上海市靜安區(qū)市級名校新高考生物押題試卷及答案解析

上海市靜安區(qū)市級名校新高考生物押題試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下圖是反射弧的模式圖（a、b、c、d、e表示反射弧的組成部分，I、Ⅱ表示突觸的組成部分），說法正確的是A．切斷d、刺激b，不會引起效應器收縮B．興奮在結(jié)構(gòu)c和結(jié)構(gòu)b的傳導速度相同C．正常機體內(nèi)興奮在反射弧中的傳導是單向的D．II處發(fā)生的信號變化是電信號→化學信號→電信號2．下圖是一種“生物導彈”的作用原理示意圖，沒有與腫瘤細胞結(jié)合的“生物導彈”一段時間后被機體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對正常細胞也有一定毒性。下列說法不正確的是A．單克隆抗體是由雜交瘤細胞合成和分泌的B．活化阿霉素能抑制細胞中的DNA復制和轉(zhuǎn)錄過程C．在治療中，應先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物導彈D．單克隆抗體特異性強，能減輕阿霉素對正常細胞的傷害3．CCR5是HIV入侵人體T細胞的主要輔助受體之一。有科學家為了使嬰兒一出生就具有抵抗艾滋病的能力，通過基因編輯破壞了受精卵中的CCR5基因，該做法引起了民眾普遍的擔憂。下列各項不屬于擔憂依據(jù)的是（）A．CCR5基因可能還參與了其他生理過程的調(diào)控B．基因編輯技術(shù)有可能因編輯對象錯誤（脫靶）造成不可預知的后果C．被編輯個體受其他疾病感染的風險可能會提高D．該技術(shù)雖然符合人類倫理道德，但可能存在潛在的安全風險4．下列關(guān)于細胞結(jié)構(gòu)和功能的敘述，正確的是A．生長素從頂芽運輸至側(cè)芽的過程主要由線粒體供能B．吞噬細胞攝取、處理抗原與溶酶體中的溶菌酶有關(guān)C．高等植物成熟篩管細胞在衰老過程中染色質(zhì)要收縮D．低等植物細胞分裂末期細胞板的形成與中心體有關(guān)5．下列關(guān)于人類與環(huán)境的敘述，錯誤的是（）A．控制人口數(shù)量增長的唯一出路是設法降低出生率B．引起溫室效應的主要原因是煤、石油和天然氣等的大量燃燒C．臭氧量減少主要是氟利昂、CO2等逸散至大氣圈上層發(fā)生反應所致D．被排放到水體中的微生物病原體等會使飲用水質(zhì)量越來越差6．果蠅的紅眼對白眼顯性，有關(guān)基因位于X染色體上。人為地將相同數(shù)量的純合紅眼雌果蠅和白眼雄果蠅（親本）培養(yǎng)在同一環(huán)境中，若交配只發(fā)生在同一世代的雌雄個體之間且是隨機的，同時不考慮突變因素，那么，下列有關(guān)敘述中正確的是A．親本中紅眼基因頻率和白眼基因頻率相同B．F2的雌果蠅基因型相同，表現(xiàn)型不同C．白眼雌果蠅最先出現(xiàn)在F3，這是基因重組的結(jié)果D．F2和F3的雄果蠅都能產(chǎn)生3種基因型的配子7．離子的跨膜運輸是神經(jīng)興奮傳導與傳遞的基礎?興奮在突觸部位的傳遞過程和離子運輸情況如圖所示?下列相關(guān)敘述正確的是（）A．圖中的神經(jīng)遞質(zhì)可能引起突觸后神經(jīng)元的興奮性下降B．圖中各種物質(zhì)的運輸都不需要消耗能量C．Ca2+通道打開可能與興奮傳到突觸小體引起電位變化有關(guān)D．突觸間隙中Na+濃度增大時，興奮引起后膜電位變化幅度減小8．（10分）雞的性別決定方式屬于ZW型，羽毛的蘆花和非蘆花性狀由一對等位基因控制?，F(xiàn)用一只純種雌性蘆花雞與一只純種雄性非蘆花雞交配多次，F(xiàn)1中的蘆花均為雄性、非蘆花均為雌性。若將F1雌雄雞自由交配得到F2，下列敘述正確的是（）A．染色體Z、W上都含有控制蘆花和非蘆花性狀的基因B．F1中雌性非蘆花雞所占的比例大于雄性蘆花雞的比例C．F2代群體中蘆花雞與非蘆花雞的性狀分離比應為3∶1D．F2代早期雛雞僅根據(jù)羽毛的特征不能區(qū)分雌雞和雄雞二、非選擇題9．（10分）圖甲是某學習小組同學“探究影響植物光合速率因素”的實驗裝置，燈為冷光源。圖乙為最適溫度下根據(jù)實驗結(jié)果繪制的曲線。黑藻為多年生沉水草本植物，有綠色部分，也有非綠色部分。據(jù)圖回答下列問題：（1）圖甲可用于探究光照強度對植物光合速率的影響，改變光照強度的方法有：①____________，②____________。（2）為排除無關(guān)變量對實驗結(jié)果的干擾，該實驗需設置對照實驗。設置的方法是利用與圖甲相同的實驗裝置，___________。（3）在圖乙曲線的Z點，葉肉細胞利用氧氣的具體場所是____________。在Y點時，該植物綠色部分的細胞通過光合作用產(chǎn)生的O2量與該部分細胞呼吸消耗的O2量相比____________(填要多、要少或相等)。