2025年外研銜接版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研銜接版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、要使目的基因與對(duì)應(yīng)的運(yùn)載體重組；所需要的酶是（）

①限制酶②DNA連接酶③解旋酶④DNA聚合酶A.①②B.③④C.①④D.②③2、引物的設(shè)計(jì)是影響PCR擴(kuò)增反應(yīng)的效率和特異性的關(guān)鍵因素，相關(guān)敘述正確的是（）A.引物的堿基數(shù)量越少則退火溫度越低、目標(biāo)DNA獲得率越高B.根據(jù)需要可在引物的5’端添加限制酶識(shí)別序列、點(diǎn)突變序列等C.兩種引物的退火溫度差異較大，可減少引物與模板的非特異性結(jié)合D.引物的GC含量越高，結(jié)合特異性越強(qiáng)，越利于目標(biāo)DNA的擴(kuò)增3、小鼠的成纖維細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)可成為iPS細(xì)胞，為新型再生療法帶來希望。下列敘述正確的是（）A.經(jīng)誘導(dǎo)形成的iPS細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)，分化能力減弱B.分化后的細(xì)胞蛋白質(zhì)種類和數(shù)量相同C.iPS細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞D.與囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)ES細(xì)胞相比，iPS細(xì)胞用于再生醫(yī)學(xué)可回避倫理爭議4、為了解決雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來自B淋巴細(xì)胞的染色體丟失的問題；研究者增加了一個(gè)步驟，除了抗原刺激之外，還用EBV（一種病毒顆粒）感染動(dòng)物B淋巴細(xì)胞，并使之成為“染色體核型穩(wěn)定”的細(xì)胞株。上述細(xì)胞株能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對(duì)烏本苷（Oua）敏感。如圖為該實(shí)驗(yàn)操作示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是。

A.骨髓瘤細(xì)胞無法在HAT選擇培養(yǎng)基中存活B.雜交瘤細(xì)胞染色體丟失可能導(dǎo)致抗體產(chǎn)生能力下降C.B淋巴細(xì)胞來源于抗原刺激后動(dòng)物的淋巴結(jié)和脾臟等D.該實(shí)驗(yàn)最終目的是篩選出能產(chǎn)生抗EBV抗體的雜交瘤細(xì)胞5、下面的簡式表示植物組織培養(yǎng)的大致過程、據(jù)此判斷下列說法錯(cuò)誤的是（）

①②③→④A.若①是體細(xì)胞融合得到的雜種細(xì)胞，則④可能出現(xiàn)不同植物的遺傳特性B.若①是二倍體植株的花粉，則④是單倍體植株，經(jīng)秋水仙素處理后可得到穩(wěn)定遺傳的品種C.若①是人參細(xì)胞，對(duì)②進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)可提高人參皂苷的產(chǎn)量D.若①是具有雜種優(yōu)勢的農(nóng)作物細(xì)胞，則利用③進(jìn)行繁殖會(huì)發(fā)生性狀分離6、轉(zhuǎn)基因技術(shù)是把雙刃劍，下列不屬于轉(zhuǎn)基因作物引發(fā)的安全性問題的是（）A.轉(zhuǎn)有過敏源基因的食品引起過敏人群的過敏反應(yīng)B.抗除草劑油菜成為入侵物種，降低當(dāng)?shù)厣锒鄻有訡.含有β-胡蘿卜素的黃金米可以補(bǔ)充人體缺乏的維生素AD.導(dǎo)入的抗性基因通過花粉雜交轉(zhuǎn)移到近緣野生物種7、用平板劃線法或稀釋涂布平板法都可以純化大腸桿菌，二者得共同點(diǎn)有（）

①可以用相同得培養(yǎng)基②都需要使用接種針進(jìn)行接種③都需要在火焰旁進(jìn)行接種④都可以用來計(jì)數(shù)活菌A.①②B.③④C.①③D.②④8、科學(xué)家已能運(yùn)用基因工程技術(shù)；讓羊合成并分泌人的抗體．相關(guān)敘述正確的是（）

①該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異②DNA連接酶把目的基因與運(yùn)載體粘性末端的堿基對(duì)連接起來③蛋白質(zhì)中的氨基酸序列可為合成目的基因提供資料④受精卵是理想的受體⑤該羊的產(chǎn)生要用到核移植技術(shù)A.①②③④B.②③④C.②③④⑤D.①③④評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、生物武器的傳播途徑主要包括（）A.直接傳播B.食物傳播C.生活必需品傳播D.施用者人體傳播10、基因工程利用某目的基因（圖甲）和Pl噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA；限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正確的是（）

A.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體B.構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重組DNA11、某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究；有關(guān)敘述正確的是（）

