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文檔簡(jiǎn)介
1、For personal use only in study and research; not for commercial use螞高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)袈實(shí)驗(yàn)一 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布(必修一P26)螇一、實(shí)驗(yàn)原理:薃1、真核細(xì)胞的DNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi),RNA大部分存在于細(xì)胞質(zhì)中。衿2、甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對(duì)DNA親和力強(qiáng),使DNA顯現(xiàn)出綠色,而吡羅紅對(duì)RNA的親和力強(qiáng),使RNA呈現(xiàn)出紅色。利用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細(xì)胞染色,可同時(shí)顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。薀3、鹽酸的作用薆 鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞;蚃
2、鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合芀 4、0.9%的NaCl溶液作用:保持口腔上皮細(xì)胞的正常的形態(tài)肈二、目的要求:芅初步掌握觀察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法螃三、材料用具:蟻人的口腔上皮細(xì)胞(也可用其他動(dòng)物或植物細(xì)胞代替,如洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞)蝿大燒杯、小燒杯、溫度計(jì)、滴管、消毒牙簽、載玻片、蓋玻片、鐵架臺(tái)、石棉網(wǎng)、火柴、酒精燈、吸水紙、顯微鏡莈 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸,吡羅紅甲基綠染色劑(取A液20mL,B液80mL配成染色劑,使用時(shí)現(xiàn)配。A液:取吡羅紅甲基綠粉1g,加入100mL蒸餾水中溶解,放入棕色瓶中備用。B液:取乙酸鈉16
3、.4g,用蒸餾水溶解至1000mL。取乙酸12mL,用蒸餾水稀釋至1000mL。取稀釋的乙酸鈉溶液30mL和乙酸20mL,加蒸餾水50mL,配成pH為4.8的溶液),蒸餾水螃五、方法步驟:肁1、取口腔上皮細(xì)胞制片膇在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液。肆 用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下,把牙簽袃上附有碎屑的一端,放在上述載玻片上的液滴中涂抹幾下。蒂點(diǎn)燃酒精燈,將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片烘干。(固定細(xì)胞)衿2、水解裊在小燒杯中加入30mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸,將烘干的載玻片放入小燒杯中。羃在大燒杯中加入30溫水。蕿將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放在大燒杯中保溫5mi
4、n。莇3、沖洗涂片蚄用蒸餾水緩水流沖洗載玻片10s。肂4、染色羀用吸水紙吸去載玻片上的水分。聿將吡羅紅甲基綠染色劑滴2滴在載玻片上,染色5min。蚇吸去多余染色劑,蓋上蓋玻片。膂5、觀察莁低倍鏡觀察:選擇染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調(diào)節(jié)清晰。薇換用高倍物鏡觀察:調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色情況。蒆六、考點(diǎn)提示:節(jié)1、取口腔上皮細(xì)胞之前,應(yīng)先漱口,以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì);螂2、取洋蔥表皮細(xì)胞時(shí),盡量避免材料上帶有葉肉組織細(xì)胞;艿3、沖洗載玻片時(shí)水的流速要盡量慢,切忌直接用水龍頭沖洗;膅4、用酒精燈烘烤載玻片時(shí),不要只集中于材料處,而應(yīng)將載玻片在火焰上來(lái)回移動(dòng),使載
5、玻片均勻受熱,以免破裂;莂5、烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。膃蚇實(shí)驗(yàn)二 檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(必修一P18)羋一、實(shí)驗(yàn)原理:莂某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。莀1、生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多,有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥基,因此叫做還原糖;蔗糖分子內(nèi)沒(méi)有,為非還原糖。實(shí)驗(yàn)中所用的斐林試劑,只能鑒定生物組織中可溶性還原糖,而不能鑒定可溶性非還原糖。蒈糖類中的還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),
6、溶液變化過(guò)程為:淺藍(lán)色棕色磚紅色沉淀羇淀粉遇碘變藍(lán)色(直鏈)或紫(紅)色(支鏈)。蒂2、脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)統(tǒng)稱為脂類。它是構(gòu)成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學(xué)組成上,脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關(guān)的物質(zhì)。脂類的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細(xì)胞漿內(nèi)。 螀脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染液染成紅色)。膀3、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。)螅 薂 因此,可以根據(jù)與某些化學(xué)試劑所產(chǎn)生的顏色反
7、應(yīng),檢測(cè)生物組織中糖類,脂肪或蛋白質(zhì)的存在。膁二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?薈嘗試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)。薄三、實(shí)驗(yàn)材料:螞1、做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn),應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果或梨勻漿。(因?yàn)榻M織的顏色較淺,易于觀察。)薂經(jīng)試驗(yàn)比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。芀2、做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子、花生種子勻漿為最好,實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡34小時(shí)(也可用蓖麻種子)。薇3、做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),可用富含蛋白質(zhì)的豆?jié){、鮮肝提取液。螁4、淀粉的鑒定:馬鈴薯勻漿。蠆四、實(shí)驗(yàn)用具:雙面刀片、試管(最好用刻度試管)、試管夾、試管架、大小燒杯、小
