選修一1-4細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)

1、1原理(1)自主整理植物細(xì)胞球萬(wàn)能性的概念：高度分化的植物細(xì)胞球，仍有可能發(fā)育成完整的植物。 (2)高度分化植物細(xì)胞球的萬(wàn)能表達(dá)條件離體條件無(wú)菌操作(防止雜菌污染)適宜的物質(zhì)誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)(荷爾蒙激素主要為生長(zhǎng)素、分裂素等)種類齊全，比例適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)溫度、酸鹽基度、光照射等條件的控制。 2基本過程，3影響植物培養(yǎng)的因素(1)選擇外植體不同植物的組織培養(yǎng)難度不同。 對(duì)于同樣的植物材料，材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短等也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 旺盛的嫩枝大姨媽狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。 培養(yǎng)基的制備(MS培養(yǎng)基)大量元素體： c、h、o、n、p、k、Ca、Mg、s。 微量元素體： b、Mn、Cu、Zn、

2、Fe、Mo、I、Co。 有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。 pH、溫度、光照不同的植物對(duì)不同條件的要求往往不同。 菊花的適當(dāng)條件： pH控制在5.8左右，溫度控制在1822，每天熒光燈照射12h。 圖1是科學(xué)家培養(yǎng)胡蘿卜皮部細(xì)胞球形成胡蘿卜植株過程的示意圖(注：胚狀體相當(dāng)于植物種子胚的結(jié)構(gòu))。 根據(jù)圖，(1)從細(xì)胞球塊形成胚狀體必須經(jīng)過_過程。 (2)此培養(yǎng)方法在生物科技中稱為培養(yǎng)。 (3)培養(yǎng)基中除了水分和有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，還必須加入水分和有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 培養(yǎng)過程所需的外界條件包括適當(dāng)?shù)臏囟?、溫度等?(4) 從胡蘿卜的麻纖維部細(xì)胞球培養(yǎng)成完整的胡蘿卜植株，再?gòu)募?xì)胞球團(tuán)發(fā)育成植物幼

3、苗必須經(jīng)過細(xì)胞分裂和細(xì)胞球分化兩個(gè)過程用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中含有植物生長(zhǎng)發(fā)育所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)該加入生長(zhǎng)素、分裂素兩種植物荷爾蒙來誘導(dǎo)根和芽的分化，保證適當(dāng)?shù)耐饨绛h(huán)境。 答案(1)細(xì)胞分裂和細(xì)胞球分化(2)組織(3)礦質(zhì)元素體生長(zhǎng)調(diào)節(jié)類(荷爾蒙激素)物質(zhì)光照、氧無(wú)菌(4)植物細(xì)胞球具有萬(wàn)能性，月季花藥培養(yǎng)時(shí)的花粉粒最好是() a四分體時(shí)期b單核位于中期c單核側(cè)的d二核或三核花粉粒，一般在單核期細(xì)胞核從中央向細(xì)胞側(cè)移動(dòng)時(shí)藥培養(yǎng)成功率高主動(dòng)粗提1，DNA和鑒定1基本原理(1) DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。 (2)DNA不溶

4、于酒精溶液；(3)DNA不被蛋白酶水解作用；(4)DNA被二苯胺染成藍(lán)色。 2方法的目的，二、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段1細(xì)胞球內(nèi)DNA復(fù)制和PCR技術(shù)的比較，三、血色素的提取和分離1方法和原理，2 .實(shí)驗(yàn)操作步驟(1)樣品處理血紅細(xì)胞的洗滌：去除血漿蛋白等雜質(zhì)，有利于后續(xù)步驟的分離純化。 釋放血色素：使血紅細(xì)胞膨脹，釋放血色素的分離血色素溶液：通過離心分離將血色素和其他雜質(zhì)分離，使轉(zhuǎn)化為下一個(gè)血色素變得容易。 (2)粗分離透析：去除樣品中分子量小的雜質(zhì)。 (3)純化：用凝膠色譜分析法分離純化血色素。 (4)純度鑒定：一般用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量，即純度鑒定。 1DNA

5、粗提實(shí)驗(yàn)哺乳動(dòng)物成熟的血紅細(xì)胞中既不含細(xì)胞核，也不含DNA，雖然不適合DNA提取材料，但是是提取血色素的理想材料。 實(shí)驗(yàn)中蒸餾水里使用兩次，第一次目的是使成熟雞的血色素細(xì)胞球膨脹釋放DNA，第二次目的是稀釋NaCl溶液。2PCR技術(shù)在反應(yīng)過程中控制不同溫度的意義(1)90以上的時(shí)變性，雙鏈DNA解聚成單鏈。 (2)復(fù)制50左右，引物與2條單鏈DNA結(jié)合，延伸到(3)72左右，Taq DNA多聚酶具有最大活性，將DNA新鏈從5端延伸到3端。 由32P標(biāo)識(shí)牌的一個(gè)DNA分子在未標(biāo)識(shí)牌的環(huán)境中培養(yǎng)，重復(fù)5次后標(biāo)識(shí)牌的DNA分子占DNA分子總數(shù)的() A1/10B1/16 C1/25 D1/32， 分

