藥物分析課件

藥物分析課件基本要求

一、掌握吡啶類、吩噻嗪類、苯并二氮雜卓類藥物的鑒別和含量測定的基本原理與方法。二、熟悉本類藥物中典型藥物國外藥典收載的鑒別和含量測定方法。返回第2頁,共52頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)吡啶類藥物一、典型藥物的結(jié)構(gòu)與主要化學性質(zhì)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)

吡啶（pyridine）異煙肼（isoniazid）第3頁,共52頁，2024年2月25日，星期天尼可剎米（nikethamide）第4頁,共52頁，2024年2月25日，星期天硝苯地平（nifedipine)第5頁,共52頁，2024年2月25日，星期天（二）主要化學性質(zhì)

1、弱堿性

吡啶環(huán)上的氮為堿性氮原子，吡啶環(huán)的pKb

值為8.8（水中）。尼可剎米除了吡啶環(huán)上氮外，β位上被酰氨基取代。酰氨基化學性質(zhì)不甚活潑，但遇堿水解后釋放出具有堿性的二乙胺，故可以進行鑒別。

第6頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

2、還原性

異煙肼的吡啶環(huán)γ位上被具有還原性酰肼取代，可被氧化劑氧化，可與含羰基的化合物發(fā)生縮合反應(yīng)。

3、吡啶環(huán)的特性

異煙肼和尼可剎米的吡啶環(huán)α、α’位未取代，而β或γ位被羧基衍生物所取代，其吡啶環(huán)可發(fā)生開環(huán)反應(yīng)。（戊烯二醛反應(yīng)）

第7頁,共52頁，2024年2月25日，星期天二、鑒別試驗（一）吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng)

本反應(yīng)適用于吡啶環(huán)的α、α’位無取代基的異煙肼和尼可剎米。1.戊烯二醛反應(yīng)（k?ning反應(yīng)）尼可剎米+溴化氰H2O戊烯二醛衍生物苯胺黃色第8頁,共52頁，2024年2月25日，星期天第9頁,共52頁，2024年2月25日，星期天（黃色~黃棕色）第10頁,共52頁，2024年2月25日，星期天（二）酰肼基團的反應(yīng)

1．還原反應(yīng)異煙肼+AgNO3異煙酸銀+N2+Ag(白色）銀鏡異煙肼+亞硒酸硒（紅色）第11頁,共52頁，2024年2月25日，星期天2．縮合反應(yīng)

異煙肼的酰肼基與芳醛縮合形成腙，其有固定的熔點，可用以鑒別。ChP和BP均采用本法鑒別.

黃色結(jié)晶mp為228℃～231℃

第12頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍尼可剎米+NaOH

二乙胺第13頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

（一）異煙肼中游離肼的檢查

1.TLC法

Ch.P中異煙肼及其注射,采用TLC法中雜質(zhì)對照法。

對照品：硫酸肼0.20mg/ml（相當于游離肼50μg）

薄層板：硅膠（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）

展開劑：異丙醇-丙酮（3：2）

顯色劑：乙醇制對-二甲氨基苯甲醛試液

檢測結(jié)果：供試品主斑點前方，不得顯黃色斑點

三、有關(guān)物質(zhì)檢查第14頁,共52頁，2024年2月25日，星期天(二)尼可剎米中有關(guān)雜質(zhì)檢查

因有關(guān)雜質(zhì)的化學結(jié)構(gòu)不明，故Ch.p采用TLC法中的高低濃度對比法進行檢查。

第15頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

(三)硝苯地平中有關(guān)物質(zhì)檢查

硝苯地平遇光分子內(nèi)部發(fā)生光化學歧化作用，降解為4-（2-硝基苯基）-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸二甲酯（A）和4-（2-亞硝基苯基）-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸二甲酯（B）。其化學結(jié)構(gòu)如下:第16頁,共52頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)吩噻嗪類藥物一、基本結(jié)構(gòu)與化學性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)特點與典型藥物第17頁,共52頁，2024年2月25日，星期天第18頁,共52頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共52頁，2024年2月25日，星期天奮乃靜第20頁,共52頁，2024年2月25日，星期天癸氟奮乃靜第21頁,共52頁，2024年2月25日，星期天鹽酸氟奮乃靜第22頁,共52頁，2024年2月25日，星期天鹽酸三氟拉嗪第23頁,共52頁，2024年2月25日，星期天（二）主要化學性質(zhì)1.紫外和紅外吸收光譜特征硫氮雜蒽母核為共軛三環(huán)л系統(tǒng)

