血液腫瘤與檢測(cè).ppt

1、淋巴造血系統(tǒng)腫瘤及檢測(cè),a,2,概念： 在機(jī)體各種致瘤因素的作用下，局部組織的細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)其生長的正常調(diào)控，與正常組織相比，其增生和分化異常，導(dǎo)致克隆性增生而形成的新生物，常形成腫塊。 特性： 1.獲得不斷增殖的能力相對(duì)無限制性自主性生長； 2.失去正常分化成熟的能力異常的形態(tài)、代謝和功能。,腫瘤的概念,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤？,a,3,我國死亡率前十位惡性腫瘤,a,4,造血系統(tǒng)/組織,胚胎期（中胚葉造血期）：卵黃囊、肝、脾 胎兒期（肝脾造血期）：肝、脾、骨髓、胸腺、淋巴結(jié) 出生后（骨髓造血期）：骨髓、淋巴結(jié)生成淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,a,5,血細(xì)胞的發(fā)育與成熟,造血細(xì)胞的生長發(fā)育是一個(gè)連續(xù)不斷

2、的復(fù)雜過程，造血器官內(nèi)的各種造血細(xì)胞，按一定的規(guī)律發(fā)育成為各種成熟的血細(xì)胞，然后釋放入血循環(huán)中。,a,6,造血干細(xì)胞的分化,a,7,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤,骨髓增生異常綜合征（MDS） 白血病（AML、ALL、CML、CLL） 淋巴瘤 (HL、NHL) 多發(fā)性骨髓瘤（MM） 骨髓增生性疾?。∕PN）(CML、ET、PV、PMF),a,8,骨髓增生異常綜合征（MDS）,骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndromes, MDS)是起源于造血干細(xì)胞的一組異質(zhì)性髓系克隆性疾病，特點(diǎn)是髓系細(xì)胞分化及發(fā)育異常，表現(xiàn)為無效造血、難治性血細(xì)胞減少、造血功能衰竭，高風(fēng)險(xiǎn)向急性髓系白血?。ˋML

3、）轉(zhuǎn)化。,a,9,骨髓增生異常綜合征（MDS）,a,10,白血病,白血病是一類造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病?？寺⌒园籽〖?xì)胞因?yàn)樵鲋呈Э?、分化障礙、凋亡受阻等機(jī)制在骨髓和其他造血組織中大量增殖累積，并浸潤其他組織和器官，同時(shí)正常造血受抑制。 按白血病細(xì)胞的分化成熟程度及自然病程，可分為急、慢性白血病。 按病變細(xì)胞系列分類，包括髓系的粒、單、紅、巨核系和淋巴系的T和B細(xì)胞系。 臨床上常將白血病分為急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）、急性髓細(xì)胞白血病（AML）、慢性粒細(xì)胞白血?。–ML）、慢性淋巴細(xì)胞白血病等（CLL）。,a,11,白血?。╨eukemia）,急性白血病A,慢性白血病 C,淋巴系L,髓系M,

4、a,12,淋巴瘤,淋巴瘤（lymphoma）起源于淋巴結(jié)和淋巴組織，其發(fā)生大多與免疫應(yīng)答過程中淋巴細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生的某種免疫細(xì)胞惡變有關(guān)，是免疫系統(tǒng)的惡性腫瘤。 臨床上常按組織病理學(xué)改變將其分為非霍奇金淋巴瘤（NHL）和 霍奇金淋巴瘤（HL）兩類,a,13,淋巴瘤,a,14,多發(fā)性骨髓瘤,多發(fā)性骨髓瘤（MM）是漿細(xì)胞惡性增殖的結(jié)果。 其特征為骨髓漿細(xì)胞異常增生伴有單克隆免疫球蛋白（M蛋白）過度生成，極少數(shù)患者可以是不產(chǎn)生M蛋白的未分泌型MM。,a,15,漿細(xì)胞?。ǘ喟l(fā)性骨髓瘤）,a,16,骨髓增生性疾病,骨髓增生性疾病指分化相對(duì)成熟的一系或多系骨髓細(xì)胞不斷地克隆性增殖所致的一組腫瘤性疾病，也稱

