糧油檢驗(yàn) 谷物粉狀制品中碘的測(cè)定-氣相色譜法編制說(shuō)明

PAGE1PAGE8《谷物粉狀制品中碘的測(cè)定—?dú)庀嗌V法》編制說(shuō)明引言碘是人體必須元素之一，人體缺碘將嚴(yán)重影響嬰幼兒的生長(zhǎng)發(fā)育與人體健康。但人體所攝入的碘缺乏或過(guò)量都將對(duì)人體產(chǎn)生危害。目前在數(shù)多配方食品中都將碘作為重要的強(qiáng)化成分，特別是嬰幼兒配方乳粉及米粉中的含量規(guī)定為強(qiáng)制指標(biāo)：GB10765-1997、GB10766-1997、GB10767-1997、GB10769-1997、GB10770-1997的五個(gè)嬰幼兒配方粉（以牛或羊乳為主要原料）和嬰幼兒斷奶期的輔助與補(bǔ)充食品（以谷物為主要原料）的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了碘的含量應(yīng)在30～150μg/100g。相應(yīng)的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)必須能準(zhǔn)確測(cè)定其含量。在現(xiàn)行有效的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法中只有GB/T5413.23-1997《嬰幼兒配方食品和乳粉碘的測(cè)定》，該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)以乳為主要原料的產(chǎn)品碘能夠準(zhǔn)確測(cè)定其含量，而以谷物為主要原料的產(chǎn)品因大量淀粉的干擾其測(cè)定結(jié)果偏低（即該方法不適于谷物類(lèi)產(chǎn)品）。因目前該類(lèi)產(chǎn)品在市場(chǎng)上較多，且許多產(chǎn)品涉及嬰幼兒，直接影響到嬰幼兒的健康及正常發(fā)育，準(zhǔn)確測(cè)定碘的含量極為重要。為此我們針對(duì)谷物類(lèi)產(chǎn)品的特點(diǎn)，聯(lián)合雀巢公司共同開(kāi)展了谷物類(lèi)食品中碘的測(cè)定方法的研究，并于2007年通過(guò)全國(guó)乳品標(biāo)準(zhǔn)化中心向國(guó)家標(biāo)委會(huì)提出了制定該標(biāo)準(zhǔn)的申請(qǐng)。1、任務(wù)來(lái)源、起草單位、驗(yàn)證單位和主要起草人任務(wù)來(lái)源：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)任務(wù)編號(hào)：20071661-T-449起草單位：國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，雙城雀巢乳品有限公司歸口單位：全國(guó)糧油標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)驗(yàn)證單位：國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)杭州站，上海英特爾營(yíng)養(yǎng)乳品有限公司，青島圣元乳品公司，農(nóng)業(yè)部乳品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心主要起草人：姜金斗、楊金寶、李輝、魏雪東、宋暢、郎昭斌、鞏軍2、制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義2.1維護(hù)消費(fèi)者健康的需要碘是人體必須元素，碘缺乏嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，碘缺乏病的主要表現(xiàn)是：損害兒童大腦神經(jīng)發(fā)育，表現(xiàn)為不同程度的智力缺陷、學(xué)習(xí)能力低下。地方性甲狀腺腫，俗稱(chēng)粗脖根或大脖子病；嚴(yán)重碘缺乏會(huì)引發(fā)地方性克汀病。表現(xiàn)為聾、啞、呆、傻。導(dǎo)致正在母親肚子里生長(zhǎng)的胎兒死亡、畸形、聾啞或流產(chǎn)、早產(chǎn)。成人體力和勞動(dòng)能力下降，兒童生長(zhǎng)、發(fā)育受到影響。此外，碘缺乏病還明顯影響牲畜的生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖和生產(chǎn)力，降低肉、蛋、乳等的產(chǎn)量和質(zhì)量?？茖W(xué)家的研究發(fā)現(xiàn)女性比男性更容易受到缺碘的影響。幼兒和青春期少年兒童生長(zhǎng)發(fā)育較快，體內(nèi)需要的碘也就多。由于生理的原因，處于青春期的女孩和懷孕的婦女更是需要碘，因此，她們對(duì)碘缺乏非常敏感。由此可知：強(qiáng)化碘的食品必須達(dá)到配方要求，否則對(duì)人體健康將產(chǎn)生危害，特別是以此類(lèi)產(chǎn)品為主要食品的嬰幼兒而言更為重要。制定準(zhǔn)確測(cè)定谷物中碘含量的標(biāo)準(zhǔn)迫在眉睫。國(guó)家政府部門(mén)食品安全監(jiān)管的需要我國(guó)自實(shí)施食品質(zhì)量安全市場(chǎng)準(zhǔn)入制度以來(lái)，對(duì)規(guī)范食品質(zhì)量安全生產(chǎn)、保護(hù)廣大消費(fèi)者的利益等起到了極為重要的作用。其中食品生產(chǎn)許可證審查細(xì)則就是審查生產(chǎn)企業(yè)是否符合要求的法規(guī)性文件，也是企業(yè)必須達(dá)到的最低要求。另一方面，產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)督必須有相應(yīng)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)支持，否則無(wú)法有效監(jiān)管。由此可看出，制訂此檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)的重要性。