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1、第三章 植物病原原核生物,原核生物(Procaryotes):是指無(wú)真正的細(xì)胞核,遺傳物質(zhì)分散在細(xì)胞質(zhì)中,無(wú)核膜包被,僅形成一個(gè)圓形或橢圓形的核區(qū)的低等生物,包括細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌和植原體等。 一般是由細(xì)胞膜和細(xì)胞壁或只有細(xì)胞膜包圍的單細(xì)胞微生物。它的遺傳物質(zhì)(DNA)分散在細(xì)胞質(zhì)中,沒(méi)有核膜包圍,沒(méi)有明顯的細(xì)胞核。細(xì)胞質(zhì)中含有小分子的核糖體(70s),但沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等細(xì)胞器。,Thomas Jonathan Burrill 被稱為植物病原細(xì)菌學(xué)之父,他在1877首次描述了梨火疫病的癥狀,并推測(cè)是由細(xì)菌引起的。,梨火疫病,Erwin F. Smith,歐文證實(shí)了梨火疫病是Erwinia

2、 amylovora 引起的,主要內(nèi)容 一、原核生物的一般概念 二、原核生物生長(zhǎng)繁殖及遺傳變異 三、植物病原原核生物的主要類群 四、植物病原原核生物侵染與傳播 五、植物病原原核生物病害的診斷,第一節(jié) 植物病原細(xì)菌概述,1細(xì)菌病害的數(shù)量和危害僅次于真菌和病毒,屬第三大病原物。已經(jīng)記載的植物細(xì)菌病害500種以上。植物病原細(xì)菌已經(jīng)確認(rèn)的約有250個(gè)種、亞種和致病變種。 2細(xì)菌屬于原核生物界(Procaryotae)的單細(xì)胞生物,有細(xì)胞壁,沒(méi)有細(xì)胞核。 3一般細(xì)菌的形態(tài)為球狀、桿狀和螺旋狀。大都單生,也有雙生、串生和聚生的。植物病原細(xì)菌大多是桿狀菌,大小為0.5-0.81-5m,少數(shù)是球狀。 4大多具

3、鞭毛,著生在菌體一端或兩端的叫極鞭,著生在菌體側(cè)面和四周的叫周鞭。 5植物病原細(xì)菌都不產(chǎn)生芽孢。芽孢抗逆性較強(qiáng)。,6細(xì)菌都是非專性寄生物,均可在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。寄生性強(qiáng)的可以侵染綠色葉片,寄生性弱的只能侵染植物的貯藏器官和果實(shí)等抗病性較弱部位。 7一般植物病原細(xì)菌的致死溫度是48-53/10分鐘,而要?dú)⑺兰?xì)菌的芽孢則需要120左右的高壓蒸汽10-20分鐘。因此高壓滅菌的指標(biāo)是 120 30分鐘。 8細(xì)菌都是以裂殖方式繁殖,即一分為二。在適宜條件下最快20分鐘繁殖一次。一般植物病原細(xì)菌的最適溫度為26-30,24-48小時(shí)可以在培養(yǎng)基上長(zhǎng)出細(xì)菌菌落。 9細(xì)菌經(jīng)常發(fā)生變異。人工培養(yǎng)的細(xì)菌致病力容

4、易減弱,通過(guò)人工接種的方法可以恢復(fù)其致病力。,一、形態(tài)和結(jié)構(gòu),細(xì)菌的形態(tài)有球狀、桿狀和螺旋狀,植物病原細(xì)菌多為桿狀,少數(shù)球狀 各種細(xì)菌大小差別很大,而且形態(tài)及大小會(huì)受到環(huán)境條件的影響。 球狀細(xì)菌的直徑為0.5-1.3m, 桿狀細(xì)菌的大小為0.5-0.8m15m,也有更小一些的。螺旋狀細(xì)菌較大,有的可達(dá)13一14m 1.5m。細(xì)菌大都單生,也有雙生、串生和聚生的。 植物病原細(xì)菌大多是桿狀菌,大小為0.5一0.8m13m,少數(shù)為球狀。 核糖體為型,真核生物是型的,細(xì)菌的形態(tài)示意圖,弧菌,螺旋菌,二、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)、生長(zhǎng)繁殖及菌種保存,植物病原細(xì)菌屬于化能有機(jī)異養(yǎng)型,可以寄生和人工培養(yǎng)。常用培養(yǎng)基 LB

