新生物制品審批辦法

新生物制品審批方法

《新生物制品審批方法》于1999年3月26日經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局局務(wù)會(huì)審議通過，現(xiàn)予發(fā)布。本規(guī)定自1999年5月1日起施行。

一九九九年四月二十二日

新生物制品審批方法

第一章

總那么

第一條

根據(jù)《中華人民共和國藥品管理法》、《中華人民共和國藥品管理法實(shí)施方法》的規(guī)定，為加強(qiáng)新生物制品研制和審批的管理，特制定本方法。

第二條

生物制品是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細(xì)胞及各種動(dòng)物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品。

第三條

新生物制品系指我國未批準(zhǔn)上市的生物制品；已批準(zhǔn)上市的生物制品，當(dāng)改換制備疫苗和生物技術(shù)產(chǎn)品的菌毒種、細(xì)胞株及其他重大生產(chǎn)工藝改革對制品的平安性、有效性可能有顯著影響時(shí)按新生物制品審批。

第四條

新生物制品審批實(shí)行國家一級審批制度。

第五條

凡在中華人民共和國境內(nèi)進(jìn)行新生物制品研究、生產(chǎn)、經(jīng)營、使用、檢定、審批、監(jiān)督管理的單位和個(gè)人，都必須遵守本方法。

第二章

新生物制品命名及分類

第六條

新生物制品的命名應(yīng)遵照《中國生物制品規(guī)程》和藥品命名原那么的有關(guān)規(guī)定命名。

第七條

新生物制品分為五類：

第一類：國內(nèi)外尚未批準(zhǔn)上市的生物制品。

第二類：國外已批準(zhǔn)上市，尚未列入藥典或規(guī)程，我國也未進(jìn)口的生物制品。

第三類：1.療效以生物制品為主的新復(fù)方制劑。

2.工藝重大改革后的生物制品。

第四類：1.國外藥典或規(guī)程已收載的生物制品。

2.已在我國批準(zhǔn)進(jìn)口注冊的生物制品。

3.改變劑型或給藥途徑的生物制品。

第五類：增加適應(yīng)癥的生物制品。

第三章

新生物制品研制的要求

第八條

新生物制品研制內(nèi)容，包括生產(chǎn)用菌毒種、細(xì)胞株、生物組織、生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、檢定方法、保存條件、穩(wěn)定性以及與制品平安性、有效性有關(guān)的免疫學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)等臨床前的研究工作和臨床研究。并根據(jù)研究結(jié)果提出制造檢定規(guī)程和產(chǎn)品使用說明書〔草案〕。

第九條

新生物制品研制和生產(chǎn)要分別符合我國《藥品非臨床研究質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)》〔GLP〕、《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)》〔GMP〕的有關(guān)規(guī)定。

第十條

新生物制品研制過程一般分為以下幾個(gè)階段，各階段的要求如下。

1.實(shí)驗(yàn)研究

包括應(yīng)用根底研究，生產(chǎn)用菌毒種或細(xì)胞株的構(gòu)建、選育、培養(yǎng)、遺傳穩(wěn)定性，生物組織選擇，有效成分的提取、純化及其理化特性、生物特性的分析等研究，取得制造和質(zhì)量檢定的根本條件和方法。

2.小量試制

根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果，確定配方、建立制備工藝和檢定方法，試制小批量樣品，進(jìn)行臨床前平安性和有效性的實(shí)驗(yàn)，并制定制造與檢定根本要求。

3.中間試制

(1)生產(chǎn)工藝根本定型，產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)率相對穩(wěn)定，并能放大生產(chǎn)。

(2)有產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、檢定方法、保存穩(wěn)定性資料，并有測定效價(jià)用的參考品或?qū)φ掌贰?/p>

(3)提供自檢和中國藥品生物制品檢定所復(fù)檢合格，并能滿足臨床研究用量的連續(xù)三批產(chǎn)品。

(4)制定較完善的制造檢定試行規(guī)程和產(chǎn)品使用說明書〔草案〕。

4.試生產(chǎn)

在試生產(chǎn)階段，完善生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其檢定方法；同時(shí)按有關(guān)規(guī)定完成第Ⅳ期臨床試驗(yàn)、制品長期穩(wěn)定性研究和國家藥品監(jiān)督管理局要求進(jìn)行的其他工作。

5.正式生產(chǎn)

按要求完成試生產(chǎn)期工作后，經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)轉(zhuǎn)入正式生產(chǎn)。

第四章

新生物制品臨床研究申報(bào)與審批

第十一條

申報(bào)新生物制品臨床研究，研制單位要填寫申請表〔附件一〕，提交規(guī)定的有關(guān)申報(bào)材料〔附件二、三、四、五，其中保密資料按保密有關(guān)規(guī)定辦理〕，送所在省、自治區(qū)、直轄市藥品監(jiān)督管理部門。省級藥品監(jiān)督管理部門對申報(bào)材料進(jìn)行形式審查，并對研制條件和原始資料進(jìn)行現(xiàn)場核查，提出意見后，報(bào)送國家藥品監(jiān)督管理局審批。

第十二條

除體外診斷試劑外，生物制品臨床研究須經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局審評、批準(zhǔn)前方可進(jìn)行。臨床研究用藥的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)與臨床前研究用藥一致。

1.預(yù)防用新生物制品臨床研究工作，由國家藥品監(jiān)督管理局指定的單位按照附件六、七的技術(shù)要求和程序組織實(shí)施。

2.治療用新生物制品臨床研究參照新藥臨床研究的要求，須在國家藥品監(jiān)督管理局確定的藥品臨床研究基地按《藥品臨床研究質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)》〔GCP〕的要求進(jìn)行。

3.體外診斷用品的臨床研究，申報(bào)單位于申報(bào)前，須在三個(gè)以上省級醫(yī)療衛(wèi)生單位用其他方法診斷明確的陽性、陰性標(biāo)本〔總數(shù)一般不少于1000例〕考核其申報(bào)品種的特異性、敏感性。申報(bào)后，根據(jù)需要由國家藥品監(jiān)督管理局指定單位做進(jìn)一步的臨床考核。

4.人用鼠源性單克隆抗體、體細(xì)胞治療和基因治療的臨床研究申報(bào)和審批具體要求見附件四、八、九。

5.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗(yàn)用藥由研制單位無償提供并承當(dāng)研究費(fèi)用。Ⅳ期臨床試驗(yàn)用藥的提供和研究費(fèi)用，由生產(chǎn)單位與承當(dāng)單位雙方商定；有明確規(guī)定者按有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

第十三條

中外合作研制的新生物制品，合作雙方在國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究的資料和樣品均可用于臨床研究申報(bào)。

第五章

新生物制品生產(chǎn)的申報(bào)和審批

第十四條

新生物制品Ⅲ期臨床試驗(yàn)結(jié)束后，研制單位填寫申請表〔附件十三〕，提交規(guī)定的有關(guān)申報(bào)資料〔附件二〕，報(bào)送國家藥品監(jiān)督管理局審批，批準(zhǔn)后發(fā)給新藥證書。

多家聯(lián)合研制的新生物制品，國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)后，給每個(gè)單位頒發(fā)研制單位聯(lián)合署名的新藥證書。

第十五條

多家聯(lián)合研制的新生物制品，第一類新生物制品允許其中兩個(gè)單位生產(chǎn)；其他類別的新生物制品允許一個(gè)單位生產(chǎn)。

第十六條

申報(bào)生產(chǎn)新生物制品的企業(yè)，在經(jīng)過國家驗(yàn)收符合GMP要求的車間內(nèi)連續(xù)生產(chǎn)三批，經(jīng)中國藥品生物制品檢定所抽樣檢定合格，填報(bào)申請表〔附件十三〕，提交新藥證書、生產(chǎn)車間驗(yàn)收文件、中國藥品生物制品檢定所的檢定報(bào)告復(fù)印件，報(bào)國家藥品監(jiān)督管理局審批，批準(zhǔn)后，發(fā)給批準(zhǔn)文號(hào)。第一類為“國藥試字S××××××××”，其中S代表生物制品，其他類別的新生物制品除某些制品外均為“國藥準(zhǔn)字S××××××××”。

第十七條

更換生產(chǎn)用菌毒種或細(xì)胞的疫苗、生物技術(shù)產(chǎn)品或氨基酸數(shù)目、順序等結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的生物技術(shù)產(chǎn)品以及需試產(chǎn)期考核的改變給藥途徑的產(chǎn)品核發(fā)試生產(chǎn)文號(hào)。

第十八條

國藥試字新生物制品試生產(chǎn)期二年。試生產(chǎn)期滿3個(gè)月前，生產(chǎn)單位填寫申請表〔附件十四〕，提交規(guī)定的有關(guān)申報(bào)資料〔附件二〕，報(bào)國家藥品監(jiān)督管理局審批；審批期間，其試生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)仍然有效。如有特殊情況，確需延長試生產(chǎn)期者，經(jīng)批準(zhǔn)可延長試生產(chǎn)期。批準(zhǔn)轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)的產(chǎn)品，發(fā)給新的批準(zhǔn)文號(hào)為“國藥準(zhǔn)字S××××××××”，逾期未提出轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)申請或試產(chǎn)期滿未批準(zhǔn)轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)的產(chǎn)品原批準(zhǔn)文號(hào)取消。