三個最大吸收峰別在：205nm、254nm、300nm由于2位、10位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。

硫氮雜蒽母核的硫為二價，易氧化為砜和亞砜，其紫外吸收光譜有明顯不同，它們具有四個峰值。另外，取代基R和R’的不同，則可產(chǎn)生不同的紅外光譜第24頁,共52頁，2024年2月25日，星期天2.易氧化呈色

二價硫易氧化，遇不同氧化劑如硫酸、硝酸、三氯化鐵試液及過氧化氫等，隨著取代基的不同，而呈不同的顏色。

3.與金屬離子絡(luò)合呈色

本類藥物中未被氧化的硫，可與鈀離子形成配位化合物，其氧化產(chǎn)物則無此反應(yīng)。此性質(zhì)可用于鑒別和含量測定，并具有專屬性，可消除氧化產(chǎn)物的干擾。第25頁,共52頁，2024年2月25日，星期天（一）紫外特征吸收和紅外吸收光譜

本類藥物可用UV和IR鑒別，Ch.P中UV鑒別實例如下：

藥物名稱溶劑濃度（μg/ml）λmax（nm）AE1%1cm鹽酸氯丙嗪鹽酸（9→1000）52540.46915306—

—鹽酸異丙嗪鹽酸（0.01mol/L）6249—883~937奮乃靜無水乙醇72580.65—癸氟奮乃靜乙醇10260—

—鹽酸氟奮乃靜鹽酸（9→1000）10255—553~593鹽酸三氟拉嗪鹽酸（1→20）10256—630鹽酸硫利達嗪乙醇8264與315—

—二、鑒別試驗第26頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

（二）顯色反應(yīng)

1.與氧化劑的顯色反應(yīng)

藥物名稱硫酸硝酸過氧化氫

鹽酸氯丙嗪顯紅色,漸變淡黃色—鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色,放置生成紅色沉淀,加熱即溶解,后顏色漸變深溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色奮乃靜—

—顯深紅色;放置后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色,溫熱—

—后變成紅褐色鹽酸三氟拉嗪—生成微帶紅色的白色沉淀;放—置后,紅色變深,加熱后變黃色

鹽酸硫利達嗪顯藍色

—

—

第27頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

2.與鈀離子絡(luò)合顯色反應(yīng)

利用分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物，如與癸氟奮乃靜形成紅色絡(luò)合物。第28頁,共52頁，2024年2月25日，星期天第29頁,共52頁，2024年2月25日，星期天（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)

癸氟奮乃靜碳酸鈉及碳酸鉀F-+酸性茜素鋯試液[ZrF6]2-配位離子，茜素游離使溶液由紅色變?yōu)辄S色。600℃熾灼第30頁,共52頁，2024年2月25日，星期天鹽酸異丙嗪中特殊雜質(zhì)檢查主要有：2-二甲氨基-1-丙醇；N,N,β-三甲基-10H-吩噻嗪-10-乙胺異構(gòu)體和結(jié)構(gòu)不清的分解產(chǎn)物

。因此采用TLC法中的

高低濃度對比法控制上述這些雜質(zhì)的限量。三、特殊雜質(zhì)檢查返回第31頁,共52頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)苯并二氮雜卓類藥物一、結(jié)構(gòu)特征與典型藥物NNClH3CO地西泮第32頁,共52頁，2024年2月25日，星期天阿普唑侖第33頁,共52頁，2024年2月25日，星期天奧沙西泮第34頁,共52頁，2024年2月25日，星期天氯氮卓NNNCH3OClH第35頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

(一)化學鑒別試驗

1。沉淀反應(yīng)

氯氮卓

橙紅色沉淀

阿普唑侖鹽酸氟西泮

＋KBiI4

也生成橙紅色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀顏色變深，

因此可以相互區(qū)別。二、鑒別試驗阿普唑侖+遇硅鎢酸白色沉淀，藥典中也用于鑒別。第36頁,共52頁，2024年2月25日，星期天2.水解后呈芳伯胺反應(yīng)

氯氮卓和奧沙西泮，其反應(yīng)如下：第37頁,共52頁，2024年2月25日，星期天3.硫酸-熒光反應(yīng)

本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光。例如：

地西泮黃綠色

黃色氯氮卓黃色

紫色艾司唑侖+H2SO4亮綠色+稀硫酸天藍色硝西泮淡藍色

藍綠色奧沙西泮淡黃綠色第38頁,共52頁，2024年2月25日，星期天4.分解產(chǎn)物的反應(yīng)