5、(0.5%酵母抽提物+1%蛋白胨+1%氯化鈉) NA(牛肉膏蛋白胨) 細(xì)菌的代謝過(guò)程有酶的參與,果膠酶;通過(guò)無(wú)氧發(fā)酵或有氧呼吸來(lái)產(chǎn)生能量,常見(jiàn)的EMP途徑和三羧酸循環(huán)。 細(xì)菌的代謝產(chǎn)物很多,對(duì)它的鑒定很有幫助。,細(xì)菌人工培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意培養(yǎng)基中各個(gè)物質(zhì)的配比以及合適的溫度和酸度。(25-28,pH7.0-7.2;多為好氣型)。 細(xì)菌的繁殖速度很快,為裂殖方式。 菌種的保存方法: 1.轉(zhuǎn)管保藏法:簡(jiǎn)便易行但保藏期短 2.液體石蠟油保藏法:簡(jiǎn)便易行,保藏期長(zhǎng) 3.無(wú)菌水保藏法:簡(jiǎn)便易行,但適應(yīng)范圍有限 4.真空冷凍干燥保藏法:程序較復(fù)雜但效果最好。,從左至右: 轉(zhuǎn)管保藏法、甘油保藏法、真空冷凍干燥保藏

6、法,細(xì)菌的芽孢,一些芽孢桿菌在菌體內(nèi)可以形成一種稱作芽孢的內(nèi)生孢子。芽孢并不是細(xì)菌的繁殖器官,因?yàn)橐粋€(gè)菌體只形成一個(gè)芽孢,芽孢萌發(fā)也只形成一個(gè)細(xì)菌。芽孢的抵抗力很強(qiáng)。一般植物病原細(xì)菌的致死溫度在4853之間,有些耐高溫細(xì)菌的致死溫度,最高也不超過(guò)70,而要?dú)⑺兰?xì)菌的芽孢,一般要用120左右的高壓蒸氣處理l020分鐘。,革蘭氏染色反應(yīng),細(xì)菌對(duì)革蘭氏染色的反應(yīng)有陽(yáng)性和陰性。 革蘭氏染色反應(yīng)與細(xì)菌的其他性狀有關(guān)。例如,革蘭氏陽(yáng)性的細(xì)菌能耐高濃度的鹽,不易被蛋白酶分解,但是對(duì)于堿性染料和除垢劑(如肥皂)則較敏感。 對(duì)抗菌素的反應(yīng)也不同,青霉素對(duì)革蘭氏陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)菌作用比較大,而鏈霉素則對(duì)陽(yáng)性反應(yīng)和陰性

7、反應(yīng)的細(xì)菌都有一定的作用。 營(yíng)養(yǎng)的要求也不同,革蘭氏染色反應(yīng)陽(yáng)性的細(xì)菌,一般需要較復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 電子顯微鏡的觀察發(fā)現(xiàn),革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁不是光滑的。可見(jiàn),革蘭氏染色反應(yīng)也反映了細(xì)菌的組成和結(jié)構(gòu)等本質(zhì)上的差別,因此它是細(xì)菌分類上的一個(gè)重要性狀。,二、原核生物的繁殖、遺傳和變異,原核生物的遺傳物質(zhì)是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的DNA,主要在核區(qū)內(nèi),但在細(xì)胞中還有單獨(dú)的遺傳物質(zhì),如質(zhì)粒。核質(zhì)和質(zhì)粒共同構(gòu)成了原核生物的遺傳信息庫(kù)一基因組。 原核生物經(jīng)常發(fā)生變異。細(xì)菌在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)到一定時(shí)期后一些性狀就會(huì)發(fā)生變化,如植物病原細(xì)菌致病力的減弱,可能是由于改變后的生活條件對(duì)細(xì)菌的選擇作用的結(jié)果。類似的現(xiàn)象是一種植

8、物病原細(xì)菌通過(guò)不同的寄主植物,特別是抗性強(qiáng)弱不同的寄主植物,它的致病力可以減弱或增強(qiáng)。,三、 主要類群,絕大多數(shù)的原核生物是腐生的或自養(yǎng)性的,它們廣泛分布在自然界的各種場(chǎng)所,從高山到海洋,從赤道到兩極,從植物到動(dòng)物體內(nèi)外,都可發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌存在。 能夠侵染植物引起發(fā)病的原核生物稱為植物病原原核生物,主要有真細(xì)菌和菌原體兩大類群,分屬于薄壁菌門(mén)、厚壁菌門(mén)和軟壁菌門(mén)。 薄壁菌門(mén)和厚壁菌門(mén)的細(xì)菌有細(xì)胞壁,軟壁菌門(mén)的成員也稱菌原體,三者統(tǒng)稱為真細(xì)菌。,革蘭氏染色反應(yīng),植物病原細(xì)菌革蘭氏染色反應(yīng)大多是陰性(紅色G-),少數(shù)是陽(yáng)性(紫色G+),這與細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和成分有關(guān)(先用結(jié)晶紫和碘液處理細(xì)胞壁,再用酒