第十九條

已批準(zhǔn)上市的生物制品，經(jīng)過工藝重大改革，研究資料證明改革后的產(chǎn)品質(zhì)量、平安性和有效性明顯提高者，按新生物制品審批后，發(fā)給新的批準(zhǔn)文號(hào)，原工藝產(chǎn)品的批準(zhǔn)文號(hào)予以取消。其他單位采用新工藝時(shí)按新藥技術(shù)轉(zhuǎn)讓規(guī)定辦理。

第二十條

凡新生物制品申報(bào)原料藥的，按本方法規(guī)定進(jìn)行審批，核發(fā)新藥證書和批準(zhǔn)文號(hào)。

第二十一條

新體外診斷試劑，研制單位完成產(chǎn)品臨床考核，其連續(xù)三批產(chǎn)品〔批量見附件十二〕經(jīng)中國藥品生物制品檢定所檢定合格后，填寫申請表〔附件十三〕，提交規(guī)定的有關(guān)資料〔附件二、四、十、十一〕，報(bào)國家藥品監(jiān)督管理局審批，批準(zhǔn)后，發(fā)新藥證書，具備相應(yīng)生產(chǎn)條件者發(fā)批準(zhǔn)文號(hào)。生產(chǎn)單位用外購的主要原材料制備的新體外診斷試劑，經(jīng)批準(zhǔn)，發(fā)批準(zhǔn)文號(hào)，不發(fā)新藥證書。

第六章

新生物制品制造檢定規(guī)程的轉(zhuǎn)正

第二十二條

新生物制品生產(chǎn)批準(zhǔn)后，其制造檢定規(guī)程為試行規(guī)程。試行期第一類為三年〔含試生產(chǎn)期〕，其他類別為二年。

第二十三條

試行期滿三個(gè)月前，生產(chǎn)企業(yè)填寫申請表〔附件十五〕，提交規(guī)定的有關(guān)申報(bào)資料〔附件十六〕，報(bào)國家藥品監(jiān)督管理局。

第二十四條

國家藥品監(jiān)督管理局責(zé)成中國生物制品標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)對試行規(guī)程按規(guī)定的要求和程序〔附件十六〕進(jìn)行審查，提出制造檢定正式規(guī)程，報(bào)國家藥品監(jiān)督管理局審批、發(fā)布。

第二十五條

規(guī)程試行期滿，未提出轉(zhuǎn)正申請或未按要求補(bǔ)充材料的生產(chǎn)企業(yè)，國家藥品監(jiān)督管理局取消其產(chǎn)品的批準(zhǔn)文號(hào)。

第七章

附那么

第二十六條

本方法中體外診斷試劑指免疫學(xué)、微生物學(xué)、分子生物學(xué)等體外診斷試劑。

第二十七條

抗生素、動(dòng)物臟器制品按《新藥審批方法》管理。

第二十八條

生物制品工藝重大改革的審查認(rèn)定由中國藥品生物制品檢定所負(fù)責(zé)。

第二十九條

治療用生物制品臨床研究的要求、新生物制品的技術(shù)轉(zhuǎn)讓、新生物制品研制過程中違規(guī)處分等與《新藥審批方法》規(guī)定類同的事項(xiàng)均參照《新藥審批方法》執(zhí)行。

第三十條

本方法由國家藥品監(jiān)督管理局負(fù)責(zé)解釋。

第三十一條

本方法自1999年5月1日起施行。

附件：

一、新生物制品臨床研究申請表

二、新生物制品申報(bào)資料工程

(一)治療用新生物制品申報(bào)資料工程

(二)預(yù)防用新生物制品申報(bào)資料工程

(三)體外診斷用品申報(bào)資料工程

三、人用重組DNA制品質(zhì)量控制要點(diǎn)

四、人用鼠源性單克隆抗體質(zhì)量控制要點(diǎn)

五、傳代細(xì)胞系生產(chǎn)生物制品規(guī)程

六、預(yù)防用新生物制品臨床研究的技術(shù)要求

七、預(yù)防用新生物制品臨床研究程序

八、人的體細(xì)胞治療申報(bào)臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原那么

九、人基因治療申報(bào)臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原那么

十、放射免疫分析藥盒申報(bào)資料工程及要求

十一、用于檢測病原體的體外核酸擴(kuò)增〔PCR〕診斷試劑盒的申報(bào)、審評暫行方法

十二、體外生物診斷試劑報(bào)批批量最低要求

十三、新生物制品證書生產(chǎn)申請表

十四、新生物制品轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)申請表

十五、新生物制品試行規(guī)程轉(zhuǎn)正申請表

十六、新生物制品試行規(guī)程轉(zhuǎn)正的具體要求

附件一：

新生物制品臨床研究申請表

名

稱：

類

別：

研究單位：國家藥品監(jiān)督管理局制

研制單位填報(bào)工程

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中文名

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品

名

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英文名

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│漢語拼音│

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劑

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組成成份

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及含量

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制

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備

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工

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藝

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┃適應(yīng)癥與用法│

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活性

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測定

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方法

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和

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結(jié)論

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┃效力實(shí)驗(yàn)

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┃或藥理學(xué)

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┃研究工程

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和結(jié)論

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┃實(shí)驗(yàn)室平安│

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性及毒性

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┃研究工程及│

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結(jié)論

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申請單位

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│郵政編碼│

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地

址

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│電

話│

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┃研制負(fù)責(zé)人│

〔簽字〕│日

期│

年

月

日┃

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附件二：

新生物制品申報(bào)資料工程

(一)治療用新生物制品申報(bào)資料工程

1.新生物制品臨床研究申請表，附中檢所復(fù)檢報(bào)告

2.研究工作總結(jié)

3.新制品名稱、選題目的和依據(jù)、國內(nèi)外有關(guān)方面研究現(xiàn)狀〔包括專利〕、生產(chǎn)和使用情況綜述及主要參考文獻(xiàn)

4.生產(chǎn)用菌毒種來源、歷史、全面檢定及鑒別資料和傳代限度試驗(yàn)資料；或工程菌〔細(xì)胞〕構(gòu)建的詳細(xì)資料，包括目的基因的獲得、表達(dá)載體詳細(xì)結(jié)構(gòu)、宿主菌〔細(xì)胞〕基因型、表型特征等；或雜交瘤株建株詳細(xì)資料

5.生產(chǎn)用原材料質(zhì)控要求的有關(guān)資料

6.生產(chǎn)工藝研究及確定的有關(guān)資料

7.中試產(chǎn)品質(zhì)量研究總結(jié)資料,包括生物活性測定方法試驗(yàn)研究資料

8.工作參考品或?qū)φ掌返闹苽浼皺z定資料

9.培養(yǎng)及生產(chǎn)過程中使用對人有潛在毒性物質(zhì)的檢查資料

10.生產(chǎn)用動(dòng)物合格證明,研制和中試車間面積、凈化、工藝走向圖紙，制備和檢定用主要儀器、設(shè)備等情況，省級藥品監(jiān)督管理部門核實(shí)蓋章

11.與國內(nèi)外同類產(chǎn)品質(zhì)量比擬資料

12.內(nèi)包裝材料及選擇的依據(jù)

13.供臨床研究用連續(xù)三批中試產(chǎn)品的制造和檢定原始記錄

14.中試產(chǎn)品制造和檢定規(guī)程草案及起草說明

15.至少三批中試產(chǎn)品初步穩(wěn)定性試驗(yàn)資料

16.制劑的處方、工藝及處方依據(jù)，輔料的來源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有關(guān)文獻(xiàn)資料等

17.目的基因核苷酸序列、表達(dá)質(zhì)粒酶切圖譜以及特異性鑒別資料

18.目的基因表達(dá)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)確證資料，包括氨基酸組成分析、N末端15個(gè)氨基酸及C末端1～2個(gè)氨基酸序列分析、肽圖分析、圓二色光譜分析等，或單抗特異性、親和力、活性等試驗(yàn)資料

19.原始種子庫和生產(chǎn)種子庫建庫資料以及貯存復(fù)蘇過程中宿主載體表達(dá)系統(tǒng)遺傳、表達(dá)穩(wěn)定性試驗(yàn)資料，或雜交瘤細(xì)胞株分泌抗體穩(wěn)定性試驗(yàn)資料