2.3完善國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的需要在我國(guó)現(xiàn)有的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)中，缺失針對(duì)谷物類(lèi)產(chǎn)品中碘的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)。這也是完善食品檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的需要。3、起草過(guò)程3.1前期工作2006年，根據(jù)企業(yè)的要求及國(guó)家有關(guān)執(zhí)法部門(mén)執(zhí)法的需要，我們開(kāi)始立項(xiàng)開(kāi)展“米粉中碘的測(cè)定”方法研究。因在現(xiàn)行國(guó)家及國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)中，無(wú)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)解決谷粉類(lèi)產(chǎn)品中碘的測(cè)定。根據(jù)谷物類(lèi)產(chǎn)品的特點(diǎn)，首先組織技術(shù)人員研究制定了技術(shù)路線(xiàn)，搜集有關(guān)資料并開(kāi)展了研究工作。首先根據(jù)GB/T5314的方法測(cè)定了米粉中碘的含量，發(fā)現(xiàn)此方法不適于該類(lèi)產(chǎn)品；而后我們借鑒了雀巢公司的方法進(jìn)行研究，證明此方法基本可行。而后對(duì)此方法進(jìn)行優(yōu)化后，組織相關(guān)技術(shù)人員開(kāi)始按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)制定的要求對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證，對(duì)方法的適用范圍、采用的標(biāo)準(zhǔn)、驗(yàn)證方法、準(zhǔn)確性、精密度等方面進(jìn)行了分析和確認(rèn)，目前已基本完成了實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證工作。驗(yàn)證后認(rèn)為此方法操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速，并通過(guò)測(cè)定米粉、麥粉等不同樣品碘含量后證明：該方法能準(zhǔn)確測(cè)定。基本符合制定國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的條件，并于2007年向國(guó)家標(biāo)委會(huì)提出立項(xiàng)的申請(qǐng)。3.3實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證工作2008年3月全國(guó)糧標(biāo)委在北京召開(kāi)標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作會(huì)議后，根據(jù)會(huì)議精神，我們。我們邀請(qǐng)了全部通過(guò)CNAS認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)杭州站、上海英特爾營(yíng)養(yǎng)乳品有限公司、青島圣元營(yíng)養(yǎng)乳品有限公司、農(nóng)業(yè)部乳品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心（哈爾濱）等單位進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室間的驗(yàn)證工作。通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析各個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)數(shù)據(jù)，驗(yàn)證了方法的準(zhǔn)確度和精密度、最低檢出限等。參加驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)室一致認(rèn)為：該方法用于測(cè)定以淀粉為主的谷物類(lèi)產(chǎn)品中碘的測(cè)定，其結(jié)果準(zhǔn)確可靠，操作簡(jiǎn)單、快速等特點(diǎn)。并將方法整理成為征求意見(jiàn)稿。4.制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)。目前測(cè)定產(chǎn)品中碘含量的標(biāo)準(zhǔn)有GB/T5413.23-1997《嬰幼兒配方食品和乳粉碘的測(cè)定》、GB/T13882-92《飼料中碘的測(cè)定方法硫氮酸鐵一亞硝酸催化動(dòng)力學(xué)法》、SN/T0929-2000《進(jìn)出口加碘食鹽中碘的檢驗(yàn)方法》等；其中GB/T5413的氣相色譜為采用甲乙酮與碘反應(yīng)生成的衍生物進(jìn)行色譜分析，其它為比色法。由于谷物類(lèi)樣品中含有大量淀粉，碘離子被氧化為碘后與淀粉結(jié)合致使結(jié)果偏低。比色法中必須先將樣品加保護(hù)劑灰化后測(cè)定，經(jīng)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為該樣品處理方法會(huì)造成碘的損失。據(jù)此須針對(duì)谷物類(lèi)產(chǎn)品的特點(diǎn)，研究相應(yīng)的檢測(cè)方法。這類(lèi)產(chǎn)品中一般以強(qiáng)化的方式添加碘，谷類(lèi)中天然含有的碘極微量可忽略不計(jì)。添加的碘主要以碘化鉀與碘酸鉀兩種形態(tài)，所以測(cè)定方法中必須能測(cè)定這兩種形態(tài)的碘。考慮到氣相色譜法的靈敏度高，選擇性強(qiáng)的特點(diǎn)，我們采用在酸性環(huán)境下以環(huán)氧乙烷作為衍生劑，與碘離子（若為碘酸根，將其變?yōu)榈怆x子）生成碘丙烷的氣相色譜法測(cè)定。經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：該方法的準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性、檢出限等完全能滿(mǎn)足谷物類(lèi)產(chǎn)品中碘含量測(cè)定的要求。