骨髓細胞學檢查醫(yī)學課件

1、骨髓細胞學檢查 Bone Marrow Examination,1,學習交流PPT,內(nèi)容,骨髓檢查內(nèi)容與部位 骨髓細胞學檢測臨床應用 骨髓細胞學檢測的方法與內(nèi)容 血細胞發(fā)育過程中形態(tài)演變的一般規(guī)律 血細胞的正常形態(tài)學特征,2,學習交流PPT,內(nèi)容,血細胞化學染色 細胞免疫分型 細胞遺傳學分析 常見血液病骨髓細胞學檢查特點,3,學習交流PPT,骨髓檢查內(nèi)容,4,學習交流PPT,骨髓穿刺或活檢的部位,髂前/后上棘（posterior or anterior Iliac crest） 胸骨柄（Sternum ）(aspiration only) 脛骨粗隆（Tibia ）(infants 1 year

2、 old , particularly newborns) 脊柱棘突（Spinous processes of the vertebrae） (rarely used),Copyright The McGraw-Hill Companies, Inc. All Rights Reserved.,5,學習交流PPT,骨髓細胞學檢測臨床應用,診斷造血系統(tǒng)疾?。?白血病、惡性組織細胞病、多發(fā)性骨髓瘤、再生障礙性貧血、巨幼細胞貧血、戈謝病、尼曼-匹克病、海藍色組織細胞病等 輔助診斷某些疾?。?骨髓轉移瘤、淋巴瘤的骨髓浸潤、骨髓增生異常綜合征、骨髓增殖性疾病、缺鐵性貧血、溶血性貧血、脾功能亢進和特發(fā)性血

3、小板減少性紫癜,6,學習交流PPT,骨髓細胞學檢測臨床應用,提高某些疾病的診斷率： 瘧原蟲、黑熱病原蟲、狼瘡細胞 細菌培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)染色體培養(yǎng)、造血細胞集落培養(yǎng),7,學習交流PPT,骨髓細胞學檢查的適應證,外周血細胞成分及形態(tài)異常 不明原因的發(fā)熱，肝、脾、淋巴結腫大 骨痛、骨質破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯增加 化療后的療效觀察 移植后的疾病復發(fā)監(jiān)測 骨髓活檢、造血祖細胞培養(yǎng)、染色體核型分析、微生物及寄生蟲學檢查（如傷寒、瘧疾）,8,學習交流PPT,骨髓細胞學檢查的禁忌證,各種凝血因子缺陷引起的出血性疾病如血友病 晚期妊娠的孕婦慎做骨髓穿刺術,9,學習交流PPT,骨髓細胞學檢測的方法和

4、內(nèi)容,骨髓涂片肉眼觀察: 低倍鏡檢查： 判斷標本是否滿意： 取材 制片 染色 確定骨髓增生度（見后表) 計數(shù)巨核細胞： 735個。 觀察有無異常細胞及其他： 轉移瘤細胞、戈謝細胞、尼曼-匹克細胞、瘧原蟲,10,學習交流PPT,備注：40物鏡為高倍鏡視野,骨髓增生程度,11,學習交流PPT,骨髓增生程度,12,學習交流PPT,骨髓檢查方法,油鏡下觀察 有核細胞分類： 200-500個有核細胞。計算出各系統(tǒng)各階段有核細胞的百分率。 計算粒/紅比值：正常人約24:1。 細胞形態(tài)觀察 :正常或異常細胞 其他：如寄生蟲 骨髓象的分析與報告,13,學習交流PPT,造血系統(tǒng),14,學習交流PPT,血細胞形態(tài)

5、演變的一般規(guī)律,15,學習交流PPT,血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律,16,學習交流PPT,粒細胞系統(tǒng),占5060% 有核細胞 細胞類型 比例 原始粒細胞 1% 早幼粒細胞 5% 中幼粒細胞 15% 晚幼粒細胞 15% 嗜酸性粒細胞 5 嗜堿性粒細胞 1,17,學習交流PPT,紅細胞系統(tǒng),占20% 有核細胞 細胞類型 比例 原紅細胞 1% 早幼紅細胞 5% 中幼紅細胞 10% 晚幼紅細胞 10%,18,學習交流PPT,其他系統(tǒng),淋巴細胞： 占20% 有核細胞 單核細胞： 占4% 有核細胞 漿細胞 ： 占2% 有核細胞 巨核細胞： 7-35/片 其他細胞或寄生蟲： 無,19,學習交流PPT,血細胞正常