20.生產(chǎn)用種子庫外源因子檢查〔細(xì)菌、真菌、支原體和病毒〕、細(xì)胞基質(zhì)外源因子檢查、核型分析及致瘤性試驗(yàn)資料

21.與治療作用有關(guān)的動(dòng)物主要藥效學(xué)研究資料及文獻(xiàn)資料

22.動(dòng)物一般藥理學(xué)研究資料及文獻(xiàn)資料

23.動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)研究資料及文獻(xiàn)資料

24.動(dòng)物急性〔單劑量〕毒性研究資料及文獻(xiàn)資料

25.動(dòng)物長期〔重復(fù)給藥〕毒性研究資料及文獻(xiàn)資料

26.動(dòng)物局部用藥毒性研究資料及文獻(xiàn)資料

27.復(fù)方制劑中多種組分對動(dòng)物藥效或毒性影響的研究資料及文獻(xiàn)資料

28.遺傳毒性研究資料及文獻(xiàn)資料

29.生殖毒性研究資料及文獻(xiàn)資料

30.致癌研究資料及文獻(xiàn)資料

31.藥物依賴性研究資料及文獻(xiàn)資料

32.免疫毒性和/或免疫原性研究資料及文獻(xiàn)資料

33.供臨床醫(yī)師參閱的臨床前藥理毒理研究結(jié)論綜述及擬進(jìn)行的臨床研究方案及有關(guān)文獻(xiàn)資料

34.新生物制品證書、生產(chǎn)申請表，附臨床研究批件

35.臨床藥代動(dòng)力學(xué)的研究資料及文獻(xiàn)資料

36.臨床研究負(fù)責(zé)單位總結(jié)的臨床研究資料，并附各臨床研究單位的分報(bào)告等資料

37.制定保存條件及效期的穩(wěn)定性試驗(yàn)資料

38.連續(xù)三批試產(chǎn)品原始制檢記錄及中檢所復(fù)核報(bào)告

39.制造和檢定試行規(guī)程及起草說明

40.內(nèi)包裝材料及選擇的依據(jù)

41.使用說明書及包裝、標(biāo)簽樣稿

42.臨床研究批件要求完成工作的完成情況及試驗(yàn)資料

43.生產(chǎn)用原材料、試劑、化學(xué)藥品的規(guī)格及標(biāo)準(zhǔn)

44.生產(chǎn)車間的GMP認(rèn)證證書

45.臨床前研究工作簡要總結(jié)

46.新生物制品轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)申請表，附試生產(chǎn)批件、制造和檢定試行規(guī)程、使用說明書

47.Ⅳ期臨床研究總結(jié)資料，并附各臨床研究單位的分報(bào)告等資料

48.試生產(chǎn)批件上要求完成工作的完成情況及試驗(yàn)資料

49.試生產(chǎn)工作總結(jié)，包括試生產(chǎn)概況、產(chǎn)量及全面質(zhì)量檢定結(jié)果等

50.連續(xù)3～5批試制品的原始制檢記錄及中檢所復(fù)檢報(bào)告

51.修改后的制造及檢定試行規(guī)程和使用說明書，以及修改說明并提供有關(guān)試驗(yàn)資料

52.連續(xù)3～5批試制品的穩(wěn)定性考核資料及所有試制品留樣考核結(jié)果總結(jié)

關(guān)于申報(bào)資料工程的幾點(diǎn)說明：

1.不包括基因治療和體細(xì)胞治療制劑。

2.每份研究資料后面都應(yīng)注明試驗(yàn)設(shè)計(jì)者、試驗(yàn)參加者、試驗(yàn)單位、試驗(yàn)日期、原始資料保存處和聯(lián)系人等。

3.藥學(xué)：

1〕常規(guī)方法生產(chǎn)制品申報(bào)臨床資料需報(bào)資料1～16項(xiàng)，采用DNA重組技術(shù)或雜交瘤技術(shù)制備制品尚需申報(bào)17～20項(xiàng)〔I、II類制品〕；申報(bào)新藥證書、試生產(chǎn)需報(bào)資料34～45項(xiàng)；轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)需報(bào)資料46～52項(xiàng)。13項(xiàng)中應(yīng)說明試制和檢定用主要儀器、設(shè)備、環(huán)境條件等。

2〕血液制品尚需增加病毒滅活工藝驗(yàn)證，請參照“血液制品去除或滅活病毒方法及其驗(yàn)證和論證程序”。

3〕特殊申請申報(bào)資料根據(jù)不同品種而定。

4〕單抗及修飾單抗詳細(xì)要求參照“人用鼠源性單克隆抗體質(zhì)量控制要點(diǎn)”。

5〕Ⅲ、Ⅳ類制品根據(jù)重大生產(chǎn)工藝改革情況或劑型、途徑改變情況而減少申報(bào)工程。

6〕V類制品主要申報(bào)1～3和41項(xiàng)。

4.藥理毒理研究：

1)許多新生物制品具有較強(qiáng)的種屬特異性、免疫原性等生物學(xué)特性，因此，申報(bào)資料的21～33項(xiàng)，對某些新生物制品可能涉及到選擇相關(guān)動(dòng)物種屬〔指受試物在此類動(dòng)物體內(nèi)能通過表達(dá)的受體或抗原決定簇產(chǎn)生藥理活性〕進(jìn)行體內(nèi)外試驗(yàn)。有時(shí)只能確定一種相關(guān)動(dòng)物用于試驗(yàn)。如確無可供選擇的相關(guān)動(dòng)物種屬，應(yīng)考慮使用表達(dá)人源受體的相關(guān)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或使用同系蛋白。

2)未經(jīng)修飾的人源性血液制品和特異性免疫球蛋白，可免報(bào)平安性研究資料〔不包括復(fù)方制品〕；微生態(tài)制品只需做一般平安試驗(yàn)，其他平安性研究資料可免報(bào)。

3)人體內(nèi)用單克隆抗體的有關(guān)申報(bào)資料的毒理研究要求，可參考“人用鼠源性單克隆抗體質(zhì)量控制要點(diǎn)”〔附件四〕中有關(guān)臨床前研究局部。

4)對第28項(xiàng)的說明：常規(guī)使用的遺傳毒性研究方法不適用于生物技術(shù)藥物，因此可免做。但如果對產(chǎn)品有某些擔(dān)憂〔例如結(jié)合蛋白產(chǎn)品中存在有機(jī)聯(lián)接物〕，應(yīng)考慮用相關(guān)的或新建立的方法進(jìn)行研究。

5)對第29項(xiàng)的說明：可根據(jù)產(chǎn)品的情況、臨床適應(yīng)癥和預(yù)期使用的病人群體決定是否進(jìn)行該項(xiàng)研究。

6)對第30項(xiàng)的說明：常規(guī)使用的致癌研究方法一般不適用于生物技術(shù)藥物，然而有些如生長因子、免疫抑制劑等產(chǎn)品，應(yīng)根據(jù)臨床用藥時(shí)間、病人群體和生物活性對其進(jìn)行潛在致癌性的評價(jià)。如具有加強(qiáng)或誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化細(xì)胞增生和克隆擴(kuò)增潛力的產(chǎn)品可能具有致瘤性，可用相關(guān)的惡性或正常細(xì)胞和動(dòng)物模型進(jìn)行研究。

7)對第32項(xiàng)的說明：免疫毒性研究主要考察擬用于刺激或抑制免疫系統(tǒng)的某些生物技術(shù)藥物，因其可能影響細(xì)胞介導(dǎo)的免疫或改變靶細(xì)胞外表抗原的表達(dá)〔可能導(dǎo)致自身免疫〕。

免疫毒理學(xué)評價(jià)的一個(gè)方面還應(yīng)包括評價(jià)潛在的免疫原性，許多生物技術(shù)藥物對動(dòng)物有免疫原性，其評價(jià)可在重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)中檢測抗體以助說明。

一般對蛋白質(zhì)產(chǎn)品呈陽性的豚鼠過敏試驗(yàn)結(jié)果不能預(yù)測人體反響，因此，對這類產(chǎn)品進(jìn)行該試驗(yàn)無必要。

8)對申報(bào)資料21～33項(xiàng)的有關(guān)具體技術(shù)要求可進(jìn)一步參考“藥理毒理申報(bào)資料技術(shù)要求”指導(dǎo)原那么的有關(guān)章節(jié)。

9)第五類制品主要申報(bào)21、22、24、25、26、33項(xiàng)(延長用藥周期和/或增加劑量者)。

〔二〕預(yù)防用新生物制品申報(bào)資料工程

1.新生物制品臨床研究申請表，附中檢所復(fù)檢報(bào)告

2.研究工作總結(jié)

3.新制品名稱、選題目的和依據(jù)、國內(nèi)外有關(guān)方面研究現(xiàn)狀〔包括專利〕、生產(chǎn)和使用情況綜述及主要參考文獻(xiàn)