標(biāo)準(zhǔn)主要條款的說(shuō)明5.1標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)在上報(bào)國(guó)家標(biāo)委會(huì)時(shí)，當(dāng)時(shí)我們主要考慮解決嬰幼兒米粉類(lèi)產(chǎn)品中碘測(cè)定的技術(shù)問(wèn)題，所以定名為“米粉中碘的測(cè)定”。在2008年3月全國(guó)糧油標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)在北京召開(kāi)的標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作會(huì)議上，有關(guān)專(zhuān)家提出應(yīng)擴(kuò)大到所有谷物類(lèi)粉狀產(chǎn)品中。根據(jù)此建議，現(xiàn)將本標(biāo)準(zhǔn)的名稱(chēng)定為：《谷物粉狀制品中碘的測(cè)定—?dú)庀嗌V法》。5.2范圍以大米、小麥等谷物為主要原料，或加入其它輔料、白砂糖、微量元素和維生素等，經(jīng)加工制成的即食（或非即食）類(lèi)粉狀制品。樣品的處理方法考慮到谷物類(lèi)制品以淀粉為主，淀粉在測(cè)定碘時(shí)可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響，我們首先采用淀粉酶水解的方法進(jìn)行處理。結(jié)果表明：此方法處理后，由于淀粉酶本身的影響，在對(duì)用環(huán)氧乙烷衍生后的產(chǎn)物測(cè)定時(shí)會(huì)產(chǎn)生干擾，即產(chǎn)生明顯的本地值。為此我們采用用水溶解樣品后直接衍生的方式。該方法通過(guò)精密度及加標(biāo)回收證明，可減小本地值的干擾，重現(xiàn)性好等。為排除試劑對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾，同時(shí)須作空白實(shí)驗(yàn)。在提取方式上，我們先用正己烷與乙酸乙酯兩種方式進(jìn)行比較：由于形成的產(chǎn)物屬極性化合物，采用正己烷提取衍生物時(shí)，提取一次的提取率較低(90%左右)，一般需提取2-3次方可；而采用具有中等極性的溶劑乙酸乙酯提取，只需一次即可提取完全（98%以上）。特別是溶劑對(duì)人體的毒性乙酸乙酯遠(yuǎn)低于正己烷，卻操作簡(jiǎn)便。最終確定采用乙酸乙酯作為提取衍生物的試劑。為提高衍生及萃取效率，我們采用搖床恒溫的方式。即在加入衍生劑后，將樣品放入搖床中，在保溫30℃左右的條件下以150轉(zhuǎn)/分的速度振蕩反應(yīng)30min；然后加入乙酸乙酯后仍以相同條件進(jìn)行萃取。其效果明顯好于振蕩?kù)o止30min的方式進(jìn)行衍生、萃取。由于衍生物對(duì)光較為敏感，所以在操作過(guò)程中盡量避光。5.4色譜柱及條件的選擇5.4.1色譜柱的選擇：色譜住是待測(cè)物能否達(dá)到理想的分離度、方法成功的關(guān)鍵之一。根據(jù)待測(cè)組分的性質(zhì)，根據(jù)“相似相容”的原理，分離極性化合物需選用極性色譜柱。由于目前的氣相色譜基本都采用毛細(xì)管柱，我們首先使用了安杰倫生產(chǎn)的DB-23和HP-20兩種毛細(xì)柱。兩種色譜柱的性質(zhì)全部屬?gòu)?qiáng)極性，只是填料不同：前者填料為（50%-氰丙基）-甲基聚硅氧烷，主要用于分析脂肪酸甲酯；后者為聚乙二醇。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明：兩種色譜柱都能將待測(cè)物有效分離，但其選擇性后者優(yōu)于前者。采用DB-WAX毛細(xì)柱的分離效經(jīng)農(nóng)業(yè)部乳品檢測(cè)中心、國(guó)家乳品質(zhì)檢中心等實(shí)驗(yàn)不理想，故在討論稿中提出的該色譜柱取消。所以我們最終選擇以DB-INNOWAX、HP-20類(lèi)極性毛細(xì)柱作為檢測(cè)碘衍生物的色譜柱；也可使用HP-5類(lèi)弱極性柱，但梯度升為條件需較為1-1.5℃/min，否則出峰時(shí)間太短造成分離度降低等。5.4.2色譜條件的選擇由于待測(cè)液中存在大量雜質(zhì)，在測(cè)定中要求進(jìn)樣口的溫度必須保證使樣品全部氣化，并同時(shí)進(jìn)入色譜柱；為保證分離效果，在較低溫度下將待測(cè)成分分離，同時(shí)使待測(cè)液中所有組分在進(jìn)入下一樣品前全部排出色譜柱，采用梯度升溫的模式；為減小ECD檢測(cè)器的污染，采用檢測(cè)器溫度稍高的條件。據(jù)此最終推薦的色譜條件為：進(jìn)樣口溫度250℃，梯度升溫條件采用前期緩慢升溫測(cè)定、后期快速升溫清洗色譜柱，ECD溫度設(shè)定為300℃（過(guò)高雖清洗效果好，但會(huì)減少壽命）。標(biāo)準(zhǔn)及米粉碘衍生物色譜圖（不同色譜柱碘測(cè)定色譜圖）圖一、碘標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖（國(guó)家乳制品質(zhì)檢中心，DB-23）圖二、嬰幼兒米粉樣品中碘測(cè)定色譜圖（國(guó)家乳制品質(zhì)檢中心，DB-23）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)譜圖：圖三、碘標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖（青島圣元乳品公司，HP-INNOWAX）樣品譜圖：圖四、嬰幼兒米粉樣品中碘測(cè)定色譜圖（青島圣元乳品公司，HP-INNOWAX）5.5標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制為確保待測(cè)液中的碘能全部被衍生，必須使含量控制在一定范圍內(nèi)：經(jīng)測(cè)定表明，以碘含量為0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00μg系列濃度所形成的衍生物與峰面積間符合比爾定律，具有線(xiàn)性關(guān)系。