碘量法測(cè)定蔬菜中維生素c含量

碘量法測(cè)定蔬菜中維生素c含量

維生素c被稱為維生素c，具有預(yù)防和治療傷口疾病的功能，也被稱為抗傷口酸。是含有6個(gè)碳原子的酸性多羥基化合物。分子中第2及第3位碳原子上的2個(gè)烯醇式羥基極易釋放出H+,具有很強(qiáng)的還原性。在氧化劑存在時(shí),抗壞血酸可脫氫形成脫氫抗壞血酸,反應(yīng)可逆,脫氫抗壞血酸具有和維生素C相同的生理活性。脫氫抗壞血酸繼續(xù)被氧化生成2,3-二酮古洛糖酸完全失去生理活性,反應(yīng)不可逆。維生素C具有多種生理功能,如能保持巰基酶的活性和谷胱甘肽的還原狀態(tài),起解毒等作用;可促進(jìn)膠原蛋白的形成,膠原蛋白可包圍癌細(xì)胞,從而表現(xiàn)出抗癌作用;促進(jìn)人體內(nèi)抗體的生成,增加免疫力;可將膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸,使高膽固醇血癥患者的膽固醇下降;維生素C在對(duì)抗消化性潰瘍、協(xié)助戒煙、降低血鉛水平、預(yù)防或減輕疾病及預(yù)防女性膽結(jié)石等方面也具有重要功效;在生理?xiàng)l件下,維生素C參與了機(jī)體內(nèi)正常代謝而產(chǎn)生的自由基的泯滅。維生素C也是畜禽日糧中不可缺少的重要的維生素之一,并且在生產(chǎn)實(shí)踐中也有應(yīng)用。維生素C易被光及空氣氧化,微量金屬離子(銅、鐵等)可加速其氧化,實(shí)驗(yàn)操作要迅速。維生素C在酸性溶液中比在堿性溶液中穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)在酸性條件下進(jìn)行。維生素C廣泛分布于動(dòng)物界和植物界,僅幾種脊椎動(dòng)物(人類和其他靈長(zhǎng)類、豚鼠、一些鳥(niǎo)類和某些魚(yú)類)不能合成,這些動(dòng)物體的肝臟中缺乏L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯氧化酶。所有綠色植物都能合成維生素C,新鮮水果和蔬菜中含量豐富,是重要的維生素C源。測(cè)定蔬菜中維生素C含量的常用方法有2,6-二氯酚靛酚法、碘量法、2,4-二硝基苯肼法、分光光度法、間接光度法、熒光分析法、紫外光度法、光電比濁法、高效液相色譜法等。這些方法各有特點(diǎn),依據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)材料和要求選擇不同的測(cè)定方法。1材料和方法1.1維生素c試驗(yàn)材料:邢臺(tái)市產(chǎn)的黃瓜(Cucumber);白蘿卜(Bailuobu);冬瓜(Fatmelon)和土豆(Solanumtuberosum)。試劑:1%草酸溶液;維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度為1mg/mL,即CVC=0.00568mol/L);1%淀粉溶液;0.01055762mol/L碘標(biāo)準(zhǔn)溶液(I2見(jiàn)光易分解或配置碘溶液時(shí)未能將其完全溶解都會(huì)使碘溶液的濃度發(fā)生變化,所以在每次滴定樣品之前,都應(yīng)先用標(biāo)準(zhǔn)維生素C溶液重新標(biāo)定碘溶液的濃度)。1.2主體材料的滴定碘量法。原理:維生素C是強(qiáng)還原性物質(zhì),其分子中的二烯醇基可被I2氧化成二酮基。利用其還原性,以I2做氧化劑,用淀粉作指示劑,采用I2作標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定。其滴定原理:當(dāng)維生素C被I2完全氧化后,則碘與淀粉指示劑作用,使溶液變藍(lán),當(dāng)?shù)味ǖ饺芤撼霈F(xiàn)藍(lán)色且15s內(nèi)不褪色為終點(diǎn)。