4.生產(chǎn)用菌、毒種來源、歷史、全面檢定及鑒別資料和傳代限度試驗(yàn)資料

5.生產(chǎn)用菌、毒種毒力〔或毒性〕及毒力穩(wěn)定性、傳代限度試驗(yàn)研究資料

6.生產(chǎn)用菌、毒種原始種子庫和生產(chǎn)種子庫建庫及保存條件、貯存資料

7.生產(chǎn)用菌、毒種原始種子庫和生產(chǎn)種子庫外源因子檢查資料〔細(xì)菌、真菌、支原體和病毒〕

8.細(xì)胞基質(zhì)外源因子檢查、核型分析及致瘤性試驗(yàn)資料以及傳代使用代次限度試驗(yàn)資料

9.抗原性試驗(yàn)研究資料

10.免疫原性或效力試驗(yàn)研究資料

11.過敏原性研究資料

12.生產(chǎn)工藝確定及質(zhì)量檢定方法研究資料

13.中試產(chǎn)品質(zhì)量及產(chǎn)量全面總結(jié)資料

14.參考品或?qū)φ掌分苽浼皺z定資料

15.至少三批中試產(chǎn)品初步穩(wěn)定性試驗(yàn)資料

16.培養(yǎng)及生產(chǎn)、純化過程中參加對人有潛在毒性物質(zhì)檢查資料

17.供臨床研究用連續(xù)三批中試產(chǎn)品的制造和檢定原始記錄

18.中試產(chǎn)品制造和檢定規(guī)程草案及起草說明

19.擬進(jìn)行的臨床研究方案及有關(guān)文獻(xiàn)資料

20.生產(chǎn)用動(dòng)物合格證明,研制和中試車間面積、凈化、工藝走向圖紙，制備和檢定用主要儀器、設(shè)備等情況，省級藥品監(jiān)督管理部門核實(shí)蓋章

21.與原制品比擬資料

22.內(nèi)包裝材料及選擇的依據(jù)

23.工程菌〔細(xì)胞〕構(gòu)建的詳細(xì)資料，包括目的基因的獲得、表達(dá)載體詳細(xì)結(jié)構(gòu)、宿主菌〔細(xì)胞〕基因型、表型特征等

24.原始種子庫和生產(chǎn)種子庫建庫資料以及貯存復(fù)蘇過程中宿主載體表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定性試驗(yàn)資料

25.目的基因核苷酸序列及酶切圖譜以及特異性鑒別資料

26.目的基因表達(dá)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)確證資料，包括氨基酸組成分析、N末端15個(gè)氨基酸及C末端1～2個(gè)氨基酸序列分析、肽圖分析等

27.剩余人DNA含量、宿主蛋白剩余量測定

28.新生物制品證書、生產(chǎn)申請表，附臨床研究批件

29.臨床研究負(fù)責(zé)單位總結(jié)的臨床研究資料，并附各臨床研究單位的分報(bào)告等資料

30.制定保存條件及效期的穩(wěn)定性試驗(yàn)資料

31.連續(xù)三批試產(chǎn)品原始制檢記錄及中檢所復(fù)核報(bào)告

32.制造和檢定試行規(guī)程及起草說明

33.內(nèi)包裝材料及選擇的依據(jù)

34.使用說明書及包裝、標(biāo)簽樣稿及有關(guān)說明

35.臨床研究批件要求完成工作的試驗(yàn)資料

36.生產(chǎn)用原材料、試劑、化學(xué)藥品的規(guī)格及標(biāo)準(zhǔn)

37.試生產(chǎn)車間的GMP認(rèn)證證書

38.臨床前研究工作簡要總結(jié)

39.新生物制品轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)申請表，附試生產(chǎn)批件、制造和檢定試行規(guī)程、使用說明書

40.Ⅳ期臨床研究總結(jié)資料，并附各臨床研究單位的分報(bào)告等資料

41.試生產(chǎn)批件上要求完成工作的試驗(yàn)資料

42.試生產(chǎn)工作總結(jié)，包括試生產(chǎn)概況、產(chǎn)量及全面質(zhì)量檢定結(jié)果等

43.連續(xù)3～5批試制品的原始制檢記錄及中檢所復(fù)檢報(bào)告

44.修改后的制造及檢定試行規(guī)程和使用說明書，以及修改說明并提供有關(guān)試驗(yàn)資料

45.連續(xù)3～5批試制品的穩(wěn)定性考核資料及所有試制品留樣考核結(jié)果總結(jié)

說明：

1.不包括DNA疫苗。

2.每份研究資料后面都應(yīng)注明試驗(yàn)設(shè)計(jì)者、試驗(yàn)參加者、試驗(yàn)單位、試驗(yàn)日期、原始資料保存處和聯(lián)系人等。

3.臨床研究申請：用常規(guī)方法制備菌苗、疫苗、類毒素申報(bào)資料1～22項(xiàng)，用DNA重組技術(shù)產(chǎn)品尚需增加申報(bào)23～27項(xiàng)。

4.新生物制品證書、試生產(chǎn)申請需報(bào)28～38項(xiàng)；轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)申請需報(bào)39～45項(xiàng)。

〔三〕體外診斷用品申報(bào)資料工程

1.新生物制品證書/生產(chǎn)申請表。

2.研究工作總結(jié)。

3.新體外診斷用品的名稱，選題目的和依據(jù)，國內(nèi)外有關(guān)的研究現(xiàn)狀及生產(chǎn)使用情況綜述及主要參考文獻(xiàn)資料，專利檢索資料。

4.產(chǎn)品的研制報(bào)告：包括原材料的選擇、制造，生產(chǎn)工藝過程確實(shí)定，成品質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的建立，成品性能評價(jià)(靈敏度,特異性精密度等)，與國內(nèi)外同類產(chǎn)品進(jìn)行比擬等試驗(yàn)資料。

5.連續(xù)生產(chǎn)三批產(chǎn)品的原始制造檢定記錄復(fù)印件，及中國藥品生物制品檢定所對這三批產(chǎn)品進(jìn)行檢定的報(bào)告書。

6.穩(wěn)定性試驗(yàn)資料：至少三批產(chǎn)品在儲(chǔ)存溫度條件下保存至效期后兩個(gè)月的試驗(yàn)資料，及37℃保存的試驗(yàn)資料。檢測工程應(yīng)按成品檢定標(biāo),準(zhǔn)進(jìn)行。

7.臨床使用考核資料：選擇三家以上省級醫(yī)療衛(wèi)生單位用統(tǒng)一的方案進(jìn)行考核，提供一份總的臨床考核總結(jié)報(bào)告及各單位的分報(bào)告，附臨床考核原始數(shù)據(jù)。病例數(shù)一般不少于1000例，非常見病可酌減，但要有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

8.制造檢定規(guī)程草案：參照《中國生物制品規(guī)程》的格式書寫。

9.使用說明書：包括中英文名稱，規(guī)格，前言(原理、用途、特點(diǎn))，試劑盒組份、操作步驟，結(jié)果判定，考前須知，保存條件及有效期，生產(chǎn)單位名稱、地址、、等。

10.包裝材料及各組份標(biāo)簽實(shí)物或樣稿。

11.《藥品生產(chǎn)企業(yè)許可證》復(fù)印件。生產(chǎn)車間驗(yàn)收文件復(fù)印件。

12.轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)申請報(bào)告。

13.原批準(zhǔn)的試生產(chǎn)批件及試行制檢規(guī)程、使用說明書。

14.試生產(chǎn)期間完善生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)、銷售情況總結(jié)及臨床使用情況分析總結(jié)。

15.對試生產(chǎn)批件中要求進(jìn)行的研究工作完成情況的總結(jié)。

16.提供重新修改的產(chǎn)品制檢規(guī)程和使用說明書。

17.中國藥品生物制品檢定所對連續(xù)試生產(chǎn)的三批樣品的檢定報(bào)告書及原始生產(chǎn)制造檢定記錄復(fù)印件。

關(guān)于申報(bào)資料工程的幾點(diǎn)說明：

1.自制原材料為單克隆抗體或基因工程產(chǎn)品，申報(bào)資料要求參照附件三、四。

2.放射免疫分析藥盒申報(bào)資料工程及要求見附件十。

3.用于檢測病原體的體外核酸擴(kuò)增(PCR)診斷試劑盒申報(bào)資料工程及要求見附件十一。

4.體外診斷用品證書/生產(chǎn)申請需報(bào)1～11項(xiàng)，試生產(chǎn)轉(zhuǎn)正式生產(chǎn)申請需報(bào)12～17項(xiàng)。

5.試劑盒檢定所用的參比品由中國藥品生物制品檢定所提供和/或認(rèn)可。

6.CUTOFF值確實(shí)定：正常人標(biāo)本測定人數(shù)應(yīng)在400人份以上，所得數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

7.評價(jià)體外診斷試劑盒試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括兩方面：真實(shí)性和可靠性。

①真實(shí)性〔Validity〕：真實(shí)性指測量值與實(shí)際值符合的程度?！苍\斷試驗(yàn)應(yīng)能提供哪些人確實(shí)有病〔真陽性〕和哪些人確實(shí)無病〔真陰性〕的指標(biāo)，這是試驗(yàn)的真實(shí)性〕。評價(jià)真實(shí)性的兩個(gè)指標(biāo)：靈敏度〔Sensitivity〕及特異度〔Specificity〕。

靈敏度是試驗(yàn)檢出有病〔即陽性〕的人占病人總數(shù)的比例，即真陽性率。特異度指試驗(yàn)檢出無病〔即陰性〕的人占無病者總數(shù)的比例，即真陰性率。

