2025年粵教新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵教新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述正確的是（）

A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲得的致敏T淋巴細(xì)胞B.①表示將骨髓瘤細(xì)胞去核后進行細(xì)胞融合C.乙為融合細(xì)胞，同時具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性D.②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞2、某小鼠生活過程中被多種病原體感染過，科學(xué)家卻能夠以該小鼠為實驗材料，通過細(xì)胞工程技術(shù)獲得抗某種病原體的高純度單克隆抗體，這是因為A.小鼠體內(nèi)只有一種抗體B.小鼠體內(nèi)只有一種B淋巴細(xì)胞C.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后只產(chǎn)生一種雜交瘤細(xì)胞D.可以通過克隆培養(yǎng)法和抗體檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞3、影印培養(yǎng)法是工程菌篩選的一種常用方法，基本過程是：把長有許多菌落的培養(yǎng)皿倒置于包有滅菌絲絨布的木圓柱（直徑略小于培養(yǎng)皿）上，然后把“印章”上的細(xì)菌接種到不同的選擇性培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，對各皿相同位置上的菌落作對比，就可選出適當(dāng)?shù)墓こ叹?。圖1是將人生長激素基因?qū)爰?xì)菌B制造工程菌示意圖，影印培養(yǎng)法篩選結(jié)果如圖2所示，其中數(shù)字表示不同的菌落。下列說法錯誤的是（）

A.培養(yǎng)基甲中必須含有氨芐青霉素B.培養(yǎng)基乙中必須含有四環(huán)素C.切割質(zhì)粒A和人生長激素基因的限制酶必須是同種酶D.繼續(xù)培養(yǎng)篩選工程菌必須挑取培養(yǎng)基甲中的菌落1和44、動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.CO2培養(yǎng)箱中95%的氧氣可保證細(xì)胞進行正常呼吸B.原代培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞需經(jīng)胰蛋白酶處理后再進行傳代培養(yǎng)C.傳代培養(yǎng)中的細(xì)胞失去增殖能力是由于細(xì)胞發(fā)生分化所致D.對雜交瘤細(xì)胞進行克隆培養(yǎng)即可獲得所需的單克隆抗體5、科學(xué)家培育了一種可以生產(chǎn)人血紅蛋白的轉(zhuǎn)基因煙草。下列敘述正確的是（）A.要獲得該轉(zhuǎn)基因煙草，首先要從人的成熟紅細(xì)胞內(nèi)獲取目的基因B.人血紅蛋白基因?qū)霟煵菁?xì)胞可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法C.PCR不能用于鑒定受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)入了目的基因D.該基因轉(zhuǎn)到煙草染色體上使煙草發(fā)生染色體畸變評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)6、大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來做基因工程中的載體，這與它的哪項優(yōu)點有關(guān)()A.具有黏性末端B.分子呈環(huán)狀，便于限制酶切割C.對宿主細(xì)胞的生存沒有決定性作用D.分子小，能自主復(fù)制，有標(biāo)記基因7、利用PCR技術(shù)擴增目的基因；其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列敘述正確的是（）