本類藥物多為有機氯化合物，用氧瓶燃燒法破壞，顯氯化物反應(yīng)。Ch.P用于地西泮和三唑侖藥物的鑒別。

第39頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜

藥物名稱溶劑濃度（μg/ml）λmax（nm）A

地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242約0.51282

約0.23366氯氮卓鹽酸溶液(9→1000)7245,308阿普唑侖鹽酸溶液(9→1000)12264鹽酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2,284±2比值1.95～2.50362±2氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2,307±2奧沙西泮乙醇10229,315±2(較弱)

紅外吸收光譜:已用于地西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、鹽酸氟西泮、氯硝西泮和奧沙西泮的鑒別。

第40頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

（一）有關(guān)物質(zhì)檢查

Ch.P收載的八種本類藥物，除氯氮卓外，其余均作此項檢查。其檢查方法除了三唑侖采用GC法外，其余均用TLC法進行檢查。USP(24)和BP(2000)中對氯氮卓都規(guī)定了此項檢查，而且均用TLC法進行檢查。三、特殊雜質(zhì)檢查第41頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

1.地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查

地西泮在合成過程中因其副反應(yīng)，可能引入N-去甲基苯甲二氮卓及化學結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì)，可采用TLC法中的高低濃度對比法進行檢查。

2.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查

USP(24)用TLC法檢查氯氮卓中的有關(guān)物質(zhì)，并規(guī)定其分解產(chǎn)物2-氨基-5-氯-2-苯甲酮含量不得過0.01%；中間體7-氯-1，3-二氫-5-苯基-2H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮-4-氧化物含量不得過0.1%。第42頁,共52頁，2024年2月25日，星期天(二)降解產(chǎn)物的檢查

地西泮注射液列入此項檢查，因本品在貯藏過程中有可能分解成2-甲氨基-5-氯-二苯甲酮等雜質(zhì)。采用HPLC法進行檢查。返回第43頁,共52頁，2024年2月25日，星期天一、非水溶液滴定法(一)基本原理第四節(jié)含量測定當HA酸性較強時，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測定條件。第44頁,共52頁，2024年2月25日，星期天(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml結(jié)果高氯酸滴定液滴定以空白試驗校正第45頁,共52頁，2024年2月25日，星期天(三)問題討論1.適用范圍

主要用于Kb＜10-8的有機堿鹽的含量測定。對堿性較弱的雜環(huán)類藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點指示的方法，可使pKb為8～13的弱堿性藥物采用本法滴定。

一般來說：

Kb為10-8～10-10時，宜選冰醋酸作為溶劑；藥物的Kb為10-10～10-12時，宜選冰醋酸與醋酐的混合溶液；Kb＜10-12時，應(yīng)用醋酐作為溶劑。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測定結(jié)果。

第46頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

2.酸根的影響：無機酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞減：

高氯酸＞氫溴酸＞硫酸＞鹽酸＞硝酸

消除HX干擾的方法：加Hg(Ac)2

量不足終點不明顯，結(jié)果偏低。

2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

過量(1～3倍)不影響測定結(jié)果第47頁,共52頁，2024年2月25日，星期天3.終點指示方法

常用電位法和指示劑法Ch.P收載的本類藥物大多采用結(jié)晶紫指示劑指示終點，少數(shù)采用電位法指示終點。第48頁,共52頁，2024年2月25日，星期天(四)應(yīng)用實例

1.游離弱堿性藥物測定

異煙肼、尼可剎米、地西泮及氯氮卓等。基于這些藥物分子結(jié)構(gòu)中氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法直接測定其含量。由于這些藥物的堿性強弱不同，測定時所采用溶劑、指示劑及其指示終點的方法也不盡相同。

藥物名稱取樣量(g)溶劑指示劑終點顏色

尼可剎米0.15冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍綠色地西泮0.2冰醋酸、酸酐10ml結(jié)晶紫綠色氯氮卓0.3冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍色第49頁,共52頁，2024年2月25日，星期天

2.氫鹵酸鹽類藥物測定

當這些藥物溶于冰醋酸時，由于氫鹵酸在冰醋酸中酸性較強，對測定有干擾，必須先加入過量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成難以電離的鹵化汞，而氫鹵酸鹽藥物，則轉(zhuǎn)變成可測定的醋酸鹽。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可獲得滿意