6、形態(tài)特征,紅細胞系 粒細胞系 淋巴細胞系 漿細胞系 單核細胞系 巨核細胞系,20,學習交流PPT,紅細胞系,原紅細胞(proerythroblast)： 圓形或橢圓形，直徑15-22um，細胞邊緣有時可瘤狀突起。核圓形，居中或稍偏位，約占細胞直徑的4/5。核染色質呈細砂狀或細粒狀，較原粒細胞著色深。核仁1-5個，呈暗藍色，界限不甚清晰，常很快消失。胞質量少，不透明，深藍色，有時核周圍著色淺形成淡染區(qū)，胞質不含顆粒。,21,學習交流PPT,紅細胞系,早幼紅細胞(basophilic erythroblast)： 圓形或橢圓形，直徑11-20um，核圓形，約占細胞直徑的2/3，居中或稍偏位。染色質

7、開始凝集成小塊狀，核仁消失。胞質量較多，呈不透明深藍色，有時胞質著色較原紅細胞更深，仍可見瘤狀突起及核周淡染區(qū)，不含顆粒。,22,學習交流PPT,紅細胞系,中幼紅細胞(polychromatophilic erythroblast)： 圓形，直徑8-18um。核圓形，約占細胞直徑的1/2。染色質凝集成團塊狀或粗索狀，似車輪狀排列，其間有明顯的淡染區(qū)域。胞質量較多，因內(nèi)含血紅蛋白逐漸增多，可呈著色不均勻的不同程度的嗜多色性。,23,學習交流PPT,紅細胞系,晚幼紅細胞(orthochromatic erythroblast)： 圓形，直徑7-12um。核圓形，居中，占細胞的1/2以下。染色質凝集

8、成大塊狀或固縮成團，呈紫褐色或紫黑色。胞質量多，呈均勻的淡紅色或極淡的灰紫色。,24,學習交流PPT,粒細胞系,原粒細胞（myeloblasts）： 圓形或橢圓形，直徑11-18um。胞核較大，占細胞的2/3以上，圓形或橢圓形，居中或略偏位。核染色質呈淡紫紅色細粒狀，排列均勻平坦如薄紗。核仁2-5個，清楚易見，呈淡藍色或無色。胞質量少，呈透明天藍色，繞于核周，不含顆?；蛴猩倭款w粒。,25,學習交流PPT,粒細胞系,早幼粒細胞（Promyelocyte）： 圓形或橢圓形，胞體較原粒細胞大，直徑12-22um。胞核大，圓形或橢圓形，居中或偏位。染色質開始聚集呈粗網(wǎng)粒狀，分布不均。核仁可見或消失。胞

9、質量較多，呈淡藍色或藍色，核周的一側可出現(xiàn)淡染區(qū)。胞質內(nèi)含有大小、形態(tài)和數(shù)目不一、分布不均的紫紅色非特異性嗜天青顆粒。,26,學習交流PPT,粒細胞系,中幼粒細胞（Myelocyte）： 中性中幼粒細胞： 圓形，直徑10-18um。胞核內(nèi)側緣開始變扁平，或稍呈凹陷，圓形或橢圓形，居中或偏位。染色質開始聚集呈粗網(wǎng)粒狀，占細胞的2/3-1/2。染色質聚集成粗索狀或小塊狀，核仁消失。胞質量多，淡紅色，內(nèi)含細小、分布均勻、淡紫紅色的特異性中性顆粒。,27,學習交流PPT,粒細胞系,晚幼粒細胞（Metamyelocyte） 圓形或橢圓形，直徑10-16um（嗜堿性晚幼粒細胞稍?。?。胞核內(nèi)明顯凹陷呈腎形，

10、但其凹陷程度一般不超過假設核直徑的一半。核染色質粗糙呈粗塊狀，排列緊密。胞質量多，呈淡紅色。內(nèi)含不同的特異性顆粒，可分為中性、嗜酸性、嗜堿性晚幼粒細胞，特異性顆粒的形態(tài)、染色及分布等特點同中幼粒細胞,28,學習交流PPT,粒細胞系,桿狀核粒細胞（Band cell） 圓形，直徑10-15um。胞核狹長，彎曲呈帶狀，兩端鈍圓。核染色質粗糙呈塊狀，染深紫紅色。胞質中含特異性顆粒，也可分為中性、嗜酸性、嗜堿性桿狀核粒細胞，顆粒特點同中幼粒細胞,29,學習交流PPT,粒細胞系,中性分葉核粒細胞（Segmented neutrocyte）： 圓形，直徑10-15um。胞核分葉狀，常分為2-5葉，以分3葉