8、量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙、顯微鏡螈五、實(shí)驗(yàn)試劑:莆1斐林試劑(甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液,乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液)袁2蘇丹或蘇丹染液肀3雙縮脲試劑(A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液,B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)蒀4體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液膅5碘液膅6蒸餾水蒁六、方法步驟:羈1.實(shí)驗(yàn)材料、儀器和試劑的選擇 每小組從老師提供的實(shí)驗(yàn)材料中選擇一兩種,預(yù)測(cè)其中含有哪些化合物,再選擇所需要的儀器和試劑。膈2.設(shè)計(jì)記錄表格,記錄預(yù)測(cè)結(jié)果,然后按照試驗(yàn)步驟進(jìn)行檢測(cè),用“+”或
9、“-”記錄實(shí)測(cè)結(jié)果。芅3.檢測(cè)的方法步驟袂(1)可溶性糖的檢測(cè)和觀察蝕1. 制備組織樣液。羇(去皮、切塊、研磨、過(guò)濾)蘋果或梨組織液必須臨時(shí)制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。蒞2. 取1支試管,向試管內(nèi)注入2mL待測(cè)組織樣液。芃3. 向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。(應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲(chǔ)存,使用前才將甲、乙液等量混合均勻后在注入)。 肇(切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測(cè)。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時(shí),生成的Cu ( OH )2在70 900oC下分解成黑色CuO和水,甲、乙液分別加入時(shí)可能會(huì)與組織樣液發(fā)生反
10、應(yīng),無(wú)Cu ( OH )2生成)。蚆4.試管放在盛有50-65oC溫水的大燒杯中,加熱約2min。蒅5.觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化:淺藍(lán)色 棕色 磚紅色(沉淀)。葿(好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者。也可用酒精燈對(duì)試管直接加熱,短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。防止試管內(nèi)的溶液沖出試管,造成燙傷。)衿(2)脂肪的檢測(cè)和觀察蒄方法一:向待測(cè)組織樣液中滴加3滴蘇丹III染液,觀察樣液被染色的情況。薅方法二:制作子葉臨時(shí)切片,用顯微鏡觀察子葉細(xì)胞的著色情況(以花生為例)。袀?cè)〔?取一粒浸泡過(guò)的花生種子,去掉種皮。(干種子要浸泡34小時(shí),新花生的浸泡時(shí)間可縮短。因?yàn)榻輹r(shí)間短,不易切片;
11、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng),組織較軟,切片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察)芇切片 用刀片在花生子葉的橫斷面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培養(yǎng)皿中待用。蕆制片從培養(yǎng)皿中選取最薄的切片,用毛筆蘸取放在載玻片中央;在花生子葉薄片上滴23滴蘇丹,染色3min(如果用蘇丹染液,染色1min),(染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)),薄片周圍染液,再滴加12滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液,洗去浮色,(酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,會(huì)影響對(duì)橘黃色脂肪滴的觀察。同時(shí),酒精是脂溶性溶劑,可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。)用吸水紙吸去花生子葉周圍的酒精,滴上一滴蒸餾水(滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)生氣泡),蓋上蓋玻片,制成臨時(shí)裝片。薅
12、觀察 在低倍顯微鏡下找到花生子葉的最薄處,移至視野中央,將影像調(diào)節(jié)清楚;換高倍鏡觀察,視野中被染成橘黃色的脂肪顆粒清晰可見(jiàn)。(裝片不宜久放,時(shí)間一長(zhǎng),油滴會(huì)溶解在乙醇中)芁(3)蛋白質(zhì)的檢測(cè)和觀察罿制備組織樣液(浸泡、去皮研磨、過(guò)濾)。黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購(gòu)新鮮豆?jié){以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間??捎玫扒宕娑?jié){,蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。芆向試管內(nèi)注入2mL待測(cè)組織樣液。蚅向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑A液1mL,搖勻。螞向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑B液4滴,搖勻。蕆(先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白
13、質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時(shí)加入,會(huì)導(dǎo)致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。CuSO4溶液不能多加,否則CuSO4的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)顏色)肅觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化。(溶液變紫色)螄(4)淀粉的檢測(cè)和觀察蝿向試管內(nèi)注入2mL待測(cè)組織樣液。腿向試管內(nèi)滴加2滴碘液,觀察顏色變化。(碘液不要滴太多,以免影響顏色觀察)螄七、考點(diǎn)提示:襖1、常見(jiàn)還原性糖與非還原性糖有哪些?膀答:葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。 莁2、還原性糖植物組織取材條件?薁答:含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。 螈3、研磨中為何
