蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能

蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能第一章StructureandFunctionofProtein一、什么是蛋白質(zhì)?蛋白質(zhì)(protein)是由許多氨基酸(aminoacids)通過(guò)肽鍵(peptidebond)相連形成的高分子含氮化合物。二、蛋白質(zhì)的生物學(xué)重要性1.蛋白質(zhì)是生物體重要組成成分分布廣：所有器官、組織都含有蛋白質(zhì)；細(xì)胞的各個(gè)局部都含有蛋白質(zhì)。含量高：蛋白質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)最豐富的有機(jī)分子，占人體干重的45％，某些組織含量更高，例如脾、肺及橫紋肌等高達(dá)80％。1〕作為生物催化劑〔酶〕2〕代謝調(diào)節(jié)作用3〕免疫保護(hù)作用4〕物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和存儲(chǔ)5〕運(yùn)動(dòng)與支持作用6〕參與細(xì)胞間信息傳遞2.蛋白質(zhì)具有重要的生物學(xué)功能3.氧化供能蛋白質(zhì)的分子組成

TheMolecularComponentofProtein第一節(jié)一、組成蛋白質(zhì)的元素及特點(diǎn)

有些蛋白質(zhì)還含有少量的P、Fe、Cu、Mn、Zn、Se、I等。

C50~55%H6~7%O19~24%N13~19%S0~4%主要元素組成

各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為16％。

由于體內(nèi)的含氮物質(zhì)以蛋白質(zhì)為主，因此，只要測(cè)定生物樣品中的含氮量，就可以根據(jù)以下公式推算出蛋白質(zhì)的大致含量：100克樣品中蛋白質(zhì)的含量(g%)=每克樣品含氮克數(shù)×6.25×1001/16%

蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn)*二、蛋白質(zhì)的根本組成單位—氨基酸

存在自然界中的氨基酸有300余種，但組成人體蛋白質(zhì)的根本氨基酸僅有20種。氨基酸的通式:L-α-氨基酸氨基均連接在緊靠羧基的-碳原子上故稱-氨基酸且均屬L-氨基酸〔甘氨酸除外〕。H甘氨酸CH3丙氨酸L--氨基酸的通式R

側(cè)鏈氨基酸的旋光異構(gòu)根本氨基酸中，除脯氨酸和甘氨酸外，其余均屬于L-α-氨基酸。例外：Pro—亞氨基酸Gly

—

沒有手性非極性疏水性氨基酸(7種)極性中性氨基酸(8種)酸性氨基酸〔Asp、Glu〕堿性氨基酸〔Arg、His、Lys〕三、氨基酸的分類*〔按R基團(tuán)在中性溶液中的解離性質(zhì)分〕甘氨酸

glycine

Gly

G

5.97丙氨酸

alanineAlaA

6.00纈氨酸

valineValV

5.96亮氨酸

leucineLeuL

5.98

異亮氨酸

isoleucineIleI

6.02

苯丙氨酸

phenylalaninePheF

5.48脯氨酸

prolineProP

6.30非極性疏水性氨基酸色氨酸

tryptophanTrpW

5.89絲氨酸

serineSerS

5.68酪氨酸

tyrosineTyrY

5.66

半胱氨酸

cysteineCysC

5.07

蛋氨酸

methionine

MetM

5.74天冬酰胺

asparagineAsnN

5.41

谷氨酰胺

glutamineGlnQ

5.65

蘇氨酸

threonineThrT5.602.極性中性氨基酸天冬氨酸

asparticacidAspD

2.97谷氨酸

glutamicacidGluE

3.22賴氨酸

lysineLysK

9.74精氨酸

arginineArgR

10.76組氨酸

histidineHisH

7.593.酸性氨基酸4.堿性氨基酸——側(cè)鏈基團(tuán)在中性溶液中解離后帶負(fù)電荷。3.酸性氨基酸Glu，Asp天冬氨酸

Asp

谷氨酸

Glu

4.堿性氨基酸His，Arg，Lys——側(cè)鏈基團(tuán)在中性溶液中解離后帶正電荷。組氨酸His賴氨酸Lys

精氨酸Arg芳香族氨基酸：苯丙、色、酪脂肪族氨基酸：丙、纈、亮、異亮含硫氨基酸：蛋、半胱含羥基氨基酸：絲、蘇、酪氨基酸的其它分類*另外：1、蛋白質(zhì)中的很多氨基酸是經(jīng)過(guò)加工修飾的——修飾氨基酸如：脯氨酸羥基化成羥脯氨酸

