鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院結(jié)核病痰涂片檢查點(diǎn)設(shè)置及實(shí)驗(yàn)室操作專項(xiàng)規(guī)程

附件：鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院結(jié)核病痰涂片檢驗(yàn)點(diǎn)設(shè)置及試驗(yàn)室操作規(guī)程在以縣（市）為單位實(shí)施現(xiàn)代結(jié)核病控制策略（DOTS）地域，經(jīng)過在鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院設(shè)置結(jié)核病痰涂片檢驗(yàn)點(diǎn)（以下簡稱查痰點(diǎn)），方便肺結(jié)核可疑癥狀者和疑似肺結(jié)核病人就診查痰，以達(dá)成提升涂陽肺結(jié)核病人發(fā)覺率，縮短傳染性肺結(jié)核病人就診延誤和診療延誤時(shí)間，降低結(jié)核病傳輸目標(biāo)。一、鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院查痰點(diǎn)工作職責(zé)（一）鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院查痰點(diǎn)負(fù)責(zé)轄區(qū)及周圍鄉(xiāng)鎮(zhèn)肺結(jié)核可疑癥狀者和疑似肺結(jié)核病人痰檢工作。（二）查痰點(diǎn)是結(jié)核病診療初篩單位，凡痰涂片陽性病人或痰涂片陰性但高度懷疑肺結(jié)核者需轉(zhuǎn)至縣級(jí)結(jié)防機(jī)構(gòu)深入檢驗(yàn)確診。（三）鏡檢陽性痰涂片2日內(nèi)應(yīng)得到縣級(jí)結(jié)防機(jī)構(gòu)試驗(yàn)室確定，陰性涂片一周內(nèi)應(yīng)得到縣級(jí)結(jié)防機(jī)構(gòu)試驗(yàn)室復(fù)驗(yàn)。痰涂片轉(zhuǎn)送方法可依據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r決定。（四）鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院查痰點(diǎn)試驗(yàn)室須按要求做好痰涂片保留和各項(xiàng)資料登記、統(tǒng)計(jì)管理工作。二、查痰點(diǎn)基礎(chǔ)要求（一）痰涂片檢驗(yàn)點(diǎn)首先應(yīng)做好試驗(yàn)室工作用房準(zhǔn)備，依據(jù)鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院現(xiàn)有工作用房進(jìn)行合理調(diào)整和布局。試驗(yàn)室面積大于10平方米，按功效劃分為操作區(qū)，用于痰涂片制備、染色，相對(duì)潔凈區(qū)，用于鏡檢、登記等（見圖1）。（A）供搜集痰標(biāo)本使用；（B）痰涂片制備；（C）染色池；（D）洗手池；（E）顯微鏡讀片；（F）試驗(yàn)室登記和痰涂片儲(chǔ)存圖1：痰涂片檢驗(yàn)試驗(yàn)室基礎(chǔ)布局（二）依據(jù)《病原微生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》要求，查痰點(diǎn)試驗(yàn)室須含有開展痰涂片檢驗(yàn)工作水源、消毒、污物處理等通常檢驗(yàn)條件。（三）查痰點(diǎn)需有專員負(fù)責(zé)，技術(shù)人員須經(jīng)培訓(xùn)合格后方可從事痰涂片檢驗(yàn)工作（附表1）。