A.與纖維母細(xì)胞相比，過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較高B.過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞中基因選擇性表達(dá)的結(jié)果C.過程③得到的Z細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選D.圖中的肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及Y細(xì)胞具有相同的基因組成12、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是我國文化中的精髓，是我國人們利用勤勞的雙手、機(jī)智的頭腦所探究出來的智慧結(jié)晶。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.利用發(fā)酵技術(shù)，在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品B.制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制乳酸菌繁殖C.白酒的釀造過程中利用了霉菌和酵母菌兩種微生物的發(fā)酵作用D.將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中，其目的是促進(jìn)微生物代謝產(chǎn)物的累積13、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時(shí)含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項(xiàng)正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種14、蛋白質(zhì)工程就是通過對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動(dòng)力學(xué)的研究，獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對(duì)編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行有目的的設(shè)計(jì)和改造，通過基因工程技術(shù)獲得可以表達(dá)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華鱘是一種瀕危野生動(dòng)物。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)C.改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘不再是同一物種D.改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________16、人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）17、生化武器散布途徑：將病原體_____或者通過_____、_____等散布到敵方，會(huì)對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。18、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。19、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。20、胚胎工程。

胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術(shù)和______技術(shù)等組成的現(xiàn)代生物技術(shù)。21、概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的______，將它分散成______，然后放在適宜的______中，讓這些細(xì)胞______。22、請回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共16分)23、轉(zhuǎn)入油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳入環(huán)境中。()A.正確B.錯(cuò)誤24、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)25、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：

實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果如下（表中OD260反映溶液中核酸的濃度；OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請回答下列問題。

（1）與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿一異戊醇，實(shí)驗(yàn)過程中加入氯仿一異戊醇離心后，應(yīng)?、賍_____加異丙醇（異丙醇與水互溶）并離心進(jìn)行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________。

（3）兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_______。

II：某研究組對(duì)玉米開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究；A；B、C、D表示以親本植物為材料進(jìn)行的四種人工繁殖過程，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）植物組織培養(yǎng)過程中，外植體需要進(jìn)行消毒處理。利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用________消毒30s后；用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈傷組織的誘導(dǎo)，對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加____________；以促進(jìn)苗形成。

（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是_______（填下列序號(hào)）。

①綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散②剛?cè)诤系碾s交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離。

③胚狀體細(xì)胞中有葉綠體④分化的愈傷組織的各細(xì)胞的形態(tài)大小一致26、科研人員進(jìn)行了土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)流程如圖1所示。農(nóng)藥；除草劑的長期使用，會(huì)使土壤受到嚴(yán)重污染。某科研小組為篩選能分解除草劑草甘膦的微生物，其流程示意圖如圖2所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)圖1中，“？”處是__________，純化培養(yǎng)時(shí)采用的接種方法是_______________，該方法可用于菌落數(shù)的統(tǒng)計(jì)，原因是_________________________。

(2)圖1中純化培養(yǎng)所利用的培養(yǎng)基在營養(yǎng)成分和物理性質(zhì)上的特點(diǎn)分別是____________________，圖1和圖2中的兩個(gè)培養(yǎng)基在用途方面的共同點(diǎn)是____________________。

(3)圖2中的接種方法需要連續(xù)劃線，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開始，目的是_________________。結(jié)果有的菌落周圍有透明圈而有的沒有，原因是________________。27、利用乳腺生物反應(yīng)器獲取藥用蛋白具有產(chǎn)量高；成本低等優(yōu)點(diǎn)。如圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。

請回答：

（1）PCR擴(kuò)增人血清白蛋白基因使用的酶是_____________。要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與____________基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組。

（2）基因工程的核心步驟是________________________，將目的基因?qū)肱Ｊ芫阉玫姆椒ㄊ莀___________________。

（3）體外受精前精子要進(jìn)行____________處理，過程②包括__________技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；可用___________技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用_________________技術(shù)。28、已知番茄的紅果(Y)對(duì)黃果(y)為顯性；二室(M)對(duì)多室(m)為顯性，控制兩對(duì)相對(duì)性狀的基因分別位于兩對(duì)同源染色體上。育種工作者利用紅果多室(Yymm)番茄植株，采用不同的方法進(jìn)行了四組實(shí)驗(yàn)。請據(jù)圖回答問題：

(1)以上四種育種實(shí)驗(yàn)都主要應(yīng)用了________的原理，培育中發(fā)生了脫分化的過程有________。

(2)用番茄植株的花粉隨機(jī)進(jìn)行有關(guān)實(shí)驗(yàn)，得到幼苗B直接移栽，發(fā)育成的番茄植株的基因型和表型分別是________、________，如果植物體C僅是花粉兩兩隨機(jī)融合得到的，則植物體C的基因型及其比例是____________。

(3)圖中________大部分細(xì)胞中染色體數(shù)量最少，要保證植物體B可以用于生產(chǎn)，培育中④過程可使用__________________處理幼苗。