表

評價(jià)一個(gè)試驗(yàn)真實(shí)性的資料歸納表

━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

試

驗(yàn)

有病〔真陽性〕

無病〔真陰性〕

合

計(jì)

────────────────────────────────

陽

性

A

B

A+B

────────────────────────────────

陰

性

C

D

C+D

────────────────────────────────

總

數(shù)

A+C

B+D

A+B+C+D

━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

用以下公式表示：

靈敏度〔真陽性率〕=A/(A+C)×100%

特異度〔真陰性率〕=D/(B+D)×100%

假陽性率=B/(B+D)×100%

假陰性率=C/(A+C)×100%

除上述指標(biāo)外，還可計(jì)算以下幾種指標(biāo)：

1)粗一致性〔Crudeagreement〕=(A+D)/(A+B+C+D)×100%

2)調(diào)整一致性〔adjustedagreement〕=1/4{A/(A+B)+A/(A+C)+D/(C+D)+D/(B+D)×100%}以上兩個(gè)指標(biāo)均說明診斷試驗(yàn)陽性與陰性結(jié)果均正確的百分比，亦反映試驗(yàn)的真實(shí)性。

3)約登指數(shù)〔youden'sindex〕=A/(A+C)+D/(B+D)-1約登指數(shù)是將靈敏度與特異度之和減1，指數(shù)可從0～1。約登指數(shù)愈大，其真實(shí)性亦愈大。

②可靠性〔reliability〕：可靠性是指試驗(yàn)在相同條件下重復(fù)試驗(yàn)獲得相同結(jié)果的穩(wěn)定程度。如試驗(yàn)結(jié)果為均數(shù)，可用變異系數(shù)〔coefficientofVariation〕表示。公式為

CV=S/X×100%

S為標(biāo)準(zhǔn)差，X為平均值

③預(yù)示值〔Predictivevalue〕：預(yù)示值是說明試驗(yàn)的診斷價(jià)值。試驗(yàn)陽性的預(yù)示值是指試驗(yàn)陽性者中患病者〔真陽性〕的可能性；試驗(yàn)陰性的預(yù)示值是指試驗(yàn)陰性者中為非病人〔真陰性〕的可能性。可用以下公式表示：

陽性試驗(yàn)的預(yù)示值=A/(A+B)×100%

陰性試驗(yàn)的預(yù)示值=D/(C+D)×100%

附件三：

人用重組DNA制品質(zhì)量控制要點(diǎn)

1.引言

由于分子遺傳學(xué)、核酸化學(xué)及重組DNA(rDNA)技術(shù)的迅速開展，現(xiàn)已能夠確定和獲得許多天然活性蛋白的編碼基因，將其插入表達(dá)載體或引入某種宿主細(xì)胞后，能有效地表達(dá)該基因產(chǎn)物，再經(jīng)別離、純化和檢定，可得到用于預(yù)防和治療某些人類疾病的制品，諸如現(xiàn)有的乙型肝炎疫苗、胰島素、生長激素、干擾素等。

用不同于常規(guī)方法的rDNA技術(shù)生產(chǎn)的制品，是近年來出現(xiàn)的新產(chǎn)品，評價(jià)其平安性和有效性亦不同于常規(guī)方法。目前在這方面的生產(chǎn)和質(zhì)量控制經(jīng)驗(yàn)不多，而且這一領(lǐng)域中的知識(shí)和技術(shù)還在不斷開展，但是，為了有利于這類制品在我國的研究和開展，并為這類制品的審評提供依據(jù)，有必要制定一個(gè)原那么性指導(dǎo)文件，以保證在人群中試驗(yàn)或應(yīng)用時(shí)平安有效。

本“質(zhì)量控制要點(diǎn)”〔以下簡稱《要點(diǎn)》〕不可能面面俱到，可能有許多專門技術(shù)問題會(huì)出現(xiàn)，對于這類問題或某一特定制品，那么應(yīng)視具體問題具體研究決定。本《要點(diǎn)》亦將隨科學(xué)技術(shù)開展和經(jīng)驗(yàn)積累而逐步完善。

2.總那么

2.1本《要點(diǎn)》適用于rDNA技術(shù)生產(chǎn)并在人體內(nèi)應(yīng)用的制品。

2.2凡屬與一般生物制品有關(guān)的質(zhì)量控制，均按現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》執(zhí)行。

有關(guān)生產(chǎn)設(shè)施的要求應(yīng)參照國家藥品監(jiān)督管理局《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)》1999年版執(zhí)行。

3.質(zhì)量控制要求

3.1原材料的控制

表達(dá)載體和宿主細(xì)胞

應(yīng)提供有關(guān)表達(dá)載體詳細(xì)資料，包括基因的來源、克隆和鑒定，表達(dá)載體的構(gòu)建、結(jié)構(gòu)和遺傳特性。應(yīng)說明載體組成各局部的來源和功能，如復(fù)制子和啟動(dòng)子來源，或抗生素抗性標(biāo)志物。提供至少包括構(gòu)建中所用位點(diǎn)的酶切圖譜。應(yīng)提供宿主細(xì)胞的資料，包括細(xì)胞株〔系〕名稱、來源、傳代歷史、檢定結(jié)果及根本生物學(xué)特性等。

應(yīng)詳細(xì)說明載體引入宿主細(xì)胞的方法及載體在宿主細(xì)胞內(nèi)的狀態(tài)，是否整合到染色體內(nèi)，拷貝數(shù)。應(yīng)提供宿主和載體結(jié)合后的遺傳穩(wěn)定性資料。

3.1.2

應(yīng)提供插入基因和表達(dá)載體兩側(cè)端控制區(qū)的核苷酸序列。所有與表達(dá)有關(guān)的序列均應(yīng)詳細(xì)表達(dá)。

表達(dá)應(yīng)詳細(xì)表達(dá)在生產(chǎn)過程中，啟動(dòng)和控制克隆基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)所采用的方法及表達(dá)水平。

3.2生產(chǎn)的控制

主細(xì)胞庫〔MASTERCELLBANK〕

rDNA制品的生產(chǎn)應(yīng)采用種子批〔SEEDLOT〕系統(tǒng)。從已建立的主細(xì)胞庫中，再進(jìn)一步建立生產(chǎn)細(xì)胞庫〔WCB〕。

含表達(dá)載體的宿主細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過克隆而建立主細(xì)胞庫。在此過程中，在同一實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)，不得同時(shí)操作兩種不同細(xì)胞〔菌種〕；一個(gè)工作人員亦不得同時(shí)操作兩種不同細(xì)胞或菌種。

應(yīng)詳細(xì)記述種子材料的來源、方式、保存及預(yù)計(jì)使用壽命。應(yīng)提供在保存和復(fù)蘇條件下宿主載體表達(dá)系統(tǒng)的穩(wěn)定性證據(jù)。采用新的種子批時(shí)，應(yīng)重新作全面檢定。

高等真核細(xì)胞用于生產(chǎn)時(shí)，細(xì)胞的鑒別標(biāo)志，如特異性同功酶或免疫學(xué)或遺傳學(xué)特征，對鑒別所建立的種子是有用的。有關(guān)所用傳代細(xì)胞的致腫瘤性應(yīng)有詳細(xì)報(bào)告〔參照：WHO生物制品規(guī)程N(yùn)o.37〕。如采用微生物培養(yǎng)物為種子，那么應(yīng)表達(dá)其特異表型特征。

一般情況下，在原始種子階段應(yīng)確證克隆基因的DNA序列。但在某些情況下，例如傳代細(xì)胞基因組中插入多拷貝基因。在此階段不適合對克隆基因作DNA序列分析。在此情況下，可采用總細(xì)胞DNA的雜交印染分析，或作mRNA的序列分析。對最終產(chǎn)品的特征鑒定應(yīng)特別注意。

種子批不應(yīng)含有可能致癌因子〔在使用情況下〕，不應(yīng)含有感染性外源因子，如細(xì)菌、支原體、真菌及病毒。

但是有些細(xì)胞株含有某些內(nèi)源病毒，例如逆轉(zhuǎn)錄病毒，且不易除去。但當(dāng)已確知在原始細(xì)胞庫或載體局部中污染此類特定內(nèi)源因子時(shí)，那么應(yīng)能證明在生產(chǎn)的純化過程可使之滅活或去除。

有限代次生產(chǎn)

用于培養(yǎng)和誘導(dǎo)基因產(chǎn)物的材料和方法應(yīng)有詳細(xì)資料。對培養(yǎng)過程及收獲時(shí)，應(yīng)有靈敏的檢測措施控制微生物污染。

應(yīng)提供培養(yǎng)生長濃度和產(chǎn)量恒定性方面的數(shù)據(jù)，并應(yīng)確立廢棄一批培養(yǎng)物的指標(biāo)。根據(jù)宿主細(xì)胞／載體系統(tǒng)的穩(wěn)定性資料，確定在生產(chǎn)過程中允許的最高細(xì)胞倍增數(shù)或傳代代次，并應(yīng)提供最適培養(yǎng)條件的詳細(xì)資料。