賴氨酸羥基化成羥賴氨酸2、半胱氨酸Cys常以胱氨酸的形式存在

半胱氨酸

+胱氨酸二硫鍵-HH四、氨基酸的理化性質(zhì)1.兩性解離及等電點(diǎn)等電點(diǎn)(isoelectricpoint,pI)在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等，成為兼性離子，呈電中性。此時(shí)溶液的pH值稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。pH=pI+OH-pH>pI+H++OH-+H+pH<pI氨基酸的兼性離子

陽(yáng)離子陰離子思考:酸性氨基酸的等電點(diǎn)偏酸還是偏堿?2.紫外吸收性質(zhì)

色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm

附近。大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這兩種氨基酸殘基，所以測(cè)定蛋白質(zhì)溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白質(zhì)含量的快速簡(jiǎn)便的方法。3.茚三酮反響氨基酸與茚三酮水合物共熱，可生成藍(lán)紫色化合物，其最大吸收峰在570nm處。由于此吸收峰值與氨基酸的含量存在正比關(guān)系，因此可作為氨基酸定量分析方法。五、氨基酸之間的連接方式1〕連接方式：肽鍵肽鍵(peptidebond)：是由一個(gè)氨基酸的-羧基與另一個(gè)氨基酸的-氨基脫水縮合而形成的化學(xué)鍵，本質(zhì)為酰胺鍵。氨基酸殘基(residue):肽鏈中的氨基酸分子因?yàn)槊撍s合而基團(tuán)不全，被稱為氨基酸殘基。+-HOH甘氨酰甘氨酸肽鍵氨基酸殘基氨基酸殘基氨基末端羧基末端12*兩分子氨基酸縮合形成二肽，三分子氨基酸縮合那么形成三肽……*由十個(gè)以內(nèi)氨基酸相連而成的肽稱為寡肽(oligopeptide)，由更多的氨基酸相連形成的肽稱多肽(polypeptide)。*多肽鏈(polypeptidechain)是指許多氨基酸之間以肽鍵連接而成的一種結(jié)構(gòu)。N末端：多肽鏈中有自由氨基的一端C末端：多肽鏈中有自由羧基的一端２〕多肽鏈有方向性：Ala-Tyr-Asp-GlyNCN端C端N末端C末端牛核糖核酸酶六、重要的生物活性肽1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)GSH過(guò)氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSGGSH復(fù)原酶NADPH+H+NADP+GSH有抗氧化劑的作用，可復(fù)原細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)氧化氫

體內(nèi)許多激素屬寡肽或多肽

神經(jīng)肽(neuropeptide)2.多肽類激素及神經(jīng)肽七、蛋白質(zhì)的分類

*根據(jù)蛋白質(zhì)組成分

單純蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì)=蛋白質(zhì)部分+非蛋白質(zhì)部分

*根據(jù)蛋白質(zhì)形狀分

纖維狀蛋白質(zhì):多為結(jié)構(gòu)蛋白，難溶于水球狀蛋白質(zhì):多數(shù)具有生理活性，根本可溶*根據(jù)蛋白質(zhì)功能分

蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

TheMolecularStructureofProtein

第二節(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)包括〔人為劃分〕

一級(jí)結(jié)構(gòu)(primarystructure)二級(jí)結(jié)構(gòu)(secondarystructure)三級(jí)結(jié)構(gòu)(tertiarystructure)四級(jí)結(jié)構(gòu)(quaternarystructure)高級(jí)結(jié)構(gòu)定義：蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)指多肽鏈中氨基酸的排列順序。一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)主要的維系鍵：肽鍵，有些蛋白質(zhì)還包括二硫鍵。

第一個(gè)被確定一級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)：牛胰島素一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的根底,但不是唯一的決定因素。多肽鏈中氨基酸序列分析分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成測(cè)定多肽鏈的氨基末端與羧基末端為何種氨基酸殘基把肽鏈水解成片段，分別進(jìn)行分析測(cè)定各肽段的氨基酸排列順序，一般采用Edman降解法一般需用數(shù)種水解法，并分析出各肽段中的氨基酸順序，然后經(jīng)過(guò)組合排列比照，最終得出完整肽鏈中氨基酸順序的結(jié)果。二、蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu)，即該段肽鏈主鏈骨架原子的相對(duì)空間位置，并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象

。一、定義:

二級(jí)結(jié)構(gòu)的根本單位：肽鍵平面或肽單元肽鍵有局部雙鍵性質(zhì)肽鍵由于共振而具有局部雙鍵性質(zhì)，因此，肽鍵比一般C-N鍵短，且不能自由旋轉(zhuǎn)肽鍵原子及相鄰的a碳原子組成肽平面相鄰的a碳原子呈反式構(gòu)型肽鍵平面——由于肽鍵具有局部雙鍵的性質(zhì)，使參與肽鍵構(gòu)成的六個(gè)原子被束縛在同一平面上，這一平面稱為肽鍵平面或肽單元。肽單元(肽鍵平面)由于α-碳原子與其他原子之間均形成單鍵，因此兩相鄰的肽鍵平面可以作相對(duì)旋轉(zhuǎn)(二〕蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要形式

-螺旋(

-helix)

-折疊(

-pleatedsheet)

-轉(zhuǎn)角(

-turn)

無(wú)規(guī)卷曲(randomcoil)

1.α-螺旋：α-螺旋是多肽鏈的主鏈原子沿一中心軸盤繞所形成的有規(guī)律的螺旋構(gòu)象結(jié)構(gòu)要點(diǎn)：〔1〕主鏈通過(guò)α－碳原子旋轉(zhuǎn)形成穩(wěn)固的右手螺旋?！?〕每3.6個(gè)氨基酸殘基上升一圈，間距0.15nm，螺距0.54nm?！?〕相鄰兩圈螺旋之間借氫鍵穩(wěn)定?！策@是穩(wěn)定α－螺旋的主要鍵〕〔4〕肽鏈中氨基酸側(cè)鏈R，伸展在螺旋外側(cè)?！财湫螤?、大小及電荷影響α－螺旋的形成〕2.

-折疊β-折疊是由假設(shè)干肽段或肽鏈排列起來(lái)所形成的扇面狀片層構(gòu)象

結(jié)構(gòu)特征：

(1)肽鏈平面之間折疊成鋸齒狀，相鄰肽鍵平面間呈110。夾角

(2)氨基酸殘基的R側(cè)鏈伸出在鋸齒的上方或下方。

(3)依靠?jī)蓷l肽鏈或一條肽鏈內(nèi)的兩段肽鏈間的C＝O與N-H形成氫鍵，使構(gòu)象穩(wěn)定。

(4)兩段肽鏈可以是逆向平行，也可以是順向平行。

β-折疊包括平行式和反平行式兩種類型3.

-轉(zhuǎn)角是多肽鏈180°回折局部所形成的一種二級(jí)結(jié)構(gòu)無(wú)規(guī)卷曲是用來(lái)闡述沒有確定規(guī)律性的那局部肽鏈結(jié)構(gòu)。4.無(wú)規(guī)卷曲〔三〕模體(motif)在許多蛋白質(zhì)分子中，可發(fā)現(xiàn)二個(gè)或三個(gè)具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段，在空間上相互接近，形成一個(gè)特殊的空間構(gòu)象，被稱為模體。常見形式有：螺旋繞螺旋型鋅指型亮氨酸拉鏈型螺旋-環(huán)-螺旋型

螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋

鋅指結(jié)構(gòu)

亮氨酸拉鏈

螺旋-環(huán)-螺旋

〔五〕影響二級(jí)結(jié)構(gòu)形成的因素：1〕側(cè)鏈基團(tuán)的大、小2〕側(cè)鏈基團(tuán)的帶電性質(zhì)3〕脯氨酸是α-螺旋的絕對(duì)破壞者〔四〕主要的維系鍵：氫鍵三、蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)疏水鍵、離子鍵、氫鍵和VanderWaals力等。（二）維系鍵：整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置?！惨弧扯x次級(jí)鍵

肌紅蛋白(Mb)

N端C端

為單肽蛋白質(zhì)，含有153個(gè)氨基酸，有8個(gè)螺旋區(qū)對(duì)于單一多肽鏈的蛋白質(zhì)，三級(jí)結(jié)構(gòu)是它的最高級(jí)結(jié)構(gòu)，只有具有完整的三級(jí)結(jié)構(gòu)，才具有全部的生物學(xué)功能〔三〕結(jié)構(gòu)域大分子蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)?？煞指畛梢粋€(gè)或數(shù)個(gè)球狀或纖維狀的區(qū)域，折疊得較為緊密，各行使其功能。三級(jí)結(jié)構(gòu)中獨(dú)立執(zhí)行某種功能的局部區(qū)域，稱為結(jié)構(gòu)域(domain)。四、蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)定義：具有二條或二條以上獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈組成的蛋白質(zhì)，其多肽鏈間通過(guò)次級(jí)鍵相互組合而形成的空間結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)(quarternarystructure)。