10．（14分）為增加油葵種子中的含油量，科學家嘗試將花生中的酶A基因?qū)胗涂毎@得轉(zhuǎn)基因油葵新品種。（1）為獲取目的基因，可從花生細胞中提取_________，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。以此cDNA為模板通過PCR技術(shù)擴增目的基因。（2）構(gòu)建重組DNA分子（如圖所示）最好選用_________限制酶，目的是可避免_________。（3）普通大腸桿菌細胞中沒有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，將構(gòu)建的重組DNA分子導入農(nóng)桿菌中,將獲得的農(nóng)桿菌接種在含_________的固體平板上培養(yǎng)得到含重組質(zhì)粒的單菌落，再利用培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。（4）剪取油葵的葉片放入浸染液中一段時間后，經(jīng)過篩選獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞。最后經(jīng)過__________________培育成轉(zhuǎn)基因油葵植株。此種技術(shù)的原理是_________。（5）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該酶A的20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼幔浯呋芰⑻岣?倍。通過蛋白質(zhì)工程對酶A進行改造，所需步驟有_________。a．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設計b．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析c．蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的定向改造d．酶A基因的定向改造e．將改造后的酶A基因?qū)胧荏w細胞f．將定向改造的酶A導入受體細胞（6）經(jīng)過種植轉(zhuǎn)基因油葵發(fā)現(xiàn)，雖然轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丟失，其原因是_________。11．（14分）凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶，研究人員利用基因工程技術(shù)，將編碼該酶的基因轉(zhuǎn)移到了微生物細胞中并使之表達。如圖表示EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶在質(zhì)粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位點．回答下列問題：（1）根據(jù)圖中EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶的切割位點分析，該工程中最不適宜用來切割外源DNA獲取目的基因的限制酶是_____，將切割后的質(zhì)粒和目的基因連接起來需要_____酶．構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在目的基因前要加上特殊的啟動子，它是_____識別和結(jié)合的部位。（2）工業(yè)化生產(chǎn)過程中，若采用重組大腸桿菌生產(chǎn)凝乳酶，該過程中將目的基因?qū)舜竽c桿菌前，常常用_____處理細胞，使之處于一種能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為_____細胞。（3）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該凝乳酶第20位和第24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，其催化能力將提?倍?？茖W家可以生產(chǎn)上述高效凝乳酶的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是_____。該生物工程技術(shù)對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的設計和改造，必須通過基因來完成，原因是_____。12．在適宜光照下，測定植物甲、乙在不同CO2濃度下的光合速率，結(jié)果如圖所示。請據(jù)圖回答問題：