14、要加石英砂?不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響?蒞 答:加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會(huì)使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。 肅4、斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用? 莀答:混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。 螈5、還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序?yàn)椋?螆答:淺藍(lán)色 棕色 磚紅色。薀6、花生種子切片為何要???腿 答:只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。 袈7、轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí),若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?膇 答:切片的厚薄不均勻。 節(jié)8、脂肪鑒定中乙醇作用? 答:洗去浮色。 膁9、雙縮脲試
15、劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的怎樣通過(guò)對(duì)比看顏色變化? 羈答:不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對(duì)比。芃10、在鑒定蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中,若用雞蛋清作實(shí)驗(yàn)材料,必須稀釋,以免實(shí)驗(yàn)后黏住試管,不易洗刷。羄11、斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別:羀 (1)溶液濃度不同(斐林試劑乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液,雙縮脲試劑B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)肈 (2)使用原理不同蚄 斐林試劑是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加熱的條件下與醛基反應(yīng),被還原成磚紅色的Cu2O沉淀,可用于鑒定還原糖的存在,實(shí)驗(yàn)中溶液顏色的變化過(guò)程為:淺藍(lán)色-棕
16、色-磚紅色蒂 鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是在堿性條件下,Cu2+與雙縮脲發(fā)生的紫色反應(yīng)。而蛋白質(zhì)分子中有很多與雙縮脲(H2NOC-NH-CONH2)結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲發(fā)生顏色反應(yīng),可以使用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。蝿(3)使用方法不同:斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲(chǔ)存,使用前才將甲、乙液等量混合均勻后在注入;雙縮脲試劑先向試管內(nèi)注入A液1mL,搖勻,再向試管內(nèi)注入B液4滴,搖勻。膈肅實(shí)驗(yàn)三 用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞(必修一P7)膄一、目的要求:蒈1.使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞,比較不同細(xì)胞的異
17、同點(diǎn)芇2.運(yùn)用制作臨時(shí)裝片的方法蒆二材料用具:薂 1.建議選用的觀察材料:真菌(如酵母菌)細(xì)胞,低等植物(如水綿的絲狀綠藻)細(xì)胞,高等植物細(xì)胞(如葉的保衛(wèi)細(xì)胞),動(dòng)物細(xì)胞(如魚的紅細(xì)胞或蛙的皮膚上皮細(xì)胞)。以上這些材料,做成臨時(shí)裝片后就可以觀察。也可以使用其他替代材料。薁 2.用具:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、滴管、清水。如果實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要染色,應(yīng)準(zhǔn)備常用的染色液。芇三方法步驟:蚃轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡使視野明亮。莄在低倍鏡下觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野中央。芀轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,換成高倍物鏡。莇觀察并用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦。肄四:討論:螂 1.使用高倍鏡觀察的步驟和要點(diǎn)是什么?聿 答:(1)首先用低倍鏡觀
18、察,找到要觀察的物像,移到視野的中央。蕆 2.試歸納所觀察到的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的共同點(diǎn),并描述它們之間的差異,分析產(chǎn)生差異的可能的原因:蒅 答:這些細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的共同點(diǎn)是:有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,植物細(xì)胞還有細(xì)胞壁。蒃各種細(xì)胞之間的差異和產(chǎn)生差異的可能原因是:這些細(xì)胞的位置和功能不同,其結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng),這是個(gè)體發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞分化產(chǎn)生的差異。肂 3.P8圖是一個(gè)大腸桿菌的電鏡照片和結(jié)構(gòu)模式圖,大腸桿菌與你在本實(shí)驗(yàn)中觀察到的細(xì)胞有什么主要區(qū)別?薇答:從模式圖中可以看出,大腸桿菌沒(méi)有明顯的細(xì)胞核,沒(méi)有核膜,細(xì)胞外有鞭毛,等等。袆五、考點(diǎn)提示:羈(1)是低倍鏡還是高倍鏡的視野大,視野明亮?為什么?袀
19、提示:低倍鏡的視野大,通過(guò)的光多,放大的倍數(shù)??;高倍鏡視野小,通過(guò)的光少,但放大的倍數(shù)高。蚇 問(wèn)(2)為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察?芆 提示:如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對(duì)象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。蚃 問(wèn)(3)用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過(guò)高倍鏡后,轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋行不行?蠆 提示:不行。用高倍鏡觀察,只需微調(diào)即可。轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,容易壓壞玻片。螇注:莃1.目鏡無(wú)旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長(zhǎng),放大倍數(shù)越??;物鏡有旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長(zhǎng),放大倍數(shù)越大。膁2.獲取蛙皮膚上皮細(xì)胞的方法,是把蛙養(yǎng)