通過(guò)計(jì)算其回歸方程為Y=4.115×10-5A-0.013；相關(guān)系數(shù)ｒ＝0.9978。由此證明，該標(biāo)準(zhǔn)系列濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性相關(guān)性好。碘標(biāo)準(zhǔn)系列濃度及峰面積間回歸方程與相關(guān)系數(shù)碘濃度0.200.400.600.801.00峰面積503610073150242000524352回歸方程Y=4.115×10-5A-0.013相關(guān)系數(shù)ｒｒ＝0.9978碘標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)5.6分析結(jié)果的計(jì)算氣相色譜法測(cè)定谷粉制品中碘含量采用在一定濃度的范圍內(nèi)符合比爾定律的原理，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線(xiàn)的方式，查出樣品待測(cè)液中碘的濃度，從而計(jì)算出樣品中的含量。對(duì)于高含量的樣品，可通過(guò)取樣量等方法將碘的濃度控制在適當(dāng)?shù)姆秶ＷC測(cè)定液中碘的濃度在線(xiàn)性范圍內(nèi)。5.7線(xiàn)性范圍為了確定本標(biāo)準(zhǔn)適用的線(xiàn)性區(qū)間，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法線(xiàn)性范圍。在允許的范圍內(nèi)，碘標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為“0.0,0.20,0.40,0.60,0.80，1.00μg”，經(jīng)驗(yàn)證符合比爾定律。在操作上直接吸取標(biāo)準(zhǔn)工作液，用水補(bǔ)充至10ml后再衍生，可保證衍生液中酸及衍生劑濃度的一致性。標(biāo)準(zhǔn)系列濃度測(cè)定結(jié)果及線(xiàn)性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)下表。5.8最低檢測(cè)限根據(jù)GB/T5009.1-2003，中A2.1色譜法(GC.HPLC設(shè):色譜儀最低響應(yīng)值為S=3N(N為儀器噪音水平)，則檢出限按式(A.1)進(jìn)行計(jì)算。式中：b—標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程中的斜率，響應(yīng)值/μg或響應(yīng)值/ng;S—為儀器噪音的3倍，即儀器能辨認(rèn)的最小的物質(zhì)信號(hào)。結(jié)果：確認(rèn)樣品檢出限為5μg/kg。5.9準(zhǔn)確度為了確定本方法的準(zhǔn)確度,根據(jù)GB/T5009.1-2003，我們選用不同碘含量的5個(gè)樣品分別發(fā)送到各方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室。各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)各自的條件，統(tǒng)一按照標(biāo)準(zhǔn)討論稿的方法進(jìn)行回收率測(cè)定?；厥章蕼y(cè)定采用2號(hào)樣品進(jìn)行，其測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。表25家實(shí)驗(yàn)室嬰幼兒米粉碘回收率測(cè)試結(jié)果實(shí)驗(yàn)室水平本底值（μg）添加量（μg）實(shí)測(cè)值（μg）回收率（μg）國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心水平10.170.200.19195.5水平20.500.48797.4水平31.000.98698.6青島圣元乳品公司水平10.180.200.19899.0水平20.500.47695.2水平31.000.94994.9農(nóng)業(yè)部乳品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心（哈爾濱）水平10.170.200.204102.0水平20.500.47695.2水平31.001.011101.1國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)杭州站水平10.180.200.19195.5水平20.500.47995.8水平31.001.022102.2上海英特爾營(yíng)養(yǎng)乳品有限公司水平10.170.200.202101.0水平20.500.501100.2水平31.000.99199.15家實(shí)驗(yàn)室的添加回收平均數(shù)據(jù)添加水平添加量平均回收率10.2098.620.5096.731.0099.2總平均回收率%-98.25.10精密度由我中心統(tǒng)一制備樣品，同時(shí)發(fā)送到5個(gè)參加方法驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行精密度測(cè)定。每個(gè)樣品共測(cè)定6次，并計(jì)算相對(duì)偏差及CV%值。結(jié)果見(jiàn)表3。5.10.1方法的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度見(jiàn)下表重復(fù)次數(shù)水平1水平2水平3水平4水平5134.136.438.863.493.2233.033.338.661.494.1333.634.238.264.392.2434.633.739.262.893.4533.734.738.561.790.8633.334.138.062.694.6平均值33.7234.4038.5562.7093.05標(biāo)準(zhǔn)偏差1.62830.99330.42781.07331.3737相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）4.832.891.111.711.48注：使用的為色譜柱：DB-2330m×0.25mm×0.25μm農(nóng)業(yè)部乳品