11、者多見，葉與葉之間有細絲相連或完全斷開，核染色質濃集或呈小塊狀，染深紫紅色。胞質豐富，呈淡紅色，布滿細小紫紅色的中性顆粒,30,學習交流PPT,粒細胞系,Neutrophil(中性) Eosinophil(嗜酸性性) Basophil(嗜堿性性),31,學習交流PPT,淋巴細胞系,原淋巴細胞（Lymphoblast）： 細胞圓形或橢圓形，直徑10-18um。胞核大，圓形或橢圓形，稍偏位。核染色質細致，呈顆粒狀，但較原粒細胞稍粗糙，著色較深，染色質在核膜內(nèi)層及核仁周圍有濃集現(xiàn)象，使核膜濃厚而清晰。核仁多為1-2個，小而清楚，呈淡藍色或無色。胞質量少，呈透明天藍色，不含顆粒。,32,學習交流PPT

12、,淋巴細胞系,幼淋巴細胞（Prolymphocyte）： 圓形或橢圓形，直徑10-16um。胞核圓形或橢圓形，有時可有淺的切跡。核染色質較致密粗糙，核仁模糊或消失。胞質量較少，淡藍色，一般無顆粒，或可有數(shù)顆深紫紅色嗜天青顆粒。,33,學習交流PPT,淋巴細胞系,淋巴細胞（Lymphocyte） 大淋巴細胞： 圓形，直徑13-18um。胞核圓形或橢圓形，偏于一側或著邊。核染色質常致密呈塊狀，排列均勻，深染呈深紫紅色。胞質豐富，呈透明天藍色，可有少量大而稀疏的嗜天青顆粒。 小淋巴細胞： 圓形或橢圓形，直徑6-10um。胞核圓形或橢圓形，或有切跡，核著邊，核染色質粗糙致密呈大塊狀，染深紫紅色。胞質量

13、極少，僅在核的一側見到少量淡藍色胞質，有時幾乎不見而似裸核，一般無顆粒。,34,學習交流PPT,漿細胞系,原漿細胞（Plasmablast） 圓形或橢圓形，直徑15-20um。胞核圓形，占細胞的2/3以上，常偏位。核染色質呈粗顆粒網(wǎng)狀，紫紅色。核仁2-5個。胞質量多，呈灰藍色，不透明，核的一側可有半圓形淡染區(qū)，不含顆粒。,35,學習交流PPT,漿細胞系,幼漿細胞（Proplasmacyte） 多呈橢圓形，直徑12-16um。胞核圓形，占細胞的1/2，偏位。核染色質開始聚集，染深紫紅色，可見車輪狀排列，核仁基本消失。胞質量多，呈不透明灰藍色，近核處有淡染區(qū)，有時可見空泡或少數(shù)嗜天青顆粒,36,學

14、習交流PPT,漿細胞系,漿細胞（Plasmocyte） 圓形或卵圓形，直徑8-20um。胞核圓形，偏位。核染色質聚集成塊，深染，排列成車輪狀。胞質豐富，呈不透明深藍色或藍紫色，核的一側有明顯的淡染區(qū)。?？梢娦】张?，偶見少數(shù)嗜天青顆粒。,37,學習交流PPT,單核細胞系,原單核細胞（Monoblast） 圓形或橢圓形，直徑15-25um。胞核較大，圓形或橢圓形。核染色質纖細疏松呈網(wǎng)狀，染淡紫紅色。核仁1-3個，大而清楚。胞質豐富，呈淺灰紫色，半透明如毛玻璃樣，邊緣常不整齊，有時可有偽足狀突起，不含顆粒 。,38,學習交流PPT,單核細胞系,幼單核細（Promonocyte） 圓形或不規(guī)則形，直徑

15、15-25um。胞核圓形或不規(guī)則形，可有凹陷、切跡、扭曲或折疊。染色質較原單核細胞稍粗，但仍呈疏松絲網(wǎng)狀，染淡紫紅色。核仁模糊或消失。胞質量多，呈灰藍色，邊緣可有偽足突出，漿內(nèi)可見許多細小、分布均勻的淡紫紅色嗜天青顆粒 。,39,學習交流PPT,單核細胞系,單核細胞（Monocyte） 圓形或不規(guī)則形，直徑12-20um。邊緣常見偽足突出。胞核形狀不規(guī)則，常呈腎形、馬蹄形、筆架形、S形等，并有明顯扭曲折疊。染色質疏松細致，呈淡紫紅色絲網(wǎng)狀。胞質豐富，呈淡灰藍色或淡粉紅色，可見多數(shù)細小、分布均勻細塵樣淡紫紅色顆粒 。,40,學習交流PPT,巨核細胞系,原巨核細胞（Megakaryoblast）

