胃痛消痞方對功能性消化不良肝郁型大鼠胃內(nèi)殘留量及ml、no的影響

胃痛消痞方對功能性消化不良肝郁型大鼠胃內(nèi)殘留量及ml、no的影響

功能障礙（fd）的發(fā)生與許多因素有關(guān)，具體的病因和發(fā)生機(jī)制尚不清楚。西醫(yī)的治療以緩解癥狀為主，療效有限，治愈率高。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為本病病位在胃,涉及肝脾,治療多通過辨證論治,標(biāo)本兼治,治療效果較佳。本實驗通過觀察胃痛消痞方對肝郁型FD大鼠胃內(nèi)殘留量及MTL、NO含量的影響,探討該方劑的療效及作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。1實驗材料1.1實驗動物中心健康Wister大鼠60只,180～220g,雌雄各半,購自中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院實驗動物中心[使用許可證號SYXK(遼)2003-0019]。1.2半固體糊的配制胃痛消痞方:柴胡、白芍、枳實、砂仁、延胡索、焦山楂、炒麥芽、炒雞內(nèi)金、黨參、炒白術(shù)、炙甘草,購自遼寧中醫(yī)藥大學(xué)眾意藥房。以上11味,砂仁后下,其余先煎,共煎兩次,過濾去藥渣,濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于生藥1g,臨用時再配制成相應(yīng)濃度。西藥嗎叮啉(西安楊森制藥有限公司生產(chǎn),批號080903368),以蒸餾水配成0.3mg/mL的混懸液備用。營養(yǎng)性半固體糊:取5g羥甲基纖維素溶于25mL蒸餾水中,然后分別加入奶粉8g,糖4g,淀粉4g,2mL碳素墨水,攪拌均勻,配成半固體糊。試劑與儀器:NO試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))、MOT試劑盒(解放軍放免研究所生產(chǎn)),自動放免儀(中國科大中佳公司)等。2實驗方法2.1實驗組將健康Wister大鼠60只,隨機(jī)分為空白組、模型組、嗎叮啉組、胃痛消痞方高、中、低劑量組,每組10只大鼠。2.2大鼠尾遠(yuǎn)端多次刺激除空白組,其余各組采用夾尾激怒法制作肝郁型FD大鼠模型。每日(8∶00,11∶00,14∶00,17∶00)用鼠夾夾大鼠尾巴遠(yuǎn)端1/3處,連續(xù)不斷地刺激30min(如皮毛有破損用典伏涂擦),連續(xù)刺激7天。并采用差值法記錄飲水量與進(jìn)食量。2.3給藥劑量及給藥量造模后灌胃給藥,空白組、造模組予生理鹽水2mL灌胃,中藥給藥劑量以成人與大鼠用藥劑量的體重比計算,按每天成人用藥等效劑量的4倍、2倍、1倍給藥,即高、中、低劑量組分別按50g·kg-1·d-1,25g·kg-1·d-1,12.5g·kg-1·d-1給藥,嗎叮啉組予嗎叮啉溶液3mg·kg-1·d-1,各組每天灌胃兩次,連續(xù)14天。2.4測試指標(biāo)和測試2.4.1建模小鼠的一般表現(xiàn)進(jìn)食量、飲水量、活動等。2.4.2半固體糊胃殘留法實驗后禁食12h,每組大鼠均灌服混有墨汁的營養(yǎng)性半固體糊0.5mL/只,30min后處死,取胃,稱濕重后減去胃本重,為殘留量。2.4.3血液總樣本血清NO含量的測定給藥結(jié)束后,予10%水合氯醛,按0.3mL/100g麻醉,打開腹腔,腹主動脈采血,按試劑盒說明保存血液,-70℃冰箱保存。按說明以放射免疫法測定MTL及NO含量。2.5pss11.5統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)xˉ±sxˉ±s表示,用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,各組比較采用t檢驗及F檢驗,P<0.05表示有顯著差異。