A.用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列B.設(shè)計引物時需要避免引物之間形成堿基互補配對而造成引物自連C.退火溫度過高可能導(dǎo)致PCR得不到任何擴增產(chǎn)物D.每一循環(huán)都消耗引物和原料，需要在操作中及時補充8、將單克隆抗體與前體藥物的專一性活化酶藕聯(lián)（簡稱抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)）是特異性治療腫瘤并減少對正常細(xì)胞傷害的最新研究方向。堿性磷酸酶是抗腫瘤藥物多柔比星前體的專一性活化酶，醫(yī)學(xué)研究中利用抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)機理將堿性磷酸酶與單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”，通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷，進而抑制以DNA為模板進行的生理活動，達(dá)到治療腫瘤的目的。下列說法正確的是（）A.為獲得單克隆抗體應(yīng)首先給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞B.制備單克隆抗體的過程中至少要經(jīng)過兩次原理和目的均不同的篩選過程C.生物導(dǎo)彈綜合利用了堿性磷酸酶的定向制導(dǎo)作用和單克隆抗體的特異性殺傷能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的細(xì)胞9、抗菌肽又名多肽抗生素，廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)，具有廣譜抗菌活性。其作用原理是在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽對癌細(xì)胞甚至感染了病毒的宿主細(xì)胞均具有殺傷作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.從免疫調(diào)節(jié)的方式分析，抗菌肽參與特異性免疫過程B.抗菌肽改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)抗菌肽時，常選用大腸桿菌作為受體菌D.對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路10、據(jù)統(tǒng)計，從20世紀(jì)90年代至今，全世界包括基因制藥在內(nèi)的生物技術(shù)藥物的銷售額以年均30%的速度增長，生物制藥已成為21世紀(jì)的朝陽產(chǎn)業(yè)。下列有關(guān)說法正確的是（）A.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)還可以進行基因治療，現(xiàn)在技術(shù)已經(jīng)完全成熟B.對于基因制藥，我們應(yīng)該科學(xué)地認(rèn)識和評估，保障公眾的知情權(quán)C.由于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全問題，國家應(yīng)建立相應(yīng)的評估及預(yù)警機制D.我們可以利用轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)使哺乳動物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)11、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________12、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個這樣的_______個DNA片段，一共需要加入______________個引物。13、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。14、沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌；被感染了沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食品，會使人發(fā)生食物中毒。沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死。肉桂精油是從肉桂樹中提煉獲得的，具有不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)的特性，能抑制沙門氏菌的繁殖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）培養(yǎng)沙門氏菌時要進行無菌操作，常用的滅菌方法有________（答出兩種）。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。單個細(xì)菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________。

（2）從雞糞便取樣，經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要經(jīng)過一系列________才能將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上。對獲得的沙門氏菌常采用________的方法長期保存。

（3）根據(jù)題干信息，為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中儲存、加工食品的方法是________。

（4）根據(jù)肉桂精油的化學(xué)特性，可采用________法來提取，提取過程中影響精油品質(zhì)的因素有________。15、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外，還廣泛應(yīng)用于另一個重要的領(lǐng)域，即______。16、不同國家的政府對待生殖性克隆人的態(tài)度是不同的?我們認(rèn)同我國政府對待生殖性克隆人研究的態(tài)度嗎？為什么？_____。17、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取______，用相應(yīng)的______進行______。評卷人得分四、實驗題(共3題，共27分)18、物質(zhì)W是一種含氮有機物；會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌（目標(biāo)菌）?；卮鹣铝袉栴}。

（1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_________。

（2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇________菌落進一步純化，選擇的依據(jù)是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即_______。

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌；使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________；三處滴加量相同。

②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明___________。19、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能。科研人員成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖所示，請回答下列問題：

(1)強啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實驗中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。20、微生物因具有體積??；易培養(yǎng)，繁殖快，且自身遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)簡單，經(jīng)人工處理或自然突變可獲得新性狀等特點，在發(fā)酵工程中應(yīng)用廣泛。回答下列問題：

(1)大腸桿菌是發(fā)酵工程中應(yīng)用較為廣泛的菌種之一。培養(yǎng)大腸桿菌時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至____性，再利用_________________法滅菌后進行接種。

(2)在發(fā)酵工程中，常常需要對菌種數(shù)目進行統(tǒng)計。相對真菌來說，細(xì)菌的體積較小，因此對細(xì)菌數(shù)目進行統(tǒng)計時，適合使用_________________（填“細(xì)菌計數(shù)板”或“血細(xì)胞計數(shù)板”）進行計數(shù)，且統(tǒng)計的細(xì)菌數(shù)目往往比實際活菌數(shù)目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工處理或自然突變往往會使菌種成為營養(yǎng)缺陷型菌株；現(xiàn)欲設(shè)計實驗證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，請簡單描述實驗思路并預(yù)計實驗結(jié)果：

實驗思路：_____________________________；

實驗結(jié)果：_____________________________。評卷人得分五、綜合題(共2題，共16分)21、世界衛(wèi)生組織解釋克隆為“遺傳上同一的機體或細(xì)胞系（株）的無性繁殖”。相對于植物克隆而言；動物尤其是高等動物的克隆比較困難，下圖表示哺乳動物克隆的幾種方法的主要步驟，據(jù)圖回答下列問題。