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心（哈爾濱）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度見(jiàn)下表重復(fù)次數(shù)水平1水平2水平3水平4水平5133.834.840.461.893.8234.235.140.663.594.6333.134.239.463.994.2432.635.638.564.595.1534.234.839.864.393.4632.835.440.263.093.6平均值33.4534.9839.8263.5094.12標(biāo)準(zhǔn)偏差0.70920.49970.77570.99400.6462相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）2.121.431.951.560.69注：使用的色譜柱：HP-INNOWAX30m×0.320mm×0.25μ青島圣元乳品公司實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度見(jiàn)下表重復(fù)次數(shù)水平1水平2水平3水平4水平5136.9136.844.463.596.8234.2035.142.665.298.4334.5338.142.463.995.8435.2935.944.065.596.9536.6837.241.164.395.6635.4237.842.064.095.3平均值35.5036.8242.7564.4096.47標(biāo)準(zhǔn)偏差1.10111.14441.24220.78481.1483相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）3.103.112.911.221.19注：使用的色譜柱：HP-INNOWAX30m×0.320mm×0.25μ國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)杭州站實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度見(jiàn)下表重復(fù)次數(shù)水平1水平2水平3水平4水平5134.136.439.162.494.2233.034.338.661.293.1333.235.239.562.394.2433.634.739.262.693.4534.735.738.862.292.8634.335.139.661.893.6平均值33.8135.2339.1362.0893.55標(biāo)準(zhǔn)偏差0.66160.74210.38820.50760.5718相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）1.962.111.000.820.61注：使用的色譜柱：HP-INNOWAX30m×0.320mm×0.25μ上海英特爾營(yíng)養(yǎng)乳品有限公司實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度見(jiàn)下表重復(fù)次數(shù)水平1水平2水平3水平4水平5133.132.138.062.490.2232.034.438.661.492.1333.234.238.162.391.2432.634.739.363.890.4532.732.738.462.790.8632.333.138.262.693.6平均值32.6533.5338.4362.5391.38標(biāo)準(zhǔn)偏差0.45931.04820.47610.77371.2481相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）1.413.131.241.241.40注：色譜柱：HP-530m×0.320mm×0.25μ結(jié)論：各驗(yàn)證單位的室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）分別為樣品中碘含量水平1時(shí)為：1.41％～4.83％；樣品中碘含量水平2時(shí)為：1.43％～3.13％；樣品中碘含量水平3時(shí)為：1.00％～3.60％；樣品中碘含量水平4時(shí)為：0.82％～3.29％；樣品中碘含量水平5時(shí)為：0.61％～1.48％；不同谷物類(lèi)產(chǎn)品碘測(cè)定結(jié)果測(cè)定次數(shù)嬰幼兒米粉嬰幼兒麥粉124.850.3225.151.5325.550.9424.352.1524.951.8625.251.6平均值24.8351.37標(biāo)準(zhǔn)偏差0.410.60相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）1.651.17國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心測(cè)定5.10.2方法的實(shí)驗(yàn)室間精密度5家驗(yàn)證單位實(shí)驗(yàn)室間精密度如下表實(shí)驗(yàn)室水平1（μg/100g）水平2（μg/100g）水平3（μg/100g）水平4（μg/100g）水平5（μg/100g）國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心33.7234.4038.5562.7093.05農(nóng)業(yè)部乳品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心（哈爾濱）33.4534.9839.8263.5094.12青島圣元乳品公司35.5036.8242.7564.4096.47國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)杭州站33.8135.2339.1362.0893.55上海英特爾營(yíng)養(yǎng)乳品有限公司32.6533.5338.4362.5391.38平均值33.8334.9939.7463.0493.71標(biāo)準(zhǔn)偏差1.04151.21311.77270.91671.8487相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV/%）3