葛根素胃漂浮片處方優(yōu)化研究

葛根素胃漂浮片處方優(yōu)化研究

胃浮浮塊是指能迅速吸收和膨脹，形成凝膠，減少收縮，留在胃中，延長(zhǎng)藥物釋放時(shí)間，改善藥物吸收，提高生物利用水平的片劑。葛根素(puerarin,1)具有擴(kuò)張冠脈血管、改善心功能損害、降低血壓等藥理作用,臨床用于預(yù)防和治療多種心腦血管疾病。1溶解性和滲透性差,在腸上段的吸收較腸下段好,因此生物利用度低。本實(shí)驗(yàn)室前期研究中,針對(duì)其腸吸收滲透性差的問(wèn)題,篩選出對(duì)1腸吸收有顯著促進(jìn)作用的吸收促進(jìn)劑殼聚糖、冰片和白芷揮發(fā)油,通過(guò)配伍研究證實(shí)殼聚糖和白芷揮發(fā)油配伍具有協(xié)同作用,且白芷揮發(fā)油作為吸收促進(jìn)劑單用及配伍使用對(duì)腸黏膜無(wú)毒性。在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)了1胃漂浮片,提高了1的吸收滲透系數(shù)。通過(guò)考察起漂時(shí)間、漂浮狀態(tài)及1的體外釋放和機(jī)制等,篩選較優(yōu)處方。1藥品、試劑與對(duì)照品ZRS-8G型智能溶出試驗(yàn)儀(天津大學(xué)精密儀器廠);1200型高效液相色譜儀(Agilent公司);S1DP/30A型單沖壓片機(jī)(北京國(guó)藥龍立);YD-20型智能硬度儀(天津大學(xué)無(wú)線電廠)。1原藥(河南省宛西制藥股份有限公司,含量99.98%,批號(hào)20060101);1對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,含量99.99%,批號(hào)101765-200408);殼聚糖(中國(guó)海德貝爾海洋生物技術(shù)有限公司,脫乙酰度95%);羥丙甲纖維素(HPMCK15M,上?？?lè)康包衣技術(shù)有限公司);丙烯酸樹脂(EudragitL100-55,德固賽投資有限公司上海分公司);十六醇(廣東汕頭市西隴化工廠);白芷揮發(fā)油[吉水縣金海天然香料油科技有限公司,其中α-蒎烯含量為6.71%、甲基環(huán)癸烷(methylcyclododecane)7.4%、1-十四烷醇3.80%,批號(hào)20071011];聚乙烯吡烙烷酮(PVPK30)、交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮(PVPP)均購(gòu)自美國(guó)國(guó)際特品公司;水為重蒸水。2方法和結(jié)果2.11含量測(cè)定和方法研究2.1.1流動(dòng)相0.0mm磷酸檢測(cè)色譜柱EclipseXDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流動(dòng)相甲醇-0.05%磷酸(30∶70);檢測(cè)波長(zhǎng)250nm;柱溫30℃;流速1.0ml/min;進(jìn)樣量20μl。2.1.2對(duì)照品溶液的測(cè)定用甲醇-pH1.2鹽酸(30∶70)配制1濃度為0.024、0.049、0.98、1.96、4.91、9.82μg/ml的對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣測(cè)定。以峰面積(A)對(duì)濃度(c)線性回歸,得回歸方程為A=83c+1.326(r=0.9999),表明1濃度在0.024~9.82μg/ml范圍線性良好。2.1.3重復(fù)試驗(yàn)取4.91μg/ml的1對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次,測(cè)得1峰面積的RSD為0.59%,表明重復(fù)性良好。2.1.4加標(biāo)回收率試驗(yàn)精密稱取1適量及處方量輔料,用pH1.2鹽酸制成低、中、高濃度(15、37.5、75μg/ml)的1溶液,經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾,取續(xù)濾液用甲醇-pH1.2鹽酸(30∶70)稀釋10倍后進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算得低、中、高濃度的回收率為96.7%~104.3%。