（1）方法2獲得的小牛的遺傳物質(zhì)來源于________，方法3中得到的胚①、②中的遺傳物質(zhì)是否完全相同？________。

（2）細(xì)胞B取自囊胚的________細(xì)胞，具有全能性；細(xì)胞C應(yīng)取自供體3的________細(xì)胞。

（3）細(xì)胞A、B、C在進行D過程之前需要進行細(xì)胞體外培養(yǎng)，培養(yǎng)時需要滿足的條件是____________________________________________________________________。

（4）克隆也可以理解為復(fù)制、拷貝，結(jié)合世界衛(wèi)生組織的定義，你認(rèn)為還有哪些現(xiàn)代生物技術(shù)也屬于克?。縚_______________________________________________________________。

（5）你是否支持進行胚胎干細(xì)胞的研究；為什么？

_________________________________________________________________22、醫(yī)學(xué)界對于人類衰老的研究大多圍繞人體內(nèi)在功能性衰退展開。某研究團隊發(fā)現(xiàn)當(dāng)T淋巴細(xì)胞的數(shù)目減少和功能減退時；體內(nèi)積累的炎癥會讓動物未老先衰，出現(xiàn)各種“老年病”。這一成果表明T淋巴細(xì)胞在動物衰老進程中具有重要作用。請回答問題：

(1)T淋巴細(xì)胞起源于____________細(xì)胞，在____________中分化發(fā)育成熟，在____________免疫中起重要作用。

(2)科學(xué)家提出可利用人體細(xì)胞培養(yǎng)出T淋巴細(xì)胞；再通過向人體內(nèi)適當(dāng)輸入T淋巴細(xì)胞來延緩衰老。他們參考多利羊的培養(yǎng)過程，設(shè)計了以下流程圖：

圖中A表示___________細(xì)胞。要把重組細(xì)胞培養(yǎng)成為早期胚胎，需要利用B技術(shù)誘導(dǎo)，B技術(shù)是指___________。培養(yǎng)液中除各種營養(yǎng)成分外，還需添加___________等天然成分。

從早期胚胎中可以獲得___________細(xì)胞，可以利用它定向誘導(dǎo)成為T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)的實質(zhì)是發(fā)生了___________。

(3)若要改變重組細(xì)胞的遺傳特性，可以通過基因工程技術(shù)外源導(dǎo)入目的基因，該技術(shù)的核心是___________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

1；單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

2；題中①表示細(xì)胞融合；②表示篩選過程。

【詳解】

A；甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細(xì)胞；A錯誤；

B；①是完整骨髓瘤細(xì)胞與免疫的B淋巴細(xì)胞融合的過程；B錯誤；

C；融合細(xì)胞不一定同時具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性；也可能是瘤瘤細(xì)胞或B細(xì)胞，C錯誤；

D；②是經(jīng)篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；D正確。

故選D。2、D【分析】【分析】

【詳解】

A；根據(jù)題干信息“小鼠生活過程中被多種病原體感染過”；由于一種抗體只能與一種抗原發(fā)生特異性結(jié)合，則小鼠體內(nèi)產(chǎn)生多種抗體，故A錯誤；

B；每種抗體由相應(yīng)的效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生；所以小鼠體內(nèi)有多種效應(yīng)B細(xì)胞，故B錯誤；

C；B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞如兩兩融合；產(chǎn)生三種雜交細(xì)胞，即B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞，故C錯誤；

D；通過抗體檢測陽性篩選出產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；再進行體外或體內(nèi)培養(yǎng)，提取大量的單克隆抗體，故D正確。

故選D。3、C【分析】【分析】

圖1表示將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的過程。質(zhì)粒A上含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因；構(gòu)建基因表達(dá)載體后，破環(huán)了質(zhì)粒A的四環(huán)素抗性基因，但氨芐青霉素抗性基因正常，所以導(dǎo)入重組質(zhì)?；蚱胀ㄙ|(zhì)粒的細(xì)菌都能抗氨芐青霉素，但導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌不能抗四環(huán)素。

【詳解】

A；重組質(zhì)粒時抗氨芐青霉素基因未破壞；而抗四環(huán)素基因被破壞。因此可在培養(yǎng)細(xì)菌B的培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素，若在培養(yǎng)基上觀察到大量的細(xì)菌B的菌落，表明該細(xì)菌已經(jīng)導(dǎo)入了外源質(zhì)粒，故培養(yǎng)基甲中必須含有氨芐青霉素，A正確；