.083.474.461.451.97結(jié)論：各驗(yàn)證單位的實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（CV％）分別為樣品中碘含量水平1時(shí)：3.08％；樣品中碘含量水平2時(shí)：3.47％；樣品中碘含量水平3時(shí)：4.11％；樣品中碘含量水平4時(shí)：2.28％；樣品中碘含量水平5時(shí)：1.97％；5.11精密度計(jì)算依據(jù)GBT6379.2-2004《測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度第2部分確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法重復(fù)性與再現(xiàn)性的基本方法》計(jì)算表1原始記錄：米粉碘測(cè)定結(jié)果（μg/100g）實(shí)驗(yàn)室i重復(fù)次數(shù)水平1水平2水平3水平4水平51（國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心）134.136.438.863.493.2233.033.338.661.494.1333.634.238.264.392.2434.633.739.262.893.4533.734.738.561.790.8633.334.138.062.694.62（農(nóng)業(yè)部乳品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心（哈爾濱））133.834.840.461.893.8234.235.140.663.594.6333.134.239.463.994.2432.635.638.564.595.1534.234.839.864.393.4632.835.440.263.093.63（青島圣元乳品公司）136.9136.844.463.596.8234.2035.142.665.298.4334.5338.142.463.995.8435.2935.944.065.596.9536.6837.241.164.395.6635.4237.842.064.095.34（國(guó)家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)杭州站）134.136.439.162.494.2233.034.338.661.293.1333.235.239.562.394.2433.634.739.262.693.4534.735.738.862.292.8634.335.139.661.893.65（上海英特爾營(yíng)養(yǎng)乳品有限公司）133.132.138.062.490.2232.034.438.661.492.1333.234.238.162.391.2432.634.739.363.890.4532.732.738.462.790.8632.333.138.262.693.6表2米粉碘含量的單元平均值（μg/100g）實(shí)驗(yàn)室i水平j(luò)12345nijnijnijnijnij133.72634.40638.55662.70693.056233.45634.98639.82663.50694.126335.50636.82642.75664.40696.476433.81635.23639.13662.08693.556532.65633.53638.43662.53691.386表3米粉碘含量的標(biāo)準(zhǔn)差實(shí)驗(yàn)室i水平j(luò)12345sijnijsijnijsijnijsijnijsijnij10.570761.108860.427861.073361.3737620.709260.499760.775760.994060.6462631.101161.144461.242260.784861.1483640.661660.742160.388260.507660.5718650.459361.048260.476160.773761.248165.1、科克倫檢驗(yàn)p=5,n=6,柯克倫檢驗(yàn)1%臨界值為0.588，5%臨界值為0.506。對(duì)水平1，實(shí)驗(yàn)室1的s最大：ΣS2=2.6898;檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值=0.451對(duì)水平2，實(shí)驗(yàn)室3的s最大：ΣS2=4.4382;檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值=0.487對(duì)水平3，實(shí)驗(yàn)室3的s最大：ΣS2=3.492;檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值=0.570對(duì)水平4，實(shí)驗(yàn)室3的s最大：ΣS2=7.6787;檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值=0.319對(duì)水平5，實(shí)驗(yàn)室1的s最大：ΣS2=5.5079檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值=0.343這表明水平1、水平3的一個(gè)單元可以看作是岐離值，沒(méi)有離群值。該岐離值仍然參與后續(xù)計(jì)算。5.11.2,srj和sRj的計(jì)算根據(jù)GB/T6379.2-2004中7.4.4和7.4.5中所定義的諸方差計(jì)算表5碘的mjsrjsRj計(jì)算值水平j(luò)PjsrjsRj1633.8260.65601.20142634.9920.94211.48703639.7360.73551.89574663.0420.84991.20135693.7141.04962.0828精密度與m的關(guān)系根據(jù)表5，隨著m值的加大顯然標(biāo)準(zhǔn)差也在增加，所以可能建立他們之間的某種關(guān)系，其精密度可能依賴(lài)水平m的。根據(jù)GB/T6379.2-2004中7.5中所定義，按=1\*ROMANI:sr=bm擬合他們的關(guān)系式:Wj=1/(srj)2水平1：Wj=1/(srj)2=2.3238水平2：Wj=1/(srj)2=1.1266水平3：Wj=1/(srj)2=1.8486水平4：Wj=1/(srj)2=1.3844水平5：Wj=1/(srj)2=0.9077T1=ΣWj=7.5911T2=ΣWj=215.8875T3=ΣWj2=20431.15T4=ΣWjsrj=6.0748T5=ΣWjsrj=306.1936則：b=T5/T3=0.01499重現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差為：=1\*ROMANI：sr=0.01499m=0.5347=0.0093Ⅱ：sr=0.0093m同理