20、在無(wú)水的玻璃缸內(nèi)23h,待蛙的皮膚稍干后,再移入有水的玻璃缸內(nèi)。數(shù)分鐘后,蛙的部分上皮開(kāi)始龜裂并脫落到水中。用肉眼可以看見(jiàn)水中有淺灰色、透明的上皮膜。取一小塊上皮膜用于制片、觀察,看到的就是蛙皮膚的單層上皮細(xì)胞。這種制備方法不會(huì)對(duì)蛙造成傷害。莈袇螄實(shí)驗(yàn)四 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一P47)袃一、實(shí)驗(yàn)原理:蒁1、葉肉細(xì)胞中的葉綠體,散布于細(xì)胞質(zhì)中,呈綠色、扁平的橢球形或球形??梢栽诟弑讹@微鏡下觀察它的形態(tài)和分布。袆2、線粒體普遍存在于動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞中,線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠(Janus green B)染液是將活細(xì)胞中線粒體染色的專一性染料,可以使
21、活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。線粒體能在健那綠染液中維持活性數(shù)小時(shí),通過(guò)染色,可以在高倍顯微鏡下觀察到處于生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布。膅二、目的要求:芁使用高倍顯微鏡觀察葉綠體、線粒體的形態(tài)和分布。膀三、材料用具:羆新鮮的蘚類的葉(葉子薄而小,葉片是綠色的單層細(xì)胞,葉綠體清楚,可取整個(gè)小葉直接制片,不需加工即可進(jìn)行觀察,所以作為實(shí)驗(yàn)的首選材料)或菠菜葉(若用菠菜葉作實(shí)驗(yàn)材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因?yàn)楸砥ぜ?xì)胞不含葉綠體)、黑藻葉等。薆新配制的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的健那綠染液(將0.5g健那綠溶解于50mL生理鹽水中,加溫到30-40攝氏度,使其充分溶解)肅顯微鏡、載玻片、
22、蓋玻片、滴管、鑷子、消毒牙簽罿四、方法步驟:肆 1.制作蘚類葉片臨時(shí)裝片 在潔凈的載玻片中央滴一滴清水。用鑷子取一片蘚類的小葉,或者取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮,放入水滴中,蓋上蓋玻片。羇注意:臨時(shí)裝片中的葉片不能放干了,要隨時(shí)保持有水狀態(tài)(保證細(xì)胞器的正常形態(tài)并能懸浮在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,否則細(xì)胞或葉綠體失水收縮,將影響對(duì)葉綠體形態(tài)和分布的觀察)。蒁 2.觀察葉綠體 將制作好的葉片臨時(shí)裝片放在低倍顯微鏡下觀察,找到葉片細(xì)胞后,換用高倍顯微鏡,仔細(xì)觀察葉片細(xì)胞內(nèi)葉綠體的形態(tài)和分布情況。羂 3. 制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片 在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液。用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)壁上輕輕地刮幾
23、下,將牙簽上附有碎屑的一端,放在染液中涂抹幾下,蓋上蓋玻片。膆 4.觀察線粒體 在高倍顯微鏡下觀察經(jīng)過(guò)染色的人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片,可以看到藍(lán)綠色的線粒體,細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。肄四、討論:膂1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體,是不是靜止不動(dòng)的?為什么?螁答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運(yùn)動(dòng),這種運(yùn)動(dòng)能隨時(shí)改變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。芆2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能有什么關(guān)系?蒄答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細(xì)胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。襖蕿實(shí)驗(yàn)五 觀察植
24、物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原(必修一P61探究)莆一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模貉U1學(xué)會(huì)觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離與復(fù)原的方法。莂2了解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。莈二實(shí)驗(yàn)原理:蒆 把白菜剁碎做餡時(shí),常常要放一些鹽。放鹽后稍等一會(huì)就可見(jiàn)有水分滲出。對(duì)農(nóng)作物施肥過(guò)多,會(huì)造成“燒苗”現(xiàn)象。芆1質(zhì)壁分離的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過(guò)滲透作用而失水,細(xì)胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁分離。肄2質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過(guò)滲透作用而吸水,外界溶液中的
25、水分就通過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來(lái)的狀態(tài),緊貼細(xì)胞壁,使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。莁二、實(shí)驗(yàn)材料:蒅紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因?yàn)橐号莩首仙子谟^察。也可用水綿代替。蒃質(zhì)量濃度為0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對(duì)細(xì)胞無(wú)毒害作用。薂刀片、鑷子、滴管、載玻片、蓋玻片、吸水紙、顯微鏡,清水膀三、實(shí)驗(yàn)步驟:薅步 驟襖注 意 問(wèn) 題芄分 析衿1制作洋蔥表皮的臨時(shí)裝片。罿在載玻片上滴一滴水,撕取洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴中展平(也可挑取幾條水綿放入水滴中)。蓋上蓋玻片。芅螞蓋蓋玻片應(yīng)讓蓋玻片的一側(cè)先觸及載玻片,然后輕輕放平。羂聿蚆防止裝片產(chǎn)生氣泡。蒄2用低
26、倍顯微鏡觀察洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞中字的的中央液泡的大小,以及原生質(zhì)層的位置蟻可看到:液泡大,呈紫色,原生質(zhì)層緊貼著細(xì)胞壁。(或水綿細(xì)胞中有帶狀葉綠體,原生質(zhì)層呈綠色,緊貼著細(xì)胞壁。腿肇袁液泡含花青素,所以液泡呈紫色。蒀腿膃先觀察正常細(xì)胞與后面的“質(zhì)壁分離”起對(duì)照作用。薃3觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象。羋從蓋玻片的一側(cè)滴入03g/ml的蔗糖溶液,在另一側(cè)用吸水紙吸引,重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到:液泡由大變小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離。原生質(zhì)層與細(xì)胞壁之間充滿蔗糖溶液。艿薄肁芁荿重復(fù)幾次羅糖液濃度不能過(guò)高螃蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液濃度,細(xì)胞通過(guò)滲透作用失水,細(xì)胞壁伸縮性小原生質(zhì)層的伸縮性大,液泡和原生質(zhì)層
