內(nèi)毒素與真菌葡聚糖檢測的臨床意義.ppt

1、細(xì)菌內(nèi)毒素641,二、真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床應(yīng)用,二、真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床應(yīng)用,中國感染與化療雜志2008 年7 月20 日第 8 卷第4 期,二、真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床應(yīng)用,美國四大醫(yī)療中心做的一項(xiàng)回顧性研究,死亡率(%),診斷延遲時間(d),Garey KW et al. Clin Infect Dis 2006, 43:2531 .,微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn) :,（1）痰或支氣管肺泡灌洗液培養(yǎng)呈霉菌 （2）鼻竇抽取液直接鏡檢或細(xì)胞學(xué)檢查，或培養(yǎng)呈霉菌陽性； （3）痰或支氣管肺泡灌洗液經(jīng)直接鏡檢或細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)霉菌或隱球菌； （4）支氣管肺泡灌洗液、腦脊液或2份以上的血

2、液樣品呈曲霉菌抗原（半乳甘露聚糖檢測、GM試驗(yàn)）陽性； （5）血液中(1,3)-D葡聚糖檢測（G試驗(yàn)）陽性； （6）血中隱球菌抗原陽性； （7）無菌體液中經(jīng)直接鏡檢或細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)真菌； （8）未留置尿管的情況下，連續(xù)2份尿樣培養(yǎng)均呈酵母菌陽性或尿檢見念珠菌管型； （9）血培養(yǎng)呈酵母菌陽性； （10）肺部異常，與下呼吸道感染相關(guān)的標(biāo)本中（血液、痰液和支氣管肺泡灌洗液等）多次培養(yǎng)無任何致病細(xì)菌。,二、真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床應(yīng)用,真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床價值,早期診斷:先于臨床診斷平均4天 敏感性和特異性:確診和高度疑似的感染病例 單次陽性的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值

3、分別為100%、82%、40%和100%。 兩次陽性的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為60%、93%、50%和95%。,二、真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床應(yīng)用,二、真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床應(yīng)用,早期診斷：侵襲性真菌感染增多且復(fù)雜，早期癥狀無特異性，往往被原發(fā)病掩蓋，病程長，發(fā)現(xiàn)較晚，死亡率高。因此對深部真菌感染治療成敗的關(guān)鍵在于早期診斷。 指導(dǎo)用藥：快速確定真菌感染后，選擇好治療方案,有針對性使用抗真菌類藥物。為臨床選用副作用小，療效高，價格適宜的藥物提供準(zhǔn)確的依據(jù)。 評價效果：應(yīng)用抗真菌藥物后，定期檢測血漿中葡聚糖濃度變化，評價選用藥物的有效性。 監(jiān)護(hù)病程：監(jiān)護(hù)深部真菌

4、感染易感人群的病發(fā)狀態(tài)。 動態(tài)觀察：易感人群，監(jiān)測臨床療效。,真菌(1-3)- -D-葡聚糖結(jié)果判斷,二、真菌(1-3)-D-葡聚糖的臨床應(yīng)用,細(xì)菌內(nèi)毒素測定試劑盒（動態(tài)濁度法）的臨床應(yīng)用,1、假陽性因素： 污染：操作環(huán)境及操作過程中污染，可能造成假陽性； 藥物：應(yīng)用某些抗生素如-酰胺內(nèi)酯類、氨基糖苷類和喹諾酮類等患者； 多糖：葡聚糖（10pg,Tn1）能激活試劑旁路（G途徑），當(dāng)葡聚糖含量過高，處理液不能全部處理時，常規(guī)的內(nèi)毒素實(shí)驗(yàn)也呈陽性； 蛋白質(zhì)：陽離子蛋白如溶菌酶、核糖核酸酶A及人免疫球蛋白G均能與內(nèi)毒素形成細(xì)菌內(nèi)毒素蛋白復(fù)合體，對細(xì)菌內(nèi)毒素有顯著的屏蔽作用而影響測定細(xì)菌內(nèi)毒素的結(jié)果。

5、此外，血紅蛋白與LPS結(jié)合可改變LPS的一些物理特性，從而增加LPS的生物學(xué)活性及LPS與LAL的作用。人血紅蛋白、球蛋白、抗凝血酶均可以造成假陽性結(jié)果。 2、假陰性因素： 離子：離子對內(nèi)毒素測定結(jié)果影響很大。一方面，高濃度的離子會引起內(nèi)毒素的聚集，使內(nèi)毒素不易解聚；另一方面，試劑中的C因子必須在二價陽離子的參與下才能被激活形成活化C因子，當(dāng)溶液中存在維生素、添加劑、右旋糖酐-40、抗凝血劑時，可能干擾試劑形成凝膠。,1、假陽性因素（G試驗(yàn)）： 污染（故試驗(yàn)應(yīng)采用無熱原試管、槍頭和蒸餾水等）； 利用纖維膜進(jìn)行血液透析患者； 紗布或其他醫(yī)療物品（外科手術(shù)）中含有葡聚糖； 某些品牌的靜脈制劑（白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白）； 某些細(xì)菌敗血癥患者（尤其是鏈球菌敗血癥）； 某些疾病導(dǎo)致病人自身丙種球蛋白增高； 使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液等也可能造成假陽性。 2、假陰性因素（G試驗(yàn)）： 隱球菌、接合菌感染的患者 使用某些抗真菌藥物（卡泊芬凈：可非競爭性抑制1-3-D葡聚糖的合成） 標(biāo)本放置時間過長,真菌(1-3)- -D-葡聚糖測定試劑盒（動態(tài)濁度法）的臨床應(yīng)用,采集注意事項(xiàng),采樣過程要