(4)圖中植物體________少數(shù)細(xì)胞中染色體數(shù)量最多，培育該植物體的過程稱為________育種法，植物體D能表現(xiàn)出兩個(gè)親本的一些性狀，根本原因是___________________________________________。

(5)植物體A只表現(xiàn)紅果多室，原因是_______________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共28分)29、新型冠狀病毒是一種單鏈RNA病毒；新型冠狀病毒感染的常規(guī)檢測方法是通過實(shí)時(shí)熒光PCR鑒定。

（1）首先，從樣本中提取病毒RNA，經(jīng)________酶作用生成cDNA。然后以cDNA為模板進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增；測定樣品中病毒核酸量。

（2）通過實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增目的基因；需額外添加熒光標(biāo)記探針（一小段單鏈DNA，可與目的基因中部序列特異性結(jié)合）。當(dāng)探針完整時(shí)，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測到（如圖1）。

①當(dāng)樣本中有目的基因時(shí)，引物和探針與目的基因退火時(shí)，通過________原則而特異性結(jié)合。

②在PCR循環(huán)的延伸階段，TaqDNA聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。檢測到的熒光強(qiáng)度與反應(yīng)體系中DNA分子數(shù)呈_________（正相關(guān)或反相關(guān)反）關(guān)系。

（3）通過實(shí)時(shí)熒光PCR檢測新型冠狀病毒感染時(shí)；檢測到的熒光強(qiáng)度變化如圖2所示。

①與指數(shù)增長期相比，線性增長期目的基因數(shù)量的增長率下降，原因有_________。

②Ct值的含義：在PCR擴(kuò)增過程中，每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)所經(jīng)歷的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。因此，當(dāng)樣本中初始模板越多時(shí)，Ct值就_________。

③某新型冠狀病毒核酸檢測說明書標(biāo)明，Ct≤37判定為陽性，Ct>40或無Ct值判定為陰性。圖2所示新型冠狀病毒核酸檢測結(jié)果應(yīng)判定為_________。

（4）陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染?？赡墚a(chǎn)生假陰性的因素有________。

a．取樣太早；樣本中病毒量少，達(dá)不到實(shí)時(shí)熒光PCR檢測閾值。

b．樣本被污染；RNA酶將病毒RNA降解。

c．病毒發(fā)生變異30、在基因工程的操作過程中；有多種方法可檢測目的基因是否導(dǎo)入受體菌，回答下列問題。

（1）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光。將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與_________________重組后導(dǎo)入受體菌；經(jīng)培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。

（2）環(huán)絲氨酸輔助篩選法：四環(huán)素能使細(xì)菌停止生長但不致死；環(huán)絲氨酸能使正常生長的細(xì)菌致死，而對(duì)停止生長的細(xì)菌不致死。某質(zhì)粒如圖所示（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。用此質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體；轉(zhuǎn)化細(xì)菌后，結(jié)果有3種：未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌；含質(zhì)粒的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌。

①用含有___________和___________的培養(yǎng)基對(duì)上述3種細(xì)菌進(jìn)行篩選，只有含質(zhì)粒的細(xì)菌被淘汰，理由是_________________________________________________________。

②在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選出含重組質(zhì)粒的細(xì)菌，還需使用含有的____________培養(yǎng)基。

（3）熒光定量PCR技術(shù)：熒光定量PCR技術(shù)可實(shí)現(xiàn)對(duì)轉(zhuǎn)基因細(xì)菌中目的基因的定量檢測。在PCR反應(yīng)體系中；加入的熒光探針與模板DNA（目的基因）的某條鏈互補(bǔ)結(jié)合，當(dāng)合成的子鏈延伸至探針處，探針被酶切降解，熒光監(jiān)測系統(tǒng)就會(huì)接收到熒光信號(hào)，具體原理如下圖所示。

①可通過檢測_______________判定待測細(xì)菌中是否含有模板DNA，且熒光達(dá)到某一特定強(qiáng)度所需的循環(huán)次數(shù)越_______；模板DNA含量越高。

②通過上述技術(shù)定量檢測目的基因，需從設(shè)計(jì)的多對(duì)引物和多種探針中選擇特異性最好的組合，為此需進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組需向反應(yīng)體系中加入___________。（填字母）

a．轉(zhuǎn)基因細(xì)菌的DNA模板b．非轉(zhuǎn)基因細(xì)菌DNA模板c．定量的待測引物d．定量的待測熒光探針e．熱穩(wěn)定DNA聚合酶f．解旋酶g．足量的脫氧核苷酸（dNTP）31、為研制抗病毒A的單克隆抗體；某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了如圖所示實(shí)驗(yàn)流程。

