水質(zhì) 17種雜環(huán)類農(nóng)藥的測定 高效液相色譜法（征求意見稿）

1水質(zhì)17種雜環(huán)類農(nóng)藥的測定高效液相色譜法警告：實驗中使用的有機溶劑和標準溶液等具有一定的揮發(fā)性和毒性，試劑配制和樣品前處理過程應在通風櫥內(nèi)進行；操作時應按要求佩戴防護器具，避免吸入呼吸道或接觸皮膚和衣物。1適用范圍本標準規(guī)定了測定水中17種雜環(huán)類農(nóng)藥的高效液相色譜法。本標準適用于地表水、地下水、生活污水、工業(yè)廢水和海水中2-羥基莠去津、去異丙基莠去津、多菌靈、吡蟲啉、去乙基莠去津、啶蟲脒、西瑪津、氰草津、嗪草酮、2-氯-5-氯甲基吡啶、莠去津、三唑醇、撲草凈、三唑酮、腐霉利、咪鮮胺和氟蟲腈等17種雜環(huán)類農(nóng)藥的測定。進樣體積為50μl時，直接進樣法的方法檢出限為1μg/L～9μg/L，測定下限為4μg/L~36μg/L；取樣體積為250ml，定容體積為1.0ml，進樣體積為5μl時，液液萃取法和固相萃取法的方法檢出限為0.04μg/L～0.4μg/L，測定下限為0.16μg/L～1.6μg/L。詳見附錄A。2規(guī)范性引用文件本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是注明日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本標準。凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運輸HJ91.1污水監(jiān)測技術規(guī)范HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術規(guī)范HJ164地下水環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范HJ442.3近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范第三部分近岸海域水質(zhì)監(jiān)測3方法原理水樣中的雜環(huán)類農(nóng)藥經(jīng)液液萃取、固相萃取處理后，用具有紫外檢測器或二極管陣列檢測器的高效液相色譜儀分離檢測，也可直接進樣測定。根據(jù)保留時間定性，外標法定量。4干擾和消除苯酚與吡蟲啉的色譜保留時間接近，可通過硅膠小柱凈化消除干擾；2-氯酚和4-氯酚分別與氰草津和2-氯-5-氯甲基吡啶的色譜保留時間接近，2,6-二氯酚和胺苯磺隆與莠去津的色譜保留時間接近，可采用標準溶液添加法輔助定性；4-（2,4-二氯苯氧）-丁酸（2,4-DB）和2,4,6-三氯酚對三唑酮有干擾。25試劑和材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純試劑，實驗用水為不含目標化合物的純水。5.1鹽酸（HCl）：ρ=1.19g/ml，ω∈[36.0%，38.0%]。5.2二氯甲烷（CH2Cl2）：色譜純。5.3正己烷（C6H14）：色譜純。5.4丙酮（C3H6O）：色譜純。5.5乙腈（C2H3N）：色譜純。5.6甲醇（CH3OH）：農(nóng)殘級。5.7乙酸（C2H4O2）：色譜純。5.8氯化鈉（NaCl）。置于馬弗爐中400℃烘4h，冷卻后裝入具塞磨口玻璃瓶中密封，置于干燥器中保存。5.9無水硫酸鈉（Na2SO4）。置于馬弗爐中400℃烘4h，冷卻后裝入具塞磨口玻璃瓶中密封，置于干燥器中保存。5.10氫氧化鈉（NaOH）。5.11鹽酸溶液。鹽酸（5.1）和水以1:1的體積比混合。5.12氫氧化鈉溶液：ρ(NaOH)=50g/L。稱取5g氫氧化鈉（5.10溶于100ml水中，搖勻。5.13正己烷-二氯甲烷混合溶液。正己烷（5.3）和二氯甲烷（5.2）按2:1體積比混合。5.14正己烷-丙酮混合溶液I。正己烷（5.3）和丙酮（5.4）按85:15體積比混合。5.15正己烷-丙酮混合溶液II。正己烷（5.3）和丙酮（5.4）按77:23體積比混合。