有些蛋白質(zhì)分子含有二條或多條多肽鏈，每一條具有完整三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈，稱為蛋白質(zhì)的亞基(subunit)。

。亞基之間的結(jié)合力主要是疏水作用，其次是氫鍵和離子鍵。血紅蛋白的四級(jí)結(jié)構(gòu)

胰島素受體蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系TheRelationofStructureandFunctionofProtein第三節(jié)〔一〕一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象的根底一級(jí)結(jié)構(gòu)相似的蛋白質(zhì)，其根本構(gòu)象及功能也相似。如不同哺乳類動(dòng)物的胰島素分子，一級(jí)結(jié)構(gòu)中僅個(gè)別氨基酸有差異，形成的空間結(jié)構(gòu)與功能均相似在蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)中，參與功能活性部位的殘基或處于特定構(gòu)象關(guān)鍵部位的殘基，即使在整個(gè)分子中發(fā)生一個(gè)殘基的異常，該蛋白質(zhì)的功能也會(huì)受到明顯的影響。一、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

例：鐮刀形紅細(xì)胞貧血N-val·his·leu·thr·pro·glu·glu·····C(146)N-val·his·leu·thr·pro·val

·glu·····C(146)這種由蛋白質(zhì)分子發(fā)生變異所導(dǎo)致的疾病，稱為“分子病〞。重要蛋白質(zhì)氨基酸序列的改變可引起疾病蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象是其功能活性的根底，構(gòu)象發(fā)生變化，其功能活性也隨之改變。二、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

肌紅蛋白Mb血紅蛋白Hb蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病蛋白質(zhì)構(gòu)象疾?。杭僭O(shè)蛋白質(zhì)的折疊發(fā)生錯(cuò)誤，盡管其一級(jí)結(jié)構(gòu)不變，但蛋白質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生改變，仍可影響其功能，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致疾病發(fā)生。蛋白質(zhì)構(gòu)象改變導(dǎo)致疾病的機(jī)理：有些蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉樣纖維沉淀，產(chǎn)生毒性而致病，表現(xiàn)為蛋白質(zhì)淀粉樣纖維沉淀的病理改變。這類疾病包括：人紋狀體脊髓變性病、老年癡呆癥、亨停頓舞蹈病、瘋牛病等。舉例：瘋牛病中的蛋白質(zhì)構(gòu)象改變瘋牛病是由朊病毒蛋白(prionprotein,PrP)引起的一組人和動(dòng)物神經(jīng)退行性病變。正常的PrP富含α-螺旋，稱為PrPc。PrPc在某種未知蛋白質(zhì)的作用下可轉(zhuǎn)變成全為β-折疊的PrPsc，從而致病。PrPcα-螺旋PrPscβ-折疊正常瘋牛病第四節(jié)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)ThePhysicalandChemicalCharactersandSeparationandPurificationofProtein〔一〕蛋白質(zhì)的兩性電離特性一、理化性質(zhì)蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基和羧基可解離外，氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團(tuán)，在一定的溶液pH條件下都可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。*蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(isoelectricpoint,pI)當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH時(shí)，蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)相等，即成為兼性離子，凈電荷為零，此時(shí)溶液的pH稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)堿負(fù)酸正思考：1〕含酸性氨基酸較多的蛋白質(zhì)其等電點(diǎn)是偏酸還是偏堿？2〕等電點(diǎn)為6的蛋白質(zhì)于8.6的緩沖溶液中，其于電場(chǎng)中向何方向移動(dòng)？應(yīng)用：電泳、離子交換層析別離蛋白質(zhì)〔二〕蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)

1、分子大，不易透過(guò)半透膜-用于透析、超濾。

舉例：膠原蛋白的別離純化2、可形成穩(wěn)定的水溶液：

水化膜、外表電荷

思考：假設(shè)欲使蛋白質(zhì)沉淀，可采取何策略？+++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－－－－帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)水化膜++++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－－－－帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸堿酸堿酸堿脫水作用脫水作用脫水作用溶液中蛋白質(zhì)的聚沉〔三〕蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固１、蛋白質(zhì)的變性(denaturation)１〕定義：在某些物理和化學(xué)因素作用下，其特定的空間構(gòu)象被破壞，也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無(wú)序的空間結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。３〕造成變性的因素物理因素：高溫、高壓、紫外線照射、劇烈震蕩等化學(xué)因素：強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑、重金屬鹽等