9、精或丙酮脫色)。 革蘭氏染色反應(yīng)是細(xì)菌鑒別分類的重要依據(jù),此外對(duì)抗菌素的反應(yīng)也不同,青霉素對(duì)革蘭氏染色陽(yáng)性的細(xì)菌作用較大,但對(duì)陰性細(xì)菌作用則較小。而鏈霉素對(duì)陽(yáng)性和陰性細(xì)菌都有殺滅作用,應(yīng)為植物病原細(xì)菌大多屬陰性細(xì)菌,因此農(nóng)用鏈霉素在防治植物細(xì)菌病害方面廣泛應(yīng)用。,第二節(jié) 植物病原細(xì)菌分類,根據(jù)目前公認(rèn)的五界生物分類系統(tǒng),細(xì)菌屬于原核生物界。由于原核生物形態(tài)簡(jiǎn)單、差異較小,內(nèi)部的分類系統(tǒng)還不完善。目前比較公認(rèn)的是柏杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)(第九版,1994)分類系統(tǒng)。,一、原核生物界分類系統(tǒng),原核生物界通常分為4個(gè)門(mén),7個(gè)綱,35個(gè)組群。 薄壁菌門(mén):有壁較薄。革蘭氏染色反應(yīng)陰性,包括大多數(shù)植物病原細(xì)菌。

10、 厚壁菌門(mén):有壁較厚。革蘭氏染色反應(yīng)陽(yáng)性,包括棒形桿菌屬、芽孢菌屬和鏈霉菌屬。 無(wú)壁菌門(mén):菌體無(wú)壁。包括類菌原體。 疵壁菌門(mén):屬?zèng)]有進(jìn)化的原細(xì)菌或古細(xì)菌。包括產(chǎn)甲烷細(xì)菌和高鹽細(xì)菌。,二、植物病原細(xì)菌的分類單元,長(zhǎng)期以來(lái),植物病原細(xì)菌僅限于5個(gè)屬:土壤桿菌屬、歐氏桿菌屬、甲單胞桿菌屬、黃單胞桿菌屬和棒狀桿菌屬。近十年來(lái),又陸續(xù)新建了一些植物病原細(xì)菌屬?,F(xiàn)在植物病原細(xì)菌的主要類群有14個(gè)屬 1. 細(xì)菌分類依據(jù):形態(tài)特征和培養(yǎng)性狀、生理生化性狀、遺傳性狀。 2. 細(xì)菌種分類單元:基因種-細(xì)菌分類學(xué)家、分類種-植物病理學(xué)家。,3. 亞種(subspecies):細(xì)菌種下類群種在培養(yǎng)特性、生理生化和遺傳

11、學(xué)某些性狀有一定差異的群體。 4. 致病變種(pathovar.):簡(jiǎn)稱.Pv.,細(xì)菌種下以寄主范圍和致病力差異來(lái)劃分的組群。 5. 生化變種(biovar):細(xì)菌種以下按生理生化性狀差異來(lái)劃分的組群,不考慮致病性等其他性狀的異同。,1.土壤桿菌屬(Agrobacterium),土壤桿菌屬是薄壁菌門(mén)根瘤菌科的一個(gè)成員,土壤習(xí)居菌、菌體短桿狀,單生或雙生,鞭毛16根,周生或側(cè)生。好氣性,代謝為呼吸型。革蘭氏反應(yīng)陰性,無(wú)芽孢。 營(yíng)養(yǎng)瓊脂上菌落為圓形、隆起、光滑,灰白色至白色,質(zhì)地粘稠。不產(chǎn)生色素。 大多數(shù)細(xì)菌都帶有除染色體之外的另種遺傳物質(zhì),一種大分子的質(zhì)粒,它控制著細(xì)菌的致病性和抗藥性等,如侵染