2結(jié)果與分析2.1u3000i2溶液體積測(cè)定分別準(zhǔn)確吸取抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/mL)5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100mL,稀釋至100mL,各取10mL,加入1%草酸溶液20mL和1%淀粉溶液1mL,用已標(biāo)定的I2溶液進(jìn)行滴定,記錄所消耗的I2溶液的體積,滴定3次,取平均值,并扣去空白值(表1)。根據(jù)維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與所消耗的碘溶液的體積線性回歸(圖1)。線性回歸方程得y=1.0181x-0.0693,R2=0.9986(n=11),結(jié)果表明,用碘量法測(cè)定維生素C的含量在5~100mg的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,符合線性回歸方程。2.2抽濾單元的制備將新鮮的樣品洗凈、瀝干,準(zhǔn)確稱取可食用部分10g于研缽中,加入1%的草酸溶液10mL,充分研磨成糊狀,確保維生素C最大程度的溶于提取液中,然后轉(zhuǎn)入抽濾裝置中抽濾,用1%草酸溶液沖洗研缽并轉(zhuǎn)入抽濾裝置中。并將抽濾瓶用1%草酸沖洗。2次沖洗共用草酸40mL。每種樣品做3份濾液。有色樣品提取液的顏色影響滴定終點(diǎn)的觀察,可用活性炭或白陶土脫色。如果提取物泡沫較多,可加數(shù)滴丁醇。2.3維生素c含量取1份濾液,加入1%淀粉溶液1mL,用已標(biāo)定的碘溶液進(jìn)行滴定,記錄所消耗的碘溶液的體積V,并扣除空白值。每份樣品重復(fù)上述操作。根據(jù)下列公式計(jì)算維生素C的含量,100g樣品中維生素C的毫克數(shù)(R),見(jiàn)表2。式中,Mvc=176.13;V=消耗I2的體積;標(biāo)準(zhǔn)碘溶液濃度(C12)=0.01055762mol/L。由表2看出,4種蔬菜中白蘿卜中維生素C含量最豐富,冬瓜中維生素C含量較多,黃瓜中維生素C含量的最少。2.4維生素c回收率測(cè)定方法精確稱取10g已知含量的樣品3份,用研缽充分研碎成糊狀,加入1%草酸溶液10mL,然后轉(zhuǎn)入抽濾裝置中抽濾,用1%草酸沖洗研缽,轉(zhuǎn)入錐形瓶?jī)?nèi),抽濾瓶也用1%草酸沖洗。兩次沖洗共用草酸40mL。每種樣品重復(fù)上述過(guò)程3次,每種樣品得3份濾液。每份加入10mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)液,即含10mg維生素C,測(cè)定所消耗的已標(biāo)定的I2的體積,計(jì)算維生素C的回收率,見(jiàn)表3及表4。式中,A:加入純維生素C后測(cè)得的總量;B:樣品中所含維生素C的量;C:加入純維生素C的量。由表4可以看出,平均回收率為104.5%,說(shuō)明碘量法測(cè)得維生素C含量具有較高的準(zhǔn)確性。3維生素c含量碘量法對(duì)4種蔬菜維生素C含量進(jìn)行測(cè)定,4種蔬菜中,白蘿卜中維生素C含量最高,為22.50mg/100g,黃瓜中最低為10.60mg/100g。同時(shí)采用2,6-二氯酚靛酚法對(duì)4種蔬菜中維生素C含量進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果為:黃瓜10.04mg/100g,白蘿卜21.62mg/100g,冬瓜14.84mg/100g,土豆11.86mg/100g。兩種方法測(cè)定的結(jié)果接近。了解4種蔬菜維生素C含量,對(duì)日常膳食獲取維生素C提供理論依據(jù)。植物體內(nèi)的維生素C往