在生產(chǎn)周期結(jié)束時(shí)，應(yīng)監(jiān)測宿主細(xì)胞／載體系統(tǒng)的特性，例如質(zhì)?？截悢?shù)、宿主細(xì)胞中表達(dá)載體存留程度、含插入基因的載體的酶切圖譜。一般情況下，用來自一個(gè)原始細(xì)胞庫的全量培養(yǎng)物，必要時(shí)應(yīng)做一次基因表達(dá)產(chǎn)物的核苷酸序列分析。

連續(xù)培養(yǎng)生產(chǎn)

根本要求同。

應(yīng)提供經(jīng)長期培養(yǎng)后所表達(dá)基因的分子完整性資料，以及宿主細(xì)胞的表型和基因型特征。每批培養(yǎng)的產(chǎn)量變化應(yīng)在規(guī)定范圍內(nèi)。對可以進(jìn)行后處理及應(yīng)廢棄的培養(yǎng)物，應(yīng)確定指標(biāo)。從培養(yǎng)開始至收獲，應(yīng)有靈敏的檢查微生物污染的措施。

根據(jù)宿主／載體穩(wěn)定性及表達(dá)產(chǎn)物的恒定性資料，應(yīng)規(guī)定連續(xù)培養(yǎng)的時(shí)間。如屬長時(shí)間連續(xù)培養(yǎng)，應(yīng)根據(jù)宿主／載體穩(wěn)定性及產(chǎn)物特性的資料，在不同間隔時(shí)間作全面檢定。

純化

對于收獲、別離和純化的方法應(yīng)詳細(xì)記述，應(yīng)特別注意污染病毒、核酸以及有害抗原性物質(zhì)的去除。

如采用親和層析技術(shù)，例如用單克隆抗體，應(yīng)有檢測可能污染此類外源性物質(zhì)的方法，不應(yīng)含有可測出的異種免疫球蛋白。

對整個(gè)純化工藝應(yīng)進(jìn)行全面研究，包括能夠去除宿主細(xì)胞蛋白、核酸、糖、病毒或其它雜質(zhì)以及在純化過程中參加的有害的化學(xué)物質(zhì)等。

關(guān)于純度的要求可視制品的用途和用法而確定，例如，僅使用一次或需反復(fù)屢次使用；用于健康人群或用于重癥患者；對純度可有不同程度要求。

3.3最終產(chǎn)品的控制

應(yīng)建立有關(guān)產(chǎn)品的鑒別、純度、穩(wěn)定性和活性等方面的試驗(yàn)方法。檢測的必要性和純度要求取決于多種因素：產(chǎn)品性質(zhì)和用途、生產(chǎn)和純化工藝及生產(chǎn)工藝的經(jīng)驗(yàn)。一般說來以下試驗(yàn)對控制產(chǎn)品質(zhì)量是可以采用的。

物理化學(xué)鑒定

.1氨基酸成份分析

完整的氨基酸成份分析結(jié)果，應(yīng)包括甲硫氨酸、半胱氨酸及色氨酸的準(zhǔn)確值。氨基酸成份分析結(jié)果應(yīng)為三次分別水解樣品測定后的平均值。

.2局部氨基酸序列分析

局部氨基末端序列分析〔N端15個(gè)氨基酸〕可作為rDNA蛋白質(zhì)和肽的重要鑒別指標(biāo)。

.3肽圖分析

肽圖分析可作為與天然產(chǎn)品或參考品作精密比擬的手段。與氨基酸成分和序列分析結(jié)果合并，可作為蛋白質(zhì)的精確鑒別。對含二硫鍵的制品，肽圖可確證制品中二硫鍵的排列。

.4聚丙烯酰胺凝膠電泳〔PAGE〕及等電聚焦

PAGE及等電聚焦有助于證實(shí)蛋白質(zhì)和肽類的純度和分子量，亦可作為鑒別試驗(yàn)。

PAGE應(yīng)包括在復(fù)原和非復(fù)原條件下試驗(yàn)，且應(yīng)有適宜的分子量標(biāo)記物作參比。凝膠帶應(yīng)用靈敏的方法染色，例如銀染法，可測定微量蛋白質(zhì)，亦有助于檢出非蛋白質(zhì)物質(zhì)，例如核酸、糖及脂類。對分子量小于8000的肽類，PAGE測得的分子量可能不準(zhǔn)確。

.5高效液相色譜〔HPLC〕

測定蛋白質(zhì)和肽類的純度，HPLC是一種有用的方法，在某些情況下，還可用來評定其分子構(gòu)型和用作鑒別試驗(yàn)。

.6剩余細(xì)胞DNA測定

必須用敏感的方法測定來源于宿主細(xì)胞的剩余DNA含量，這對于用哺乳動(dòng)物傳代細(xì)胞〔轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系〕生產(chǎn)的制品尤為重要。一般認(rèn)為剩余DNA含量小于100pg／劑是平安的，但應(yīng)視制品的用途、用法和使用對象而決定可接受的限度。

.7其它外源性物質(zhì)

例如，用單克隆抗體〔鼠源〕親和層析純化的制品，應(yīng)測定可能存在的鼠IgG，細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的制品，應(yīng)測定剩余小牛血清含量〔以p.p.m表示〕；在培養(yǎng)及純化過程中所添加的可能有害物質(zhì)，亦應(yīng)有相應(yīng)的測定數(shù)據(jù)。

生物學(xué)測定

.1鑒別試驗(yàn)

在可能情況下，應(yīng)用參考品將rDNA制品與天然產(chǎn)品通過生物學(xué)比擬試驗(yàn)，確定其與天然產(chǎn)品是一致的。

.2效價(jià)測定

采用國際或國家參考品，或經(jīng)過國家檢定機(jī)構(gòu)認(rèn)可的參考品，以體內(nèi)或體外法測定制品的生物學(xué)活性，并標(biāo)明其活性單位。

.3特異比活性測定

在測定生物學(xué)活性的根底上，對有些制品還應(yīng)測定其特異比活性，以活性單位／重量表示之。

.4熱原質(zhì)試驗(yàn)

應(yīng)采用注射家兔法或鱟試驗(yàn)法〔LAL〕作熱原質(zhì)檢測〔《中國生物制品規(guī)程》〕，控制標(biāo)準(zhǔn)可參照天然制品的要求。

.5病毒污染檢查

應(yīng)采用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基質(zhì)和培養(yǎng)條件，檢查可能污染的病毒，應(yīng)證實(shí)最終制品不含外源病毒。

.6無菌試驗(yàn)

參照現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》進(jìn)行無菌試驗(yàn)，應(yīng)證實(shí)最終制品無細(xì)菌污染。

.7抗原性物質(zhì)檢查

在有必要時(shí)，如制品屬大劑量反復(fù)使用者，應(yīng)測定最終制品中可能存在的抗原性物質(zhì)，如宿主細(xì)胞、亞細(xì)胞組分及培養(yǎng)基成份等?；颊叻磸?fù)接受大劑量的這類制品時(shí)，應(yīng)密切監(jiān)測由這些抗原可能產(chǎn)生的抗體或變態(tài)反響。

.8毒性試驗(yàn)

可參照現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》執(zhí)行。

4.臨床前平安性評價(jià)

臨床前平安性試驗(yàn)的目的主要是確定新制品是否會(huì)在人體引起未能預(yù)料的不良反響。但是，用于一般化學(xué)藥物的傳統(tǒng)平安性或毒性試驗(yàn)對rDNA產(chǎn)品不一定適用，用傳統(tǒng)毒性試驗(yàn)來評價(jià)rDNA產(chǎn)品往往有困難，并受多種因素的影響。例如，某些蛋白質(zhì)，如干擾素，具有高度種屬特異性，這種人的蛋白質(zhì)對人的藥理學(xué)活性遠(yuǎn)超于對動(dòng)物的活性，而且人的蛋白質(zhì)氨基酸序列，常常與來自其它種系的蛋白質(zhì)不同，例如糖基就不一樣。因而由基因工程技術(shù)所制備的蛋白質(zhì)或肽類往往會(huì)在人體以外的其它宿主中產(chǎn)生免疫應(yīng)答，其生物學(xué)效應(yīng)有所改變，并可能因形成免疫復(fù)合物而導(dǎo)致有毒性反響，而這樣產(chǎn)生的毒性反響與人體平安性顯然無關(guān)。

綜上述理由，對rDNA產(chǎn)品的臨床前平安性試驗(yàn)要求，難以一概而論，應(yīng)采取較為靈活的處置方法。除了一般生物制品的毒性試驗(yàn)要求之外，其它如長期毒性試驗(yàn)、藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)、藥理學(xué)試驗(yàn)、毒理學(xué)試驗(yàn)，以及致畸和致突變等試驗(yàn)，應(yīng)根據(jù)制品性質(zhì)，與國家檢定機(jī)構(gòu)及藥品審評中心商定所需進(jìn)行的試驗(yàn)工程和方法，以及判定標(biāo)準(zhǔn)。