（1）CO2濃度為q時，限制植物甲、乙光合速率的環(huán)境因素分別是_________、_________；植物甲呼吸作用的最適溫度比光合作用的高，若圖中曲線是在光合作用的最適溫度下測定的，現(xiàn)適當提高環(huán)境溫度。q點將向__________移動。（2）若將植物甲、乙同時種植在同一個透明的密閉環(huán)境中，在適宜光照下，一段時間后，植物________可能無法正常生長，原因是_________________________________________________________。（3）CO2濃度為r時，植物甲的總光合速率______________（填“大于”“等于”或“小于”）植物乙的總光合速率；當CO2濃度為q時，植物乙與植物甲固定的CO2量的差值為_______________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

A、d處有神經(jīng)節(jié)故e是感受器，刺激b能引起肌肉收縮，但不屬于反射，A錯誤；B、興奮在c處傳遞需要經(jīng)過突觸，有信號的轉(zhuǎn)變比在b神經(jīng)纖維上的速度慢些，B錯誤；C、在反射弧中因為有突觸的存在，興奮傳遞方向是單向的，C正確；D、II處發(fā)生信號轉(zhuǎn)變是化學信號到電信號，D錯誤。故選C。2、C【解析】

A、單克隆抗體是由骨髓瘤細胞和B細胞融合形成的雜交瘤細胞合成和分泌的，A正確；B、活化的阿霉素是抑制DNA和RNA的合成的，DNA合成是經(jīng)過DNA的復制，RNA的合成是轉(zhuǎn)錄，B正確；C、根據(jù)圖形信息阿霉素的活化需要生物導彈攜帶的堿性磷酸酶，所以在治療中，應先注射生物導彈再注射非活化磷酸阿霉素，但不能間隔時間太長，因為沒有與腫瘤細胞結(jié)合的“生物導彈”一段時間后被機體清除，C錯誤；D、單克隆抗體具有特異性強，靈敏度高可大量制備的特點，根據(jù)特異性強這一特點，在該過程中是針對腫瘤細胞的，所以能減輕阿霉素對正常細胞的傷害，D正確。故選C。3、D【解析】

HIV通過識別靶細胞表面的受體進入靶細胞，故可以通過敲除CCR5避免HIV入侵。【詳解】A、CCR5基因可能還參與了其他生理過程的調(diào)控，敲除CCR5基因后其他生理過程會受到影響，A錯誤；B、基因編輯技術(shù)有可能因編輯對象錯誤（脫靶）造成不可預知的后果，故會引發(fā)民眾的擔憂，B錯誤；C、被編輯個體受其他疾病感染的風險可能會提高，會引發(fā)民眾的擔憂，C錯誤；D、該技術(shù)不符合人類倫理道德，D正確。故選D。4、A【解析】

1、植物細胞中生長素的運輸方式有：橫向運輸、極性運輸和非極性運輸，三種運輸方式都需要消耗能量，主要由線粒體提供；2、吞噬細胞通過胞吞作用攝取抗原，需要消耗能量；3、沒有成形細胞核的細胞有：成熟篩管細胞、哺乳動物成熟的紅細胞等。【詳解】A、生長素從頂芽運輸?shù)絺?cè)芽是極性運輸，需要消耗能量，主要由線粒體提供，A正確；B、吞噬細胞將抗原攝入細胞內(nèi)，與細胞膜的流動性有關(guān)，對于攝入細胞的抗原可利用溶酶體中的溶菌酶處理，B錯誤；C、高等植物的篩管細胞在成熟過程中，細胞核已退化、消失，衰老過程中無細胞核的變化，C錯誤；D、低等植物細胞分裂末期細胞板的形成于高爾基體有關(guān)，D錯誤。故選A。5、C【解析】

1、酸雨（1）形成原因：主要是硫和氮的氧化物溶于雨水而降落至土壤或水體中，酸雨的pH＜5.6。（2）來源：煤、石油等化石燃料的大量燃燒等。2、水污染（1）來源：生活污水、工業(yè)污水，海洋運輸時泄露和傾倒污染物。（2）表現(xiàn)：富營養(yǎng)化。（3）結(jié)果：若表現(xiàn)在海洋中稱為赤潮，若表現(xiàn)在湖泊等淡水流域稱為水華。3、臭氧層破壞（1）臭氧層作用：吸收日光中的紫外線，對地球生物具有保護作用。（2）破壞原因：空氣中的氟利昂等物質(zhì)的大量排放。（3）機理：氟利昂遇紫外線即放出氯，氯破壞臭氧分子的能力極強，一個氯原子能破壞10個臭氧分子。（4）危害：臭氧層破壞后，到達地球表面的紫外線將增加，給人類健康和生態(tài)環(huán)境帶來危害?！驹斀狻緼、地球的資源是有限的，食物的生產(chǎn)也是有限的，那么控制人口數(shù)量增長的唯一出路就是設法降低出生率，做到自我控制，A正確；B、由于煤、石油和天然氣的大量燃燒，致使二氧化碳的全球平衡受到了嚴重干擾，導致溫室效應，B正確；C、CO2釋放不會破壞臭氧層，臭氧量減少主要是大量氟利昂逸散之后最終將會到達大氣圈上層并在強紫外線照射下通過化學反應導致，C錯誤；D、微生物病原體投放到水體中會導致水體污染，使越來越多的江、河、湖、海變質(zhì)，使飲用水的質(zhì)量越來越差，D正確。故選C?！军c睛】本題考查全球性生態(tài)環(huán)境問題，要求考生了解全球性生態(tài)環(huán)境問題，掌握這些環(huán)境問題形成的原因、危害及緩解措施，并結(jié)合所學知識判斷各選項，難度不大。6、D【解析】

