酸性土壤速效磷試劑盒說明書

第第頁酸性土壤速效磷試劑盒說明書酸性土壤速效磷試劑盒說明書微量法100T/96S注意：正式測(cè)定之前選擇23個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。測(cè)定意義：速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分，包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機(jī)態(tài)磷，土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一、測(cè)定原理：用雙酸法提取酸溶性磷和吸附態(tài)磷，用鉬銻抗比色法測(cè)定。自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。試劑組成和配制：提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。試劑一：液體6mL×1支，4℃保存。試劑二：粉劑×1支，4℃避光保存。臨用前加2mL蒸餾水溶解。用不完的試劑4℃保存。試劑三：粉劑×3支，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解?，F(xiàn)配現(xiàn)用。樣本處理：新鮮土樣風(fēng)干，過3050目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取30min，10000g，25℃離心10min，取上清液待測(cè)。測(cè)定步驟：1、取試劑三一支，加入1mL蒸餾水充分溶解待用。2、顯色液的配制（可測(cè)50個(gè)樣）：取EP管一支，加入660μL試劑一，再加入100μL試劑二，充分混勻后，再加入240μL試劑三，充分混勻待用；配好的顯色液應(yīng)為黃色，若變藍(lán)則為磷污染；顯色液必須現(xiàn)配現(xiàn)用；若一次性測(cè)不了50個(gè)樣，可按比例縮小各試劑體積。3、操作表空白管測(cè)定管樣本（μL）40提取液（μL）40顯色液（μL）2020H2O（μL）140140充分混勻，25℃靜置30min于微量石英比色皿/96孔板中，蒸餾水調(diào)零，測(cè)定660nm處吸光值A(chǔ)，分別記為A空白管和A測(cè)定管，△A=A測(cè)定管A空白管?？瞻坠苤灰鲆还?。計(jì)算公式：a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.1252x0.0041，R2=0.9957，x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/L），y為吸光值。速效磷含量（mg/kg干重）=（△A+0.0041）÷0.1252×V樣÷（W×V樣÷V樣總）=7.987×（△A+0.0041）÷WV樣：樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，約0.1gb.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0626x0.0041，R2=0.9957，x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/L），y為吸光值。速效磷含量（mg/kg干重）=（△A+0.0041）÷0.0626×V樣÷（W×V樣÷V樣總）=15.97×（△A+0.0041）÷WV樣：樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，約0.1g注意事項(xiàng)：1.配好的顯色液