5、骨髓增殖性腫瘤（MPNs）。 MPN可分為慢性粒細(xì)胞白血病（CML），真性紅細(xì)胞增多癥（PV），原發(fā)性血小板增多癥（ET），原發(fā)性骨髓纖維化（PMF）。（是造血干細(xì)胞異?？寺《鸬某衫w維細(xì)胞反應(yīng)性增生）,a,17,骨髓增生性疾病,a,18,a,19,急性白血病(AML、ALL) 骨髓增生異常綜合征(MDS),慢性白血病(CML、CLL) 淋巴瘤(HL、NHL) 多發(fā)性骨髓瘤(MM) 骨髓增生性疾病(CML、PV、ET、PMF),a,20,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的檢測(cè),淋巴造血系統(tǒng)腫瘤精確的診斷分型是正確選用化療方案的前提。目前國際上通用的是MICM分型。 細(xì)胞形態(tài)學(xué)(Morphology)：骨髓穿

6、刺、骨髓活檢 免疫學(xué)(Immunology): 流式細(xì)胞術(shù) 細(xì)胞遺傳學(xué)(Cytogenetics)：染色體核型分析 分子生物學(xué)(Molecular) :FISH、突變分析（PCR、片段分析、基因測(cè)序）,a,21,細(xì)胞形態(tài)學(xué)(Morphology),通過骨髓細(xì)胞學(xué)可以了解骨髓中各種細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞形態(tài)、有無異常細(xì)胞等，從而協(xié)助診斷疾病、療效觀察、判斷預(yù)后。,骨髓穿刺：采取骨髓液 骨髓活檢：特制的穿刺針取一小塊骨髓組織,a,22,免疫學(xué)(Immunology),根據(jù)不同種類的細(xì)胞以及細(xì)胞在不同分化階段表達(dá)的抗原差異，通過免疫學(xué)方法識(shí)別抗原從而檢測(cè)細(xì)胞類型及數(shù)量。 粒細(xì)胞成熟過程。,a,23,a,24

7、,流式細(xì)胞術(shù),利用細(xì)胞特異抗原，通過流式細(xì)胞儀對(duì)血細(xì)胞種類、數(shù)量等特征進(jìn)行分析，從而協(xié)助診斷疾病。,a,25,細(xì)胞遺傳學(xué)(Cytogenetics)：染色體核型分析,t(9;22)(q32;q23.2) in CML,a,26,分子生物學(xué)(Molecular),2R2G 陰性細(xì)胞,1R1G2F陽性細(xì)胞,FISH（熒光原位雜交技術(shù)）, 是利用熒光標(biāo)記的特異核酸探針與細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子或RNA分子雜交，檢測(cè)基因變異情況。 BCR/ABL融合，典型的陽性細(xì)胞信號(hào)模式為1R1G2F，由于斷裂點(diǎn)位置不同,以及基因缺失，還可能出現(xiàn)其它陽性信號(hào)模式。,a,27,分子生物學(xué)(Molecular),檢測(cè)方

8、法： RQ-PCR, Sanger測(cè)序、二代基因測(cè)序、片段分析 檢測(cè)項(xiàng)目： 融合基因篩查、基因表達(dá)檢測(cè)、基因序列突變檢測(cè),a,28,定性分析 做什么？ 融合基因篩查,怎么做？,a,29,定量分析 做什么？ 融合基因 基因表達(dá),怎么做？,a,30,a,31,突變分析,a,32,Sanger測(cè)序,確定一條染色體片斷上的堿基順序。 Sanger法： 在PCR時(shí)加入熒光標(biāo)記的復(fù)制終止劑，比如ddA,ddT,ddC,ddG（相應(yīng)于4種堿基） ddX的兩個(gè)作用： 可以當(dāng)作正常堿基參與復(fù)制 一旦鏈入DNA中，其后就不能再繼續(xù)連接 它們具有共同的起始點(diǎn)，但終止在不同的的核苷酸上 誰終止，堿基就是誰,a,33,a,34,SNE (TPMT分型),a,35,片段分析,技術(shù)基礎(chǔ)：熒光標(biāo)記的引物 片段分析=分離熒光標(biāo)記的片段并檢測(cè)其相對(duì)大小,a,36,淋