B；在甲培養(yǎng)基（氨芐青霉素）上觀察到大量的細(xì)菌B的菌落；表明該細(xì)菌已經(jīng)導(dǎo)入了外源質(zhì)粒，但不能說明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因，重組質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因插入了目的基因，不能表達(dá)，細(xì)菌對四環(huán)素?zé)o抗性，故培養(yǎng)基乙必須含四環(huán)素，用來說明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重組質(zhì)粒，起到篩選作用。

C；質(zhì)粒作為載體必須具備標(biāo)記基因；所選擇的限制酶盡量不要破壞這些結(jié)構(gòu)，為了避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接，也可以使用不同的限制酶來切割，C錯誤；

D；在甲培養(yǎng)基（氨芐青霉素）上能生長的是導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌和導(dǎo)入普通質(zhì)粒的細(xì)菌；能在培養(yǎng)基乙上生長的是導(dǎo)入普通質(zhì)粒A的細(xì)菌，重組質(zhì)粒不能生長。培養(yǎng)基甲和乙對比，消失的是菌落1和4，故繼續(xù)培養(yǎng)篩選工程菌必須挑取培養(yǎng)基甲中的菌落1和4，D正確。

故選D。

【點睛】4、B【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件。

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物。

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。

（3）適宜的溫度和pH。

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

【詳解】

A、CO2培養(yǎng)箱中的混合氣體是95%的空氣和5%的CO2（維持pH）；A錯誤；

B；原代培養(yǎng)過程中用胰蛋白酶處理后分瓶可以有效解除細(xì)胞間的接觸抑制；從而保證細(xì)胞的增殖過程，B正確；

C；正常細(xì)胞的細(xì)胞分裂次數(shù)是有限的；據(jù)此可知，傳代培養(yǎng)中的細(xì)胞失去增殖能力是由于細(xì)胞衰老或遺傳物質(zhì)發(fā)生改變所致，C錯誤；

D；對雜交瘤細(xì)胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞再在體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中獲得所需的單克隆抗體，D錯誤。

故選B。5、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。目的基因的檢測與鑒定∶分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；人的細(xì)胞都含有控制血紅蛋白合成的基因；故要獲得該轉(zhuǎn)基因煙草，不一定要從人的成熟紅細(xì)胞內(nèi)獲取目的基因，A錯誤；

B；為使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)；應(yīng)將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法使目的基因插入到煙草細(xì)胞中的染色體DNA上，B正確；

C；鑒定篩選時；通過PCR技術(shù)可以檢測目的基因是否插入了受體細(xì)胞染色體DNA上，也可以檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，C錯誤；

D；該基因轉(zhuǎn)到煙草染色體上；使控制不同性狀的基因重新組合，屬于基因重組，D錯誤。

故選B。二、多選題(共5題，共10分)6、C:D【分析】【分析】

1；作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因）；以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來；

2；大腸桿菌的質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

【詳解】

A；質(zhì)粒是一種獨立于細(xì)菌擬核外的環(huán)狀DNA分子；沒有切割時不含具有黏性末端，A錯誤；

B；基因工程的運載體必須要有一個或多個限制酶切點；便于與目的基因連接形成重組DNA分子，B錯誤；

C；質(zhì)粒對宿主細(xì)胞的生存沒有決定性作用；C正確；

D；作為載體的質(zhì)粒分子??；能自主復(fù)制，且常含有抗生素抗性基因，可以作為標(biāo)記基因，對重組后重組子進行篩選，D正確。

故選CD。

【點睛】7、A:B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴增；②原理：DNA復(fù)制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴增，即約2n；⑤過程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

【詳解】

A；用PCR方法擴增目的基因時；只要知道目的基因前后的序列用以設(shè)計引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正確；

B；PCR過程中需要兩種引物分子；不同引物能靠堿基互補配對而形成（部分）雙鏈的話會造成引物不能同模板DNA結(jié)合，也就不能發(fā)生進一步的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，這一點需要避免，B正確；

