植物組織培養(yǎng)

課題1植物快速繁殖技術(shù)

組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條

植物組織培養(yǎng)過程示意圖植物組織培養(yǎng)實(shí)驗室離體的植物器官、組織、細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體植物組織培養(yǎng)的基本過程一、細(xì)胞的分化與全能性細(xì)胞分化：

個體發(fā)育中，細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。特定時空下基因的選擇性表達(dá)。形成各種組織器官。結(jié)果：原因：定義：

植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)理論――植物細(xì)胞的全能性定義：植物細(xì)胞具有該植物體全部遺傳的可能性，在一定條件下具有發(fā)育成完整植物體的潛在能力。原理：生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因，從理論上講，生物體的每一個活細(xì)胞都應(yīng)該具有全能性。差異：（1）受精卵的全能性最高；（2）受精卵分化后的細(xì)胞中，體細(xì)胞的全能性比生殖細(xì)胞的低。

細(xì)胞全能性高低與細(xì)胞分化程度有關(guān)，分化程度越高，細(xì)胞全能性越低，全能性表達(dá)越困難，克隆成功的可能性越小。植物細(xì)胞全能性高于動物細(xì)胞，而生殖細(xì)胞全能性高于體細(xì)胞，在所有細(xì)胞中受精卵的全能性最高。幼嫩的細(xì)胞全能性高于衰老的細(xì)胞。細(xì)胞分裂能力強(qiáng)的全能性高于細(xì)胞分裂能力弱的。

看一看：受精卵如何形成人體的思考：細(xì)胞分化出錯會怎樣呢？

植物細(xì)胞與動物細(xì)胞相同，也具有發(fā)育為完整個體的潛能，而且植物細(xì)胞的全能性要高于動物細(xì)胞

外植體：在植物組織培養(yǎng)過程中，用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段稱為外植體。脫分化：將分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。脫分化的結(jié)果是形成了愈傷組織。愈傷組織愈傷組織是通過細(xì)胞分裂形成的，其細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。愈傷組織培養(yǎng)

將外植體接種在人工培養(yǎng)基上，由于植物生長調(diào)節(jié)劑的存在，而其細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后通過再分化形成再生植株。它是最為常見的。

再分化：脫分化形成的愈傷組織，在適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基上繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)又可以重新分化成芽、根等器官，

進(jìn)而發(fā)育成一棵完整的植株，這一過程稱為再分化。

培養(yǎng)基請從課本中找出相關(guān)培養(yǎng)基的知識這里提到了兩種激素？激素的用量是怎樣的？經(jīng)常用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基我們把它叫做MS培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基是目前使用最普遍的培養(yǎng)基。其具有較高的無機(jī)鹽濃度，能夠保證組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長。由于配方中的離子濃度高，在配制、貯存和消毒等過程中，即使有些成分略有出入，也不會影響離子間的平衡。MS固體培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)愈傷組織，也可用于胚、莖段、莖尖及花藥的培養(yǎng)，其液體培養(yǎng)基用于細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時能獲得明顯的成功。MS培養(yǎng)基的無機(jī)養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適，足以滿足植物細(xì)胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。因此，一般情況下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分。和其它培養(yǎng)基的基本成分相比，MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高，這是它的顯著特點(diǎn)。

MS固體培養(yǎng)基成分及比例同微生物培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？

微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)，無機(jī)鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。閱讀課文，思考以下問題1.同微生物培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？2、你認(rèn)為組織培養(yǎng)過程中，成功的關(guān)鍵有哪些？這些步驟的適宜條件是什么？

組織的脫分化及愈傷組織的再分化。

植物組織培養(yǎng)過程中，影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素。離體的植物器官、組織、細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體植物組織培養(yǎng)的基本過程制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒

接種

培養(yǎng)栽培實(shí)驗操作

移栽沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上三、影響植物組織培養(yǎng)的因素：

不同植物的組織培養(yǎng)難度不同同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同

大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S

微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co

有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素：生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等1.外植體的選取2.培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基)

3.不同植物激素濃度，使用順序和使用量使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先生長素，后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長素細(xì)胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高生長素細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時促根分化，抑芽形成比值