（四）查痰點(diǎn)需配置雙目顯微鏡一臺(tái)（含100倍油鏡）和紫外線燈；上級(jí)結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)統(tǒng)一配置染色試劑、登記本、檢驗(yàn)單、玻片、痰盒等日常工作物品。（五）已含有上述基礎(chǔ)條件查痰點(diǎn)，經(jīng)地（市）級(jí)和縣級(jí)結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)驗(yàn)收合格，并經(jīng)縣級(jí)結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)上報(bào)省、地（市）級(jí)結(jié)防機(jī)構(gòu)立案后即可開展工作（附表2）。三、檢驗(yàn)對(duì)象就診及轉(zhuǎn)診疑似肺結(jié)核病人,通常包含連續(xù)咳嗽、咳痰超出3周；咳血或伴有血痰；發(fā)燒或胸痛超出2周；胸部X線檢驗(yàn)異常。四、檢驗(yàn)程序（一）接診病人：對(duì)全部肺結(jié)核可疑癥狀者和疑似肺結(jié)核病人，應(yīng)在內(nèi)科或呼吸科門診進(jìn)行登記，由門診醫(yī)生開具三張?zhí)低科瑱z驗(yàn)單（附表3）。（二）痰標(biāo)本搜集：在三個(gè)痰標(biāo)本盒上注明病人姓名、編號(hào)、檢驗(yàn)日期和容器序號(hào)。病人首次留痰前應(yīng)指導(dǎo)病人，留取“即時(shí)痰”、“夜間痰”、“晨痰”合格痰標(biāo)本，對(duì)所送不合格痰標(biāo)本除常規(guī)檢驗(yàn)外，應(yīng)要求患者重新送檢。（三）試驗(yàn)室登記：根據(jù)年度病人序號(hào)和痰標(biāo)本序號(hào)在試驗(yàn)室登記本上進(jìn)行登記（見附表4），并以一樣號(hào)碼在痰涂片檢驗(yàn)單上進(jìn)行標(biāo)識(shí)。檢驗(yàn)單病人姓名應(yīng)和試驗(yàn)室登記本一致。（四）痰涂片檢驗(yàn)：對(duì)病人送痰標(biāo)本應(yīng)立即按操作規(guī)程進(jìn)行涂片、染色和顯微鏡檢驗(yàn)。（五）痰涂片檢驗(yàn)結(jié)果登記和匯報(bào)：立即在登記本上登記痰涂片檢驗(yàn)結(jié)果。當(dāng)病人三次痰涂片檢驗(yàn)完成后，發(fā)覺有陽性痰涂片，應(yīng)在要求時(shí)間內(nèi)報(bào)縣結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)，縣級(jí)結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)應(yīng)立即對(duì)痰涂片進(jìn)行確定。（六）痰涂片保留：每個(gè)查痰點(diǎn)鏡檢后全部痰涂片應(yīng)按試驗(yàn)室登記本序號(hào)連續(xù)排列，分別存放在各點(diǎn)固定玻片盒中，供上級(jí)試驗(yàn)室復(fù)核確定。（七）痰檢質(zhì)量控制：每個(gè)痰涂片檢驗(yàn)點(diǎn)均根據(jù)中國結(jié)核病防治計(jì)劃《痰涂片鏡檢質(zhì)量確保手冊(cè)》要求，作為一個(gè)獨(dú)立被質(zhì)控單位接收室間質(zhì)量評(píng)定和檢驗(yàn)工作。五、痰涂片抗酸染色檢驗(yàn)法（一）痰標(biāo)本采集肺結(jié)核可疑癥狀者或肺結(jié)核病人送痰時(shí)，醫(yī)護(hù)人員或痰檢人員應(yīng)向病人解釋，使病人充足了解留好痰標(biāo)本關(guān)鍵性，并指導(dǎo)病人怎樣從肺部深處咳痰。采集痰標(biāo)本時(shí)應(yīng)在遠(yuǎn)離人群開放空間進(jìn)行，或在通風(fēng)良好室內(nèi)進(jìn)行。標(biāo)本量通常在3～5ml。