試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）-CO2

文件號(hào)：AA第1版頁數(shù)PAGE3共4頁試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程項(xiàng)目二氧化碳（CO2）方法PEP-C法儀器H7600系列編寫人日期審核人日期批準(zhǔn)人日期文件分發(fā)部門和/或個(gè)人本規(guī)程自年月日起實(shí)施 目錄檢測原理標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標(biāo)本處理3.試劑3.1試劑3.2校準(zhǔn)血清3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4.儀器5.操作6.計(jì)算7.操作性能7.1精密度7.2準(zhǔn)確度7.3靈敏度7.4可報(bào)告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測原理血清（漿）中碳酸氫根在磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）催化下和磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）反應(yīng)，生成草酰乙酸和磷酸；草酰乙酸和蘋果酸脫氫酶（MDH）反應(yīng)，生成蘋果酸，同時(shí)將NADH氧化成NAD；在340nm波長處吸光度的降低與樣品中HCO3-含量成正比。PEP-C+Mg2+PEP+HCO3—草酰乙酸＋H2PO4—MDH草酰乙酸＋NADH＋H+蘋果酸＋NAD+2．標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況。孕婦應(yīng)在產(chǎn)后或終止哺乳3個(gè)月后檢驗(yàn)。此外，有無服用影響的藥物以及采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會(huì)影響測試項(xiàng)目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：血漿使用肝素作為抗凝劑。2.4標(biāo)本處理：血標(biāo)本室溫放置30min～45min后離心分離血清或血漿，置潔凈試管加蓋低溫保存。3．試劑3.1試劑：本科使用上海華臣生物技術(shù)有限公司CO2試劑盒，為液體單一試劑，各組分如下：試劑包裝規(guī)格見試劑說明書。PEP丙酮酸12.5mmol/LNADH0.6mmol/LMDH蘋果酸脫氫酶>4100U/LPEP-C丙酮酸羧化酶>400U/L緩沖液pH7.53.2校準(zhǔn)血清：使用上海華臣生物技術(shù)有限公司提供的復(fù)合校準(zhǔn)血清或使用試劑盒提供的水標(biāo)準(zhǔn)液。校準(zhǔn)頻次：空白定標(biāo)：每日需做試劑空白定標(biāo)。全點(diǎn)定標(biāo)：試劑換批號(hào)使用時(shí)或質(zhì)控結(jié)果超過規(guī)定的2SD范圍，需要全點(diǎn)定標(biāo)。3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原原包裝試劑儲(chǔ)存在2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存20天。試劑儲(chǔ)存在18-22℃穩(wěn)定15天，試劑應(yīng)避免污染。試劑顏色為淺黃色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。多項(xiàng)校準(zhǔn)血清在2-8℃儲(chǔ)存至標(biāo)簽所示失效日期，復(fù)溶后-20℃保存，可穩(wěn)定半個(gè)月，只可凍融一次，避免反復(fù)凍融。參見校準(zhǔn)血清說明書。4．儀器H7600系列型號(hào)儀器。5．操作樣品為血清或肝素抗凝血漿。本法為終點(diǎn)法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。A測定A測定A標(biāo)準(zhǔn)c＝ΧCOA標(biāo)準(zhǔn)式中：c——測定二氧化碳濃度，mmol/L；A測定——標(biāo)本管吸光度；A標(biāo)準(zhǔn)——標(biāo)準(zhǔn)管吸光度；CO——校準(zhǔn)血清二氧化碳濃度，mmol/L；7．操作性能7.1精密度：批內(nèi)CV<5%，批間CV<7%。7.2準(zhǔn)確度：測量結(jié)果在上海華臣生物質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會(huì)存在差異，使用時(shí)請確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。7.3靈敏度：二氧化碳濃度為：25mmol/L時(shí)，吸光度為1.3625～1.4750。7.4可報(bào)告范圍：血清與試劑用量之比為3:300時(shí)，測定上限為50mmol/L。7.5特異性：測量值在給定值的90%-110％范圍內(nèi)。7.6干擾：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結(jié)果無明顯影響。8．參考值20～29mmol/L。9．