分析題意：假設果蠅的紅眼和白眼由一對等位基因A/a控制，親本純合紅眼雌果蠅的基因型為XAXA，白眼雄果蠅基因型為XaY，F(xiàn)1中雌果蠅基因型為XAXa，雄果蠅基因型為XAY?！驹斀狻緼、親本中純合紅眼雌果蠅和白眼雄果蠅相同數(shù)量，Y染色體上無白眼基因，故紅眼基因頻率大于白眼基因頻率，A錯誤；B、F1雌雄隨機交配，F(xiàn)2的雌果蠅基因型為XAXA、XAXa，表現(xiàn)型均為紅眼，B錯誤；C、白眼雌果蠅最先出現(xiàn)在F3，這是基因分離以及雌雄受精的結(jié)果，C錯誤；D、F2和F3的雄果蠅基因型均為XAY、XaY，能產(chǎn)生XA、Xa、Y3種基因型的配子，D正確。故選D。7、C【解析】

突觸小體中有突觸小泡，突觸小泡中有神經(jīng)遞質(zhì)，神經(jīng)遞質(zhì)只能由突觸前膜釋放到突觸后膜，使后膜產(chǎn)生興奮（或抑制）所以是單向傳遞；（突觸前膜→突觸后膜，軸突→樹突或胞體）。當興奮傳遞至突觸小體，引起Ca2+通道開放，Ca2+促進突觸小體釋放遞質(zhì)，遞質(zhì)作用于突觸后膜上的受體，引起Na+內(nèi)流，進而引起突觸后膜發(fā)生興奮。【詳解】A、神經(jīng)遞質(zhì)和受體結(jié)合后，引起Na+內(nèi)流，所以突觸后神經(jīng)元的興奮性增加，A錯誤；B、神經(jīng)遞質(zhì)的運輸方式是胞吐作用，需要消耗能量，B錯誤；C、從圖中看出當興奮傳遞至突觸小體后，引起Ca2+通道打開，C正確；D、突觸間隙中Na+濃度增大，當突觸后膜興奮時，內(nèi)流的Na+增多，引起動作電位的值變大，D錯誤。故選C。【點睛】本題關(guān)鍵是分析出圖中興奮在突觸間興奮傳遞的過程，結(jié)合教材知識進行解答。8、D【解析】