5.16正己烷-丙酮混合溶液III。正己烷（5.3）和丙酮（5.4）按3:2體積比混合。5.17含0.01%乙酸的甲醇溶液。移取50.0μl乙酸（5.7）至500ml容量瓶，用甲醇（5.6）定容。5.18雜環(huán)類農(nóng)藥標準貯備液：ρ=100mg/L?？少徺I市售有證標準溶液，目標化合物包括2-羥基莠去津、去異丙基莠去津、多菌靈、吡蟲啉、去乙基莠去津、啶蟲脒、西瑪津、氰草津、嗪草酮、2-氯-5-氯甲基吡啶、莠去津、三唑醇、撲草凈、三唑酮、腐霉利、咪鮮胺和氟蟲腈，參照標準溶液證書要求保存；也可以甲醇（5.6）為溶劑，用標準物質(zhì)配制，冷凍可保存70d。5.19標準使用液。標準使用液I(ρ=5.00mg/L）：取適量標準貯備液（5.18）用水稀釋，4℃冷藏、密封、避光保存，保存期為21d。3標準使用液II(ρ=25.0mg/L取適量標準貯備液（5.18）用甲醇（5.6）稀釋，冷凍可保存70d。5.20硅膠凈化小柱：1000mg/6ml，或其他同等效果規(guī)格的凈化小柱。5.21固相萃取柱：填料為親脂性二乙烯苯和親水性N-乙烯基吡咯烷酮共聚物，500mg/6ml，或其他性能相近的固相萃取柱。5.22濾膜I：孔徑0.45μm，尼龍濾膜、聚四氟乙烯濾膜或再生纖維素濾膜。5.23濾膜II：孔徑0.45μm，再生纖維素濾膜。5.24氮氣：純度≥99.999%。6儀器和設備6.1采樣瓶：1L，具聚四氟乙烯內(nèi)襯旋蓋或磨口塞的棕色玻璃瓶。6.2高效液相色譜儀：具有紫外檢測器（支持雙波長聯(lián)測）或二極管陣列檢測器和梯度洗脫功能。6.3色譜柱：柱長150mm，內(nèi)徑4.6mm，填料粒徑為5μm的反相C18色譜柱。6.4濃縮裝置：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)裝置、氮吹濃縮儀或平行蒸發(fā)儀等性能相當?shù)脑O備。6.5固相萃取裝置。6.6分液漏斗：500ml，具玻璃或聚四氟乙烯活塞，不涂凡士林。6.7一般實驗室常用儀器和設備。7樣品7.1樣品采集和保存按照GB17378.3、HJ91.1、HJ91.2、HJ164和HJ442.3的相關規(guī)定采集水樣。用采樣瓶（6.1）采集樣品，用鹽酸溶液（5.11）或氫氧化鈉溶液（5.12）調(diào)節(jié)水樣pH至4～9，立刻置于4℃避光保存，2-氯-5-氯甲基吡啶24h內(nèi)完成萃取，腐霉利2d內(nèi)完成萃取，其它目標化合物7d內(nèi)完成萃取，萃取液冷凍保存，40d內(nèi)完成分析。7.2試樣的制備7.2.1直接進樣法水樣經(jīng)濾膜II（5.22）過濾，棄去1ml初濾液后，置于2ml樣品瓶中，待測。含鹽量較高，高效液相色譜儀直接進海水對設備損耗大，不建7.2.2液液萃取法7.2.2.1萃取量取250ml水樣，用鹽酸溶液（5.11）或氫氧化鈉溶液（5.12）調(diào)節(jié)水樣pH至7～9，置于分液漏斗（6.6）中，加入75g氯化鈉（5.8）搖勻，用90ml二氯甲烷（5.2）分3次萃4取，每次30ml，振蕩萃取5min（注意放氣靜置分層后，將有機相通過無水硫酸鈉（5.9）脫水，合并3次二氯甲烷萃取液。注：液液萃取法不適用于2-羥基莠去津的測定；腐霉利常溫下7.2.2.2濃縮用濃縮裝置（6.4）將萃取液7.2.2.1濃縮至約1ml，待凈化。對于清潔樣品，可不用凈化，將萃取液濃縮至約1ml，加入約5ml乙腈（5.5混勻后濃縮至約1ml，重復此濃縮過程2次，將溶劑完全轉(zhuǎn)化為乙腈，定容至1.0ml，經(jīng)濾膜I（5.23）過濾，待測。7.2.2.3凈化依次用4ml丙酮（5.4）、10ml正己烷（5.3）活化硅膠凈化小柱（5.20待柱上正己烷（5.3）近干時，在濃縮液7.2.2.2中加入2ml正己烷（5.3混勻后轉(zhuǎn)移至柱中，用3ml正己烷-二氯甲烷混合溶液（5.13）分3次洗滌裝樣品的容器，洗滌液一并上柱，棄去流出液；用4ml正己烷-二氯甲烷混合溶液（5.13）淋洗柱子，棄去淋洗液；用10ml正己烷-丙酮混合溶液III（5.16）以1ml/min～2ml/min的速度洗脫，收集洗脫液；將洗脫液濃縮并更換溶劑為乙腈（5.5定容至1.0ml，待測。