27、不斷收縮,所以發(fā)生質(zhì)壁分離。肀為了使細(xì)胞完全浸入蔗糖溶液中。葿否則,細(xì)胞嚴(yán)重失水死亡,看不到質(zhì)壁分離的復(fù)原。莆4觀察細(xì)胞質(zhì)壁分離的復(fù)原現(xiàn)象。膁從蓋玻片的一側(cè)滴入清水,在另一側(cè)用吸水紙吸引,重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到:液泡由小變大,顏色由深變淺,原生質(zhì)層恢復(fù)原狀。蝿薈發(fā)生質(zhì)壁分離的裝片,不能久置,要馬上滴加清水,使其復(fù)原。薃重復(fù)幾次。羃細(xì)胞液的濃度高于外界溶液,細(xì)胞通過(guò)滲透作用吸水,所以發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象。薈因?yàn)榧?xì)胞失水過(guò)久,也會(huì)死亡。蚈羄為了使細(xì)胞完全浸入清水中。莁四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論:薁當(dāng)外界溶液濃度大于細(xì)胞液濃度時(shí),水分會(huì)由細(xì)胞液中滲出到外界溶液中,通過(guò)滲透作用失水;由于細(xì)胞壁和原生質(zhì)層的伸縮性不同
28、,細(xì)胞壁伸縮性較小,而原生質(zhì)層性較大,從而使二者分開(kāi);反之,當(dāng)外界溶液濃度低于細(xì)胞液濃度時(shí),則細(xì)胞通過(guò)滲透作用吸水,分離后的質(zhì)和細(xì)胞壁又復(fù)原。螈實(shí)驗(yàn)討論蒞1如果將上述表皮細(xì)胞浸潤(rùn)在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?肅答:表皮細(xì)胞維持原狀,因?yàn)榧?xì)胞液的濃度與外界溶液濃度相等。莀2當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離?為什么?螈答:不會(huì)。因?yàn)榧t細(xì)胞不具細(xì)胞壁。螆3.質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)的拓展應(yīng)用薀(1)判斷成熟植物細(xì)胞的死活腿(2)測(cè)定細(xì)胞液濃度范圍袈(3)比較不同植物細(xì)胞的細(xì)胞液濃度膇(剛剛發(fā)生質(zhì)壁分離所需時(shí)間越短。細(xì)胞液濃度越?。┕?jié)(4)鑒別不同種類的
29、溶液(如KNO3溶液和蔗糖溶液)膁(5)證明原生質(zhì)層具有選擇透過(guò)性羈(6)證明細(xì)胞壁的伸縮性小于原生質(zhì)層的伸縮性芃(7)檢測(cè)雜種細(xì)胞是否再生出細(xì)胞壁,是否具有活性羄羀肈蚄實(shí)驗(yàn)六 探究影響酶活性的因素(必修一P78、P83)蒂實(shí)例1:比較過(guò)氧化氫酶和Fe3+的催化效率蝿一實(shí)驗(yàn)原理:膈新鮮肝臟中有較多的過(guò)氧化氫酶。經(jīng)計(jì)算,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液中過(guò)氧化氫酶分子數(shù)的25萬(wàn)倍。肅二實(shí)驗(yàn)?zāi)康模耗f通過(guò)比較過(guò)氧化氫在不同條件下分解的快慢,了解過(guò)氧化氫酶的作用和意義。蒈三. 材料用具芇 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的肝臟
30、(如豬肝、雞肝)研磨液,新配制的體積分?jǐn)?shù)為3%的過(guò)氧化氫溶液,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的FeCl3溶液蒆 量筒,試管,滴管,試管夾,試管架,衛(wèi)生香,火柴,酒精燈,大燒杯,三腳架,石棉網(wǎng),溫度計(jì)薂四. 方法步驟:薁步驟芇注意問(wèn)題蚃解釋莄取4支潔凈試管,分別編號(hào)1,2,3,4,向試管內(nèi)分別加入2ml過(guò)氧化氫溶液,按序號(hào)依次放在試管架上芀不讓H2O2接觸皮膚莇H2O2有一定的腐蝕性肄將2號(hào)試管放在90左右的水浴中加熱,觀察氣泡冒出的情況,并與1號(hào)試管作比較。螂聿蕆向3號(hào)試管內(nèi)滴入2滴FeCl3溶液,向4號(hào)試管內(nèi)滴入2滴肝臟研磨液,觀察哪支試管產(chǎn)生的氣泡多。蒅蒃不可用同一支滴管肂薇袆肝臟研磨液必須是新鮮的羈
31、袀肝臟要制成研磨液蚇由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過(guò)氧化氫酶,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性芆蚃因?yàn)檫^(guò)氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過(guò)久,可受細(xì)菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低蠆螇研磨可破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu),使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放出來(lái),增加酶與底物的接觸面積莃23min后,將點(diǎn)燃的衛(wèi)生香分別放在3、4號(hào)試管內(nèi)液面的上方,觀察哪支試管中的衛(wèi)生香燃燒更猛烈。膁放衛(wèi)生香時(shí),動(dòng)作要快,不要插到氣泡中莈現(xiàn)象:3號(hào)試管產(chǎn)生氣泡多,冒泡時(shí)間短,衛(wèi)生香猛烈復(fù)燃,4號(hào)試管產(chǎn)生氣泡少,冒泡時(shí)間長(zhǎng),衛(wèi)生香幾乎無(wú)變化袇避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅螄實(shí)驗(yàn):影響酶活性的條件袃 細(xì)胞中幾乎所有的化學(xué)反應(yīng)都是由酶來(lái)催化的。酶對(duì)
32、化學(xué)反應(yīng)的催化效率稱為酶活性(enzyme activity)。蒁 唾液淀粉酶、胃蛋白酶等消化酶都是在消化道中起作用的。不同部位消化液的pH不一樣。唾液的pH為6.27.4,胃液的pH為0.91.5,小腸液的pH為7.6。唾液淀粉酶會(huì)隨胃液流入胃,胃蛋白酶會(huì)隨食糜進(jìn)入小腸。袆實(shí)例2:溫度對(duì)酶活性的影響膅(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模浩L1初步學(xué)會(huì)探索溫度對(duì)酶活性的影響的方法。膀2探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。羆(二)實(shí)驗(yàn)原理:薆1淀粉遇碘后,形成紫藍(lán)色的復(fù)合物。肅2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖(淀粉水解過(guò)程中,不同階段的中間產(chǎn)物遇碘后,會(huì)呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色。)麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色