:水平1：Wj=1/(sRj)2=0.6928水平2：Wj=1/(sRj)2=0.0.4522水平3：Wj=1/(sRj)2=0.2783水平4：Wj=1/(sRj)2=0.6929水平5：Wj=1/(sRj)2=0.2305T1=ΣWj=2.3468T2=ΣWj=115.6051T3=ΣWj2=6564.29T4=ΣWjsRj=3.3449T5=ΣWjsRj=170.1209則：b=T5/T3=0.02612再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差為：Ⅰ

:SR=0.0=1.2891=0.04904Ⅱ：sR=0.0062按Ⅲ：擬合：Sr計(jì)算:=8.4438=14.40368=-0.56334=-0.88623=-0.8756=0.4518lgsr=-0.5756+0.2936或sr=0.2656SR計(jì)算

:=8.4438=14.40368=0.9280=1.6037=-0.2424=0.2534LgsR=-0.2424+0.2534或sR=0.5723m0.25經(jīng)對(duì)上述三個(gè)關(guān)系式采用GBT6379.2-2004方法以sr、sR為縱坐標(biāo)，m為橫坐標(biāo)繪圖。經(jīng)檢查后發(fā)現(xiàn)：重現(xiàn)性限關(guān)系式Ⅰ擬合效果也最好；再現(xiàn)性限Ⅱ和Ⅲ為擬和效果較好，但關(guān)系式Ⅱ的截距較大，結(jié)合專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)：最適宜的關(guān)系式選用：重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差為：sr=0.01499m再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差為：sR=0.5723重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差為：sr=0.01499m再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差為：sR=0.57235.11.4重復(fù)性限（r）和再現(xiàn)性限(R)計(jì)算根據(jù)GB/T20001.4-2001《標(biāo)A準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則第4部分：化學(xué)分析方法》中附錄D計(jì)算重復(fù)性限（r）和再現(xiàn)性限(R):重復(fù)性限（r）：r=2.8sr=0.042m再現(xiàn)性限(R)：R=2.8sR=1.6024m0.256．實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的建議標(biāo)準(zhǔn)批準(zhǔn)、發(fā)布后，由全國(guó)糧油標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)組織、國(guó)家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心共同舉辦標(biāo)準(zhǔn)宣貫會(huì)，講解分析方法的技術(shù)要領(lǐng)和關(guān)鍵步驟。7參考文獻(xiàn)[1]GB/T5009.1-2003食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法理化部分總則[2]GB/T5413.23-1997《嬰幼兒配方食品和乳粉碘的測(cè)定》[3]GB/T13882-92《飼料中碘的測(cè)定方法硫氮酸鐵一亞硝酸催化動(dòng)力學(xué)法》[4]SN/T0929-2000《進(jìn)出口加碘食鹽中碘的檢驗(yàn)方法附件2標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)匯總序號(hào)提出單位提出人條款號(hào)相關(guān)條款內(nèi)容修改意見(jiàn)處理意見(jiàn)1中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)4試劑試劑建議按通用的固體、液體、配制溶液順序?qū)懖杉{，按要求進(jìn)行調(diào)整2中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)5.2色譜柱DB-INNOWAX或DB-23,HP-20都是安捷倫公司的產(chǎn)品，這么些可能不符合標(biāo)準(zhǔn)的要求采納，改為以填料進(jìn)行表述。3中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)5.4離心機(jī)離心機(jī)應(yīng)寫(xiě)出應(yīng)有的技術(shù)指標(biāo)采納此條建議，增加轉(zhuǎn)速要求4中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)6.1樣品處理與衍生振蕩和避光反應(yīng)30min是否同時(shí)進(jìn)行。還是振蕩后再反應(yīng)。建議描述清楚。采納，衍生與提取全過(guò)程避光操作。5中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)6.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備建議線(xiàn)形范圍再寬一些未采納，此范圍是根據(jù)試樣中碘含量確定的范圍。