安捷倫液質使用中注意

1、安捷倫液質培訓,質譜特點：,1 樣品必須離子化 2 必須具有一定的真空 3 必須測量質荷比（m/z）,質譜儀的組成,inlets,Ion source,Vacuum system,Ion Optics,Mass analyzer,Detector,數(shù)據(jù)處理,離子源,ESI、APCI、復合源、 其它（APPI,MALDI）,nonpolar,Very polar,1000,10,000,100,000,APCI,ESI,分子量,ESI,低流速 窄徑柱,高流速 常規(guī)柱,高電壓,Vcap,fragmentor,源參數(shù)為什么重要？,確認噴霧氣/干燥氣/鞘流氣設置正常。 Tips: 使用含水量高的流動相

2、要適當提高氣體流量和溫度。,確認噴霧針是否缺損或者堵塞，必要時更換。 Tips: 毛細管電流、噴霧室電流是否穩(wěn)定也能判定噴霧和干燥的狀況。另外，to MS/to waste壓力差和廢液桶中殘留溶劑的積存狀況也可以顯示噴霧針的問題。,關注參數(shù)：,真空 毛細管電流(capillary current) 噴霧式電流(chamber current) HPLC泵壓,幾個名詞,TIC、EIC、ECC、BPC Tune、Calibration CID( 傳輸區(qū)、碰撞池)、SIM Mass accuracy（ppm=mass error/MW*106) Quasi-molecular ion（M+H+ M+

3、Na +）,注意事項：,1 雙蒸水、三蒸水？ 2 表面活性劑？ 3 三氟乙酸（TFA），三乙胺（TEA）? 4 關機,Agilent 質譜日常維護 -真空系統(tǒng) -ESI -APCI -毛細管的清洗和鈍化 -八級桿的清洗,任務 每日每周 每6個月 根據(jù)需要 沖洗樣品通路 X 清潔噴霧室 X 檢查前級真空泵油的液面 X 開啟氣鎮(zhèn)閥 X 檢查并清空排污瓶 X 清潔或鈍化毛細管 X 更換在線過濾器篩板 X 更換前級泵泵油 1 年 更換噴霧針 1-2 年 清潔離子光學 1-2 年 更換電子倍增器 2-3 年,質譜維護時間表,Agilent 6400 QQQ MSD 日常維護,前級泵的日常維護,Tips:

4、 當質譜開機時，就應通干燥氣，盡量避免抽入空氣。 定期檢查前級泵廢氣過濾器，如果存有較多泵油，打開氣振閥可以促使泵油回流。為防止停電或誤操作導致泵油反抽到系統(tǒng)內部，請在泵油回流后及時關閉氣鎮(zhèn)閥。 開機和放空之前，必須確認前級泵氣鎮(zhèn)閥處于關閉狀態(tài)。 分子渦輪泵降速時需要散熱，所以應避免采用直接關電源關機或突然停電。 前級真空典型值為2 torr。過高的前級真空可能源于長期未開氣鎮(zhèn)閥或者泵油需要更換。,HPLC,在線脫氣機四元泵二元泵自動進樣器 柱溫箱 檢測器,Agilent 1100/1200 在線脫氣機及溶劑管理,Agilent 1100在線脫氣機工作原理,Tips: G1322A通道內部體積

5、12 mL，G1379A/B內部體積1 mL 。更換溶劑后請沖洗2倍通道體積后再開始實驗。 使用G1379，沖洗通道時的流量最好不要大于2 mL/min。,防止堵塞溶劑過濾器 污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影響色譜泵的運行。另外，其分泌物會很容易在質譜上表現(xiàn)為干擾或者離子化抑制。這在水相溶劑中尤其如此。下列建議將會防止質譜分析受到影響并延長溶劑過濾器的使用壽命。 - 使用棕色的溶劑瓶來減緩藻類生長。 每兩天更換水相溶劑。 避免溶劑瓶暴露在直射陽光下。,Agilent 1100/1200 在線脫氣機及溶劑管理,Tips: 如果經(jīng)常使用同一方法，可以將平時放置水相的

6、A瓶，更換為預先配好的流動相（等度分析）或者初始比例的混合流動相（梯度分析）。當流動相中有機溶劑比例大于10%時，微生物生長會被抑制，可以保存較長時間。 較長時間不使用系統(tǒng)時，請用甲醇將水相管路中溶劑沖洗替換之后再停機，防止微生物生長。,Agilent 1100/1200 在線脫氣機及溶劑管理,檢查溶劑過濾器 擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，此時溶劑會因為重力流出，脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出。 查看過濾器是否變色 臨時取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常 清潔溶劑過濾器 將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下。將堵塞的過濾器放在裝有濃硝酸 （35）的燒杯里浸一小時。 用二次蒸餾水

7、徹底沖洗過濾器。 將過濾器重新裝好。 注意：不要使用沒有安裝溶劑過濾器的系統(tǒng),Tips: 如何簡單判斷脫氣機腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？ 關閉泵，擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，此時溶劑會因為重力流出，脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出。,Agilent 1100/1200 色譜泵工作原理,Agilent 1100/1200 四元泵二元泵,Agilent 1100 自動進樣器工作原理,Agilent 1100/1200 自動進樣器,HPLC常用的色譜柱接頭及管路,0.090 in.,0.130 in.,0.090 in.,0.170 in.,Swagelok,Waters,Parker,Rheodyne,Valco,Uptight,0.090 in.,0.080 in.,Troubleshooting LC Fittings, Part I