注：當水樣干擾嚴重或水樣中僅含部分目標化7.2.3固相萃取法依次用10ml甲醇（5.6）和10ml水活化固相萃取柱（5.21始終保持柱頭浸潤；量取250ml水樣于樣品瓶中，用鹽酸溶液（5.11）或氫氧化鈉溶液（5.12）調(diào)節(jié)水樣pH至4~8，使樣品以約5ml/min的流速通過萃取柱；上樣結(jié)束后，在柱填料剛好暴露于空氣之前，用10ml水分2次沖洗樣品瓶，洗滌液一并轉(zhuǎn)移至柱上，棄去流出液，真空抽約30min使小柱干燥；用7ml甲醇（5.6）以1ml/min～2ml/min的流速洗脫，收集洗脫液；將洗脫液濃縮并定容至1.0ml，待測。7.3空白試樣的制備用實驗用水代替樣品，按照與試樣的制備（7.2）相同的步驟進行實驗室空白試樣的制8分析步驟8.1儀器參考條件流動相A：水；流動相B：含0.01%乙酸的甲醇溶液（5.17流動相C：乙腈（5.5）。梯度洗脫程序見表1。檢測波長：根據(jù)目標化合物的出峰時間和推薦吸收波長編制波長變換程序，見表2。5表1梯度洗脫程序005500表2目標化合物對應的紫外檢測波長1234567898.2校準曲線的建立直接進樣法分別量取適量的雜環(huán)類農(nóng)藥標準使用液I（5.19用水稀釋，配制至少5個濃度點的標準系列，雜環(huán)類農(nóng)藥的質(zhì)量濃度分別為0.020mg/L、0.100mg/L、0.500mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L（此為參考濃度液液萃取法和固相萃取法分別量取適量的雜環(huán)類農(nóng)藥標準使用液II（5.19）用甲醇（5.6）稀釋，配制雜環(huán)類農(nóng)藥的質(zhì)量濃度分別為0.100mg/L、0.500mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、25.0mg/L（此為參考濃度）的標準系列。按照儀器參考條件（8.1由低濃度到高濃度依次進樣分析。以標準系列溶液中6目標化合物組分質(zhì)量濃度為橫坐標，以其對應的峰高或峰面積為縱坐標，建立標準曲線。在本標準推薦的儀器條件下，17種雜環(huán)類農(nóng)藥的標準色譜圖見圖1。361423614758895圖117種雜環(huán)類農(nóng)藥標準色譜圖8.3試樣測定按照與校準曲線的建立（8.2）相同的儀器分析條件進行試樣7.2的測定。8.4空白試驗按照與試樣測定（8.3）相同的儀器分析條件進行空白試樣7.3的測定。9結(jié)果計算與表示9.1定性分析根據(jù)目標化合物的保留時間定性，必要時可采用標準樣品添加法、不同波長下的信號比、紫外光譜圖掃描等方法輔助定性。9.2結(jié)果計算9.2.1直接進樣法樣品中目標化合物的質(zhì)量濃度，按照公式（1）計算：?=1?×（1）7式中：ρi——樣品中第i種目標化合物的質(zhì)量濃度，mg/L；ρ1i——從標準曲線得到的試樣中目標化合物i的質(zhì)量濃度，mg/L；D——樣品的稀釋倍數(shù)。9.2.2液液萃取法和固相萃取法樣品中目標化合物的質(zhì)量濃度，按照公式（2）計算：式中：ρi——樣品中第i種目標化合物的質(zhì)量濃度，μg/L；ρ1i——從標準曲線得到的試樣中目標化合物i的質(zhì)量濃度，mg/L；V1——試樣定容體積，ml；V——水樣體積，ml；D——樣品的稀釋倍數(shù)；1000——mg轉(zhuǎn)換為μg的單位換算系數(shù)。9.3結(jié)果表示測定結(jié)果最多保留3位有效數(shù)字，小數(shù)點后位數(shù)的保留與方法檢出限一致。