1、痰標(biāo)本盒：應(yīng)采取WHO推薦國際通用螺旋蓋痰瓶，或可密封塑料盒、蠟紙盒搜集痰標(biāo)本。痰標(biāo)本盒上注明病人姓名、編號(hào)、檢驗(yàn)項(xiàng)目和容器序號(hào)“1”、“2”、“3”（1為當(dāng)日即時(shí)痰，2為夜間痰，3為次日晨痰）。2、痰標(biāo)本性狀：合格痰標(biāo)本應(yīng)是患者深呼吸后，由肺部深處咳出分泌物。合格痰標(biāo)本包含干酪痰、血痰、粘液痰。唾液或口水用于病人確診時(shí)為不合格痰標(biāo)本。（1）干酪痰標(biāo)本外觀以黃色(或奶酪色)、膿樣、團(tuán)塊狀肺部分泌物為主，粘度較粘液痰低，制片時(shí)較易涂抹；涂片染色后鏡檢，可發(fā)覺大量膿性炎癥細(xì)胞、肺上皮脫落細(xì)胞。因?yàn)檫@類標(biāo)本是由肺部深處咳出，對(duì)肺結(jié)核診療最有價(jià)值，故抗酸桿菌陽性檢出率較高。（2）血痰這類標(biāo)本是因粘液痰或干酪痰標(biāo)本中混有血液而形成，顏色為褐色或深褐色、鮮紅色或伴有血絲；涂片染色后鏡檢除能夠觀察到粘液痰或干酪痰細(xì)胞特征外，含新鮮血液標(biāo)本中可見到被染色血細(xì)胞。因?yàn)楹獦?biāo)本易干擾抗酸桿菌鏡檢結(jié)果，故在制片時(shí)應(yīng)盡可能避免挑取含血標(biāo)本。（3）粘液痰標(biāo)本外觀以白色、粘稠度較高肺部和支氣管分泌物為主，制片時(shí)需仔細(xì)涂抹；涂片染色后鏡檢時(shí)，鏡下可見支氣管內(nèi)膜纖毛柱狀上皮細(xì)胞，伴有少許肺上皮脫落細(xì)胞、膿性炎癥細(xì)胞、口腔脫落細(xì)胞及口腔寄生菌。這類標(biāo)本抗酸桿菌陽性檢出率較唾液高。（4）唾液目視觀察標(biāo)本整體外觀，以透明或半透明水樣、粘度較低口腔分泌物為主，標(biāo)本中有時(shí)伴有氣泡；涂片染色鏡檢時(shí)，鏡下可見少許口腔上皮脫落細(xì)胞和口腔內(nèi)寄生菌，有時(shí)可見食物殘?jiān)Ｒ驗(yàn)檫@類標(biāo)本進(jìn)行抗酸桿菌檢驗(yàn)時(shí)陽性檢出率很低，用于對(duì)患者確定診療時(shí)是不合格標(biāo)本。所以，當(dāng)病人首次留痰即為唾液時(shí)，應(yīng)囑病人重送并指導(dǎo)病人怎樣留取合格標(biāo)本。3、痰標(biāo)本采集時(shí)間：依據(jù)痰標(biāo)本采集時(shí)間，將痰標(biāo)本分為三類：（1）即時(shí)痰病人就診時(shí)深呼吸后咳出痰液。應(yīng)確保每個(gè)首次就診病人均留取即時(shí)痰進(jìn)行檢驗(yàn)。（2）晨痰患者晨起立即用清水漱口后，咳出第2口和第3口痰液。（3）夜間痰送痰前一日，患者晚間咳出痰液。（二）痰涂片制作1、在進(jìn)行痰涂片檢驗(yàn)前對(duì)新玻片用95%乙醇擦拭（或浸泡）脫脂，經(jīng)干燥、清潔、檢驗(yàn)無油污、無劃痕后作為合格玻片備用。在已經(jīng)準(zhǔn)備痰玻片后面左端1/3處注明編號(hào)(如使用載玻片一端無磨砂面，使用玻璃刻刀注明編號(hào)；如使用載玻片一端有磨砂面，可使用2B鉛筆在磨砂面上直接書寫)。2、小心打開痰標(biāo)本盒，預(yù)防產(chǎn)生氣溶膠或使標(biāo)本外溢。仔細(xì)觀察標(biāo)本，使用折斷竹簽茬端，挑取痰標(biāo)本中干酪樣、膿樣或可疑部分約0.05～0.1ml，于玻片正面右側(cè)2/3處，均勻涂抹成10×20mm卵圓形痰膜。痰膜朝上靜置自然干燥后(通常約需要30分鐘)進(jìn)行染色鏡檢。當(dāng)氣溫低，痰膜不易干燥時(shí)，嚴(yán)禁將玻片直接在火焰上烘拷，以防產(chǎn)生氣溶膠或痰膜脫落。一張載玻片上只能涂抹一份痰標(biāo)本，一張載玻片只能使用一次，不得清洗后再次用于痰涂片染色檢驗(yàn)。