12、寄主引起腫瘤癥狀的質(zhì)粒稱為“致瘤質(zhì)粒”(tomor inducine plasmid,俗稱為T(mén)i質(zhì)粒),有的能引起寄主產(chǎn)生不定根的“致發(fā)根質(zhì)?!?rhizogen inducine plasmid,比俗稱Ri質(zhì)粒)。,2.布克氏菌屬(Burkholderia),布克氏菌屬是由假單胞菌屬中的rRNA第二組獨(dú)立出來(lái)的。 茄青枯布克氏菌(B.solanacearum)能引起多種作物,特別是茄科植物的青枯病。 在組合培養(yǎng)基上形成光滑、濕潤(rùn)、隆起和灰白色的菌落。 病菌的寄主范圍很廣,可以為害30余科,100多種植物。病害的典型癥狀是全株呈現(xiàn)急性凋萎,病莖維管束變褐,橫切后用手?jǐn)D壓可見(jiàn)有白色菌膿溫出。 病

13、菌可以在土中長(zhǎng)期存活,是土壤習(xí)居菌。病菌可隨土壤、灌溉水和種薯、種苗傳染與傳播。侵染的主要途徑是傷口,高溫多濕有利發(fā)病。,3.歐氏桿菌屬(Erwinia),屬薄壁菌門(mén)。菌體短桿狀,周生多根鞭毛。菌落灰白色,革蘭氏染色反應(yīng)陰性。主要引致腐爛,如大白菜軟腐病。 胡蘿卜歐氏菌(E.carotovora)俗稱大白菜軟腐病菌,寄生范圍很廣,包括十字花科、禾本科、茄科等20多科的數(shù)百種果蔬和大田作物,大多由傷口侵染,或介體動(dòng)物傳帶侵染,引起肉汁或多汁的組織軟腐,尤其是在厭氧條件下最易受害,多在倉(cāng)庫(kù)中貯藏期間表現(xiàn)癥狀。,4.假單胞菌屬(Pseudomonas),假單胞菌屬是薄壁菌門(mén)假單胞菌科的模式屬。 菌體

14、短桿狀或略彎,單生,大小為0.51.0m 1.55.0m,鞭毛14根或多根,極生。 革蘭氏陰性,嚴(yán)格好氣性,代謝為呼吸型。無(wú)芽孢。 營(yíng)養(yǎng)瓊脂上的菌落圓形、隆起、灰白色,有熒光反應(yīng),有些種產(chǎn)生褐色素?cái)U(kuò)散到培養(yǎng)基中。 已發(fā)現(xiàn)的植物病原細(xì)菌有一半屬于此屬,主要引起葉斑、腐爛和萎蔫等癥。黃瓜細(xì)菌性角斑病、桑疫病等。,(五)黃單胞菌屬(Xanthomonas),黃單胞菌屬是薄壁菌門(mén)一個(gè)成員。菌體短桿狀,多單生,少雙生,單鞭毛,極生。 革蘭氏陰性。嚴(yán)格好氣性,代謝為呼吸型。 營(yíng)養(yǎng)瓊脂上的菌落圓形隆起,蜜黃色,產(chǎn)生非水溶性黃色素。 黃單胞菌屬的成員都是植物病原菌,模式種是野油菜黃單胞菌。俗稱甘藍(lán)黑腐病菌。,

15、癥狀 又稱白葉瘟、地火燒、茅草瘟。整個(gè)生育期均可受害,苗期、分蘗期受害最重,各個(gè)器官均可染病,葉片最易染病。 病原 Xanthomonas oryzae 稱水稻黃單胞菌。包括白葉枯病菌和條斑病菌兩個(gè)致病變種:即Xanthomonas oryzae pv.oryzae (Ishiyama)稻生黃單胞菌和Xanthomonas oryzae pv. oryzicola (Fang et al.)水稻黃黃單胞菌水稻生致病變種,屬細(xì)菌。異名X.campestris pv.oryzae (Ishiyama) Dye。,6.棒形桿菌屬(Clavibacter),菌體短桿狀至不規(guī)則桿狀,無(wú)鞭毛,不產(chǎn)生內(nèi)生孢