回答下列問題：

(1)在雜交瘤細(xì)胞的體外培養(yǎng)過程中，需要的氣體主要有O2和CO2。O2的主要作用是______，CO2的主要作用是__________。

(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟；___________________。

(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于___________，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是______。雜交瘤細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，其主要增殖方式是______________________。

(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有__________32、學(xué)習(xí)下列材料；回答（1）～（4）題。

人造細(xì)胞。

多細(xì)胞生物是一個(gè)復(fù)雜而有序的細(xì)胞“社會(huì)”；需要通過細(xì)胞間的信息交流高效地完成復(fù)雜的生命活動(dòng)。細(xì)胞膜上的受體蛋白在這一過程中發(fā)揮了重要作用，胞外信號(hào)分子與膜受體的結(jié)合可誘導(dǎo)膜受體發(fā)生空間構(gòu)象改變，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生下游信號(hào)分子，實(shí)現(xiàn)信號(hào)從胞外到胞內(nèi)的傳遞，以進(jìn)一步影響細(xì)胞的生命活動(dòng)。

我國科研人員利用DNA納米結(jié)構(gòu)，構(gòu)建了兩種模擬膜蛋白功能的結(jié)構(gòu)一DNA三棱柱和DNA納米孔。他們先從活細(xì)胞中獲得巨型膜囊泡，通過膽固醇分子將DNA三棱柱錨定在膜囊泡表面，DNA納米孔穿插于膜囊泡磷脂雙分子層中，構(gòu)建出“人造細(xì)胞”—GMVA。再用同樣的方法構(gòu)建出僅在膜囊泡表面錨定DNA三棱柱的“人造細(xì)胞”—GMVB。兩種人造細(xì)胞之間可通過下圖所示機(jī)制進(jìn)行信息傳遞。

實(shí)驗(yàn)開始前，GMVA的DNA三棱柱所帶的綠色熒光基團(tuán)被猝滅，DNA納米孔發(fā)出紅色熒光。體系中混合無熒光的GMVB后，其上的DNA三棱柱發(fā)出信號(hào)，誘發(fā)GMVA釋放出可以打開DNA納米孔的密鑰，同時(shí)自身的綠色熒光恢復(fù)。密鑰作用于GMVA上的DNA納米孔，使DNA納米孔轉(zhuǎn)變?yōu)榇蜷_狀態(tài)，同時(shí)DNA納米孔的紅色熒光被猝滅；Ca2＋通過DNA納米孔流入GMVA中，可被指示劑分子檢測到，GMVA內(nèi)部從無色變?yōu)辄S綠色。

上述研究為模擬和探索真實(shí)細(xì)胞的復(fù)雜功能提供了可能。此外；人造細(xì)胞也可應(yīng)用于環(huán)境治理；新能源開發(fā)、疾病治療等諸多方面。當(dāng)然，對(duì)于“人造細(xì)胞”的應(yīng)用領(lǐng)域和發(fā)展前景，學(xué)界還存在大量爭議。有學(xué)者認(rèn)為，人類對(duì)于像“人造細(xì)胞”這樣的新興技術(shù)的使用必須保持審慎的態(tài)度。

(1)Ca2＋跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞筋愃朴赺___________，依據(jù)是____________。

(2)細(xì)胞間信息交流的方式包括激素通過體液運(yùn)輸作用于靶細(xì)胞、相鄰兩植物細(xì)胞間形成胞間連絲等。與文中GMVA和GMVB的信息交流方式相似的生物學(xué)實(shí)例是____________。

(3)熒光標(biāo)記技術(shù)和指示劑可以幫助科研人員精準(zhǔn)地操控和判斷GMVA上的信息傳遞過程。下列關(guān)于GMVA膜表面熒光情況，正確的是____________（填字母）。

a．未接收信號(hào)刺激；同時(shí)發(fā)出綠色熒光和紅色熒光。

b．未接收信號(hào)刺激；僅發(fā)出紅色熒光，綠色熒光猝滅。

c．接收信號(hào)刺激；同時(shí)發(fā)出綠色熒光和紅色熒光。

d．接收信號(hào)刺激；僅發(fā)出綠色熒光，紅色熒光猝滅。

e．接收信號(hào)刺激；無熒光，囊泡內(nèi)部呈現(xiàn)黃綠色。

(4)人造細(xì)胞是簡化模型，在應(yīng)用“人造細(xì)胞”技術(shù)時(shí)需要注意的一項(xiàng)風(fēng)險(xiǎn)是____________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

要使目的基因與對(duì)應(yīng)的運(yùn)載體重組；首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體，其次要用DNA連接酶將兩者連接形成重組DNA，A正確，BCD錯(cuò)誤。