6、析了1個(gè)DNA分子復(fù)制n次后產(chǎn)生的DNA數(shù)為2n，這樣最初在32P標(biāo)識(shí)牌的DNA分子被復(fù)制的話，該被標(biāo)識(shí)牌的2條鏈分別進(jìn)入2個(gè)子DNA分子中，即2個(gè)子DNA分子被標(biāo)識(shí)牌。 但是，因?yàn)槭窃谖礃?biāo)識(shí)牌的環(huán)境下培養(yǎng)的，所以無(wú)論重復(fù)幾次，最初標(biāo)識(shí)牌的2條鏈上存在的2個(gè)DNA分子中僅含有32P，這樣重復(fù)n次，標(biāo)識(shí)牌的DNA分子就占2/2n，即1/2n1，因此本問題應(yīng)該選擇b 在答案b、血色素的全提取過程中，為了使血色素不被O2氧化用磷酸緩沖液處理的目的是鹽化學(xué)基性物質(zhì)，酸中和c磷酸緩沖液可以加快血色素的提取過程d使血色素處于穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能答案d，用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的pH環(huán)境， 為保

7、證血色素的正常結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)行了自主整理，3玫瑰精油被稱為“液體黃金”，其提取方法為： (a )用a水蒸氣蒸餾法b蒸餾法和榨取法c蒸餾法和萃取法d榨取法和萃取法d，可用解析用玫瑰精油提取，可根據(jù)玫瑰的干濕情況采用不同的提取方法， 新鮮薔薇花采用水蒸氣蒸餾法，干燥薔薇花可以使用有機(jī)溶劑萃取法，在一般的答案c，胡蘿卜粗品鑒定過程中，判斷標(biāo)準(zhǔn)樣品點(diǎn)和提取樣本點(diǎn)的依據(jù)是() a色不同b大小不同c形不同d色譜分析法后色素點(diǎn)數(shù)不同的答案d解析標(biāo)準(zhǔn)樣品為單一色素， 色譜分析法后只有一點(diǎn)，但提取的樣品不純，含有多種色素，有多個(gè)色素點(diǎn)。 命題無(wú)線熱點(diǎn)1關(guān)于實(shí)驗(yàn)【例1】DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)材料的選擇，經(jīng)過多次

8、實(shí)驗(yàn)效果的比較，最終選擇雞血作為實(shí)驗(yàn)材料。 請(qǐng)根據(jù)設(shè)計(jì)圖回答問題。 (1)雞血球中的血紅細(xì)胞，雞屬于鳥類，新陳代謝旺盛，因此血液中的細(xì)胞球多，能夠提供豐富的；(2)實(shí)驗(yàn)前老師選擇血液細(xì)胞液作為實(shí)驗(yàn)材料提供給學(xué)生們，不使用雞全血， 主要原因是：在畜牧地轄區(qū)下采集牛、羊和馬的血比較方便，使用這些個(gè)材料實(shí)驗(yàn)性地完成實(shí)驗(yàn)步驟后，結(jié)果顯示：這是因?yàn)?因?yàn)檫@些個(gè)的動(dòng)物和人類一樣，但是使用動(dòng)物肝臟作為實(shí)驗(yàn)材料的話，實(shí)驗(yàn)結(jié)果就會(huì)明確。 答案(1)包括細(xì)胞核在內(nèi)的紅DNA (2)雞血球中的DNA相對(duì)含量高(3)，因?yàn)槿绻x擇動(dòng)物肝臟作為實(shí)驗(yàn)材料，那么在提取之前最好增加_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

9、_ _ _ _ _ _的計(jì)程儀蛋白，使組織、細(xì)胞球更加容易DNA成熟的血紅細(xì)胞中的沒有細(xì)胞核的肝細(xì)胞中有細(xì)胞核(4)研磨，(1)雞的血細(xì)胞中含有成形的完整細(xì)胞核，而且很難解析血紅細(xì)胞的數(shù)量，DNA (2)雞的全血含有血漿和血細(xì)胞，而血漿中沒有DNA，在全血中除去血漿后將變成濃縮的血細(xì)胞液(3)哺乳動(dòng)物成熟的血紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核，雖然單靠白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞難以在實(shí)驗(yàn)中提取DNA，但肝細(xì)胞包括細(xì)胞核，易破壞肝組織，有利于DNA的提取。 (4)分離肝組織，切斷、研磨肝組織是一種簡(jiǎn)便的方法。 1(2009山東，34 )胡籮卜為珍貴的中藥飲片材料，其有效成分主要為人參皂甙。 利用細(xì)胞球培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂甙

10、的大致流程如下： (1)制備誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)。在接種之前，用于離體培養(yǎng)的根稱作“胡籮卜根”，即“根”。 培養(yǎng)幾天后，發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基臟污，如果是有色絨毛狀菌落，就屬于有光澤的粘液狀菌落。 (3)用少量_酶催化劑處理愈傷組織，獲得單細(xì)胞球或小細(xì)胞球塊，用液體培養(yǎng)基進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，對(duì)提高人參皂甙的合成量有效。 (4)人參皂甙容易溶解在水溶性(親水性)有機(jī)溶液中，從培養(yǎng)物的干燥粉中提取人參皂甙最好選擇方法，操作時(shí)最好采用加熱。 答(1)滅菌消毒(2)外植體真菌(霉菌)細(xì)菌(3)果膠(4)提取(提取)水浴解析的主題圖揭示了疫苗生產(chǎn)與單克隆抗體的制備過程，研究了中心規(guī)律、基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)，2(2008江蘇高考)以下描述不正確() a不能僅通過改變NaCl溶液的濃度使DNA溶液溶解來析