分別重復(fù)測(cè)定5次,RSD分別為1.05%、1.15%、0.98%,精密度符合要求。2.1.5srd測(cè)定取“2.1.4”項(xiàng)下稀釋10倍的濾液分別于37℃放置1、6、12h后取樣測(cè)定,RSD分別為1.34%、1.26%、1.32%。說(shuō)明1的穩(wěn)定性較好。2.2質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的確定1過(guò)100目篩,骨架材料、助漂劑等分別過(guò)80目篩。精密稱(量)取175mg、白芷揮發(fā)油75μl、殼聚糖60mg、發(fā)泡劑NaHCO320mg、HPMC100mg、十六醇40mg、黏合劑40mg和硬脂酸鎂4mg,按等量遞增法混勻,用乳糖調(diào)節(jié)片重至400mg。用直徑11mm的沖頭,采用粉末直接壓片工藝制備1胃漂浮片,壓力控制在5~6kg/cm2。以體外釋放度和體外漂浮性為指標(biāo)進(jìn)行處方篩選。2.3溫度和溫度采用中國(guó)藥典2005年版二部ⅩC第二法裝置,釋放介質(zhì)為pH1.2鹽酸900ml,轉(zhuǎn)速100r/min,溫度(37.0±0.5)℃。分別于1、2、3、4、5、6、8、10、11、12h取樣3ml(同時(shí)補(bǔ)充同溫等量介質(zhì)),經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾,過(guò)濾在30s內(nèi)完成,取續(xù)濾液用甲醇-pH1.2鹽酸(30∶70)稀釋10倍后進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算累積釋放率。2.4模擬胃腸動(dòng)導(dǎo)率測(cè)定將按不同處方制得的1胃漂浮片分別置37℃、pH1.2鹽酸900ml中,攪拌轉(zhuǎn)速100r/min,在模擬胃腸蠕動(dòng)條件下觀察其漂浮性能。結(jié)果表明,所制片劑均能在10min內(nèi)起漂,持漂時(shí)間與處方有關(guān)。2.5通過(guò)研究液體浮游生物的性能和外部釋放，澄清了泡沫形成的影響因素2.5.1pp的影響照“2.2”項(xiàng)下方法制備3批胃漂浮片,考察10%PVP或10%PVPP對(duì)藥物釋放(見(jiàn)圖1)和漂浮性能的影響。結(jié)果表明,4h內(nèi)PVP和PVPP對(duì)藥物釋放的影響不顯著,4h后含PVPP處方的藥物釋放速度比含PVP快。起漂時(shí)間分別為(2.4±0.1)和(2.2±0.1)min,持漂時(shí)間分別為(10.60±0.36)和(10.50±0.41)h。且混合時(shí)PVPP對(duì)白芷揮發(fā)油的吸附性優(yōu)于PVP,未出現(xiàn)“溢油”現(xiàn)象,粉末流動(dòng)性好,適合粉末直接壓片,故選擇10%PVPP。2.5.2助漂劑16醇用量的優(yōu)化固定PVPP用量為40mg,其它條件同“2.2”項(xiàng),制備3批片劑,考察十六醇用量對(duì)藥物釋放(見(jiàn)圖2)和漂浮性能的影響。助漂劑十六醇比重較小,具疏水性,能降低骨架的水化速度,調(diào)節(jié)藥物的釋放速度。十六醇用量為10%、15%和20%時(shí),3批片劑的起漂時(shí)間分別為(2.2±0.1)、(2.0±0.1)和(1.9±0.1)min,持漂時(shí)間分別為(10.50±0.36)、(10.60±0.33)和(10.80±0.42)h。其用量對(duì)藥物釋放和漂浮性能無(wú)顯著影響,故十六醇用量選用20%。2.5.3不同nahco3用量對(duì)胃漂浮片內(nèi)在穩(wěn)定性的影響固定十六醇用量80mg和PVPP用量40mg,其它條件同“2.2”項(xiàng),制備3批片劑,考察發(fā)泡劑NaHCO3用量為0、5%、7.5%對(duì)藥物釋放(見(jiàn)圖3)和漂浮性能的影響。由圖3可見(jiàn),NaHCO3用量較大時(shí),藥物釋放速度較快。