16、子. 革蘭氏反應(yīng)陽(yáng)性。好氣性,呼吸型代謝,營(yíng)養(yǎng)瓊脂上菌落為圓形光滑凸起,不透明,多為灰白色。 馬鈴薯環(huán)腐亞種(C.michiganensis subsp.sepedonicum)病菌可侵害5種茄屬植物引致馬鈴薯環(huán)腐病。病菌大多借切刀的傷口傳染,病株維管束組織被破壞,橫切時(shí)可見(jiàn)到環(huán)狀維管束組織壞死并充滿黃白色菌膿,稍加擠壓,薯塊即沿環(huán)狀的維管束內(nèi)外分離,故稱環(huán)腐病。,第三節(jié) 植物病原細(xì)菌的侵染傳播與病害診斷,植物細(xì)菌病害主要發(fā)生在栽培植物上,無(wú)論是大田作物或果樹(shù)、蔬菜都有3-4種細(xì)菌病害。 目前生產(chǎn)上重要的細(xì)菌病害有水稻白葉枯病、馬鈴薯環(huán)腐病、茄科作物青枯病、十字花科作物軟腐病、葫蘆科細(xì)菌性角斑

17、病等。,一、寄生性與致病性,1植物病原細(xì)菌都是非專性寄生物,都能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。培養(yǎng)細(xì)菌的常用培養(yǎng)基是牛肉汁蛋白胨培養(yǎng)基(NA培養(yǎng)基)。 2植物病原細(xì)菌的寄生性強(qiáng)弱有所不同。寄生性強(qiáng)的可以侵染作物的綠色部分,如葉片;寄生性弱的只能侵染植物的貯藏器官或抗性較弱部位,如果實(shí)。 3寄生性是病菌與寄主建立寄生關(guān)系,能在寄主體內(nèi)存活與繁殖的特性。,4. 致病性則是病菌對(duì)寄主造成的破壞引起病變的特性。 5.一種病菌可以在多種植物體內(nèi)存活,具有寄生性,但并不一定都能引起病害,即無(wú)致病性。例如熒光假單胞菌的寄生性較強(qiáng)??梢栽诙喾N植物體內(nèi)營(yíng)極生生活,但致病性較弱,只能在很少的場(chǎng)合顯示病變。,二、植物病原細(xì)菌

18、侵染途徑,植物病原細(xì)菌不能直接侵入植物,只能通過(guò)自然孔口和傷口侵入。植物病原細(xì)菌侵染途徑及特點(diǎn)如下: 1. 自然孔口:氣孔、水孔、皮孔、蜜腺。 2. 各種傷口:自然傷口:風(fēng)雨、冰雹、凍害、昆蟲(chóng) 人為傷口:耕作、施肥、嫁接、收獲、運(yùn)輸 3. 從自然孔口侵入的細(xì)菌一般都能從傷口侵入,能從傷口侵入的細(xì)菌不一定能從自然孔口侵入。,4. 寄生性弱的細(xì)菌一般都是從傷口侵入;寄生性強(qiáng)的細(xì)菌則從傷口和自然孔口都能侵入。 5. 引致葉斑病的細(xì)菌一般是從自然孔口侵入,如假單胞桿菌屬和黃單胞桿菌屬的細(xì)菌。 6. 引致萎蔫、腐爛和瘤腫的細(xì)菌則多半是從傷口侵入,如棒形桿菌屬、歐氏桿菌屬和土壤桿菌屬的細(xì)菌。,三、植物病原

19、細(xì)菌的傳播,1.雨水是植物病原細(xì)菌最主要的傳播途徑。風(fēng)雨易造成傷口,雨露和水滴飛濺有利于細(xì)菌菌膿或菌痂的擴(kuò)散。 2.昆蟲(chóng)介體也可傳播細(xì)菌。如種蠅的幼蟲(chóng)和菜青蟲(chóng)傳播白菜軟腐病。 3.工具傳播:切刀可以傳播馬鈴薯環(huán)腐病菌。,四、植物病原細(xì)菌的侵染來(lái)源,1. 種子和無(wú)性繁殖器官:帶菌種苗是最重要的初侵入來(lái)源,帶菌種苗調(diào)運(yùn)可遠(yuǎn)距離傳播。 2. 病殘?bào)w:植物病原細(xì)菌可以在病株殘余組織中長(zhǎng)期存活,也是重要的初侵染來(lái)源。 3. 土壤:主要存活與土壤中的作物殘余組織。 4. 雜草和其他作物:相同寄主范圍的作物。 5. 昆蟲(chóng)介體:玉米細(xì)菌性萎蔫病菌可以在玉米葉甲體內(nèi)越冬,成為初侵染來(lái)源。,五、植物細(xì)菌病害的診斷

