參七消痞方對慢性萎縮性胃炎大鼠組織病理形態(tài)及血清gh、egf的影響

參七消痞方對慢性萎縮性胃炎大鼠組織病理形態(tài)及血清gh、egf的影響

慢性萎縮性胃炎（cag）通常在臨床上看到，發(fā)病率高。在我國,CAG發(fā)病率占受檢人群的13.8%,16～30歲人群的發(fā)病率約為9%,51～65歲人群的發(fā)病率高達(dá)53%,且CAG具有癌變性,其癌變率約為10%,所以將疾病控制在萎縮性胃炎或之前的階段、逆轉(zhuǎn)胃黏膜萎縮性病變,對預(yù)防胃癌的發(fā)生具有很高的學(xué)術(shù)和社會價值。近年來,隨著中醫(yī)藥對CAG的基礎(chǔ)研究及臨床治療探索,取得了明顯的成果,中藥在治療CAG方面有很好的開發(fā)前景。本實驗采用綜合造模法,探討中國工程院院士董建華教授的臨床經(jīng)驗方參七消痞方(SQ)對CAG大鼠胃黏膜病變的改善作用,及對大鼠血清生長激素(GH)、表皮生長因子(EGF)水平的影響。1材料和方法1.1材料表面1.1.1實驗動物及原料SPF級Wistar大鼠150只,雌雄各半,體重160～180g,購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司,許可證號SCXK(京)2006-0009。1.1.2中諾兩感染膠囊試藥公司N-甲基-N’-硝基-N-亞硝基胍(MNNG)為日本TCI公司產(chǎn)品,購于北京化學(xué)試劑公司;鹽酸雷尼替丁膠囊,中諾藥業(yè)(石家莊)有限公司生產(chǎn),批號100902256;無水乙醇,購于北京化工廠,批號20100901;摩羅丹,邯鄲摩羅丹藥業(yè)股份有限公司,批號:110413;葉酸,天津飛鷹制藥有限公司,批號:1104007。1.2方法1.2.1濕度2.5%參考岳雙冰等的方法并加以改進(jìn)。大鼠按體重隨機(jī)分為空白對照組(雌雄各15只)和CAG模型組(雌雄各60只),飼養(yǎng)于通風(fēng)、光照規(guī)律的動物房里,室溫22～24℃,濕度40%～70%?？瞻讓φ战M每天蒸餾水10ml/kg灌胃,模型組每日飲用120μg/mlMNNG溶液,每日灌胃雷尼替丁溶液0.03g/kg,每周禁食1次,每次16h,禁食第2天灌胃50%乙醇1ml/只,當(dāng)天不再灌胃雷尼替丁溶液,總共造模14周。MNNG用去離子水配成1g/L的儲備液,于4℃冰箱避光保存,用前以自來水稀釋為120μg/ml濃度的溶液,裝入用黑膠布包裹的避光飲水瓶內(nèi)供模型組大鼠每天自由飲用,每天更換。1.2.2sq模型生藥灌胃第15周開始模型組剩余大鼠按體重隨機(jī)分為模型組、摩羅丹組、葉酸組、SQ組。摩羅丹為中藥對照組,葉酸為西藥對照組。正常對照組和模型組每日灌胃蒸餾水,SQ組大鼠灌胃SQ水煎(黨參、三七、丹參、半枝蓮、烏藥、百合、白花蛇舌草、香櫞皮、莪術(shù))9g生藥/kg,其他各組給予相應(yīng)的藥物灌胃,灌胃體積為10ml/kg,給藥8周。實驗期間每周觀察大鼠的體重。1.2.3gh、egf檢測第22周,大鼠禁食16h,不禁水,10%水合氯醛麻醉,打開腹腔,腹主動脈取血,分離血清,-80℃保存,放免法檢測GH、EGF;取胃,沿胃大彎剪開,除去胃容物,0.9%氯化鈉沖洗干凈,展開照相,大體觀察;胃竇部橫向條狀取材,用10%甲醛固定,蘇木精-伊紅染色作病理檢查。1.3統(tǒng)計處理方法計量資料以xˉ±sxˉ±s表示,采用單因素方差分析,數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析。2結(jié)果2.1各組大鼠的體重變化造模期間,與空白對照組相比,模型組大鼠毛發(fā)松散,無光澤,進(jìn)食、飲水量均減少,體重減輕。