２〕變性的本質(zhì)：空間結(jié)構(gòu)破壞〔次級(jí)鍵斷裂〕４〕性質(zhì)改變：①生物學(xué)活性喪失②溶解度下降③粘度增加④易被蛋白酶水解應(yīng)用舉例臨床醫(yī)學(xué)上，變性因素常被應(yīng)用來(lái)消毒及滅菌。此外,防止蛋白質(zhì)變性也是有效保存蛋白質(zhì)制劑〔如疫苗等〕的必要條件。假設(shè)蛋白質(zhì)變性程度較輕，去除變性因素后，蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或局部恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能，稱為復(fù)性(renaturation)。２、蛋白質(zhì)的復(fù)性

天然狀態(tài)，有催化活性

尿素、β-巰基乙醇

去除尿素、β-巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無(wú)活性３、蛋白質(zhì)沉淀在一定條件下，蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象。變性與沉淀的關(guān)系變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，但不一定沉淀；沉淀了的蛋白質(zhì)也并不一定變性。４、蛋白質(zhì)的凝固作用(proteincoagulation)蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較鞏固的凝塊，此凝塊不易再溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中?！菜摹车鞍踪|(zhì)的紫外吸收*由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波長(zhǎng)處有特征性吸收峰。蛋白質(zhì)的OD280與其濃度呈正比關(guān)系，因此可作蛋白質(zhì)定量測(cè)定。特點(diǎn)：快速、方便但準(zhǔn)確度較差

〔五〕蛋白質(zhì)的呈色反響(舉例〕⒈茚三酮反響(ninhydrinreaction)蛋白質(zhì)及氨基酸均可與茚三酮反響生成藍(lán)紫色化合物。⒉雙縮脲反響(biuretreaction)蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反響稱為雙縮脲反響，雙縮脲反響可用來(lái)進(jìn)行蛋白質(zhì)定量分析或檢測(cè)蛋白質(zhì)水解程度。附：蛋白質(zhì)的別離純化方法〔一〕根據(jù)分子大小不同〔三〕利用溶解度和親和力差異〔二〕根據(jù)帶電性質(zhì)和多少不同透析、超濾、凝膠過(guò)濾、超速離心等電泳、離子交換層析等

丙酮沉淀、鹽析、免疫沉淀、親和層析等利用電荷性質(zhì)可采用電泳法別離蛋白質(zhì)*蛋白質(zhì)在高于或低于其pI的溶液中為帶電的顆粒，在電場(chǎng)中能向正極或負(fù)極移動(dòng)。這種通過(guò)蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中泳動(dòng)而到達(dá)別離各種蛋白質(zhì)的技術(shù),稱為電泳(elctrophoresis)。根據(jù)支撐物的不同，可分為薄膜電泳、凝膠電泳等。電泳中分子越小、帶電荷量越多的移動(dòng)越快待別離蛋白質(zhì)溶液〔流動(dòng)相〕經(jīng)過(guò)一個(gè)固態(tài)物質(zhì)〔固定相〕時(shí)，根據(jù)溶液中待別離的蛋白質(zhì)顆粒大小、電荷多少及親和力等，使待別離的蛋白質(zhì)組分在兩相中反復(fù)分配，并以不同速度流經(jīng)固定相而到達(dá)別離蛋白質(zhì)的目的。層析(chromatography)蛋白質(zhì)別離常用的層析方法*離子交換層析：利用各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同進(jìn)行別離。*凝膠過(guò)濾(gelfiltration)又稱分子篩層析，利用各蛋白質(zhì)分子大小不同別離。凝膠過(guò)濾(gelfiltration)又稱分子篩層析。利用各蛋白質(zhì)分子大小不同別離。分子大的先洗脫下來(lái)，分子小的后下來(lái)。

大分子蛋白先洗脫下來(lái)

什么是蛋白質(zhì)組？

蛋白質(zhì)組是指“由一個(gè)細(xì)胞或一個(gè)組織的基因組所表達(dá)的全部相應(yīng)的蛋白質(zhì)〞。熒光染色的細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)對(duì)應(yīng)于基因組的所有蛋白質(zhì)構(gòu)成的整體，不是局限于一個(gè)或幾個(gè)蛋白質(zhì)。同一基因組在不同細(xì)胞、不同組織中的表達(dá)情況各不相同。在空間和時(shí)間上動(dòng)態(tài)變化著的整體。蛋白質(zhì)組是：蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)

指應(yīng)用各種技術(shù)手段來(lái)研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學(xué)，其目的是從整體的角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律。

主要研究?jī)?nèi)容

了解某種特定的細(xì)胞、組織或器官制