3、涂抹完成后痰標(biāo)本，在檢驗(yàn)結(jié)果匯報(bào)前，應(yīng)臨時(shí)保留。以備涂片、染色不合格影響鏡檢結(jié)果時(shí)，重新涂片和染色之用。（三）萋－尼氏染色1、涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片間距保持在10mm以上距離；火焰固定(在5秒鐘內(nèi)將玻片置于火焰上往返烘烤4次)。2、滴加石碳酸復(fù)紅染液，蓋滿痰膜，火焰加熱至出現(xiàn)蒸汽后，脫離火焰，保持染色5分鐘。染色期間應(yīng)一直保持痰膜被染色液覆蓋，必需時(shí)可續(xù)加染色液。加溫時(shí)勿使染色液沸騰。3、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去染色液，瀝去標(biāo)本上剩下水。4、自痰膜上端外緣滴加脫色劑充滿痰膜，脫色1分鐘；如有必需，需流水洗去脫色液后，再次脫色至痰膜無可視紅色為止。5、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去脫色液，瀝去玻片上剩下水。6、滴加亞甲藍(lán)復(fù)染液，染色30秒鐘。7、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去復(fù)染液，瀝去標(biāo)本上剩下水。待玻片干燥后鏡檢。一張染色合格痰玻片，因?yàn)楸粊喖姿{(lán)染色而呈亮藍(lán)色。將染色后玻片放置在報(bào)紙上，假如報(bào)紙上文字透過痰膜不能被看清，表明該玻片涂抹過厚。（四）顯微鏡檢驗(yàn)1、使用10倍目鏡雙目顯微鏡讀片。2、取染色完成且已干燥玻片，痰膜向上放置在玻片臺(tái)上并以卡尺固定。首先使用40倍物鏡，轉(zhuǎn)動(dòng)卡尺移動(dòng)玻片至痰膜左端，將光線調(diào)整至合適亮度，調(diào)整焦距至可見細(xì)胞形態(tài)；移開40倍物鏡，在玻片上滴1～2滴鏡油，使用100倍油鏡進(jìn)行細(xì)致觀察。在淡藍(lán)色背景下，抗酸菌呈紅色，其它細(xì)菌和細(xì)胞呈藍(lán)色。為預(yù)防抗酸桿菌交叉污染，嚴(yán)禁鏡頭直接接觸玻片上痰膜。3、讀片方法：首先應(yīng)從左向右觀察相鄰視野；當(dāng)玻片移動(dòng)至痰膜一端時(shí)，縱向向下轉(zhuǎn)換一個(gè)視野，然后從右向左觀察，依這類推。通常10×20mm大小痰膜，使用100倍油鏡，每行可觀察100個(gè)視野，觀察三行則約為300個(gè)視野。仔細(xì)觀察完300個(gè)視野，通常最少需要5分鐘以上。一位鏡檢人員連續(xù)閱讀10-12張玻片后應(yīng)休息約20分鐘。4、分枝桿菌基礎(chǔ)形態(tài)：當(dāng)患者標(biāo)本直接進(jìn)行涂片鏡檢時(shí)，能夠發(fā)覺不一樣種分枝桿菌形態(tài)。結(jié)核分枝桿菌多數(shù)為桿狀、稍彎曲；菌體寬度0.3～0.6μm；菌體長度不一，在0.5～8μm之間，多數(shù)在1.5～3.5μm；含結(jié)核分枝桿菌較多新鮮標(biāo)本經(jīng)萋－尼氏染色后，100倍油鏡觀察，可見單個(gè)存在，也能看到聚集成簇或分枝狀排列菌體，染色良好痰標(biāo)本，可見菌體內(nèi)著色較深異染顆粒。（五）鏡檢結(jié)果匯報(bào)和登記痰涂片鏡檢結(jié)果匯報(bào)，不僅是對(duì)結(jié)核病診療提供依據(jù)，匯報(bào)數(shù)量也一定程度反應(yīng)疾病嚴(yán)重程度和傳染性大小。痰涂片鏡檢結(jié)果登記應(yīng)根據(jù)鏡檢結(jié)果分級(jí)匯報(bào)標(biāo)準(zhǔn)登記在結(jié)核病細(xì)菌學(xué)試驗(yàn)室登記本上和痰檢驗(yàn)單上。不能只填寫陰性、陽性或(－)、(+)等。