磁珠法-真假羊肉鑒定

1、真假羊肉的鑒別，洛陽惠爾納米科技有限公司，教育部教學儀器研究所，電泳樣品添加示范，學生電泳混合樣品，學生電泳過程觀察，學生電泳結(jié)果觀察，我們的合影，“假羊肉”事件，哪個是真羊肉？有沒有更科學更有說服力的檢驗方法來鑒別真假羊肉？真假羊肉的鑒別，動物細胞模式，細胞核和基因在哪里？染色體由脫氧核糖核酸和蛋白質(zhì)組成，脫氧核糖核酸鏈的總長度約為1米，基因：的脫氧核糖核酸分子有特定遺傳信息的片段，基因，基因，基因，基因?？梢酝ㄟ^什么來確定肉制品是否是羊肉？數(shù)據(jù)1:遺傳物質(zhì)脫氧核糖核酸是由四個脫氧核苷酸組成的長鏈。不同生物的脫氧核糖核酸和脫氧核苷酸序列并不完全相同，這決定了它們的生物學特性差異很大。生物關(guān)系

2、越密切，脫氧核苷酸測序的差異就越小。例如，2002年的一項研究表明，人類和黑猩猩之間的脫氧核苷酸排列只有1.23%的差異。根據(jù)研究，綿羊、雞、豬、鴨和小鼠的細胞色素B基因(大小為307bp)存在差異(約5.9%-32.9%)，可將綿羊與其他動物區(qū)分開來。通過研究山羊細胞色素B的基因序列，可以認為它是一個綿羊特異性的DNA片段。實驗假設(shè)：通過鑒定肉制品中是否存在綿羊特異性細胞色素B基因(或DNA片段)，可以確定其是否為羊肉。第一步是破碎細胞并提取脫氧核糖核酸。脫氧核糖核酸提取試劑盒完成。如何分離大量綿羊特異的DNA片段？閱讀材料2，小組討論。1993年，美國科學家穆利斯博士因發(fā)明聚合酶鏈反應(yīng)獲得

3、諾貝爾化學獎。這是一種體外特異性合成DNA片段的方法，它由幾個反應(yīng)組成，如高溫變性、低溫退火和在合適溫度下延伸，這些反應(yīng)在一個循環(huán)中進行，從而可以快速擴增靶DNA。聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，一是知道脫氧核糖核酸片段的序列，以便設(shè)計一個特定的“引物”來觸發(fā)反應(yīng)；其次，模板DNA是存在的，否則就不能獲得DNA片段。第二步是擴增綿羊的特定基因片段(聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù))。放大的基因片段仍然是肉眼看不見的。我們?nèi)绾螜z測在聚合酶鏈反應(yīng)產(chǎn)物中是否有綿羊的特定基因片段？瓊脂糖是一種多糖，加熱固化后形成網(wǎng)狀凝膠。帶負電荷的脫氧核糖核酸片段可以通過瓊脂糖凝膠網(wǎng)從負電極移動到正電極。DNA片段越小，移動越快。這種被稱為電泳的

4、方法可以用來分離脫氧核糖核酸片段和檢測脫氧核糖核酸片段的大小。閱讀3，小組討論。步驟3:檢測特定的脫氧核糖核酸片段(電泳技術(shù))，電泳儀，實驗原理簡述：通過從肉制品中提取脫氧核糖核酸，用聚合酶鏈反應(yīng)擴增綿羊特定的脫氧核糖核酸片段，然后用電泳技術(shù)檢測綿羊特定的脫氧核糖核酸片段是否存在。第一步：破碎細胞，提取DNA，移液管，測量范圍和相應(yīng)的槍頭(組件)，藍色，白色，黃色，調(diào)節(jié)測量范圍的方法，使用移液管槍，吸取液體，釋放液體，第一，第二，第一，裂解細胞加入10l蛋白酶k，繼續(xù)研磨至勻漿，加入200l裂解物，用移液管將其轉(zhuǎn)移至2.0ml EP管1，搖動至完全混合，放入編號為1，2，3，4，5， 將EP管

5、1置于56的恒溫水浴中約15分鐘，在研缽的一角充分研磨，并在保持溫度的同時解釋以下內(nèi)容(2)孵育后小指管中可能存在哪些物質(zhì)？ 蛋白質(zhì)、脂肪、糖、脫氧核糖核酸、無機鹽等。盒子里有釘子，還有許多銅釘和木釘。你怎么挑出釘子的？磁珠、生物活性基團、磁珠可特異性結(jié)合DNA、2、磁珠結(jié)合、注意：磁珠結(jié)合液在使用前必須倒置并充分混合，否則提取的DNA量可能會減少。，1號，混合磁珠結(jié)合溶液250升，倒置混合5分鐘，DNA，蛋白質(zhì)，脂質(zhì)，糖等。裂解，洗滌，500升洗滌液，磁珠與脫氧核糖核酸結(jié)合，3，洗滌，洗滌，500升洗滌液，將磁珠吸附在磁筆上，并在空氣中放置1分鐘。去除磁場，通過搖動將磁珠轉(zhuǎn)移到電生理管2；反

6、向混合，施加磁場，吸起磁珠；磁場被去除，磁珠通過搖動被轉(zhuǎn)移到電生理管3；倒置并均勻混合。注意：用磁性筆轉(zhuǎn)移磁珠時，盡量將磁珠吸干凈，以減少DNA的損失。4號、100l洗脫液，去除磁場，搖動磁筆使磁珠均勻分布在洗脫液中，56水浴10分鐘，取出EP管4，用磁筆吸收磁珠，將上清液留在EP管4中備用，4。洗脫，第2步：擴增特定的脫氧核糖核酸片段，結(jié)合數(shù)據(jù)2和視頻，至少應(yīng)該添加哪些成分？將下列組分(總體積50l)加入到0.5毫升的聚合酶鏈反應(yīng)管中：超純水32l 10 *緩沖液5l氯化鎂6l dNTP 2l引物F 1l引物r11 Taq酶1l模板DNA 2l，聚合酶鏈反應(yīng)、充分混合，從每組中取出48l，第

7、三步是檢測特定的DNA片段(電泳)。1.制備瓊脂糖凝膠；(1)取樣：將10l擴增DNA溶液放在一次性手套上，加入2l裝載緩沖液和3l熒光色素，混合均勻，用移液管吸取混合液，加入凝膠孔。(2)電泳儀的設(shè)置，電泳。注意：(1)將1)脫氧核糖核酸溶液與裝載緩沖液充分混合；(2)取樣時，將移液管直立，輕輕將液體推入凝膠孔，防止液體擴散到緩沖溶液中。2，電泳，觀察電泳結(jié)果，出現(xiàn)特異性DNA片段帶，是羊肉，沒有出現(xiàn)特異性DNA片段帶，非羊肉，總DNA，Marker，Marker，細胞色素b DNA片段，總DNA，取樣孔，500 250 50，電泳方向，討論和回答問題，如果電泳沒有出現(xiàn)相應(yīng)的。小組討論了“鑒別真假羊肉”的過程和感受，教師可以回答問題。延伸：如果肉制品中有羊肉，它與豬肉和雞肉混合在一起，如何識別它們？實驗報告的寫作要求思考：(1)如果恒溫水浴溫度過高或過低，會有什么影響？(2)孵化后小指