故選A。2、B【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；退火溫度與時(shí)間；取決于引物的長度、堿基組成及其濃度，引物的堿基數(shù)量越少變性時(shí)破開的氫鍵越少，則退火溫度越低，但能與引物發(fā)生配對(duì)的片段就越多，目標(biāo)DNA獲得率越低，A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)需要可在引物的5’端添加限制酶識(shí)別序列、點(diǎn)突變序列等；以便更加準(zhǔn)確地獲得目的基因，B正確；

C；兩種引物的退火溫度差異較大；導(dǎo)致不能同時(shí)退火，甚至一條鏈在延伸，一條鏈在退火，可增加引物與模板的非特異性結(jié)合，C錯(cuò)誤；

D；引物的GC含量越高；結(jié)合特異性越強(qiáng)，但GC過高，不利用退火，從而阻礙目標(biāo)DNA的擴(kuò)增，D錯(cuò)誤。

故選B。3、D【分析】【分析】

1；細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中；相同細(xì)胞的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化過程遺傳物質(zhì)不變，只是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。

2；胚胎干細(xì)胞。

(1)來源：哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來。

(2)特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

A；經(jīng)誘導(dǎo)形成的iPS細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)；分化能力增強(qiáng)，A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)基因選擇性表達(dá)的原因；分化后的細(xì)胞蛋白質(zhì)種類和數(shù)量可能會(huì)發(fā)生改變，B錯(cuò)誤；

C；iPS細(xì)胞不屬于成體干細(xì)胞；C錯(cuò)誤；

D；ES細(xì)胞來源于早期胚胎；因此與ES細(xì)胞相比，iPS細(xì)胞用于再生醫(yī)學(xué)可回避倫理爭議，D正確。

故選D。4、D【分析】【分析】

題圖分析：圖示為單克隆抗體制備過程；除了抗原刺激之外，還用EBV（一種病毒顆粒）感染動(dòng)物B淋巴細(xì)胞，該細(xì)胞株能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對(duì)Oua敏感。

【詳解】

A；據(jù)圖可知；骨髓瘤細(xì)胞在HAT選擇培養(yǎng)基中死亡，A正確；

B；抗體是由漿細(xì)胞分泌的；雜交瘤細(xì)胞可能丟失來自（效應(yīng)）B細(xì)胞的染色體，故可能導(dǎo)致抗體產(chǎn)生能力下降，B正確；

C；B淋巴細(xì)胞在骨髓中發(fā)育成熟；可分布于淋巴結(jié)和脾臟等處，故B淋巴細(xì)胞可來源于抗原刺激后動(dòng)物的淋巴結(jié)和脾臟等處，C正確；

D；該實(shí)驗(yàn)最終目的是獲得能產(chǎn)生可與抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體；D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】5、D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官；組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

題圖分析；圖中①代表外植體，②表示愈傷組織，③表示胚狀體，④表示幼苗。

【詳解】

A；若①是體細(xì)胞融合得到的雜種細(xì)胞；由于雜種細(xì)胞中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)，因而可能出現(xiàn)不同植物的遺傳特性，A正確；

B；若①是二倍體植株的花粉；花粉經(jīng)組織培養(yǎng)得單倍體植株，經(jīng)染色體加倍后得到純合品種，B正確；

C；若①是人參細(xì)胞；利用人參細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)可提高人參皂苷的產(chǎn)量，C正確；

D；若①是具有雜種優(yōu)勢的農(nóng)作物細(xì)胞；由于植物組織培養(yǎng)是無性繁殖，因而不會(huì)發(fā)生性狀分離，D錯(cuò)誤。

故選D。6、C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；過敏源基因隨目的基因轉(zhuǎn)入了植物；影響食物安全，A錯(cuò)誤；

B；抗除草劑油菜成為人侵物種；是因?yàn)檗D(zhuǎn)基因植物選擇優(yōu)勢影響生物多樣性。進(jìn)而影響環(huán)境安全，B錯(cuò)誤；

C；含有β-胡蘿卜素的黃金米可以補(bǔ)充人體缺乏的維生素A；對(duì)人體有益，C正確；

D；轉(zhuǎn)基因生物中的外源基因向附近野生近源物種自發(fā)轉(zhuǎn)移；導(dǎo)致其基因發(fā)生變化的現(xiàn)象，影響環(huán)境安全，D錯(cuò)誤。

故選C。7、C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

1；平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。不能用于計(jì)數(shù)。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?？捎糜诰溆?jì)數(shù)。

【詳解】

①平板劃線法或稀釋涂布平板法都是在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行的；①正確；

②平板劃線法接種用接種環(huán)；稀釋涂布平板法接種要用涂布器，②錯(cuò)誤；

③不論是平板劃線法還是稀釋涂布平板法都需要進(jìn)行無菌操作；在酒精燈火焰旁進(jìn)行，③正確；

④平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)活菌；只能用于純化菌種；稀釋涂布平板法可以用來計(jì)數(shù)活菌，④錯(cuò)誤。