6中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)6.3測(cè)定液的制備1，振蕩，避光提取30min是否同時(shí)進(jìn)行。建議描述清楚。2，指形瓶是什么？是否應(yīng)為離心管？第一條同序號(hào)5的處理意見(jiàn)；第二條將指型瓶改為離心管。7中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)6.4.1推薦性色譜條件建議改為參考色譜條件采納8中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)6.4.2測(cè)定樣品是否應(yīng)改為樣品衍生液采納，改為標(biāo)準(zhǔn)系列溶液、樣品的衍生液9中國(guó)疾病預(yù)防控制中心營(yíng)養(yǎng)與食品安全所楊大進(jìn)全文修改文字樣品建議改為試樣采納，根據(jù)GB/T20001.4-2001將樣品改為試樣。10湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜4.2先將95ml超純水冷放入4℃先將95ml超純水放入4℃采納，刪除“冷”11湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜4.4乙酸乙酯乙酸乙酯：分析純未采納，在4中已規(guī)定。12湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜4.5.1用少量水溶解后移入容量瓶，最后定容至100mL用超純水溶解并定容至100ml采納，13湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜5.2毛細(xì)柱毛細(xì)管柱采納，改為“毛細(xì)管柱”14湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜6.3向上述6.1、6.2的衍生液中分別加入50mL乙酸乙酯振搖后向上述6.1、6.2的衍生液中分別精確加入50mL乙酸乙酯振搖后采納，增加“精確”。15湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜6.4.2以碘標(biāo)準(zhǔn)測(cè)溶液以碘標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定液采納，筆誤16湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜7M——樣品的質(zhì)量，gm——樣品的質(zhì)量，g采納，筆誤17湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜6.1、6.26.1、6.18.1、8.2采納，筆誤18湖南省亞華乳業(yè)有限公司任國(guó)譜6.1、6.2獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果采納。19江蘇省疾病預(yù)防控制中心馬永建4.5.2碘標(biāo)準(zhǔn)中間液用什么定容？采納，明確用超純水。20江蘇省疾病預(yù)防控制中心馬永建4.5.3碘標(biāo)準(zhǔn)工作液用什么定容？采納，明確用超純水。21江蘇省疾病預(yù)防控制中心馬永建5.4離心機(jī)是否有要求采納，明確轉(zhuǎn)速參數(shù)22江蘇省疾病預(yù)防控制中心馬永建6.3避光提取30min是什么意思？避光振蕩30min采納，改為“避光振蕩提取”23江蘇省疾病預(yù)防控制中心馬永建6.3指形瓶改為離心管采納。24江蘇省疾病預(yù)防控制中心馬永建6.2提供標(biāo)準(zhǔn)系列各點(diǎn)相當(dāng)于碘的濃度采納，增加“此標(biāo)準(zhǔn)系列碘濃度為0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0μg”25江蘇省疾病預(yù)防控制中心馬永建1核查最低檢出限為5μg/kg，1在5μg/kg的濃度下不會(huì)出峰，2各物質(zhì)的響應(yīng)不一樣可能不能用儀器本身的噪聲，是否可以用按0.2/0.5=0.4ug/g未采納，此最低檢出限是根據(jù)GB/T5009.1-2003標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定計(jì)算的26國(guó)家食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（上海）段文鋒5.2毛細(xì)柱：DB-INNOWAX或DB-23，HP-20等，柱長(zhǎng)30m*0.32mm；或同等性能的柱子缺色譜柱膜厚條件采納，增加“膜厚0.25～0.50μm”27國(guó)家食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（上海）段文鋒6.4.1載氣（N2）缺載氣流速參考條件采納，增加“尾吹60ml/min；柱流量1.5ml/min”28國(guó)家食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（上海）段文鋒6.1（精確至0.1mg，碘含量在1μm以?xún)?nèi)）（精確至0.1mg，碘含量在1μg以?xún)?nèi)）采納，筆誤。29國(guó)家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心曹紅周相娟4.5在這里，是否應(yīng)是碘化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，因?yàn)榘礃?biāo)準(zhǔn)規(guī)定，碘標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)是由碘配置，而不是碘化鉀配置的未采納，碘化鉀為穩(wěn)定地鹽，而單質(zhì)碘極易升華，難以準(zhǔn)確配置，且衍生劑與碘離子反應(yīng)，若用碘還需首先變成碘離子。30國(guó)家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心曹紅周相娟5.3往復(fù)振蕩機(jī)必須要求往復(fù)振蕩機(jī)還是別的回旋式振蕩機(jī)也能用，建議把往復(fù)去掉采納，振蕩主要能