33、。注:市售a-淀粉酶的最適溫度約60罿(三)方法步驟:肆操作羇注意問(wèn)題蒁解釋羂取3支試管,編上號(hào),然后分別注入2mL可溶性淀粉溶液膆肄膂另取3支試管,編上號(hào),然后分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液螁芆蒄將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組,分別放入熱水(約60)、沸水和冰塊中,維持各自的溫度5min襖不能只用不同溫度處理淀粉溶液或酶溶液蕿防止混合時(shí),由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化,反應(yīng)溫度不是操作者所要控制的溫度,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。莆分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中,搖勻后,維持各自的溫度5min裊保持各自溫度時(shí)間不能太短莂淀粉酶催化淀粉水解需要一定時(shí)間莈在3支試管中各滴入1-2
34、滴碘液,搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并記錄蒆碘液不能滴加太多芆防止影響實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察肄實(shí)例3:PH值對(duì)酶活性的影響莁1、取三支潔凈的試管,編上號(hào)1,2,3,并分別注入1ml的新鮮的淀粉酶溶液。蒅2、依次向1號(hào),2號(hào),3號(hào)試管中注入蒸餾水,氫氧化鈉溶液,稀鹽酸各1ml并搖勻。蒃3、分別向1號(hào),2號(hào),3號(hào)試管中各注入2ml可溶性淀粉溶液,震蕩搖勻。薂4、將三支試管的下半部浸到37左右的溫水中,保溫5分鐘。膀5、向三支試管中各加入2ml斐林試劑,震蕩搖勻。薅實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象:襖一、溫度對(duì)酶活性的影響芄1號(hào)試管中的液體未變藍(lán),2號(hào)和3號(hào)試管中的液體變藍(lán),且2號(hào)試管藍(lán)色比3號(hào)試管深。衿二、pH對(duì)酶活性的影
35、響罿2號(hào)和3號(hào)試管中的液體未變藍(lán),1號(hào)試管中的液體變藍(lán)。芅實(shí)驗(yàn)結(jié)論:螞1、在最適宜的溫度和最適宜的ph條件下,酶的活性最高。羂2、溫度和ph偏高或偏低,酶的活性明顯下降。聿注意:蚆探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖水解的作用。注意事項(xiàng):蒄1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模鹤C明酶的專一性2、遵循等量性原則蟻3、酶催化結(jié)果的檢驗(yàn):因?yàn)榈矸鄣乃猱a(chǎn)物中有還原性糖,故可以用斐林試劑檢驗(yàn)還原糖的存在,從而說(shuō)明淀粉酶催化水解了淀粉;而蔗糖則不能水解,其本身不能與斐林試劑反應(yīng)。所以此實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于蔗糖的純度和新鮮度,如果其中混有少量的葡萄糖或果糖,或蔗糖放置久了受細(xì)菌作用,部分分解成了單糖,則與斐林試劑共熱時(shí)能生成磚紅色的沉淀,使人產(chǎn)生錯(cuò)
36、覺(jué)腿肇實(shí)驗(yàn)七 葉綠體色素的提取和分離(必修一P97)袁一、實(shí)驗(yàn)原理蒀 綠葉中的色素能溶解在有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇中,所以,可以用無(wú)水乙醇提取葉綠體中的色素。綠葉中的色素不只一種,它們都能溶解在層析液中。然而,它們?cè)趯游鲆褐腥芙舛炔煌喝芙舛雀叩碾S層析液在濾紙上的擴(kuò)散得快;反之則慢。這樣,幾分之后,綠葉中的色素就會(huì)隨著層析液在濾紙上的擴(kuò)散而分離開(kāi)。(分子量小的溶解度高)腿二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康哪e1.進(jìn)行綠葉中色素的提取和分離。薃2.探索葉綠體中有幾種色素。羋三、材料用具艿新鮮的綠葉(如菠菜的綠葉)薄干燥的定性濾紙,試管,棉塞,試管架,研缽,玻璃漏斗,尼龍布,毛細(xì)吸管,剪刀,藥勺,量筒(10ml),天平。肁無(wú)水乙
37、醇(若沒(méi)有無(wú)水乙醇,也可用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇,但要加入適量的無(wú)水碳酸鈉,除去水分),層析液(由20份在6090下分餾出來(lái)的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。93號(hào)汽油也可代用),二氧化硅和碳酸鈣。芁四、方法步驟荿步 驟羅注 意 問(wèn) 題螃分 析肀1提取色素葿(1)稱取5g綠葉,剪碎,放入研缽中。(2)在研缽中放入少許SiO2、CaCO3,再加入10mL無(wú)水乙醇,進(jìn)行迅速、充分研磨。莆加SiO2膁加CaCO3蝿薈薃羃薈蚈羄莁薁加無(wú)水乙醇迅速螈加SiO2有助于研磨得充分。蒞加CaCO3防止研磨時(shí)葉綠素受到破壞。因?yàn)槿~綠素含鎂,可被細(xì)胞液中的有機(jī)酸產(chǎn)生的氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡
38、破壞釋放的有機(jī)酸,防止葉綠體被破壞。肅葉綠體色素易溶于有機(jī)溶劑。莀減少研磨過(guò)程葉綠素的分解螈2收集濾液螆將研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一單層尼龍布)中進(jìn)行過(guò)濾。將濾液收集到試管中,及時(shí)用棉塞將試管口塞嚴(yán)。薀腿袈尼龍布起過(guò)濾作用。膇節(jié)試管口用棉花塞塞緊是為了防止揮發(fā)和色素氧化膁3制備濾紙條羈將干燥的定性濾紙剪成略小于試管長(zhǎng)與直徑的濾紙條,一端剪去兩個(gè)角,并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。芃羄干燥羀順著紙紋剪成長(zhǎng)條肈一端剪去二個(gè)角蚄蒂可吸收更多的濾液。蝿層析時(shí),色素分離效果好。膈可使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線。肅4劃濾液細(xì)線膄用毛細(xì)吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線劃出細(xì)、齊、直的一條濾液細(xì)線,待濾液干后
39、再畫一兩次。蒈濾液細(xì)線越細(xì)、越齊越好。芇蒆重復(fù)三次。薂薁芇防止色素帶之間部分重疊。蚃莄增加色素在濾紙上的附著量,使分離的色素帶清晰分明,實(shí)驗(yàn)結(jié)果更明顯。芀5紙層析法分離色素莇將適量的層析液倒入試管中,將濾紙條(有濾液細(xì)線的一端朝下)輕輕插入層析液中,隨后用棉塞塞緊試管口。注意,不能讓濾液細(xì)線觸及層析液。(也可用小燒杯代替試管,用培養(yǎng)皿蓋住小燒杯)肄層析液不能沒(méi)及濾紙條。螂燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。聿防止色素溶解在層析液中蕆層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。蒅為避免過(guò)多吸入層析液中的揮發(fā)性物質(zhì),本實(shí)驗(yàn)應(yīng)在通風(fēng)條件下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)及時(shí)用肥皂洗手。蒃6觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果肂薇襖最寬:葉綠素a;羀最窄:葉綠素b;衿
