《微生物基礎(chǔ)》課件-14克氏雙糖鐵(KIA)試驗

克氏雙糖鐵(KIA)試驗微生物基礎(chǔ)克氏雙糖鐵培養(yǎng)基配方蛋白胨牛肉膏酵母膏乳糖葡萄糖克氏雙糖鐵培養(yǎng)基配方氯化鈉檸檬酸鐵銨硫代硫酸鈉酚紅瓊脂克氏雙糖鐵培養(yǎng)基配方無糖培養(yǎng)基+1份葡萄糖+10份乳糖+鐵鹽+酚紅碳源葡萄糖乳糖1：10指示劑：酚紅pH<6.8黃色pH>8.4紅色克氏雙糖鐵培養(yǎng)基的pH為7.4雙糖:葡萄糖和乳糖鐵:檸檬酸鐵銨克氏雙糖鐵培養(yǎng)基原理是怎樣的呢？是否分解乳糖?是否分解葡萄糖?是否產(chǎn)氣（有斷裂）?是否產(chǎn)H2S（培養(yǎng)基變黑色）?固體培養(yǎng)基含有乳糖半固體培養(yǎng)基含有葡萄糖克氏雙糖鐵培養(yǎng)基中葡萄糖含量僅為乳糖的1/10，若細(xì)菌只分解葡萄糖而不分解乳糖，分解葡萄糖產(chǎn)酸使PH降低葡萄糖含量較少，產(chǎn)生的少量酸可因接觸空氣而氧化，并因細(xì)菌生長繁殖時可利用含氮物質(zhì)生成堿性化合物處于缺氧狀態(tài)，氨基酸降解產(chǎn)生的堿性物質(zhì)不足以中和所形成的酸克氏雙糖鐵培養(yǎng)基中葡萄糖含量僅為乳糖的1/10，若細(xì)菌只分解葡萄糖而不分解乳糖，分解葡萄糖產(chǎn)酸使PH降低細(xì)菌分解葡萄糖、乳糖產(chǎn)酸克氏雙糖鐵培養(yǎng)基中葡萄糖含量僅為乳糖的1/10，若細(xì)菌只分解葡萄糖而不分解乳糖，分解葡萄糖產(chǎn)酸使PH降低細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫時與培養(yǎng)基中的硫酸亞鐵作用斜面紅，底層黃，說明什么？細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵乳糖，是不發(fā)酵乳糖菌的特征。培養(yǎng)8-12h時培養(yǎng)18-24時細(xì)菌把培養(yǎng)基里葡萄糖分解后產(chǎn)生了一定量的酸，把培養(yǎng)基都染成了黃色。

葡萄糖被完全消耗，斜面部分的細(xì)菌在有氧條件下開始氧化降解氨基酸，產(chǎn)生的胺類很快就中和斜面上存在的酸，很快斜面PH轉(zhuǎn)為堿性，顏色變?yōu)榧t色。實驗結(jié)果是斜面黃，底層黃呢？細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖，發(fā)酵乳糖。實驗結(jié)果是斜面紅，底層紅呢？斜面堿性，底層堿性：不發(fā)酵葡萄糖和乳糖，系不發(fā)酵菌的特征。中間的培養(yǎng)基斷裂了，這是怎么回事？產(chǎn)氣了，產(chǎn)生的氣體，使整個培養(yǎng)基都發(fā)生了斷裂，就是產(chǎn)氣的表現(xiàn)。發(fā)酵葡萄糖、發(fā)酵乳糖、產(chǎn)氣的情況發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，不發(fā)酵乳糖，產(chǎn)生硫化氫發(fā)酵葡萄糖和乳糖產(chǎn)酸培養(yǎng)基斷裂斜面紅色，底層酸性（黑色）斜面酸性，底層酸性，底層和斜面均呈黃色發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)氣表述最終結(jié)果表述最終結(jié)果反應(yīng)產(chǎn)酸產(chǎn)堿是否產(chǎn)生H2S或氣體表示符號AK加號“+”或減號“-”志賀氏菌KA--不發(fā)酵乳糖發(fā)酵葡萄糖不產(chǎn)氣不產(chǎn)H2S志賀氏菌傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌志賀氏菌傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌不發(fā)酵乳糖，發(fā)酵葡萄糖，不產(chǎn)氣，不產(chǎn)H2S，記為KA--只分解葡萄糖，不分解乳糖，產(chǎn)生的酸少斜面可揮發(fā)、氧化以及因為細(xì)菌分解培養(yǎng)基里的含氮物質(zhì)產(chǎn)胺（生成堿性物質(zhì)），中和酸志賀菌屬傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌不發(fā)酵乳糖，發(fā)酵葡萄糖，不產(chǎn)氣，產(chǎn)H2S，記為KA-+底層黑色，為產(chǎn)H2S，說明硫化氫試驗陽性，即細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中的含硫氨基酸胱氨酸半胱氨酸H2S在酸性條件下遇鐵離子形成硫化亞鐵志賀菌屬傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌不發(fā)酵乳糖，發(fā)酵葡萄糖，不產(chǎn)氣，產(chǎn)H2S，記為KA-+產(chǎn)酸產(chǎn)H2S不發(fā)酵乳糖底層黑色，為產(chǎn)H2S，說明硫化氫試驗陽性，即細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中的含硫氨基酸志賀菌屬傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌發(fā)酵乳糖、葡萄糖，產(chǎn)氣，不產(chǎn)H2S記為AA

+-志賀菌屬傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌發(fā)酵乳糖、葡萄糖，產(chǎn)氣，不產(chǎn)H2S記為AA

+-志賀菌屬傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌銅綠假單胞菌全是紅色，不變黃不分解葡萄糖，不分解乳糖不發(fā)酵乳糖志賀氏菌傷寒沙門氏菌銅綠假單胞菌發(fā)酵乳糖大腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌發(fā)酵葡萄糖志賀菌屬傷寒沙門氏菌腸埃希氏菌肺炎克雷伯菌產(chǎn)H2S傷寒沙門氏菌不分解葡萄糖銅綠假單胞菌斜面呈紅色斜面呈黃色底層紅色底層黃色1、多數(shù)沙門氏菌在克氏雙糖鐵（KIA）復(fù)合實驗中的反應(yīng)是（）A、斜面和底層均變黃B、斜面變紅，底層變黃C、斜面和底層均變紅D、斜面變紅，底層變黑E、斜面變紅，底層無變化D、斜面變紅，底層變