20、,、根據(jù)癥狀初步診斷 、顯微檢查(噴菌現(xiàn)象)及菌體形態(tài) 、分離培養(yǎng)和接種實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確診 、根據(jù)核糖體rRNA序列進(jìn)行比較,進(jìn)行分類和鑒定。 只有有了準(zhǔn)確的診斷結(jié)果,才能制定合理的防治措施。,(一)癥狀識(shí)別,1植原體病害的癥狀特點(diǎn) 病株矮化或矮縮,枝葉叢生,葉小而黃化。因此叢生、矮縮、小葉與黃化相結(jié)合是診斷植原體病害癥狀時(shí)必須掌握的關(guān)鍵。 2細(xì)菌病害的癥狀特點(diǎn) 表現(xiàn)的癥狀類型主要有壞死、萎蔫、腐爛和畸形等及少數(shù)褪色或變色(柑橘黃龍?。?; 病癥:高濕度下發(fā)病部位有菌膿(ooze)溢出。,菌膿,壞死,以葉部、果實(shí)上出現(xiàn)的斑點(diǎn)、枯斑為最多 、在病斑初顯時(shí),多為水漬狀浸潤(rùn)斑或油浸狀,病斑逐漸擴(kuò)展,壞死面

21、積擴(kuò)大變成為條斑或枯死斑。如水稻條斑病、水稻白葉枯病。 、病斑受到木栓化組織限制并產(chǎn)生離層使病斑脫落而成穿孔狀,如桃葉穿孔病。 、如果木栓化組織不脫落,就會(huì)形成潰瘍狀,如柑桔潰瘍病。 潮濕時(shí)病斑上泌出淡黃色或灰白色的菌膿,干涸后成為顆?;蚓?水稻白葉枯病癥狀,桃細(xì)菌性穿孔病癥狀,柑橘潰瘍病癥狀,萎蔫,萎蔫癥狀是細(xì)菌侵害維管束系統(tǒng)以后所造成的,它與真菌性病害造成的萎蔫癥狀相似,茄青枯病、馬鈴薯環(huán)腐病是常見(jiàn)的代表類型。 可通過(guò)莖橫切面可否出現(xiàn)菌膿與真菌性萎蔫病進(jìn)行區(qū)分。,茄青枯病,馬鈴薯環(huán)腐病癥狀,花生青枯病,腐爛,腐爛是細(xì)菌病害較為特有的一種類型,瓜果等貯藏器官的軟腐型腐爛大多由軟腐細(xì)菌侵害所

22、致, 雖然瓜果腐霉真菌也能導(dǎo)致腐爛癥狀,但常見(jiàn)有菌絲伴隨而易于區(qū)分,此外細(xì)菌所致腐爛多伴有臭味。,白菜軟腐病癥狀,辣椒軟腐病癥狀,畸形,畸形大多發(fā)生在木本植物的根冠或莖基部、枝條上,少數(shù)在葉柄或葉脈上出現(xiàn),主要是由土壤桿菌侵害所致,如桃發(fā)根病,蘋(píng)果、葡萄的根癌病等。,茶樹(shù)根癌病癥狀,根癌,冠癭,(二)顯微鏡檢查,由螺原體或菌原體侵染所致病害,必須用電子顯微鏡才能看清楚。 由細(xì)菌侵染所致病害的病部,無(wú)論是維管束系統(tǒng)受害的,還是薄壁組織受害的,都可以在徒手切片中看到有大量細(xì)菌從病部噴出,這種現(xiàn)象稱為噴菌現(xiàn)象(bacteria exudation,BE)。 噴菌現(xiàn)象為細(xì)菌病害所特有,是區(qū)分細(xì)菌病害或

23、真菌、病毒病害的最簡(jiǎn)便的手段之。維管束病害的噴菌量多,可持續(xù)幾分鐘到十多分鐘。薄壁組織病害的噴菌狀態(tài)持續(xù)時(shí)間較短,噴菌數(shù)量亦較少。,噴菌現(xiàn)象照片,(三)分離培養(yǎng)與侵染性試驗(yàn),按柯赫氏法則進(jìn)行 對(duì)于植原體病害,可采用菟絲子介體接種作橋梁接種傳染到長(zhǎng)春花上作鑒定的辦法,證明其有無(wú)侵染性,從而完成柯赫氏法則的診斷程序。,柯赫氏法則(證病律),是診斷和鑒定新病害的方法,也是鑒定病原菌的主要手段 具體步驟如下: .在病植物上常伴隨有一種病原生物的存在 .該生物可在離體或人工培養(yǎng)基上分離并得到純培養(yǎng) .所得到的純培養(yǎng)物能接種到該種植物的健康植株上并表現(xiàn)出與第一次發(fā)病時(shí)相同的癥狀 .從接種發(fā)病的植物上再分離