5.臨床試驗(yàn)

用rDNA技術(shù)所生產(chǎn)的制品必需經(jīng)過臨床試驗(yàn)，以評價(jià)其平安性和有效性。

附件四：

人用鼠源性單克隆抗體質(zhì)量控制要點(diǎn)

本品系用雜交瘤技術(shù)將抗原免疫動(dòng)物后，取脾或外周血淋巴細(xì)胞或經(jīng)體外免疫獲得的免疫淋巴細(xì)胞與相應(yīng)的骨髓瘤細(xì)胞融合建立穩(wěn)定分泌特異抗體的雜交瘤細(xì)胞株，通過體內(nèi)法或體外培養(yǎng)法制備單克隆抗體，經(jīng)提取純化獲得的特異性單克隆抗體制劑。用于有關(guān)疾病的診斷或治療。

1雜交瘤細(xì)胞

1.1親本細(xì)胞

骨髓瘤細(xì)胞

SP2/0或其他適宜的骨髓瘤細(xì)胞系。應(yīng)為不合成或不分泌免疫球蛋白鏈型，具有符合骨髓瘤細(xì)胞的染色體條數(shù)，并有明確的來源歷史及符合要求的保存條件。

免疫親代細(xì)胞

經(jīng)抗原免疫的鼠脾B淋巴細(xì)胞或外周血B淋巴細(xì)胞。

應(yīng)有明確的免疫原來源、性質(zhì)及動(dòng)物種系，免疫原詳細(xì)的制備過程。

適宜的免疫方法及免疫淋巴細(xì)胞制備的方法。

1.2細(xì)胞融合

末次免疫后第3天取脾制成細(xì)胞懸液，與骨髓瘤細(xì)胞按一定的比例混合并在融合劑作用下或在電融合儀中按常規(guī)法或其他適宜的方法進(jìn)行細(xì)胞融合。

1.3克隆化

用ELISA或其他適宜方法篩選出分泌目的抗體的雜交瘤經(jīng)有限稀釋法或其他適宜方法對其進(jìn)行克隆化，直至獲得具有穩(wěn)定分泌單克隆抗體能力的雜交瘤細(xì)胞系。

1.4雜交瘤細(xì)胞檢定

抗體分泌穩(wěn)定性

經(jīng)克隆化及連續(xù)傳代后檢查。連續(xù)克隆化后至檢測單克隆抗體陽性率達(dá)100%，并在體外傳代3個(gè)月以上細(xì)胞株能保持穩(wěn)定的分泌抗體。

細(xì)胞核學(xué)特征

檢查細(xì)胞分裂中期染色體。應(yīng)符合雜交瘤細(xì)胞的核型。

鼠源病毒檢查

按附錄1要求檢測鼠源病毒。

.1細(xì)胞接種法

細(xì)胞及培養(yǎng)上清分別接種人2BS細(xì)胞、Vero細(xì)胞，接種量為107。樣品接種細(xì)胞后，傳兩代，制片，用IFA法檢測病毒抗原。

.2動(dòng)物接種法

樣品接種出生24小時(shí)以內(nèi)乳小鼠兩窩〔至少10只〕，15～20g成年小鼠10只，300～350g的豚鼠5只。每只動(dòng)物腹腔接種107活細(xì)胞。觀察4周，存活率應(yīng)在80%以上；另外接種對淋巴脈絡(luò)叢腦膜炎病毒〔LCMV〕敏感的成年小鼠10只，腦內(nèi)接種106活細(xì)胞，觀察4周，存活率應(yīng)在80%以上。用ELISA或其他適宜的方法檢測血清中病毒抗體。

.3雞胚接種法

樣品接種SPF雞胚尿囊腔和卵黃囊。每種途徑至少10只，每只接種106活細(xì)胞，孵育5天，用豚鼠和雞紅血球做HA法檢測病毒血凝素，同組雞胚中至少80%保持健康并存活，試驗(yàn)有效。單抗制品不應(yīng)有鼠源病毒污染。

對產(chǎn)生單克隆抗體的鼠類細(xì)胞系，一般認(rèn)為具有產(chǎn)生傳染性鼠類反轉(zhuǎn)錄病毒的能力，可以不做反轉(zhuǎn)錄病毒檢測，但應(yīng)有資料證明制造工藝中能去除或滅活反轉(zhuǎn)錄病毒。

支原體檢查

.1培養(yǎng)法

細(xì)胞及培養(yǎng)上清分別接種支原體培養(yǎng)基，按《生物制品檢定標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)那么》進(jìn)行。應(yīng)設(shè)陰、陽性對照。

.2DNA熒光染色法

細(xì)胞及培養(yǎng)上清分別與指示細(xì)胞共同培養(yǎng)，按《生物制品檢定標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)那么》進(jìn)行。

無菌試驗(yàn)

按《生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。

2單克隆抗體的檢定

2.1免疫球蛋白類及亞類

用免疫雙擴(kuò)散法或其他適宜的方法測定。

2.2親和力

用適宜的方法測定單抗的親和常數(shù)或相對親和力。

2.3特異性

測定單抗對靶抗原的特異性；分析單抗識(shí)別的抗原決定簇。

2.4交叉反響

按附錄2要求。

免疫組織化學(xué)法測定單抗與人體組織交叉反響，用冰凍及石蠟包埋的成年人及胎兒各臟器組織測定。來源于腫瘤相關(guān)抗原的單抗應(yīng)進(jìn)行與各種腫瘤組織的交叉反響試驗(yàn)。

2.5效價(jià)測定

用ELISA法或其他特異性方法測定。

3其他原材料

3.1細(xì)胞培養(yǎng)用小牛血清

支原體檢測應(yīng)為陰性。經(jīng)小量試驗(yàn)適于雜交瘤細(xì)胞生長。

3.2培養(yǎng)液

應(yīng)有培養(yǎng)液來源，質(zhì)量指標(biāo)。

3.3化學(xué)試劑

規(guī)格應(yīng)到達(dá)分析純以上。

4細(xì)胞庫的建立和單克隆抗體的生產(chǎn)

為了保證長期、穩(wěn)定的生產(chǎn)出符合要求的高質(zhì)量單抗，首先要建立高標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞庫。同時(shí)單抗生產(chǎn)場所必須符合GMP要求，潔凈無污染，生產(chǎn)人員無傳染病，不得從事其他可導(dǎo)致傳染原污染單抗制劑的工作；無關(guān)人員不得進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)內(nèi)。在同一車間內(nèi)，不得同時(shí)生產(chǎn)其他無關(guān)單抗。

4.1細(xì)胞庫

建立原始細(xì)胞庫和生產(chǎn)細(xì)胞庫，幾種細(xì)胞株用于同一目的生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)分別建立細(xì)胞庫及種子批。

原始細(xì)胞庫

為雜交瘤細(xì)胞建立時(shí)較原始的細(xì)胞管，即融合細(xì)胞管、一次克隆及屢次克隆的細(xì)胞管。

種子細(xì)胞庫

由原始細(xì)胞庫中建株細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)凍存的細(xì)胞種子。每一批細(xì)胞管數(shù)不應(yīng)少于20支，貼上標(biāo)簽放入液氮中保存。種子批應(yīng)進(jìn)行外源因子檢查，包括細(xì)菌、真菌、支原體及病毒污染的檢查。

生產(chǎn)細(xì)胞庫

經(jīng)檢定合格后的雜交瘤細(xì)胞按生產(chǎn)條件大量培養(yǎng)、凍存的細(xì)胞管為生產(chǎn)細(xì)胞庫。每一生產(chǎn)細(xì)胞批細(xì)胞管數(shù)不少于10支，每次生產(chǎn)腹水時(shí)取生產(chǎn)細(xì)胞管一支復(fù)蘇、擴(kuò)增及生產(chǎn)，不再回凍。細(xì)胞庫應(yīng)詳細(xì)紀(jì)錄存放細(xì)胞管位置、代數(shù)、管數(shù)、凍存、復(fù)蘇的情況，并有專人負(fù)責(zé)。同時(shí)要進(jìn)行各種外源因子檢測，保證沒有污染。

4.2單克隆抗體制備

小鼠腹水法

.1小鼠

制備腹水必需使用SPF級小鼠，生產(chǎn)用鼠必需經(jīng)過檢查，應(yīng)無鼠源病毒污染，并有合格證明。在腹水生產(chǎn)過程中如發(fā)現(xiàn)動(dòng)物不健康、咬傷、感染者均應(yīng)廢棄。

.2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施應(yīng)有相關(guān)部門頒發(fā)的二級以上的合格證。

.3細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)

取生產(chǎn)批細(xì)胞管一支復(fù)蘇，加營養(yǎng)液進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，一支生產(chǎn)細(xì)胞只用一次，不再凍存。

