DB37T 4204-2020 水貂阿留申病診斷與凈化技術(shù)

DB37Aleutiandiseasediagnoseandcleaning-uptechnologyforminkfarm山東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I李玉杰、劉長(zhǎng)浩、徐鴻、李金波、馬慧玲、藺曉月、崔凱、陳靜、李富金、王1水貂阿留申病診斷與凈化技術(shù)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水貂阿留申病臨床診斷技術(shù)、病毒抗體檢測(cè)技術(shù)、熒光PCR檢測(cè)、病獸淘汰技術(shù)、獸本標(biāo)準(zhǔn)適用于水貂阿留申病感染動(dòng)物的篩選、感染控制GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格DB37/T2381規(guī)?；躔B(yǎng)殖場(chǎng)生物安全DB37/T2660規(guī)?；?dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)消毒3.1.2傳染源主要為病貂和隱性感染貂。病毒的群間傳播主要是來自感染貂的唾液、糞便和尿3.1.3有明顯的季節(jié)性，秋冬季節(jié)的發(fā)病率與病死率明顯地比其他季3.2.1漸進(jìn)性消瘦：病貂食欲時(shí)好時(shí)壞3.2.2出血和貧血：口腔、齒齦、軟腭、硬腭和舌根有大量出血點(diǎn)和出血斑，內(nèi)臟器官尤其是3.2.5本病預(yù)后不良，對(duì)癥治療可緩解癥狀。常復(fù)發(fā)，最后衰23.3.3肝、脾、淋巴結(jié)腫脹，肝呈土黃色，3.3.4懷孕期發(fā)病可見死胎、胎兒液化、吸收或者出現(xiàn)木乃伊胎兒、子宮4抗體檢測(cè)4.1樣品的采集與保存注射器、離心管架、剪刀或指甲剪、酒精棉、干脫脂棉、記號(hào)筆，有條件的使用采血板和毛細(xì)管。4.1.2采血方法：將水貂保定，剪刀酒精棉消毒，中趾趾間毛細(xì)管采血或直接剪掉中4.1.3樣品保存及運(yùn)輸：2℃~8℃,不超過24h。4.2樣品處理將裝有血液的離心管靜置，待血清析出，經(jīng)4000r/min離心3min～5min，取血清置于1.5mL離心4.3對(duì)流免疫檢測(cè)5.1儀器設(shè)備5.1.4冰箱（2℃~8℃和-20℃兩種）。5.2試劑或材料35.3樣品的采集與保存5.3.4存放采集或處理的樣本在2℃~8℃條件下保存，不超過24h。普通提取方法，或者采用經(jīng)驗(yàn)證的病毒DNA提取試劑盒，按照試劑盒使用說明書提照+1管陽(yáng)性對(duì)照）。5.4.3加樣在樣品處理區(qū)進(jìn)行。分別向上述PCR管中加入樣本核酸提取步驟5.4.1中制備的DNA溶液10μL，蓋在檢測(cè)區(qū)進(jìn)行。將加樣后的PCR管放入熒光PCR檢測(cè)儀內(nèi)，記錄PCR管擺放順序。反應(yīng)參數(shù)設(shè)置：第45.5結(jié)果判定選定FAM檢測(cè)通道讀取檢測(cè)結(jié)果；ABI儀器，選擇FAM作為報(bào)告熒光基團(tuán)，無(wú)淬滅熒光基復(fù)驗(yàn)：Ct/Cp值大于30.0，且出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線的樣品建議復(fù)驗(yàn)。復(fù)6.1檢測(cè)方法的選擇：抗體檢測(cè)技術(shù)適用于群體檢測(cè)，PCR檢測(cè)技術(shù)適6.3一次性凈化：把檢測(cè)出的陽(yáng)性水貂直接淘汰6.4逐步凈化：實(shí)行阿留申病毒陰陽(yáng)性貂分場(chǎng)（群）飼養(yǎng)，逐步淘汰陽(yáng)性貂。分（場(chǎng)）群后，應(yīng)建立對(duì)污染的飼料、墊料等廢棄物以及糞便、污水應(yīng)按照GB7959和GB8978進(jìn)行無(wú)害化處理。5病死水貂按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《病死及病害動(dòng)物無(wú)害化處理6FCAACCCTCCAGGTCAACRCTCTTAACAGGATTCCAGPFAM-AAGCTTGCCTCTCCAAGTAAAGTAAC7——2℃~8℃冰箱；）；8——樣本的保存，核酸提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管在樣本制備區(qū)進(jìn)行；——對(duì)實(shí)驗(yàn)