C；若退火溫度過高；則引物與模板DNA無法形成部分雙鏈，PCR也就不能發(fā)生，C正確；

D；PCR技術(shù)中的引物和原料是一次性添加的；不需要補充，D錯誤。

故選ABC。

【點睛】8、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合。②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體制備過程中；需要給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，刺激小鼠產(chǎn)生體液免疫，才能得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；制備單克隆抗體的過程中至少要經(jīng)過兩次原理和目的均不同的篩選過程；第一次篩選雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；生物導(dǎo)彈綜合利用了單克隆抗體的定向制導(dǎo)作用和堿性磷酸酶的特異性殺傷能力；C錯誤；

D；根據(jù)題干信息“通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷；進而抑制以DNA為模板進行的生理活動”，說明多柔比星還可以抑制細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過程，而不增殖的細(xì)胞也具有轉(zhuǎn)錄過程，D錯誤。

故選AB。9、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一樣；具有繁殖、遺傳、變異、進化的特點，病毒是一種體積非常微小，結(jié)構(gòu)極其簡單的生物，僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。不能獨立生活，只能寄生在活細(xì)胞內(nèi)，并在寄主細(xì)胞內(nèi)進行繁殖。一旦離開了活細(xì)胞，病毒就無法生存，就會變成結(jié)晶體。

2；真菌較細(xì)菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)勢是真菌為真核微生物；含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對蛋白進行加工和修飾。

【詳解】

A；通過題干信息可知；抗菌肽具有廣譜抗菌活性，抗菌肽不參與特異性免疫過程，A錯誤；

B；根據(jù)題干信息；抗菌肽“在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡”，即改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡，B正確；

C；抗菌肽“是廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)”；即來源于真核細(xì)胞，如利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高抗菌肽的產(chǎn)量，但最好選擇真菌作為受體菌，因為真菌是真核細(xì)胞，繁殖速度快，遺傳物質(zhì)少，C錯誤；

D；根據(jù)題干信息；“某些抗菌肽對癌細(xì)胞甚至病毒等均具有強有力的殺傷作用”，則對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路，D正確。

故選BD。

【點睛】10、B:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物中基因來源是藥用蛋白基因和乳腺組織特異性表達(dá)的啟動子；成果是乳腺生物反應(yīng)器?；蛑委熓前颜；?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細(xì)胞中，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的，目前還處于初期的臨床試驗階段。轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以進行基因治療；但現(xiàn)在技術(shù)還不成熟，A錯誤；

B；由于人們對基因藥物持不同觀點；所以應(yīng)科學(xué)地認(rèn)識和評估，保障公眾的知情權(quán)，B正確；

C；轉(zhuǎn)基因生物的安全性包括食物安全、生物安全和環(huán)境安全問題；國家應(yīng)該設(shè)立多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u價機制，C正確；

D；利用轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)可以使哺乳動物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”；如有人將α-抗胰蛋白酶基因轉(zhuǎn)到羊體內(nèi)生產(chǎn)α-抗胰蛋白酶，D正確；

故選BCD。

【點睛】三、填空題(共7題，共14分)11、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－213、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1414、略

【分析】【分析】

微生物實驗中常用的滅菌方法有干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌；其中對于培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，對于接種環(huán)一般用灼燒滅菌，對于培養(yǎng)皿等可以用干熱滅菌。培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中需要倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法，即將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當(dāng)菌落長成后將試管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6個月都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上；對于需要長期保存的菌種可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法，如玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，常采用蒸餾法提取；對于如橘皮精油，其主要儲存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，又會產(chǎn)生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法提取。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)中常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法；灼燒滅菌法、干熱滅菌法等。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板倒置；可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此單個細(xì)菌在平板上會形成菌落，通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。

（2）從雞糞便取樣；經(jīng)選擇培養(yǎng)后，如果要將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上，需要經(jīng)過一系列梯度稀釋。對獲得的沙門氏菌進行長期保存常采用甘油管藏法。

（3）根據(jù)題干信息；沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死，因此為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中可采取低溫儲存；高溫加工方法進行處理。

（4）根據(jù)題意；肉桂精油不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)，故可采用水蒸氣蒸餾法進行提取，提取過程中蒸餾的溫度、時間都會影響精油品質(zhì)。

【點睛】

本題主要考查現(xiàn)代生物科技的原理和運用，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力，能運用所學(xué)知識，準(zhǔn)確判斷問題的能力?！窘馕觥孔茻郎缇?、高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征梯度稀釋甘油管藏低溫儲存、高溫加工水蒸氣蒸餾蒸餾的溫度、時間15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。16、略