10準確度10.1精密度10.1.1直接進樣法6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥濃度為0.040mg/L、0.400mg/L和4.00mg/L的統(tǒng)一標準樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍分別為0%～15%、0.10%～14%和0%～7.9%；實驗室間相對標準偏差范圍分別為3.6%～17%、2.5%～15%和1.9%～8.2%；重復性限范圍分別為0.002mg/L～0.007mg/L、0.004mg/L～0.072mg/L和0.03mg/L～0.40mg/L；再現(xiàn)性限范圍分別0.006mg/L～0.019mg/L、0.029mg/L～0.17mg/L和0.24mg/L~0.92mg/L。6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為2.00mg/L的工業(yè)廢水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍為0%～3.1%；實驗室間相對標準偏差范圍為0.9%～5.4%；重復性限范圍為0.01mg/L～0.09mg/L；再現(xiàn)性限為0.05mg/L～0.30mg/L。方法精密度數(shù)據(jù)參見表C.1。10.1.2液液萃取法6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥濃度為0.80μg/L、8.00μg/L和80.0μg/L的統(tǒng)一標準樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍分別為0%～11%、1.1%～19%和1.9%～8.3%；實驗室間相對標準偏差范圍分別為3.6%～13%、3.6%～8.8%和3.6%～11%；8重復性限范圍分別為0.07μg/L～0.2μg/L、0.61μg/L～2.1μg/L和5.6μg/L～13μg/L；再現(xiàn)性限范圍分別為0.17μg/L～0.3μg/L、1.3μg/L～2.7μg/L和12μg/L～23μg/L。6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為0.80μg/L的地表水和生活污水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍分別為0%～12%和0～13%；實驗室間相對標準偏差范圍分別為1.1%～13%和0%～13%；重復性限范圍分別為0.06μg/L～0.2μg/L和0.07μg/L～0.2μg/L；再現(xiàn)性限范圍分別為0.06μg/L～0.4μg/L和0.09μg/L～0.3μg/L。6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為4.00μg/L的工業(yè)廢水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍為1.3%～26%；實驗室間相對標準偏差范圍為3.1%～11%；重復性限范圍為0.3μg/L～1.4μg/L；再現(xiàn)性限范圍為0.4μg/L～1.5μg/L。方法精密度數(shù)據(jù)參見表C.2。10.1.3固相萃取法6家實驗室分別對含17種雜環(huán)類農(nóng)藥濃度為0.80μg/L、8.00μg/L和80.0μg/L的統(tǒng)一標準樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍分別為0%～20%、0.64%～19%和0.87%～18%；實驗室間相對標準偏差范圍分別為0%～18%、3.6%～10%和3.6%～6.9%；重復性限范圍分別為0.05μg/L～0.25μg/L、0.30μg/L～2.7μg/L和3.0μg/L～15μg/L；再現(xiàn)性限范圍分別為0.1μg/L～0.4μg/L、0.98μg/L～2.8μg/L和11μg/L～23μg/L。