赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频奶崛」に噧?yōu)化

背景介紹靈芝為多孔菌科真菌赤芝干燥子實(shí)體，是我國名貴的傳統(tǒng)中藥，藥用價(jià)值極高。除子實(shí)體外，孢子粉是其另一個(gè)常用的藥用部位之一。關(guān)于靈芝孢子粉的研究主要集中在赤芝孢子粉總?cè)频奶崛?yōu)化及其藥理活性的探究，紫芝孢子粉因其產(chǎn)量少，價(jià)格高對(duì)其研究較少，所以，關(guān)于紫芝孢子粉的提取工藝以及赤芝和紫芝孢子粉之間是否存在差異尚不明確。本文采用超聲提取法對(duì)赤芝和紫芝孢子粉中的總?cè)七M(jìn)行提取，并采用響應(yīng)面法對(duì)提取參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，以獲得總?cè)频寐瘦^高的醇提物。為進(jìn)一步研究赤芝和紫芝孢子粉中的三萜類化合物奠定基礎(chǔ)，同時(shí)也為赤芝、紫芝孢子粉的質(zhì)量控制及食品藥品的開發(fā)利用提供理論依據(jù)和參考。文章亮點(diǎn)1.赤芝、紫芝孢子粉中總?cè)频寐实钠骄捣謩e為14.03%、10.20%，與模型預(yù)測(cè)值的RSD僅為0.94%、1.24%；2.

相較于傳統(tǒng)的溶劑浸提法和回流提取法，縮短了提取時(shí)間且提取率提高，高效省時(shí)，原料利用率高，有效成分不會(huì)因?yàn)闇囟忍叨黄茐?，適用于工業(yè)生產(chǎn)。內(nèi)容介紹1單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響1.1

溶劑對(duì)總?cè)频寐实挠绊懸詿o水乙醇作為溶劑提取赤芝、紫芝孢子粉中的三萜，得率均大于用無水甲醇提取總?cè)频牡寐?。因此，選擇乙醇作為提取赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频娜軇?.2

料液比對(duì)總?cè)频寐实挠绊懜鶕?jù)圖1可知，料液比對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频奶崛÷视绊戄^大。a.

赤芝孢子粉；

b.

紫芝孢子粉圖1

料液比對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频寐实挠绊慒ig.1

Effectofsolid-liquidratioonthetotaltriterpenoidyieldof

Ganodermalucidum

and

Ganodermasinense

sporepowder1.3

提取時(shí)間對(duì)總?cè)频寐实挠绊懹蓤D2可知，提取時(shí)間對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频奶崛÷视绊戄^小，總?cè)频寐孰S著時(shí)間的增加而增大，赤芝孢子粉在60min時(shí)達(dá)到最大，紫芝孢子粉在40min時(shí)達(dá)到最大，之后逐漸下降。a.

赤芝孢子粉

；b.

紫芝孢子粉圖2

提取時(shí)間對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频寐实挠绊慒ig.2

Effectofextractiontimeonthetotaltriterpenoidyieldof

Ganodermalucidum

and

Ganodermasinense

sporepowder1.4

提取溫度對(duì)總?cè)频寐实挠绊懹蓤D3可知，提取溫度對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频奶崛÷视绊懕容^小，總?cè)频寐孰S著溫度的升高而增大，赤芝、紫芝孢子粉都在40

oC時(shí)達(dá)到最大，而后逐漸下降，因此赤芝、紫芝孢子粉選擇30、40、50

oC3個(gè)水平進(jìn)行Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)。a.

赤芝孢子粉；

b.

紫芝孢子粉圖3

提取溫度對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频寐实挠绊慒ig.3

Effectofextractiontemperatureonthetotaltriterpenoidyieldof

Ganodermalucidum

and

Ganodermasinense

sporepowder1.5

乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總?cè)频寐实挠绊懹蓤D4可知，赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频奶崛÷示c乙醇體積分?jǐn)?shù)的大小呈正相關(guān)，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為100%時(shí)提取率突然增大，達(dá)到最大值，因沒有出現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，無法選擇響應(yīng)面設(shè)計(jì)的高中低3個(gè)水平，所以不選擇該因素進(jìn)行Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)。a.

赤芝孢子粉

b.

紫芝孢子粉圖4

乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频寐实挠绊慒ig.4

Effectofethanolcontentonthetotaltriterpenoidyieldof

Ganodermalucidum

and

Ganodermasinense

sporepowder2響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果2.1

赤芝孢子粉結(jié)果分析以赤芝孢子粉總?cè)频寐剩╕1）為響應(yīng)值，經(jīng)多元二次回歸擬合分析，得到的回歸方程為：Y1=13.92+1.05A+0.06B+0.595C-0.105AB-0.73AC+0.255BC-0.975A2-1.55B2-0.825C2。2.2

紫芝孢子粉結(jié)果分析以紫芝孢子粉總?cè)频寐剩╕2）為響應(yīng)值，對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元二次回歸擬合分析，得到的回歸方程為：Y2=9.8+1.08A+0.11B+0.57C+0.06AB-0.72AC-0.01BC-0.63A2-1.06B2-0.90C2。2.3

最優(yōu)提取工藝的確定及驗(yàn)證試驗(yàn)經(jīng)優(yōu)化，赤芝孢子粉總?cè)铺崛〉睦碚撟顑?yōu)條件是：液料比（料液比的倒數(shù)）、提取時(shí)間、提取溫度分別為64.813、60.311min、41.493

oC，理論得率為14.218%。3結(jié)論根據(jù)本課題組前期采用紫外-可見分光光度法測(cè)定靈芝孢子粉中總?cè)坪糠椒▽W(xué)的考察，該方法準(zhǔn)確可靠，可行性良好。單因素試驗(yàn)考察了提取溶劑種類、料液比、提取時(shí)間、提取溫度、溶劑組成對(duì)赤芝、紫芝孢子粉總?cè)频寐实挠绊?，在此基礎(chǔ)上，通過Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)料液比、提取時(shí)間以及提取溫度3個(gè)因素進(jìn)行提取工藝優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)赤芝與紫芝孢子粉最佳提取工