【分析】【詳解】

對待生殖性克隆人的研究，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。因為生殖性克?。ㄒ簿褪强寺∪耍?，違反人類繁衍的自然法則，損害人類作為自然人的尊嚴(yán)，會引起嚴(yán)重的道德、倫理、社會和法律問題。所以，現(xiàn)階段生殖性克隆絕對不可以應(yīng)用于人類本身。【解析】認(rèn)同。因為生殖性克?。ㄒ簿褪强寺∪耍?，違反人類繁衍的自然法則，損害人類作為自然人的尊嚴(yán)，會引起嚴(yán)重的道德、倫理、社會和法律問題。所以，現(xiàn)階段生殖性克隆絕對不可以應(yīng)用于人類本身。17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)抗體抗原－抗體雜交四、實驗題(共3題，共27分)18、略

【分析】【分析】

篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W(xué)；物理因素的抗性而設(shè)計的；能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標(biāo)菌種變成優(yōu)勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。

【詳解】

（1）該研究小組的目標(biāo)菌是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌；而物質(zhì)W是一種含氮有機物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。

（2）研究小組的目標(biāo)菌；是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標(biāo)細(xì)菌。

（3）目標(biāo)菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源；故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌便是目的細(xì)菌，故實驗操作為：將甲；乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。

（4）①C處作為空白對照；要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A；B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。

【點睛】

本題考查篩選培養(yǎng)基的配置和使用，針對不同要求的目標(biāo)菌種，選擇不同物質(zhì)配制不同篩選作用的培養(yǎng)基。并且要求學(xué)生理解識別目標(biāo)菌種篩選的現(xiàn)象，判斷篩選結(jié)果。【解析】①.W②.乙③.乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W④.將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮氣作為氮源⑤.緩沖液⑥.緩沖液不能降解W⑦.酶E與天然酶降解W的能力相近19、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲?。焕肞CR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點；能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄；如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強啟動子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實驗中的作用是將強啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細(xì)胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細(xì)胞團；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細(xì)胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染20、略

【分析】【分析】

1；利用顯微鏡進行直接計數(shù)；也是一種常用的、快速直觀的測定微生物數(shù)量的方法。該方法利用特定的細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量，統(tǒng)計的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。細(xì)菌計數(shù)板和血細(xì)胞計數(shù)板的計數(shù)原理相同。血細(xì)胞計數(shù)板比細(xì)菌計數(shù)板厚，常用于相對較大的酵母菌細(xì)胞、霉菌孢子等的計數(shù)。用細(xì)菌計數(shù)板可對細(xì)菌等較小的細(xì)胞進行觀察和計數(shù)。

2；滅菌則是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物；包括芽孢和孢子。濕熱滅菌：高壓蒸汽滅菌（壓力為100kPa、溫度為121℃、15~30min）；干熱滅菌：160~170℃熱空氣維持2~3h。耐高溫的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等；灼燒滅菌：接種工具。接種過程中，試管口、瓶口等容易被污染的部位。

【詳解】

（1）大腸桿菌是細(xì)菌；培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，對培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。

（2）細(xì)菌計數(shù)板和血細(xì)胞計數(shù)板的計數(shù)原理相同。血細(xì)胞計數(shù)板比細(xì)菌計數(shù)板厚；常用于相對較大的酵母菌細(xì)胞；霉菌孢子等的計數(shù)。用細(xì)菌計數(shù)板可對細(xì)菌等較小的細(xì)胞進行觀察和計數(shù)。該方法統(tǒng)計的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，所以統(tǒng)計的細(xì)菌數(shù)目往往比實際活菌數(shù)目多。

（3）本實驗為了證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后；可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，可將野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)一段時間后觀察大腸桿菌是否生長，如果在培養(yǎng)基上無大腸桿菌生長，說明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，獲得了組氨酸缺陷型突變菌株。具體實驗思路及結(jié)果如下：

實驗思路：使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上；標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標(biāo)記為丙組；將甲；乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時間后觀察并統(tǒng)計培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。

實驗結(jié)果：乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無菌落?！窘馕觥?1)中性或弱堿高壓蒸汽滅菌（或濕熱滅菌）

(2)細(xì)菌計數(shù)板多。

(3)使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接