6家實驗室分別對含17種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為0.80μg/L的地表水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍為0%～18%；實驗室間相對標準偏差范圍為3.6%～16%；重復性限范圍為0.06μg/L～0.2μg/L；再現(xiàn)性限范圍為0.14μg/L～0.4μg/L。6家實驗室分別對含17種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為80.0μg/L的工業(yè)廢水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差范圍為0.26%～19%；實驗室間相對標準偏差范圍為3.6%～6.4%；重復性限范圍為2.1μg/L～17μg/L；再現(xiàn)性限范圍為10μg/L～28μg/L。方法精密度數(shù)據(jù)參見表C.3。10.2正確度10.2.1直接進樣法6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥濃度為0.040mg/L、0.400mg/L和4.00mg/L的統(tǒng)一標準樣品進行6次重復測定：相對誤差范圍分別為-30%～23%、-15%～20%和-14%～14%；相對誤差最終值范圍為-9.2%±28%～3.3%±26%、-2.3%±14%～1.8%±25%和-2.0%±14%～1.0%±15%。6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為2.00mg/L的工業(yè)廢水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：加標回收率范圍為92.2%～110%；加標回收率最終值范圍為96.7%±10%~103%±7.6%。方法正確度數(shù)據(jù)參見表C.4。10.2.2液液萃取法6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥濃度為0.80μg/L、8.00μg/L和80.0μg/L的統(tǒng)一標9準樣品進行6次重復測定：相對誤差范圍分別為-25%～24%、-23%～18%和-23%～13%；相對誤差最終值范圍為-15%±19%～0.017%±26%、-18%±9.8%～1.2%±18%和-19%±8.9%～1.7%±13%。6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為0.80μg/L的地表水和生活污水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：加標回收率范圍分別為72.5%～125%和72.5%～119%；加標回收率最終值范圍分別為81.3%±14%～104%±21%和81.3%±14%～104%±13%。6家實驗室分別對含16種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為4.00μg/L的工業(yè)廢水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：加標回收率范圍為72.5%～105%；加標回收率最終值范圍為76.7%±5.2%~95.9%±14%。方法正確度數(shù)據(jù)參見表C.5。10.2.3固相萃取法6家實驗室分別對含17種雜環(huán)類農(nóng)藥濃度為0.80μg/L、8.00μg/L和80.0μg/L的統(tǒng)一標準樣品進行6次重復測定：相對誤差范圍分別為-25%～25%、-25%～11%和-24%～7.6%；相對誤差最終值范圍為-25%±0%～-0.72%±21%、-18%±11%～-1.6%±15%和-19%±8.2%～-2.2%±13%。