故選C。8、D【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的意愿；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。

【詳解】

①基因工程技術(shù)能按照人們的意愿進(jìn)行；所以變異是定向的，①正確；

②DNA連接酶把目的基因與運(yùn)載體粘性末端的磷酸與脫氧核糖連接成磷酸二酯鍵；而不是將堿基對(duì)連接起來，②錯(cuò)誤；

③蛋白質(zhì)中的氨基酸序列可為合成目的基因提供資料；先推知mRNA中的密碼子序列，再推知目的基因中的脫氧核苷酸序列，③正確；

④受精卵能直接發(fā)育成新的個(gè)體；是理想的受體，④正確；

⑤該羊的產(chǎn)生沒有用到核移植技術(shù)；直接由受精卵發(fā)育而成，⑤錯(cuò)誤。

綜上正確的選項(xiàng)有①③④；D正確，ABC錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共6題，共12分)9、A:B:C【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

生物武器可以通過多種途徑使人感染發(fā)病，如經(jīng)口食入、經(jīng)呼吸道吸入、昆蟲叮咬、皮膚接觸等，因此生物武器的傳播途徑主要包括直接傳播、食物傳播和生活必需品傳播。故選ABC。10、A:B:C【分析】【分析】

一種限制酶只能識(shí)別一種核苷酸序列且在特定的位點(diǎn)對(duì)DNA分子進(jìn)行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端兩種，具有相同黏性末端的DNA片段之間可以在DNA連接酶的作用下連接到一起。

【詳解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，A正確；

B；由于Sau3AI的切割位點(diǎn)在EcoRI的左側(cè)；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，B正確；

C；P1噬菌體載體為環(huán)狀DNA；其上只含有一個(gè)EcoRI的切點(diǎn)，因此用EcoRI切割后，該環(huán)狀DNA分子變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，C正確；

D；從圖甲看出；用EcoRI切割目的基因后兩端各有一切口，與圖乙中EcoRI切口對(duì)接時(shí)，可有兩種可能，即可產(chǎn)生兩種重組DNA，D錯(cuò)誤。

故選ABC。11、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析；①過程導(dǎo)入外源基因，類似于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化，②表示細(xì)胞分裂和分化，③表示動(dòng)物細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，④是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

【詳解】

A；①過程是通過誘導(dǎo)基因作用使纖維母細(xì)胞（高度分化）脫分化為干細(xì)胞（具有分裂和分化能力）；與纖維母細(xì)胞相比，干細(xì)胞的全能性較高，A正確；

B；②過程是干細(xì)胞再分化為其他組織器官細(xì)胞；是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，B正確；

C；③過程是細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞過程；需要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選，C正確；

D；圖中的肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞均來自于甲鼠；具有相同的基因組成，Y細(xì)胞來自于乙鼠，其基因組成不同，D錯(cuò)誤。

故選ABC。12、B:D【分析】【分析】

（1）微生物的發(fā)酵在食品的制作中具有重要意義；如制饅頭；面包、釀酒要用到酵母菌，制酸奶要用到乳酸菌。

（2）低溫能抑制細(xì)菌；真菌的生長和繁殖。

（3）制作泡菜的原理就是利用乳酸菌使蔬菜中的有機(jī)物生成乳酸。

【詳解】

A；制酸奶要用到乳酸菌；乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，使得酸奶有一種特殊的酸味，所以在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品，A正確；

B；制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制需氧型微生物繁殖；B錯(cuò)誤；

C；白酒的釀造過程中利用了酵母菌的發(fā)酵作用；同時(shí)利用霉菌產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉糖化，C正確；

D；地窖中溫度低；能抑制細(xì)菌、真菌等微生物的生長和繁殖，使其繁殖速度慢，數(shù)量少，不能充分分解食物，達(dá)到保鮮的目的，所以將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中是為了抑制微生物的生長，D錯(cuò)誤。

故選BD。13、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應(yīng)為無菌水，B錯(cuò)誤；

C；由Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號(hào)培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。14、C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；A正確；

B；因?yàn)榛蛑笇?dǎo)蛋白質(zhì)的合成；所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)，B正確；

C；改造后的中華鱘具有新的性狀；但其和現(xiàn)有中華鱘之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是基因；可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。

故選CD。三、填空題(共8題，共16分)15、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)16、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖17、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥竣?直接②.食物③.生活必需品18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個(gè)核苷酸兩個(gè)DNA片段19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)性別控制21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】組織單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)基生長和繁殖22、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽四、判斷題(共2題，共16分)23、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，則可能通過減數(shù)分裂進(jìn)入到花粉細(xì)胞中，進(jìn)而傳入環(huán)境中的其他生物體內(nèi)。本說法正確。24、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克?。菏侵赴芽寺〕鰜淼慕M織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g(shù)在實(shí)驗(yàn)室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)25、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有機(jī)體中的重要成分；在生物體中核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類，在真核細(xì)胞中，前者主要存在于細(xì)胞核中，后者主要存在于細(xì)胞質(zhì)及核仁里。在制備核酸時(shí)，通過研磨破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，使核蛋白被釋放出來。提取DNA有有多種方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有區(qū)別又有聯(lián)系。