24、到這種病原生物的純培養(yǎng),其性狀與第一次的純培養(yǎng)相同 局限性:對(duì)復(fù)合侵染、專性寄生菌不適合。,細(xì)菌的菌落,(四)染色反應(yīng),革蘭氏染色反應(yīng):鑒定出革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌。 細(xì)菌的鞭毛染色:鑒定出鞭毛的數(shù)目和周生鞭毛或極生鞭毛。,革蘭氏染色反應(yīng),植物病原細(xì)菌革蘭氏染色反應(yīng)大多是陰性(紅色G-),少數(shù)是陽(yáng)性(紫色G+),這與細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和成分有關(guān)(先用結(jié)晶紫和碘液處理細(xì)胞壁,再用酒精或丙酮脫色,再用番紅復(fù)染)。 青霉素對(duì)革蘭氏染色陽(yáng)性的細(xì)菌作用較大,但對(duì)陰性細(xì)菌作用則較小。而鏈霉素對(duì)陽(yáng)性和陰性細(xì)菌都有殺滅作用,因?yàn)橹参锊≡?xì)菌大多屬陰性細(xì)菌,因此農(nóng)用鏈霉素在防治植物細(xì)菌病害方面廣泛應(yīng)用。,(五)生理

25、生化反應(yīng),如過(guò)氧化氫酶反應(yīng) 乳糖發(fā)酵 液化明膠等,(六)血清學(xué)反應(yīng),如ELISA、試管沉淀等。,第四節(jié) 植物類菌原體(MLO),1967年,日本學(xué)者土居養(yǎng)二(Doi,Y)首先從桑萎縮病電鏡切片中中發(fā)現(xiàn)了類菌原體(Mycoplasma like orgnism,MLO),其屬于原核生物界無(wú)壁菌門(mén)。 目前已知約有300中植物發(fā)生菌原體病害,如桑萎縮病、棗瘋病、蘋(píng)果縮果病、梨衰退病、水稻黃矮病、甘薯叢枝病、泡桐叢枝病和椰子死亡黃化病等。,泡桐叢枝病,棗瘋病,一、類菌原體的主要類群,1螺原體屬(Spiroplasma):菌體的基本形態(tài)為螺旋形,繁殖時(shí)可產(chǎn)生分枝,分枝亦呈螺旋形。植物病原螺原體只有3個(gè)種

26、,主要寄主是雙子葉植物和昆蟲(chóng)。如柑桔僵化病、玉米矮化病和蜜蜂的爬蜂病等都是螺原體侵染所致。葉蟬是傳染螺原體的媒介昆蟲(chóng),從吸食到傳染也須經(jīng)23周的循回期,接種后到發(fā)病的潛育期約46周。螺原體也可以在多年生宿主假高梁的體內(nèi)越冬存活,也可在介體葉蟬體內(nèi)越冬。,2植原體屬(Phytoplasma):植原體屬即原來(lái)的類菌原體(MycoplasmaLike Organism,MLO),菌體的基本形態(tài)為圓球形或橢圓形。菌體大小為801000nm。目前還不能在離體條件下培養(yǎng)它們。日本學(xué)者土居養(yǎng)二(Doi,Y)首先從桑萎縮病病組織切片中發(fā)現(xiàn)了病原體,稱之為類菌原體(MLO),傳播介體是桑菱紋葉蟬。在國(guó)內(nèi),除桑萎

27、縮病外,還有棗瘋病、泡桐叢枝病、水稻黃矮病、水稻橙葉病和甘薯叢枝病等,亦是由這類菌原體侵染所致。,二、類菌原體的基本特性,1. 球形,無(wú)細(xì)胞壁,只有單位膜。 2. 可以人工培養(yǎng),在培養(yǎng)基上形成“荷包蛋”狀菌落。 3. 對(duì)四環(huán)素類藥物敏感,可用于診斷和治療。對(duì)青霉素和鏈霉素不敏感,因無(wú)細(xì)胞壁。 4. 引致黃化、矮縮、叢生、小葉等癥狀。 5. 必須依賴?yán)ハx(chóng)介體傳播。葉蟬和飛虱等刺吸式口器是主要媒介。,寄生性種子植物菟絲子(Cuscuta),菟絲子是菟絲子科菟絲子屬植物的通稱,俗稱“金線草”。是一類纏繞在木本和草木植物莖葉部營(yíng)全寄生生活的一年生草本植物。 菟絲子在全世界廣泛分布,中國(guó)各地均有發(fā)生。菟