40、相鄰色素帶最近:葉綠素a和葉綠素b;蚅相鄰色素帶最遠(yuǎn):胡蘿卜素和葉黃素。芅螞五、考點(diǎn)提示:蚈1、二氧化硅:為了使研磨充分;碳酸鈣:保護(hù)色素免受破壞;丙酮:色素的溶劑。 螅2、擴(kuò)散最快的是胡蘿卜素(橙黃色),擴(kuò)散最慢的是葉綠素b(黃綠色)。莂3、裁取定性濾紙時(shí),注意雙手盡量不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。膀4、制備濾紙條時(shí),要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均勻,便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。蕆5、根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長(zhǎng)度高出燒杯1cm ,高出的部分做直角彎折。裊6、濾紙上的濾液細(xì)線如果觸到層析液,細(xì)線上的色素就會(huì)溶解到層析液中,就不會(huì)在濾紙上擴(kuò)散開(kāi)來(lái),實(shí)驗(yàn)
41、就會(huì)失敗。螃7、畫濾液細(xì)線時(shí),用力要均勻,速度要適中袁8、研磨要迅速、充分。a.因?yàn)楸菀讚]發(fā); b.為了使葉綠體完全破裂.從而能提取較多的色素;c.葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而被破壞。蒀羅實(shí)驗(yàn)八 探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)膃一實(shí)驗(yàn)原理:荿1酵母菌是一種單細(xì)胞真菌,在有氧和無(wú)氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來(lái)研究細(xì)胞呼吸的不同方式。羋2 CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時(shí)間長(zhǎng)短,可以檢測(cè)酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。肅3橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化
42、學(xué)反應(yīng),在酸性條件下,變成灰綠色。薄三方法步驟:肁1酵母菌培養(yǎng)液的配制羇取20g新鮮的食用酵母菌,分成兩等份,分別放入錐形瓶A(500mL)和錐形瓶B(500mL)中 ,再分別向瓶中注入240mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的葡萄糖溶液肅2檢測(cè)CO2的產(chǎn)生羅用錐形瓶和其他材料用具組裝好實(shí)驗(yàn)裝置(如圖),并連通橡皮球(或氣泵),讓空氣間斷而持續(xù)地依次通過(guò)3個(gè)錐形瓶(約50min)。然后將實(shí)驗(yàn)裝置放到25-35的環(huán)境中培養(yǎng)8-10h。葿3檢測(cè)灑精的產(chǎn)生肀各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液,分別注入2支干凈的試管中。向試管中分別滴加0.5mL溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%-97%)并輕輕振蕩,使它們
43、混合均勻,觀察試管中溶液的顏色變化。膄膂膁實(shí)驗(yàn)九 觀察細(xì)胞的有絲分裂(必修一P115)蝿一實(shí)驗(yàn)原理:芄1在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見(jiàn)于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個(gè)細(xì)胞的分裂是獨(dú)立進(jìn)行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時(shí)期的細(xì)胞。薃2染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過(guò)在高倍顯微鏡下觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期,進(jìn)而認(rèn)識(shí)有絲分裂的完整過(guò)程。羃染色體容易被堿性染料(如龍膽紫染液)著色薈二實(shí)驗(yàn)?zāi)康模呵c1制作洋蔥根尖細(xì)胞(或植物形成層)有絲分裂裝片羄2觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過(guò)程,識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期,比較細(xì)胞周期不同時(shí)
44、期的時(shí)間長(zhǎng)短。莁3繪制植物細(xì)胞有絲分裂簡(jiǎn)圖。莇三材料用具: 蒄洋蔥(可用蔥、蒜代替)。因?yàn)楦馍L(zhǎng)點(diǎn)屬于分生組織,細(xì)胞分裂能力強(qiáng),易觀察到有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞。蒞顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,剪子,鑷子,滴管。肅質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精,質(zhì)量濃度為0.01g/ml或0.02g/ml的龍膽紫溶液(將龍膽紫溶解在質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋紅液,洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂固定裝片。莀四實(shí)驗(yàn)步驟:薄步 驟蒂注 意 問(wèn) 題薀分 析膈一、根尖的培養(yǎng)蚄實(shí)驗(yàn)前34天,讓洋蔥放在廣口瓶上,底部接觸清水。把這個(gè)裝置放在溫暖的地方培養(yǎng)。根長(zhǎng)約5cm時(shí),取生長(zhǎng)健壯的根尖制成臨時(shí)裝片
45、觀察袂節(jié)置于溫暖處,常換水。袇羈因?yàn)榧?xì)胞分裂和生長(zhǎng)需要水分、適宜的溫度和氧氣。芃二、裝片的制作螀(解離漂洗染色制片)羀1解離:上午10時(shí)至下午2時(shí)(洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞處于分裂期的較多,這會(huì)因洋蔥品種、室溫等的差異而有所不同),剪取洋蔥根尖23mm,立即放入盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,室溫下解離35min。肈蚄解離時(shí)間要保證,細(xì)胞才能分散開(kāi)來(lái)。蒂蝿膇肅解離時(shí)間也不宜過(guò)長(zhǎng)。袀蒈目的:用藥液溶解細(xì)胞間質(zhì)(果膠),使組織中的細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái)。此時(shí),細(xì)胞已被鹽酸殺死。芇膂否則,根尖過(guò)于酥軟,無(wú)法取出。薂2漂洗:待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛有清水
46、的玻璃皿中漂洗約10 min。芇漂洗要充分,可換水12次。芇薃目的:洗去解離液,防止解離過(guò)度,便于染色。肀芀3染色:把洋蔥根尖放進(jìn)盛有質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色35min。莇染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則顯微鏡下一片紫色,無(wú)法觀察。羄龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。螂醋酸洋紅溶液也能使染色體著色聿4制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來(lái),放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。(壓片法)蕆要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動(dòng)蓋玻片, 蒅目的:使細(xì)胞分散,避免細(xì)