II：題圖分析：A表示利用生殖細(xì)胞得到單倍體植株；B表示通過胚狀體進(jìn)行無性繁殖；其中①為脫分化；再分化；C為植物組織培養(yǎng)；D表示植物體細(xì)胞雜交，其中②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。

【詳解】

I：（1）液氮溫度低，液氮中研磨會(huì)研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。

（2）氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-異戊醇，離心后，氯仿-異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應(yīng)該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說明DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇。

（3）從表中數(shù)據(jù)可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物組織培養(yǎng)過程中；整個(gè)過程應(yīng)嚴(yán)格無菌無毒，利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）為促進(jìn)愈傷組織再分化；在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需降低2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加適量的生長素，以促進(jìn)苗形成。

（3）①芽是植物體中具有分生能力的組織；細(xì)胞排列緊密，①錯(cuò)誤；

②剛?cè)诤系闹参矬w細(xì)胞沒有成熟的大液泡；無法構(gòu)成滲透系統(tǒng)，不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，②錯(cuò)誤；

③胚狀體細(xì)胞出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽；因此其細(xì)胞內(nèi)有葉綠體，③正確；

④分化的愈傷組織的結(jié)果形成了具有根和芽的胚狀體；細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了變化，④錯(cuò)誤。

故選③。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查DNA提取原理、操作過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，意在考查學(xué)生讀圖能力和分析應(yīng)用能力。【解析】研磨充分，低溫抑制酶活性抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA（體積分?jǐn)?shù)為70-75%）酒精降低（適量的）生長素③26、略

【分析】【分析】

將微生物接種到固體培養(yǎng)基常用稀釋涂布平板法；接種前先要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在一定的稀釋度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成單個(gè)細(xì)胞，在適宜的條件下培養(yǎng)讓菌體進(jìn)行繁殖，能夠在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。稀釋涂布平板操作：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取出時(shí)，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡。②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡冷卻8-10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基上，涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。

【詳解】

（1）圖1中是將土壤懸浮液取1mL；加入9mL無菌水進(jìn)行稀釋10倍。圖1中微生物接種方式為稀釋涂布平板法。該方法可以用于對(duì)菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，因?yàn)楫?dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面可以獲得由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量可以推測所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

（2）土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；培養(yǎng)基需要采用固體培養(yǎng)基，才可用于稀釋涂布平板法，且因?yàn)槭欠蛛x固氮菌，所以培養(yǎng)基中不加氮源。圖1和圖2中的兩個(gè)培養(yǎng)基都是用于從多種微生物中分離目的菌種。

（3）圖2中接種方法為平板劃線法，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開始，目的是將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果。圖2中培養(yǎng)基時(shí)為了篩選出能分解除草劑草甘膦的微生物，所以有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈?！窘馕觥?1)無菌水稀釋涂布平板法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面可以獲得由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量可以推測所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

(2)沒有氮源；屬于固體培養(yǎng)基從多種微生物中分離出目的菌。

(3)將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈27、略

【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因奶牛的產(chǎn)生采用了體外受精（精子的采集和獲能；卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、受精）、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

（1）參與PCR的主要物質(zhì)：引物；熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）、原料（dNTP）、模板和緩沖液（其中需要Mg2+）等；故主要使用熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等，故要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法。

（3）體外受精是指哺乳動(dòng)物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術(shù)。成熟的精子在受精前需獲能處理；過程②包括早期胚胎培養(yǎng)（動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)）技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。為了獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢；可進(jìn)行胚胎分割，操作時(shí)的注意事項(xiàng)是將囊胚階段的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白；根據(jù)抗原特異性結(jié)合原理，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟；蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。能根據(jù)題干信息設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，綜合考察運(yùn)用生物學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問題的能力?！窘馕觥繜岱€(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）（牛）乳腺蛋白基因表達(dá)載體的構(gòu)建顯微注射法獲能早期胚胎培養(yǎng)（動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)）胚胎分割抗原—抗體雜交28、略

【分析】【分析】

分析題圖：①⑤⑥為植物組織培養(yǎng)；③為花粉離體培養(yǎng)；幼苗B為單倍體，若過程④使用秋水仙素處理幼苗B，則植物體B為可育的純合植株。

【詳解】

（1）由圖可知；圖中的四種育種方法都利用了離體的植物細(xì)胞進(jìn)行育種，運(yùn)用了植物細(xì)胞具有全能性的原理，離體植物細(xì)胞的培育都必須運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該過程中會(huì)發(fā)生脫分化，即①③⑤⑥。