6家實驗室分別對含17種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為0.80μg/L的地表水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：加標回收率范圍為75.0%～125%；加標回收率最終值范圍為89.6%±10%~98.1%±25%。6家實驗室分別對含17種雜環(huán)類農(nóng)藥加標濃度為80.0μg/L的工業(yè)廢水統(tǒng)一實際樣品進行6次重復測定：加標回收率范圍為74.1%～109%；加標回收率最終值范圍為78.0%±5.4%~98.3%±13%。方法正確度數(shù)據(jù)參見表C.6。11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制11.1每20個樣品或每批次（少于20個樣品）至少分析1個實驗室空白，空白中目標化合物的濃度應低于方法檢出限。11.2標準曲線的相關系數(shù)≥0.995。每24h應分析測定1個曲線中間濃度點標準溶液，測定結(jié)果與該點濃度的相對誤差應在±20%內(nèi)。否則，應建立新的標準曲線。11.3每20個樣品或每批次（少于20個樣品）應分析測定1個平行樣，平行樣測定結(jié)果的相對偏差應在±30%以內(nèi)。11.4每20個樣品或每批次（少于20個樣品）應分析測定1個基體加標樣品，加標回收率應在65%～135%之間。12廢物處置實驗中產(chǎn)生的廢物應分類收集，集中保管，并做好相應標識，依法委托有資質(zhì)的單位進行處理。（規(guī)范性附錄）方法檢出限和測定下限本方法目標化合物的方法檢出限和測定下限見表A.1。表A.1方法檢出限和測定下限114 2atrazine-2833435atrazine-362872882893pyridine73938procymidone——prochloraz96（資料性附錄）分級凈化步驟與參考洗脫率采用硅膠凈化小柱凈化試樣時，分級洗脫方式各段洗脫液和一次洗脫方式洗脫液中目標化合物參考洗脫率見表B.1。表B.1硅膠凈化小柱各段洗脫液中目標化合物參考洗脫率III5.16）1 2 3 4 5 6——7—8——9—— ——當水樣干擾嚴重時，采用分級洗脫的方式進行凈化：依次用4ml丙酮（5.4）、10ml正己烷（5.3）活化硅膠凈化小柱（5.20待柱上正己烷（5.3）近干時，在7.2.2.2濃縮液中加入2ml正己烷（5.3混勻后轉(zhuǎn)移至柱中，用3ml正己烷-二氯甲烷混合溶液（5.13）分3次洗滌裝樣品的容器，洗滌液一并上柱；用4ml正己烷-二氯甲烷混合溶液（5.13）淋洗柱子，棄去淋洗液；先用10ml正己烷-丙酮混合溶液I（5.14）以1ml/min～2ml/min的速度洗脫，收集洗脫液1；再用10ml正己烷-丙酮混合溶液II（5.15）洗脫，收集洗脫液2；最后用10ml正己烷-丙酮混合溶液III（5.16）洗脫，收集洗脫液3；將洗脫液分別濃縮并更換溶劑為乙腈（5.5定容至1.0ml，待測；在洗脫液1中測定西瑪津、氰草津、嗪草酮、2-氯-5-氯甲基吡啶、莠去津、撲草凈、三唑酮、腐霉利和氟蟲腈的濃度，在洗脫液2中測定去異丙基莠去津、去乙基莠去津、三唑醇和咪鮮胺的濃度，在洗脫液3中測定多菌靈、吡蟲啉和啶蟲脒的濃度。當目標化合物僅為西瑪津、氰草津、嗪草酮、2-氯-5-氯甲基吡啶、莠去津、撲草凈、三唑酮、腐霉利和氟蟲腈時，采用以下方式凈化：依次用4ml丙酮（5.4）、10ml正己烷（5.3）活化硅膠凈化小柱（5.20待柱上正己烷（5.3）近干時，在7.2.2.2濃縮液中加入2ml正己烷（5.3混勻后轉(zhuǎn)移至柱中，用3ml正己烷-二氯甲烷混合溶液（5.13）分3次洗滌裝樣品的容器，洗滌液一并上柱；用4ml正己烷-二氯甲烷混合溶液（5.13）淋洗柱子，棄去淋洗液；用10ml正己烷-丙酮混合溶液I（5.14）以1ml/min～2ml/min的速度洗脫，收集洗脫液；將洗脫液濃縮并更換溶劑為乙腈（5.5定容至1.0ml，待測。當目標化合物僅為去異丙基莠去津和去乙基莠去津時，采用以下方式凈化：依次用4ml丙酮（5.4）