī)中央部位,并用黑紙將底片四周透光部位遮擋起來。(3)調(diào)焦時要開大鏡頭光圈,所用的成像白紙厚度應(yīng)與所用的放大紙厚度相等。對清楚焦點后將光圈收縮,使畫面中央和

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