萋尼氏染色鏡檢結(jié)果分級(jí)匯報(bào)標(biāo)準(zhǔn)抗酸桿菌陰性(－)：連續(xù)觀察300個(gè)不一樣視野未發(fā)覺抗酸桿菌。匯報(bào)抗酸桿菌菌數(shù)：1～8條/300視野。抗酸桿菌陽性（1＋）：3～9條/100視野。抗酸桿菌陽性（2＋）：1～9條抗酸桿菌/10視野。抗酸桿菌陽性（3＋）：1～9條抗酸桿菌/每視野?？顾釛U菌陽性（4＋）：≥10條抗酸桿菌/每視野。（六）抗酸染色玻片處理閱讀完萋尼氏染色玻片后，應(yīng)立即用浸滿二甲苯（分析醇）擦鏡紙揭取數(shù)次，根本去除玻片上鏡油。經(jīng)脫油干燥后玻片，按試驗(yàn)室序號(hào)及涂片編號(hào)放置在玻片盒中，存放在陰涼干燥環(huán)境中，以備復(fù)檢或質(zhì)控抽檢。六、痰涂片抗酸染色檢驗(yàn)注意事項(xiàng)痰涂片抗酸染色檢驗(yàn)要注意預(yù)防假陽性和假陰性結(jié)果產(chǎn)生。假陽性是指將陰性涂片錯(cuò)誤判讀為陽性，假陰性是指將陽性涂片錯(cuò)誤判讀為陰性。屬于技術(shù)原因影響要經(jīng)過一系列試驗(yàn)室內(nèi)和試驗(yàn)室間質(zhì)量控制不停改善。（一）假陽性結(jié)果預(yù)防方法1、必需使用新載玻片進(jìn)行痰涂片檢驗(yàn)。2、每個(gè)標(biāo)本均使用一個(gè)新竹簽完成制片涂抹。3、全部染液均經(jīng)過過濾。4、染色時(shí)玻片相互之間保持一定距離，相互根本分隔開。5、嚴(yán)禁使用染色缸將玻片放置一起染色。6、染色時(shí)勿使玻片上染液干燥。7、滴加鏡油時(shí)，嚴(yán)禁容器滴口直接接觸玻片痰膜。8、嚴(yán)禁物鏡鏡頭直接接觸玻片痰膜。9、完整、正確標(biāo)注痰盒、玻片和試驗(yàn)室登記本各項(xiàng)內(nèi)容。10、登記前、后對(duì)檢驗(yàn)單和標(biāo)本盒上標(biāo)注進(jìn)行仔細(xì)查對(duì)。11、認(rèn)真根據(jù)要求讀片，正確統(tǒng)計(jì)和匯報(bào)結(jié)果。（二）假陰性結(jié)果預(yù)防方法1、確定標(biāo)本是痰而非唾液。2、確定每份標(biāo)本最少有3ml。3、選擇膿樣、干酪樣、粘液分泌物涂抹制備玻片。4、制備玻片時(shí)標(biāo)本涂抹均勻，不要太厚或太薄。5、使用高質(zhì)量染料、嚴(yán)格根據(jù)配方配制染液。6、嚴(yán)格根據(jù)操作程序完成染色過程。7、判定結(jié)果為“陰性”前，必需閱讀要求要求視野數(shù)。8、作為對(duì)照，可采取已知結(jié)果為陽性玻片，完成染色鏡檢過程。9、完整、正確地標(biāo)注痰盒、玻片和試驗(yàn)室登記本。10、登記前對(duì)檢驗(yàn)單和標(biāo)本盒上標(biāo)注進(jìn)行仔細(xì)查對(duì)。11、正確統(tǒng)計(jì)和匯報(bào)結(jié)果。七、痰玻片保留（一）鏡檢后涂片應(yīng)立即用浸滿二甲苯擦鏡紙根本去除涂片上鏡油。（二）再次查對(duì)試驗(yàn)室登記本和每張涂片試驗(yàn)序號(hào)。（三）嚴(yán)禁在涂片上標(biāo)識(shí)鏡檢陰、陽性結(jié)果。（四）按試驗(yàn)室登記本序號(hào)連續(xù)排列全部涂片，存放于玻片盒內(nèi)。（五）涂片保留和試驗(yàn)室登記本統(tǒng)計(jì)應(yīng)保持一致。初診病人第一張涂片存入涂片盒后需預(yù)留出兩個(gè)空位置，以備第二張、第三張涂片檢驗(yàn)后放入。（六）保留近期3個(gè)月全部痰涂片待各級(jí)試驗(yàn)室質(zhì)量控制抽檢，假如年涂片量不足500張，必需全部保留。（七）裝滿涂片玻片盒，需用標(biāo)簽注明涂片試驗(yàn)序號(hào)區(qū)間和日期區(qū)間，方便以后盲法復(fù)檢或現(xiàn)場評(píng)價(jià)時(shí)抽樣。