雞的性別決定方式屬于ZW型，雌雞的性染色體組成是ZW，雄雞的性染色體組成是ZZ。根據(jù)題意一只純種雌性蘆花雞與一只純種雄性非蘆花雞交配多次，F(xiàn)1中雄雞均為蘆花雞，雌雞均為非蘆花雞，表現(xiàn)出交叉遺傳特性，母本與雄性后代相同，父本與雌性后代相同，所以控制該性狀的基因不在W染色體上而在Z染色體上，且蘆花是顯性性狀，非蘆花為隱性性狀。母本蘆花雞的基因型是ZAW，父本非蘆花雞的基因型是ZaZa，據(jù)此答題?！驹斀狻緼、由題意分析可知蘆花雞與非蘆花雞在雌性和雄性中都有出現(xiàn)，說明控制該性狀的基因不在W染色體上，應該在Z染色體上，A錯誤；B、根據(jù)分析，母本蘆花雞基因型是是ZAW，父本非蘆花雞基因型是ZaZa，所以F1中雌性非蘆花雞∶雄性蘆花雞=1∶1，B錯誤；C、ZAW×ZaZa→F1（ZaW、ZAZa），F(xiàn)1中的雌、雄雞自由交配，F(xiàn)2表現(xiàn)型及比例為：蘆花雞∶非蘆花雞=1∶1，C錯誤；D、ZAW×ZaZa→ZAZa、ZaW，F(xiàn)1中的雌、雄雞自由交配，F(xiàn)2中雌、雄雞的基因型和表現(xiàn)型分別為ZAZa（蘆花雌雞）、ZaZa（非蘆花雌雞）、ZAW（蘆花雄雞）、ZaW（非蘆花雄雞），早期雛雞僅根據(jù)羽毛的特征不能區(qū)分雌雞和雄雞，D正確。故選D?！军c睛】雞的性別決定方式和人類、果蠅正好相反。在伴性遺傳中考察最多的就是這一對“ZAW（蘆花♀）×ZaZa（非蘆花♂）”對早期的雛雞可以根據(jù)羽毛特征把雌性和雄性區(qū)分開，也可以用來判斷顯隱性，這就是這道試題解答的入手點。二、非選擇題9、在不改變燈功率的情況下，通過調(diào)整燈與廣口瓶之間的距離來控制在不改變燈與廣口瓶之間距離的情況下，通過調(diào)整燈的功率來控制將黑藻換成形態(tài)大小相同的死亡黑藻線粒體內(nèi)膜要多【解析】

光合作用分為兩個階段進行，在這兩個階段中，第一階段是直接需要光的稱為光反應，第二階段不需要光直接參加，是二氧化碳轉(zhuǎn)變?yōu)樘堑姆催^程稱為暗反應。光合作用在葉綠體中進行，光反應的場所位于類囊體膜，暗反應的場所在葉綠體基質(zhì)。光反應的發(fā)生需要葉綠體類囊體膜上的色素、酶參與。光合作用和呼吸作用是植物兩大重要的代謝反應，光合作用與呼吸作用的差值稱為凈光合作用?！驹斀狻浚?）用圖甲裝置，改變光照強度的方法通常是調(diào)整光源與廣口瓶之問的距離或調(diào)節(jié)光源的功率。（2）對照試驗是為了排除無關(guān)變量的影響，所以將黑藻換成形態(tài)大小相同的死亡黑藻即可。（3）細胞中利用氧氣的過程是有氧呼吸第三階段，其具體場所是線粒體內(nèi)膜。在Y點時，該植物的綠色部分細胞光合作用產(chǎn)生的O2量比該部分細胞呼吸消耗的O2量要多。原因是該光照強度下，植物整體的光合作用強度與細胞呼吸強度相等，但植物體有一些非綠的細胞不能進行光合作用?！军c睛】熟悉光合作用及呼吸作用的過程是解答本題的關(guān)鍵。10、mRNABamHⅠ和PstⅠ質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接氨芐青霉素植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物細胞的全能性b、a、d、e抗灰霉菌基因沒有表達（或丟失等）【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）逆轉(zhuǎn)錄過程需要從供體細胞內(nèi)提取出的mRNA為模板，以脫氧核苷酸為原料合成cDNA。（2）構(gòu)建重組DNA分子時選用的限制酶要不破壞目的基因，所以不能用EcoRI，同時盡量防止質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接，所以最好選用兩種限制酶，即BamHⅠ和PstⅠ。（3）根據(jù)限制酶的切割位點，由于使用BamHⅠ和PstⅠ會破壞抗四環(huán)素標記基因，但抗氨芐青霉素的標記基因是完整的所以只能用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的單菌落。（4）得到轉(zhuǎn)基因細胞后，要培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植株，需要用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)才能實現(xiàn)，其依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。（5）蛋白質(zhì)工程的步驟是：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析→蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設計→酶A基因的定向改造→將改造后的酶A基因?qū)胧荏w細胞→獲得所需蛋白質(zhì)。（6）轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升，但抗灰霉菌的能力丟失，原因可能是抗灰霉菌基因未表達或丟失?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。11、EcoRⅠDNA連接酶RNA聚合酶Ca2+感受態(tài)蛋白質(zhì)工程基因決定蛋白質(zhì)【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）含有目的基因的外源DNA分子上含有EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶的切割位點，其中EcoRⅠ的切割位點位于目的基因上，用該酶切割會破壞目的基因，因此不能用該酶切割；將切割后的質(zhì)粒和目的基