（2）紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉基因型及比例是Ym：ym＝1：1；故花粉苗直接發(fā)育成的番茄幼苗B的基因型是Ym或ym，但其為單倍體，高度不育，故表型為無果實(shí)；而植物體C僅是花粉兩兩隨機(jī)融合得到的，基因型及其比例是YYmm：Yymm：yymm＝1：2：1。

（3）育種過程中染色體數(shù)量最少的是由減數(shù)分裂產(chǎn)生的花粉及幼苗B；植物體B中只有一個(gè)染色體組；高度不育，可以使用一定濃度的秋水仙素或適當(dāng)?shù)蜏靥幚硎怪蔀槎扼w，以用于生產(chǎn)。

（4）植物體D是由番茄體細(xì)胞和馬鈴薯體細(xì)胞融合培育而來的；其染色體數(shù)量是兩個(gè)物種親本的染色體數(shù)量之和，有絲分裂中少數(shù)細(xì)胞中的染色體數(shù)量暫時(shí)加倍，染色體數(shù)量最多；植物體D具有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)，故能表現(xiàn)出兩個(gè)親本的一些性狀。

（5）植物體A的形成過程中沒發(fā)生減數(shù)分裂，只進(jìn)行了有絲分裂，沒有基因重組，沒發(fā)生基因突變，故完全表現(xiàn)親本紅果多室的性狀。【解析】(1)植物細(xì)胞全能性①③⑤⑥

(2)Ym或ym無果YYmm∶Yymm∶yymm＝1∶2∶1

(3)花粉和幼苗B一定濃度的秋水仙素或適當(dāng)?shù)蜏亍?/p>

(4)D植物體細(xì)胞雜交具有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)。

(5)該培育過程中只進(jìn)行了有絲分裂，且沒發(fā)生基因突變，完全保持了親本的遺傳性狀六、綜合題(共4題，共28分)29、略

【分析】【分析】

PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)；每次循環(huán)可分為變性；復(fù)性、延伸三步，常需要進(jìn)行一次預(yù)變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。

（1）

由病毒RNA生成cDNA的過程屬于逆轉(zhuǎn)錄；需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。

（2）

①當(dāng)樣本中有目的基因時(shí)；引物和探針與目的基因退火，通過堿基互補(bǔ)配對(duì)形成氫鍵而特異性結(jié)合。

②在PCR循環(huán)的延伸階段；TaqDNA聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。根據(jù)題干信息可知，“熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物數(shù)量完全同步”，檢測到的熒光強(qiáng)度與反應(yīng)體系中DNA分子數(shù)呈正比例關(guān)系。

（3）

①與指數(shù)增長期相比；線性增長期目的基因數(shù)量的增長率下降，有可能是底物濃度降低導(dǎo)致的，也有可能是酶的活性緩慢下降導(dǎo)致的。

②樣本中初始模板越多時(shí)；達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)所經(jīng)歷的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)就越小，Ct值就越低。

③Ct≤37判定為陽性，Ct>40或無Ct值判定為陰性。據(jù)圖2可知熒光閾值大概是36；新型冠狀病毒核酸檢測結(jié)果應(yīng)判定為陽性。

（4）

陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染?？赡墚a(chǎn)生假陰性的因素有；取樣太早，樣本中病毒量少，達(dá)不到實(shí)驗(yàn)時(shí)熒光PCR檢測閾值；樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，從而導(dǎo)致樣本中病毒量少；病毒發(fā)生變異，檢測不出來，從而出現(xiàn)假陰性。

故選abc。

【點(diǎn)睛】

熟知PCR技術(shù)的原理以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵，能夠從題目中獲取有用的信息并進(jìn)行利用、分析和綜合是解答本題的關(guān)鍵。【解析】（1）逆轉(zhuǎn)錄。

（2）堿基互補(bǔ)配對(duì)原則正相關(guān)。

（3）TaqDNA聚合酶活性下降；引物濃度下降、原料dNTP濃度下降越小陽性。

（4）abc30、略

【分析】【分析】

基因工程育種原理：DNA重組技術(shù)（屬于基因重組范疇）方法：按照人們的意愿；把一種生物的個(gè)別基因復(fù)制出來，加以修飾改造，放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。操作步驟包括：提取目的基因；目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與表達(dá)等。舉例：能分泌人類胰島素的大腸桿菌菌株的獲得，抗蟲棉，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等。

【詳解】

（1）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光。將目的基因和GFP基因拼接成融合基因；并與運(yùn)載體（質(zhì)粒）重組后導(dǎo)入受體菌，經(jīng)培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落，這屬于個(gè)體生物學(xué)鑒定法。

（2）①用含有四環(huán)素和環(huán)絲氨酸