從第3周開始模型組大鼠與空白對照組相比,體重明顯減輕(P<0.05),隨著造模周數(shù)的增加,差異越來越顯著,見表1。與空白對照組比較,1)P<0.05,2)P<0.01。2.2胃黏膜白、形態(tài)變異與空白對照組相比,模型組大鼠胃內(nèi)容物惡臭,胃黏膜蒼白,胃壁較薄,胃黏膜皺襞走向紊亂,部分區(qū)域皺襞變淺或消失,部分見出血點。SQ組對胃黏膜有明顯改善作用,胃壁較厚,彈性較好,胃黏膜皺襞較多。2.3組織病理結(jié)果蘇木精-伊紅染色切片鏡下觀察:空白對照組大鼠黏膜結(jié)構(gòu)正常,腺體排列緊密、整齊;模型組大鼠胃黏膜不同程度的萎縮,黏膜層變薄,固有層腺體減少,排列稀疏不規(guī)則,部分腺體擴(kuò)張,有腸上皮化生,少數(shù)見異型增生,細(xì)胞核著色深染,有炎性細(xì)胞浸潤,黏膜肌層增厚。SQ組與模型組相比,病理結(jié)果均有不同程度的改善,黏膜腺體數(shù)量多,排列較整齊,固有層單個核細(xì)胞數(shù)量少。SQ提高大鼠胃竇區(qū)褶皺處的胃黏膜厚度(L1)/黏膜肌層厚度(L2)(P<0.01),結(jié)果見表2。2.4各組小鼠體內(nèi)egf活性的比較GH的主要生理功能是促進(jìn)神經(jīng)組織以外的所有其他組織生長。SQ組與模型相比,GH水平有增高趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。EGF是一種多功能的生長因子,在體內(nèi)體外都對多種組織細(xì)胞有強(qiáng)烈的促分裂作用,SQ組與模型組比較顯著升高(P<0.01)。結(jié)果見表3。與空白組比較,2)P<0.01;與模型組比較,3)P<0.05,4)P<0.01。3模型大鼠cag模型的臨床研究中醫(yī)治療CAG主要以個人經(jīng)驗為主,臨床辨證證候分型多種多樣,主要有肝氣郁滯、脾虛失運(yùn)、胃氣壅滯,或為胃陰不足、脾胃虛寒、瘀血阻絡(luò)、濕熱內(nèi)蘊(yùn)等。董建華教授認(rèn)為胃為水谷之海,主要功能是“傳化物而不藏”,以通為用,以降為順。胃氣得降,則“五臟安定,血脈和利,精神乃居”。初病多在氣,病癥以脹為主;久病多傷血絡(luò),病癥以痛為主。其臨床經(jīng)驗方SQ具有益氣養(yǎng)陰,活血消癥、清熱解毒功能,臨床用于CAG。本實驗建立了MNNG復(fù)合多因素致大鼠CAG模型,主要病理病變出現(xiàn)在胃竇區(qū)褶皺處,大鼠胃黏膜萎縮,固有層腺體減少,排列不規(guī)則,間隙較大,有腸上皮化生和異型增生,動物成模率高,成模時間較短,適合用于實驗研究。CAG臨床診斷以黏膜固有腺體萎縮甚至消失,黏膜肌層常見增厚為其主要病理改變,有文獻(xiàn)報道采用L1/L2值作為評價指標(biāo)。本實驗觀察了大鼠胃竇區(qū)褶皺處的L1/L2,觀測位置固定,病理改變明顯,測量數(shù)值穩(wěn)定可靠,結(jié)果客觀。實驗結(jié)果顯示大鼠14周制成CAG模型,停止造模8周,模型組大鼠胃萎縮病變無明顯恢復(fù);停止造模給藥8周,SQ能提高大鼠胃竇區(qū)褶皺處的L1/L2,顯示有良好的治療胃萎縮性胃炎作用。本實驗選擇臨床常用的中藥摩羅丹和西藥葉酸作為陽性藥對照。摩羅丹是國家中藥保護(hù)品種,臨床明確定位于CAG,具有修復(fù)胃黏膜,雙向調(diào)節(jié)胃腸道運(yùn)動的作用,增強(qiáng)免疫功能等。葉酸是一種水溶性B族維生素,對細(xì)胞的分裂生長及核酸、氨基酸、蛋白質(zhì)的合成起著重要的作用,可用于輔助治療CAG。實驗結(jié)果可見中藥摩羅丹和西藥葉酸對CAG大鼠GH、EGF水平都有顯著的調(diào)節(jié)作用。SQ在一定程度上能通過