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1、常用的細(xì)菌染色方法,觀(guān)察革蘭氏染色抗酸染色細(xì)菌的基本形態(tài)結(jié)構(gòu),細(xì)菌染色的意義,細(xì)菌個(gè)體小,基本上是無(wú)色透明的,因此必須用適當(dāng)?shù)娜玖先旧^(guān)察,才能顯示其形態(tài)、大小、結(jié)構(gòu)、染色特性等,對(duì)細(xì)菌鑒別有很大的意義。革蘭氏染色是細(xì)菌學(xué)中應(yīng)用最廣泛的染色方法,牙齒染色法可以將所有細(xì)菌分為兩個(gè)茄子主要類(lèi)別。細(xì)菌染色方法及原理總是用微藍(lán),結(jié)晶紫等堿性染料染色。大部分染料是中性有機(jī)鹽。根據(jù)著色器,可以分為堿性染料(basic dye)中有陽(yáng)電染料的類(lèi)型。陽(yáng)離子部分是發(fā)色基團(tuán),可以與細(xì)胞中帶負(fù)電的基團(tuán)結(jié)合。酸性染料(Acid dye)帶負(fù)電染料。負(fù)離子部分是發(fā)色基團(tuán),可以與細(xì)胞中有正電的基團(tuán)結(jié)合。革蘭氏染色原理,細(xì)
2、菌的等電點(diǎn)低,約在pH 25之間,因此在中性、堿性或弱堿性溶液中,菌體蛋白在電離后呈負(fù)電荷,容易將帶正電荷的堿性染料和龍膽、堿性復(fù)紅等結(jié)合起來(lái),使細(xì)菌紫色或紅色染色。1,細(xì)菌染色標(biāo)本片的制備,細(xì)菌染色檢查,首先要做細(xì)菌標(biāo)本的制備。準(zhǔn)備細(xì)菌標(biāo)本一般包括涂層、干燥、固定三個(gè)階段。固定目的及方法,使細(xì)菌的細(xì)胞變硬,使菌體和幻燈片更加牢固,對(duì)染料進(jìn)行菌絲體的通透性加熱固定會(huì)殺死細(xì)菌。用比較安全的方法制作的標(biāo)本通過(guò)火焰均勻地通過(guò)三次,革蘭氏染色,染色:超染色(結(jié)晶紫)媒染(碘液)脫色(酒精)Crystal violet,染色程序,鄭秀晶紫一次染色盧戈碘液媒染乙醇脫色復(fù)紅再染色,()注意事項(xiàng)涂層要稍微厚一點(diǎn),染色或延長(zhǎng)染色時(shí)間,加熱時(shí)隨時(shí)添加染液分枝桿菌,以紅色(-)其他細(xì)菌和背景為藍(lán)色(-)。操作過(guò)程,痰涂片(稍厚)干燥固定煤酸復(fù)紅加熱染色810分鐘后,以鹽酸酒精的3%左右脫色,脫色時(shí)輕輕搖動(dòng)。水洗直到涂層顏色脫落,然后用堿性微藍(lán)色染色1分鐘,進(jìn)行水洗,印干鏡檢查,形態(tài):苗條,稍彎曲的鞭毛,無(wú)孢子。染色性:不易著色,抗酸染色陽(yáng)性。菌絲體是紅色,背景的其他物質(zhì)藍(lán)色。結(jié)核桿菌(M.tuberculosis),觀(guān)察細(xì)菌的基本形態(tài)結(jié)構(gòu),基本形態(tài)球菌弧菌特殊結(jié)構(gòu)桿菌,破傷風(fēng)牛細(xì)胞膜肺炎球
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