47、胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標(biāo)本被壓成云霧狀。艿三、觀察袇1低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動(dòng)裝片,找到分生區(qū)細(xì)胞。薇2高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細(xì)觀察,找出處于細(xì)胞分裂期中期的細(xì)胞,再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。薁調(diào)節(jié)顯微鏡的放大倍數(shù),使你能夠在視野里同時(shí)看到約50個(gè)細(xì)胞羈一定要找到分生區(qū)。薆在一個(gè)視野里,往往不容易找全有絲分裂過(guò)程中各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞。如果是這樣,可以慢慢地移動(dòng)裝片,從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。蚇分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn)是:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正處于分裂期。羂討論:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?荿答:制作好洋
48、蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點(diǎn):(1)剪取洋蔥根尖材料時(shí),應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時(shí)間;(2)解離時(shí),要將根尖細(xì)胞殺死,細(xì)胞間質(zhì)被溶解,使細(xì)胞容易分離;(3)壓片時(shí),用力的大小要適當(dāng),要使根尖被壓平,細(xì)胞分散開(kāi)。蠆注意:1、選材:應(yīng)選取有絲分裂旺盛的細(xì)胞,如植物根尖分生區(qū)的細(xì)胞螇 2、解離就是用要藥液使組織的細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái),便于最后制片時(shí)能被壓成一薄層進(jìn)行顯微觀察。解離液中酒精的作用是迅速殺死細(xì)胞,固定細(xì)胞的分裂相;而鹽酸的作用是使洋蔥細(xì)胞的細(xì)胞壁軟化,并使細(xì)胞間的中膠層物質(zhì)溶解,從而達(dá)到分離細(xì)胞的目的。另外解離時(shí)間不宜過(guò)短,否則根尖未充分解離,壓片時(shí)細(xì)胞分不開(kāi);但又不能太
49、長(zhǎng),否則使根尖過(guò)分酥軟,無(wú)法進(jìn)行漂洗和染色,且染色體成分被破壞。這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵莃3、漂洗的目的是去除根中多余的解離液,特別是鹽酸,因?yàn)槿旧珪r(shí)用的是堿性染料龍膽紫,酸與堿發(fā)生反應(yīng)會(huì)影響染色效果膁4、染色時(shí)間亦不能過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)使染色體與周圍的其他結(jié)構(gòu)均被著色,這樣就無(wú)法形成顏色上的反差,不便于觀察。莈5、在制片時(shí)要用拇指按壓蓋玻片,目的是使細(xì)胞分散,不至于重疊。袆6、顯微鏡下觀察到的細(xì)胞被固定在有絲分裂的某個(gè)階段,若在視野中找不到處于某個(gè)時(shí)期的細(xì)胞時(shí),可以適當(dāng)移動(dòng)玻片螄實(shí)驗(yàn)十 細(xì)胞大小與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)年P(guān)系(必修一P110)蕿一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模耗i通過(guò)探究細(xì)胞大小,即細(xì)胞的表面積與體積,與物質(zhì)運(yùn)輸效
50、率之間的關(guān)系,探討細(xì)胞不能無(wú)限長(zhǎng)大的原因。袆二實(shí)驗(yàn)原理:膅用瓊脂塊模擬細(xì)胞。瓊脂塊越小,其表面積越大,則其與外界效換物質(zhì)的表面積越大,經(jīng)交換進(jìn)來(lái)的物質(zhì)在瓊脂塊中擴(kuò)散的速度快;瓊脂塊中含有酚酞,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(zhì)(NaOH)在瓊脂塊中的擴(kuò)散速度。芁三.材料用具膀3cm3cm6cm的含酚酞的瓊脂塊,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的NaOH溶液。羆塑料餐刀,防護(hù)手套,毫米尺,塑料勺,紙巾,燒杯。節(jié)四操作步驟:羃操作方法罿注意問(wèn)題肆解釋蚃用塑料餐刀將含酚酞的瓊脂塊切成三塊邊長(zhǎng)分別為3cm、2cm、1cm的正方體蒁螈膆將3塊瓊脂塊放在燒杯內(nèi),加入NaOH溶液,將瓊脂塊淹沒(méi),浸泡10min。用塑料勺
51、不時(shí)翻動(dòng)瓊脂塊。肄不要用勺子將瓊脂塊切開(kāi)或挖動(dòng)其表面膂避免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果蒆戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出。用紙巾把它們吸干,用塑料刀把瓊脂塊切成兩半。仔細(xì)觀察切面的顏色變化,變成紅色的部分代表NaOH擴(kuò)散的深度,測(cè)量每一塊上NaOH擴(kuò)散后著色的濃度。記錄測(cè)量結(jié)果芆應(yīng)避免NaOH與皮膚和眼睛等接觸。如潑灑出來(lái),應(yīng)立即用水沖洗潑灑處。蒄每?jī)纱尾僮髦g必須把刀擦干蝕NaOH有腐蝕性蕿莆蟻莂避免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果羋根據(jù)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行計(jì)算,并將結(jié)果填在記錄表中蒆肂螀結(jié)論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減??;NaOH擴(kuò)散的體積與整個(gè)瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。肇四課后討論題答
52、案:蒅1.當(dāng)NaOH與含酚酞的瓊脂塊相遇時(shí),其中的酚酞變成紫紅色,這是常用的檢測(cè)NaOH的方法,從瓊脂塊的顏色變化就知道NaOH擴(kuò)散到多遠(yuǎn);在相同時(shí)間內(nèi),NaOH在每一瓊脂塊內(nèi)擴(kuò)散的深度基本相同,說(shuō)明NaOH在每一瓊脂塊內(nèi)擴(kuò)散的速率是相同的。蒃2.根據(jù)球體的體積公式V=4/3r3,表面積公式S=4r2,計(jì)算結(jié)果如下表。薂細(xì)胞直徑(m)膀表面積(m2)薅體積(m3)襖比值(表面積/體積)羀20衿1 256蚅4 187芅0.30螞30蚈2 826螅14 130莂0.20膀3.細(xì)胞越大,物質(zhì)運(yùn)輸?shù)男试降?,所以多?xì)胞生物體是由許多細(xì)胞而不是由少數(shù)體積更大的細(xì)胞構(gòu)成的。細(xì)胞越大,需要與外界環(huán)境交流的物質(zhì)越多;但是細(xì)胞體積越大,其表面積相對(duì)越小,細(xì)胞
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