人白介素6(IL-6)試劑盒的操作說明書

1、人白細胞介素-6試劑盒操作說明人白細胞介素-6試劑盒操作說明這個工具包僅用于研究。檢測范圍：96T0-8納克/升使用目的：該試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣品中白細胞介素6的含量。實驗原理該試劑盒采用雙抗體夾心法測定樣品中人白細胞介素6的水平。微孔板包被有純化的人白細胞介素6(IL-6)抗體以制備固相抗體。將白細胞介素6(IL6)依次加入包被有單克隆抗體的微孔中，然后與辣根過氧化物酶標記的IL6抗體結合，形成抗體-抗原-酶標記的抗體復合物。徹底清洗后，加入基質TMB進行顯色。TMB在辣根過氧化物酶的催化下變成藍色，在酸的作用下變成黃色。顏色的深度與樣品中的白細胞介素-6呈正相關。用酶標儀

2、在450納米波長下測定吸光度(吸光度值)，用標準曲線計算樣品中人白細胞介素6(IL-6)的濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶7停液6ml1瓶2酶標試劑6毫升1瓶8標準(16納克/升)0.5毫升1瓶3酶標涂布板12孔8 9標準稀釋液1.5ml1瓶4樣品稀釋劑6ml1瓶10說明15顯影液6毫升，1瓶，11個密封板，2片6顯影劑b液體6ml1/瓶12密封袋1樣本要求1.樣品收集后應盡快提取，提取應根據(jù)相關文件進行。提取后應盡快進行實驗。如果不能立即進行試驗，可將樣品儲存在-20下，但應避免反復凍融。2.含有NaN3的樣品無法檢測，因為NaN3抑制辣根過氧化物酶(HRP)活性。操作步驟1.

3、標準物質的稀釋：該試劑盒提供一種原始標準物質。用戶可以根據(jù)下圖將其稀釋在小試管中。將150l標準物質稀釋液添加到150l 8 ng/L5標準物質的原始標準物質中4ng/L4標準150l標準5添加150l標準稀釋劑2ng/L3標準150l標準4添加150l標準稀釋劑將150l標準稀釋液添加到150l 1 ng/L2標準的3號標準中0.5納克/150微升標準L1，將150微升標準稀釋劑加入標準22.樣品添加：設置空白孔(空白對照孔不含樣品和酶標試劑，其他步驟相同)、標準孔和待測樣品孔。將50l標準物質準確加入酶標包被板，將40l樣品稀釋液加入待測樣品孔，然后加入10l待測樣品(樣品最終稀釋5倍)。

4、添加樣品將樣品添加到酶標板孔的底部，盡量不要接觸孔壁，輕輕搖動并混合。3.孵育：用密封膜密封平板，然后在37孵育30分鐘。4.配液：用20倍蒸餾水稀釋20倍濃縮洗滌液備用5.清洗：小心地去除密封膜，丟棄液體，甩干，用清洗液填充每個孔，靜置30秒后丟棄，重復5次，拍干。6.酶添加：除空白孔外，每孔添加50l酶標試劑。7.孵化：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：先加入50l顯色劑，再加入B50l顯色劑，輕輕搖勻，在37避光15分鐘顯色。10.終止：向每個孔中加入50l終止溶液以終止反應(此時藍色變成黃色)。11.測定：依次測量空白空調在0和450納米波長下各孔的吸光度(外徑值)。應在添加終止

5、液后15分鐘內進行測定。人白細胞介素-6試劑盒注意事項1.試劑盒應在使用前從冷藏環(huán)境中取出，并在室溫下平衡15-30分鐘。如果酶標涂層板在打開后沒有用完，應將其放入密封袋中儲存。2.濃縮的洗滌溶液中可能會有結晶和沉淀，可以在水浴中加熱以在稀釋時有助于溶解，并且在洗滌時不會影響結果。3.加樣的每一步都應使用加樣器，并定期檢查其準確度，以避免測試誤差。一個樣本廣告的時間7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。有關注意事項1.從冷藏環(huán)境中取出的試劑盒在使用前應在室溫下保持平衡15-30分鐘，酶聯(lián)免疫吸附涂層板打開后如果板條耗盡應裝入密封袋中保存。2洗滌緩沖液會結晶，加熱的水會溶解稀釋，洗滌不影響結果。3樣品的每一步都應與進樣器一起使用，并校對其準確性以避免測試誤差。一個樣本時間控制在5分鐘以內，如果樣本量很大，建議使用齊射式。4每次測量同時以標準曲線做多個孔。如待測樣品中物質含量過高（樣品外徑大于標準孔外徑)，請先將樣品稀釋倍數(shù)(n倍)進行測量和計算，然后再乘以總稀釋倍數(shù)(n * * 5).5 .封板膜只能一次性使用，避免交叉污染。儲存6個基板。7嚴格按照操作說明，將測定結果以微量滴定板讀數(shù)器為標準。8 .所有樣品、洗滌液和各種被