NaHCO3對(duì)漂浮的貢獻(xiàn)是雙重性的,比例低時(shí),NaHCO3在胃酸性環(huán)境中產(chǎn)生的CO2氣體可被包裹在凝膠層中,有助于減小制劑密度,增加漂浮力;但比例大于一定的范圍,產(chǎn)生的氣體便從HPMC的水凝膠中逸出,造成浮力的降低,同時(shí)產(chǎn)氣膨脹作用可能使片劑崩解,無(wú)法達(dá)到漂浮目的,因此必須控制適宜的NaHCO3用量。隨NaHCO3用量的增加,胃漂浮片的起漂時(shí)間縮短,持漂時(shí)間有所延長(zhǎng),NaHCO3用量分別為0、5%、7.5%時(shí),3批片劑的起漂時(shí)間分別為(3.6±0.2)、(1.9±0.1)和(1.7±0.1)min,持漂時(shí)間分別為(9.20±0.43)、(10.50±0.36)、(11.00±0.38)h。NaHCO3用量為7.5%時(shí),釋出的CO2量較多,片劑崩解較快,故NaHCO3用量選為5%。2.6混合設(shè)計(jì)，優(yōu)潤(rùn)胃浮片的制備2.6.1l、16醇、nahco330和作為乳化劑的制備方法根據(jù)單因素考察結(jié)果,固定片重為400mg,其中含175mg、白芷揮發(fā)油75μl、十六醇80mg、NaHCO320mg、PVPP40mg、硬脂酸鎂4mg和乳糖17mg。綜合考察殼聚糖、HPMC、EudragitL100-55(3種輔料總量為164mg)用量配比對(duì)片劑漂浮性及釋放的影響,設(shè)計(jì)因素和水平如表1。2.6.2漂浮性能測(cè)定經(jīng)DesignExpert軟件(Version7.1.3,Stat-Ease公司)設(shè)計(jì),得到7組混合實(shí)驗(yàn)(見(jiàn)表2),根據(jù)所給出的試驗(yàn)方案壓片,按“2.3”項(xiàng)下方法操作,于1、2、3、4、5、6、8、10、11、12h取樣檢測(cè),計(jì)算各處方的累積釋放率(如圖4),并用零級(jí)方程擬合。用綜合評(píng)分(Y1)和擬合方程的相關(guān)系數(shù)(Y2)為指標(biāo),考察結(jié)果見(jiàn)表2。體外漂浮性能測(cè)定表明,1~7號(hào)實(shí)驗(yàn)制得的片劑均能在3min內(nèi)起漂,片劑表面形成了凝膠屏障層,以維持片劑形狀。隨漂浮時(shí)間延長(zhǎng),片劑體積增加,但仍保持片形完整,持漂時(shí)間都超過(guò)10h,滿足要求。2.6.3項(xiàng)式方程擬合方程效果檢驗(yàn)分別以Y1和Y2對(duì)A、B、C進(jìn)行多元線性回歸和二項(xiàng)式擬合,通過(guò)復(fù)相關(guān)系數(shù)判斷模型的擬合程度。多元線性回歸方程:Y1=0.44A+0.098B+0.29C(R2=0.4452,P=0.3078);Y2=0.61A+1.17B+1.35C(R2=0.8333,P=0.0278)。二項(xiàng)式方程:Y1=0.53A+0.14B+0.45C-1.16A×C-0.75B×C(R2=0.9764,P=0.0466);Y2=0.54A+1.22B-0.16C+4.03A×C(R2=0.9686,P=0.0093)。從擬合方程的復(fù)相關(guān)系數(shù)R2值可見(jiàn),3個(gè)指標(biāo)采用二項(xiàng)式方程擬合效果較好。3個(gè)因素對(duì)Y1和Y2均有較顯著影響。用DesignExpert軟件優(yōu)化得到與設(shè)定值接近的2個(gè)組合(見(jiàn)表3),可見(jiàn)較優(yōu)組合為:殼聚糖為0.5,HPMC為0.36,EudragitL100-55為0.14,即殼聚糖82mg,HPMC59mg,EudragitL100-5523mg。2.6.4起漂時(shí)間和持漂時(shí)間照優(yōu)化處方制備1胃漂浮片3批,測(cè)定體外釋放度(見(jiàn)圖5)和漂浮性能。結(jié)果表明,3批片劑的起漂時(shí)間為(2±0.1)min,持漂時(shí)間為(10.5±0.35)h,Y1=0.1699±0.0049,Y2=0.9832±0.0032,與預(yù)測(cè)值相近。由Y2值(零級(jí)方程擬合的相關(guān)系數(shù))可見(jiàn),制品的體外釋放符合零級(jí)模型。3兩種吸收促進(jìn)劑的配比對(duì)患者殘留時(shí)間的影響1具有酚