八、試驗(yàn)室管理（一）顯微鏡日常維護(hù)顯微鏡作為發(fā)覺涂片陽性病人關(guān)鍵設(shè)備，試驗(yàn)室工作人員應(yīng)正確使用并給正確維護(hù)，以確保其正常工作和延長使用壽命。在使用和維護(hù)顯微鏡時(shí)應(yīng)尤其遵守下列關(guān)鍵點(diǎn)：1、顯微鏡應(yīng)放置在干燥、無塵和通風(fēng)環(huán)境中。假如顯微鏡一段時(shí)期內(nèi)停止使用，應(yīng)拆開并放置在原包裝盒內(nèi)，并放置有效干燥劑。2、使用前和使用后必需使用擦鏡紙根本清潔物鏡。3、嚴(yán)禁物鏡鏡頭直接接觸玻片上痰膜。4、使用油鏡時(shí)，只能使用細(xì)螺旋調(diào)整焦距。5、使用電光源顯微鏡時(shí)，注意電壓和電流是否和儀器要求相匹配。（二）耗材供給和管理為保障痰涂片檢驗(yàn)工作能夠連續(xù)不停開展，應(yīng)儲(chǔ)存一定數(shù)量試驗(yàn)耗材和對(duì)應(yīng)試劑，貯備量可依據(jù)工作量來進(jìn)行計(jì)算，通常應(yīng)準(zhǔn)備比平均工作量高20％對(duì)應(yīng)耗材和試劑。染色試劑應(yīng)由省結(jié)核病參比試驗(yàn)室或經(jīng)省級(jí)結(jié)核病參比試驗(yàn)室進(jìn)行了質(zhì)量控制地（市）級(jí)結(jié)核病參比試驗(yàn)室組織統(tǒng)一配制和供給，其它耗材可依據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r由省、地或縣統(tǒng)一供給。各項(xiàng)物資、耗材根據(jù)需要供給，并確保達(dá)成質(zhì)量要求。每個(gè)查痰點(diǎn)每檢驗(yàn)1000份痰標(biāo)本所消耗材料列表以下：材料用量（每檢驗(yàn)1000份痰標(biāo)本）試劑名稱用量（每檢驗(yàn)1000份痰標(biāo)本）痰盒1200個(gè)石碳酸復(fù)紅5000ml竹簽1200個(gè)亞甲基藍(lán)5000ml載玻片1200張5%鹽酸酒精10000ml載玻片盒(100張/盒)10個(gè)鏡油110ml初診病人登記本1本二甲苯110ml試驗(yàn)室登記本1本定性濾紙6張?zhí)低科瑱z驗(yàn)單20本（50張/本）擦鏡紙1本記號(hào)筆（玻璃刻刀或2B鉛筆）2支（三）試驗(yàn)室人員安全防護(hù)1、嚴(yán)格遵守試驗(yàn)室安全操作規(guī)程，試驗(yàn)室技術(shù)人員必需經(jīng)過生物安全培訓(xùn)后方可上崗。2、嚴(yán)格遵守試驗(yàn)室安全操作規(guī)程，警惕分枝桿菌氣溶膠產(chǎn)生。3、試驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格限制非試驗(yàn)室人員進(jìn)入，降低試驗(yàn)室內(nèi)外交叉生物污染。完成試驗(yàn)工作離開試驗(yàn)室，要關(guān)好門窗。4、進(jìn)入試驗(yàn)室，盡可能避免攜帶非必需物品。試驗(yàn)臺(tái)上不放任何和試驗(yàn)無關(guān)物件或私人用具。5、工作人員進(jìn)入試驗(yàn)室，應(yīng)穿工作服并注意著裝整齊，操作時(shí)應(yīng)戴口罩、帽子和手套，長發(fā)者須將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。6、試驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)保持肅靜，試驗(yàn)過程中嚴(yán)禁一切和試驗(yàn)無關(guān)活動(dòng)，以確保集中精力完成試驗(yàn)操作。7、試驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙、飲食及用嘴濕潤鉛筆或標(biāo)簽等，也不要以手撫摩頭面部等。