28、絲子主要寄生于豆科、菊科、蓼科、楊柳科、薔薇科、茄科、百合科、傘形科等木本和草木植物上。,菟絲子的葉退化為鱗片狀,莖為黃色絲狀物,纏繞在寄主植物的莖和葉部,吸器與寄主的維管束系統(tǒng)相連結(jié),不僅吸收寄主的養(yǎng)分和水分,并造成寄主輸導(dǎo)組織的機(jī)械性障礙,受害作物般減產(chǎn)10%20%,重者達(dá)40%50%,嚴(yán)重的甚至顆粒無(wú)收。,菟絲子以種子繁殖和傳播。種子小而多,一株菟絲子可產(chǎn)生近萬(wàn)粒種子。種子壽命長(zhǎng),隨作物種子調(diào)運(yùn)而遠(yuǎn)距離傳播,纏繞寄主上的絲狀體能不斷伸長(zhǎng),蔓延繁殖。,菟絲子防治,防治采用清潔種子,嚴(yán)禁從外地調(diào)運(yùn)帶有菟絲子種子的種苗是最基本的防治措施。 作種用的種子,應(yīng)徹底清除菟絲子后方能用作繁殖。 糞肥經(jīng)

29、高溫處理,使菟絲子種子失去萌發(fā)能力。 合理輪作或間作也有一定效果,菟絲子一般不寄生禾本科作物上,如玉米、高粱、谷子等,以這些作物與大豆輪作,或與大豆間作,玉米有屏障作用,可減輕菟絲子的發(fā)生與危害。,利用寄生菟絲子的炭疽病菌制成生物防治的菌劑,在菟絲子危害初期噴灑,可減少菟絲子的數(shù)量并減輕危害,具有防病增產(chǎn)作用。 菟絲子早期以營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)為主,其吸器多伸達(dá)皮層或終止于韌皮部,在早期進(jìn)行手工拉絲防除較容易,寄主受害也較輕,受害嚴(yán)重的田塊應(yīng)及早連同寄主一起銷毀。,補(bǔ)陽(yáng)益陰:主治腰酸腿軟等證。 養(yǎng)肝明目:可治肝腎不足,目暗不明。 補(bǔ)脾止瀉:適用于脾虛便溏,及消渴。,列 當(dāng),列當(dāng)為全寄生型的根寄生草本植物,

30、大多數(shù)寄生性較?;?,有固定的寄主,少數(shù)較廣泛。 寄主多為草本,以豆科、菊科、葫蘆科植物為主。 無(wú)真正的根,只有吸盤(pán)吸附在寄主的根表,以短須狀次生吸器與寄主根部的維管束相連。 代表:向日葵列當(dāng) (Orobanche cumana),1.不同的向日葵品種對(duì)列當(dāng)?shù)募纳潭让黠@不同,所以選用經(jīng)過(guò)鑒定在當(dāng)?shù)貙?duì)列當(dāng)具有抗性的品種是防除列當(dāng)?shù)慕?jīng)濟(jì)有效措施。 2.對(duì)重茬、迎茬地實(shí)行一定年限的輪作倒茬。由于列當(dāng)?shù)姆N子在無(wú)寄主根的分泌物時(shí)不能萌芽,且在土壤中休眠期長(zhǎng)達(dá)10年之久,而且列當(dāng)不寄生單子葉植物,所以對(duì)重發(fā)生田塊可改種非寄主作物,宜與麥類、甜菜、高粱、玉米、谷子、糜子等作物輪作,年限不少于6年。在受列當(dāng)危害的地區(qū),種植向日葵的間斷周期不得少于56年。在輪作種植其它作物的田間,必須徹底鏟除向日葵自生苗。 3.及時(shí)鏟除田間列當(dāng)苗和向日葵自生苗。在列當(dāng)出土盛期和結(jié)實(shí)前中耕鋤草23次。由于列當(dāng)從向日葵開(kāi)始形成花盤(pán)到成熟均可寄生出土,藥劑防治成本較高,因此,增加中耕次數(shù)、及時(shí)拔除列當(dāng)苗及向日葵自生苗

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