.4細(xì)胞接種

制備腹水均須在無菌條件下完成。注射雜交瘤細(xì)胞之前，每只小鼠腹腔注射液體石蠟或降植烷0.5ml。一般在1周后每只小鼠注射雜交瘤細(xì)胞1～3×106。

.5腹水的采集

注射細(xì)胞后一般7～10天，或在小鼠瀕死前一次性采集腹水，亦可屢次收集。離心別離出上清即為粗提抗體，注明批號(hào)、采集日期，置-20℃保存。

細(xì)胞培養(yǎng)法

可以采用發(fā)酵罐培養(yǎng)，亦可用細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)收采上清液制備單克隆抗體。

.1種子細(xì)胞

來源于生產(chǎn)細(xì)胞庫。

.2培養(yǎng)基

用無牛血清或低牛血清培養(yǎng)基，不能用β-內(nèi)酰胺類抗生素。

.3抗體收集

可一次性收集，也可采用連續(xù)收集法。每一支安瓿種子細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)后收集的上清為一個(gè)批號(hào)

4.3粗制抗體檢測

無論是小鼠腹水法還是細(xì)胞培養(yǎng)法制備的單克隆抗體，都需要進(jìn)行如下檢定。

無菌試驗(yàn)

按《生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。

支原體檢查

按項(xiàng)進(jìn)行。

鼠源病毒檢查

按項(xiàng)進(jìn)行。

效價(jià)測定

用ELISA法或其他特異性檢測方法測定。合格的用于抗體純化。

4.4抗體純化

可采用鹽析法、分子篩層析、離子交換等適宜的方法。

盡可能選用一些不引起免疫球蛋白聚合、變性等的純化方法及條件。

應(yīng)驗(yàn)證所用的純化方法能去除可能存在的非目標(biāo)產(chǎn)物污染，如不需要的免疫球蛋白分子、宿主DNA、病毒及用于生產(chǎn)腹水抗體的刺激物〔如降植烷、液體石蠟〕。

連續(xù)生產(chǎn)〔至少3批〕的各批產(chǎn)品必須符合質(zhì)檢要求，批間具有良好的重復(fù)性。

4.5純化后處理

滅活

必要時(shí)56℃水浴滅活30分鐘，離心收集上清。

合并

不同亞批的合格制品合并后應(yīng)在2～8℃放置一個(gè)月以上，去除局部不穩(wěn)定蛋白。

除菌分裝

將經(jīng)滅活的單抗用0.22μm濾膜過濾，過濾后進(jìn)行分裝。

5檢定

5.1半成品

活性檢測

用ELISA法或其他特異性檢測方法測定?？贵w活性應(yīng)≥參比品。

純度測定

.1電泳法

復(fù)原和非復(fù)原條件SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定抗體純度。掃描后計(jì)算出免疫球蛋白含量，含量應(yīng)到達(dá)95%以上，二聚體≤10%。

.2HPLC法

純度應(yīng)≥95%。

多聚體測定

用FPLC或HPLC法，用適宜的分子篩層析，多聚體應(yīng)≤10%。

蛋白質(zhì)含量測定

用Lowry法或其他適宜的方法測定。

DNA含量測定

用DNA分子雜交法。提取待檢制品中的DNA，用骨髓瘤細(xì)胞制備的DNA探針與待檢樣品進(jìn)行雜交。以不同含量的骨髓瘤細(xì)胞DNA作為工作標(biāo)準(zhǔn)，每一劑量剩余DNA含量不應(yīng)超過100pg。

交叉反響性測定

用免疫組織化學(xué)及細(xì)胞化學(xué)方法檢查。應(yīng)提供3批單抗與人體組織器官的交叉反響性材料。結(jié)果不應(yīng)與人體組織器官發(fā)生交叉反響。如腫瘤相關(guān)抗原單抗，應(yīng)進(jìn)行各種腫瘤組織的交叉反響測定。

5.2成品檢定

物理檢查

液體制劑應(yīng)為接近無色微帶乳光的澄清液體，不應(yīng)含有異物、混濁或搖不散的沉淀。

化學(xué)檢查

.1pH值

電位法測定，pH值應(yīng)為7.0±0.5。

.2蛋白質(zhì)含量

用Lowry法測定，含量應(yīng)在標(biāo)示值的90%～110%之內(nèi)。

活性測定

按項(xiàng)進(jìn)行。

無菌試驗(yàn)

按《生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。

平安試驗(yàn)

.1豚鼠試驗(yàn)

用體重300～400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射檢品5ml，注射后半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反響，觀察7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。

.2小白鼠試驗(yàn)

用體重18～20g小白鼠10只，每只腹腔注射檢品0.5ml，注射后半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反響，繼續(xù)觀察7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。

熱原質(zhì)試驗(yàn)

按照《生物制品熱原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。家兔注射劑量＝〔人用劑量÷50〕×20×家兔體重〔kg〕。不應(yīng)有致熱作用。也可用鱟試劑法，1mg/ml蛋白濃度不應(yīng)檢測出有凝集活性。

異常毒性試驗(yàn)

每批成品應(yīng)進(jìn)行異常毒性試驗(yàn)。腹腔注射5只體重17～22g小鼠和2只體重250～350g的豚鼠，每只小鼠注射1個(gè)人用劑量，但不超過1ml；每只豚鼠注射劑量不超過5ml。動(dòng)物至少存活7天以上，應(yīng)無任何異常中毒反響。

水分測定

產(chǎn)品如為凍干制品，應(yīng)進(jìn)行剩余水分測定，其含量應(yīng)≤3%。

6經(jīng)修飾的單克隆抗體

為了提高單克隆抗體在治療和體內(nèi)診斷中的作用，常用單抗與毒素、藥物、放射性核素或其他物質(zhì)偶聯(lián)形成免疫結(jié)合物，或在同一段多肽鏈中包含非免疫球蛋白和免疫球蛋白序列的嵌合重組蛋白來獲得。研究者除對前面提到的有關(guān)未偶聯(lián)單克隆抗體〔未修飾單克隆體〕的要求外，還應(yīng)提供以下內(nèi)容：

6.1免疫結(jié)合物的構(gòu)建

應(yīng)提供構(gòu)建免疫結(jié)合物所用試劑和過程的詳細(xì)資料，包括：

描述與單克隆抗體連接的成分如：毒素、藥物、酶及細(xì)胞因子，包括：所有成分的來源、結(jié)構(gòu)、制法、純度及特征。

制備免疫結(jié)合物所用化學(xué)試劑的描述，如連接劑和螯合劑。這些資料應(yīng)該包括試劑來源、制備方法，以及合成或純化時(shí)殘留雜質(zhì)的測定等內(nèi)容。還應(yīng)提供合成反響途徑的圖解，以及與免疫結(jié)合物制備中所用化學(xué)試劑毒性相關(guān)資料。

在確定成品的標(biāo)準(zhǔn)時(shí)應(yīng)首先確定該原料與抗體的平均結(jié)合率及每個(gè)抗體被結(jié)合部分的數(shù)量，并揭示免疫球蛋白置換數(shù)量、效力和穩(wěn)定性間的關(guān)系。

用重組DNA技術(shù)制備的制品〔如來源于轉(zhuǎn)染細(xì)胞系或微生物培養(yǎng)基，嵌合的、易形的，互補(bǔ)決定區(qū)［CDR］接合的及單鏈Fv抗體，以及重組免疫結(jié)合物〕應(yīng)提供構(gòu)建和制備過程的全部資料。重組免疫結(jié)合物的穩(wěn)定性應(yīng)認(rèn)真研究。因聚合物形成構(gòu)形改變或變性而減弱了特異免疫反響性〔如通過重組Fvs形成“雙抗”〕可能導(dǎo)致藥代動(dòng)力學(xué)的改變和/或與非靶組織結(jié)合。

6.2免疫結(jié)合物的純度

應(yīng)采取特殊措施保證抗體盡可能無外源免疫球蛋白或非免疫球蛋白污染，因這些污染物質(zhì)在構(gòu)建免疫結(jié)合物過程中，能與核素、毒素或藥物發(fā)生反響。

應(yīng)規(guī)定最終產(chǎn)品中游離抗體或游離組分的限量。活性中間體應(yīng)被滅活或去除。

6.3免疫結(jié)合物的免疫反響性，效力及穩(wěn)定性

毒素或藥物偶聯(lián)至抗體上會(huì)改變其中任一成分的活性。

應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄔu估偶聯(lián)前后的免疫反響性。

免疫結(jié)合物非免疫球蛋白成分的活性應(yīng)在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候用效力試驗(yàn)來進(jìn)行評估〔例如，毒素、細(xì)胞因子或酶等)，用于造影的放射性免疫結(jié)合物除外。

免疫結(jié)合物構(gòu)建后，應(yīng)確定免疫反響性變化的百分率限值，并作為產(chǎn)品規(guī)格的組成局部。

應(yīng)通過在合并的人血清中37℃無菌條件下孵育，來檢測免疫結(jié)合物在體外的穩(wěn)定性。假設(shè)所用抗凝劑不會(huì)影響免疫結(jié)合物的穩(wěn)定性，