8、試驗(yàn)前須開啟紫外燈對(duì)試驗(yàn)室和操作區(qū)域進(jìn)行照射消毒1小時(shí)以上；試驗(yàn)結(jié)束后，開啟紫外燈對(duì)操作區(qū)和試驗(yàn)室進(jìn)行照射消毒2小時(shí)以上。9、試驗(yàn)結(jié)束后，操作人員要用清潔劑（或肥皂）和清水充足洗凈。10、每次試驗(yàn)操作終止后，必需清理好試驗(yàn)臺(tái)，全部物品歸位并用70%酒精或3-5%石碳酸等有效消毒劑擦洗試驗(yàn)臺(tái)和地面。11、試驗(yàn)室中生物危險(xiǎn)物要依據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目和性質(zhì)不一樣，局限在對(duì)應(yīng)試驗(yàn)室或試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)，不得隨意將其帶到其它區(qū)域進(jìn)行。（四）污物消毒和處理1、痰標(biāo)本、被污染一次性用具及試驗(yàn)室垃圾應(yīng)經(jīng)高壓滅菌后丟棄，或使用專用焚燒爐或固定垃圾坑進(jìn)行焚燒。2、每次完成檢驗(yàn)后，操作臺(tái)和試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)經(jīng)紫外燈近距離照射消毒2小時(shí)以上。3、試驗(yàn)過程中，如標(biāo)本被打翻污染了操作臺(tái)或地面，應(yīng)以大于污染面積紗布或衛(wèi)生紙吸滿5%苯酚溶液或70%酒精，覆蓋污染區(qū)，30分鐘后方可移去，再經(jīng)紫外線近距離照射。附表：1、鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院痰檢人員培訓(xùn)統(tǒng)計(jì)表2、基礎(chǔ)情況調(diào)查表3、檢驗(yàn)單參考式樣4、結(jié)核病細(xì)菌學(xué)試驗(yàn)室登記本附表1：縣衛(wèi)生院痰檢人員培訓(xùn)統(tǒng)計(jì)表姓名：性別：出生年月：(歲)學(xué)歷：職稱：從事檢驗(yàn)工作時(shí)間：（年）培訓(xùn)地點(diǎn)：培訓(xùn)從200年月日到200年月日共培訓(xùn)天玻片號(hào)制片質(zhì)量評(píng)價(jià)痰檢結(jié)果評(píng)價(jià)痰細(xì)胞涂抹大小厚薄染色痰膜脫落初檢結(jié)果復(fù)檢結(jié)果合格不合格合格不合格合格不合格合格不合格合格不合格陰性陽性陰性陽性符合不符和綜合評(píng)價(jià)：署名：日期附表2：______縣（市）基礎(chǔ)情況調(diào)查表一、通常情況省名：地（市）名：縣（市）名：縣編碼：上年末人口數(shù)（萬）：地理面積:(平方公里)地貌特征：山區(qū)丘陵平原湖區(qū)貧困縣：是（國家級(jí)、省級(jí)）否鄉(xiāng)鎮(zhèn)數(shù):村數(shù):縣級(jí)綜合醫(yī)院數(shù)目（個(gè)）:鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院數(shù)目（個(gè)）:中心衛(wèi)生院數(shù)目（個(gè)）:二、縣（市）結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)情況全縣開始實(shí)施DOTS時(shí)間:200年月從事結(jié)防工作專職人員數(shù):人，兼職人員數(shù)：人從事痰涂片檢驗(yàn)專職人員數(shù):人，兼職人員數(shù)：人其中鄉(xiāng)鎮(zhèn)痰檢點(diǎn)專職人員數(shù):人，兼職人員數(shù)：人專職痰涂片檢