16、圓形或橢圓形，胞體較大，直徑15-30um。胞核大，占細胞的極大部分，呈圓形或橢圓形。染色質呈深紫紅色，粗粒狀，排列緊密。可見淡藍色核仁2-3個，核仁大小不一，不清晰。胞質量較少，呈不透明深藍色，邊緣常有不規(guī)則突起。,41,學習交流PPT,巨核細胞系,幼巨核細胞（Promegakaryocyte） 圓形或不規(guī)則形，胞體明顯增大，直徑30-50um。胞核開始有分葉，核形不規(guī)則并有重疊。染色質凝集呈粗顆粒狀或小塊狀，排列緊密。核仁模糊或消失。胞質量增多，呈藍色或灰藍色，進核處可出現(xiàn)淡藍色或淡紅色淡染區(qū)，可有少量嗜天青顆粒。,42,學習交流PPT,巨核細胞系,顆粒巨核細胞（Granular mega

17、karyocyte） 胞體明顯增大，直徑50-70um，甚至大100 um，外形不規(guī)則。胞核明顯增大，高度分葉，形態(tài)不規(guī)則，分葉常層疊呈堆積狀。染色質粗糙，排列致密呈團塊狀，染深紫紅色。胞質極其豐富，呈淡紫紅色，其內(nèi)充滿大量細小紫紅色顆粒，有時可見邊緣處顆粒聚集成簇，但周圍無血小板形成。,43,學習交流PPT,巨核細胞系,產(chǎn)板型巨核細胞（Megakaryocyte with platelet） 胞質內(nèi)顆粒明顯聚集成簇，有血小板形成，胞質周緣部分已裂解為血小板，使細胞邊緣不完整，其內(nèi)側或外側常有成簇血小板出現(xiàn)。其余的細胞特征均與顆粒型巨核細胞相同。,44,學習交流PPT,細胞化學染色,髓過氧化酶

18、染色(POX) 中性粒細胞堿性磷酸酶染色(NAP) 非特異性酯酶染色(a-NAE) 糖原染色(PAS) 鐵染色,45,學習交流PPT,細胞化學染色,46,學習交流PPT,中性粒細胞堿性磷酸酶染色（NAP）,參考值：成人 NAP陽性率10%-40%；積分：40-80,47,學習交流PPT,幾種常見急性白血病化學染色結果,48,學習交流PPT,鐵染色,參考值：細胞外鐵 +； 細胞內(nèi)鐵 20% 90%， 平均65% 臨床意義： 1. IDA，細胞外鐵缺如，細胞內(nèi)鐵減少； 2. 非缺鐵性貧血細胞外鐵增加 3. 鐵粒幼細胞性貧血細胞內(nèi)鐵增多，形成環(huán)狀鐵粒幼細胞增多15%,49,學習交流PPT,鐵染色,5

19、0,學習交流PPT,細胞免疫分型,原理：用單克隆抗體及免疫學技術對細胞表面和/或細胞質存在的特異性抗原進行檢測。分析細胞所屬系列、分化程度和功能狀態(tài)。 檢測方法： 1.免疫熒光法（臨床常用流式細胞儀檢測） 2. 免疫酶染色法 3. ABC法,51,學習交流PPT,細胞免疫分型的臨床應用,1.有助于識別不同系列的細胞 2. 識別不同的淋巴細胞 3. 用于檢測T淋巴細胞亞群 4. 用于識別不同分化階段的細胞,52,學習交流PPT,細胞免疫分型的臨床應用,5. 有助于識別不同功能狀態(tài)的細胞 6. 有助于對不同系列和不同分化階段的細胞進行分離和研究 7.可用于各種白血病細胞的免疫表型分析 8. 可用于

20、白血病微小殘留病的檢測,53,學習交流PPT,細胞免疫表型(immunophenotypes),常用各系血細胞CD抗原 1、T系：CD1-CD8（CD6不用） 2、B系：CD10, CD19-CD24, FMC7 3、髓系：CD11b,CD13-CD16,CD33,CD64 4、干祖：CD34, CD117, CD38, HLA-DR,54,學習交流PPT,B 淋巴細胞免疫表型,泛B標志：CD19,HLA-DR,cCD79a/CD22 幼稚B標志：CD34,TdT,CD10 成熟B標志：CD23,FMC7,55,學習交流PPT,T淋巴細胞免疫表型,泛T: CD2,CD5,CD7,cCD3 幼稚