結(jié)果與分析3結(jié)果3.1保持暴狂狀態(tài)夾尾法激怒大鼠,引起相互廝打,前肢離地,豎立對峙,半小時內(nèi)保持暴怒狀態(tài)。刺激4天后大鼠進(jìn)食減少,第6天打斗減弱,第7天進(jìn)食量、飲水量明顯減少,毛發(fā)變暗、糾結(jié),失去光澤,并有脫毛現(xiàn)象。3.2與模型組相比，白鼠組和模型組的進(jìn)水量見表1。表1表明,與空白組比較,模型組大鼠飲水量及進(jìn)食量減少,有統(tǒng)計學(xué)意義。3.3中、中劑量組療效比較見表2。表2表明,胃痛消痞方組能明顯減少胃內(nèi)殘留量(P<0.05),高、中劑量組與嗎丁啉組作用相似(P>0.05),中劑量組療效優(yōu)于高、低劑量組(P<0.05),該作用在一定范圍內(nèi)隨劑量的增加而增加,但超過此范圍并不增加療效;模型組胃內(nèi)殘留量明顯多于空白組(P<0.05),說明造模成功。3.4對血清no的活性的影響見表3。表3表明,胃痛消痞方高、中劑量組能增加血漿MTL分泌,優(yōu)于低劑量組(P<0.05),低劑量組胃動素與模型組相比無明顯差異(P>0.05),中藥各劑量組均減少血清NO的分泌(P<0.05);中、高劑量組MTL及NO相比無明顯差異(P>0.05),高、中劑量組血漿MTL、血清NO含量與空白對照組無明顯差異(P>0.05)。4對fd發(fā)病的機(jī)制探討用夾尾法復(fù)制大鼠肝郁型功能性消化不良模型從祖國醫(yī)學(xué)角度來看屬于“怒傷肝,久則郁”,肝氣郁結(jié)不得疏泄,橫逆犯胃,胃失和降,導(dǎo)致疾病。李乾構(gòu)等根據(jù)臨床的三大主癥而命名,以上腹部痞滿為主癥屬于中醫(yī)“痞滿病”范疇,以胸骨或胃脘部疼痛為主癥命名為“胃脘痛”,以燒心反酸為主癥時,則歸于“嘈雜”范圍;此外,李鴻昌認(rèn)為FD屬于“郁證”范疇。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為肝失疏泄是肝郁型FD發(fā)病的基礎(chǔ),胃痛消痞方由柴胡、白芍、枳實、砂仁、延胡索、焦山楂、炒麥芽、炒雞內(nèi)金、黨參、炒白術(shù)、炙甘草等組成,功能疏肝理氣、和胃健脾,從而使肝疏泄條達(dá)、脾胃升降功能恢復(fù),符合辨證論治思想。從實驗研究結(jié)果看,模型組與空白組比較胃內(nèi)殘留量明顯增加,說明FD發(fā)病與胃腸運(yùn)動障礙密切相關(guān),而模型組NO含量增加,MLT含量減少,提示這可能是肝郁型FD發(fā)病的神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)基礎(chǔ),這與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為消化道運(yùn)動障礙是功能性消化不良的主要病理生理學(xué)基礎(chǔ),另外還可能與胃腸激素改變等結(jié)論一致。就NO和MTL左右而言,NO可調(diào)節(jié)食管下段括約肌、幽門括約肌、Oddi氏括約肌和肛門括約肌的肌肉緊張度,調(diào)節(jié)腸道的蠕動反射;有報道認(rèn)為,FD患者血清NO水平明顯高于正常對照組;而MTL可直接作用于M型受體促使平滑肌收縮,又可作用于N型受體、膽堿能5-HT3受體,調(diào)節(jié)胃腸移行性復(fù)合運(yùn)動Ⅲ項(MMCⅢ)收縮;Fujimiya等研究表明,胃腸激素是影響胃腸動力的重要因素,MLT含量改變必然引起FD患者的胃腸動力改變。Yogo等研究表明,促胃動素藥物能改善功能性消化不良,增加血漿MTL濃度。各研究結(jié)果并不一致。本研究中胃痛消痞方組能增加血漿MTL分泌,減少血清NO含量,其減少胃內(nèi)殘留量的作用機(jī)制可能與此相關(guān)。并且中藥低劑量組大