21、T: CD34,TdT,CD1a,CD4/8 成熟T: CD3,CD4,CD8,56,學習交流PPT,單核細胞免疫表型,全單核細胞標志：CD33,CD13,HLA-DR 幼稚單核細胞標志：CD34,CD117 成熟單核細胞標志：CD14,CD64,57,學習交流PPT,粒細胞免疫表型,全粒細胞標志：CD13,CD33,Cmpo 幼稚粒細胞標志：CD34,CD117,HLA-DR 成熟粒細胞標志：D15,CD11b,CD10,CD64,58,學習交流PPT,診斷白血病主要標記,B-ALL: CD34, HLA-DR, CD19, CD10+/-, cCD79a T-ALL: CD34, CD38

22、, CD7, CD2+/-, CD5+/-, cCD3 AML: CD34, CD117, CD33, CD13, cMPO M3: CD34-, HLA-DR- M2: CD19+: t(8, 21) M4/M5: CD14+ M6: GlyA+, CD71+ M7: IIb/IIIa(CD41, CD61)+,59,學習交流PPT,白血病的流式細胞儀檢測結果,60,學習交流PPT,急性白血病細胞免疫表型特點,ALL與AML細胞免疫表型特點,61,學習交流PPT,急性淋巴細胞白血病免疫表型特點,62,學習交流PPT,急性髓細胞性白血病,63,學習交流PPT,細胞遺傳學檢測,64,學習交流PP

23、T,細胞遺傳學檢測,65,學習交流PPT,常見血液病的血液學特征,貧血(anemia) 白血病(leukemia) 骨髓增生異常綜合癥(myelodysplastic syndrome) 多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma),66,學習交流PPT,缺鐵性貧血(iron deficiency anemia),血象變化,67,學習交流PPT,缺鐵性貧血(iron deficiency anemia),血象變化,紅細胞中央蒼白區(qū)明顯擴大而呈環(huán)狀,68,學習交流PPT,缺鐵性貧血(iron deficiency anemia),骨髓象變化,69,學習交流PPT,缺鐵性貧血(iron def

24、iciency anemia),紅細胞常30%，使G:E降低。以中幼及晚幼紅細胞為主，嚴重時，中幼紅較晚幼紅細胞更多,骨髓象變化,70,學習交流PPT,缺鐵性貧血(iron deficiency anemia),左圖為鐵染色（-），右圖為鐵染色（+）,骨髓鐵染色,71,學習交流PPT,溶血性貧血 (hemolytic anemia),血象改變,72,學習交流PPT,溶血性貧血 (hemolytic anemia),73,學習交流PPT,溶血性貧血 (hemolytic anemia),74,學習交流PPT,溶血性貧血 (hemolytic anemia),骨髓象改變,75,學習交流PPT,溶血

25、性貧血 (hemolytic anemia),76,學習交流PPT,再生障礙性貧血(aplastic anemia),急性再障血象改變,77,學習交流PPT,再生障礙性貧血(aplastic anemia),78,學習交流PPT,再生障礙性貧血(aplastic anemia),79,學習交流PPT,再生障礙性貧血(aplastic anemia),急性再障骨髓象改變,80,學習交流PPT,再障骨髓活檢Biopsy of AA,81,學習交流PPT,再生障礙性貧血(aplastic anemia),慢性再障血象改變,82,學習交流PPT,再生障礙性貧血(aplastic anemia),慢性再

26、障骨髓象改變,83,學習交流PPT,白血病(leukemia),急性白血病血象改變,84,學習交流PPT,白血病(leukemia),急性白血病骨髓象改變,*FAB分型，WHO分型以20%ANC為標準,85,學習交流PPT,白血病(leukemia),急性白血病分型,急性淋巴細胞白血病（acute lymphocytic leukemia, ALL） L1型、L2型、L3型 急性髓細胞白血?。╝cute myelicytic leukemia, AML） M0型、M1型、M2型、M3型、 M4型、 M5型、 M6型、 M7型,86,學習交流PPT,白血病(leukemia),急性淋巴細胞白血病（ALL-L1, L2, L3）,87,學習交流PPT,白血病(leukemia),急性髓細胞白血?。ˋML-M0 121:402-407,89,學習交流PPT,急性白血病細胞遺傳學檢測,【1】 Wan