臨床標本的細菌學檢驗.ppt

1、,臨床標本的細菌學檢驗,第一節(jié) 血液及骨髓標本 一、血液標本 （一）標本采集 靜脈采血，應嚴格消毒血培養(yǎng)瓶蓋和皮膚，用無菌采血裝置采血，不換針頭，直接將血液標本注入血培養(yǎng)瓶中，注入血液后應顛倒混勻以防凝固。采用真空采血裝置可降低污染。,1、采血時間 一般應在抗菌藥物治療前，發(fā)熱初期或高峰時抽血。研究表明細菌通常在寒戰(zhàn)或發(fā)熱前1h入血，因為超過發(fā)熱峰值后，病原菌的檢出率會隨之降低。對間歇性菌血癥應在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前采集血培養(yǎng)，因為細菌流入血液與發(fā)熱通常間隔1h，實際上在發(fā)熱后由于細菌很快會從血液中清除，因此，應盡快抽取血培養(yǎng)。,2、采血部位 以無菌操作在患者肘靜脈采血。兒童和嬰幼兒其采血的

2、部位多為頸部和腹股溝，這兩個部位皮膚皺褶多，易造成皮膚寄生菌污染，因此必須嚴格消毒。消毒過程同成人，但氯己定（洗必泰）不能用于2個月以下嬰兒。成人不建議采集動脈血，不宜從靜脈導管或靜脈留置口取血，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導管內(nèi)采血，必須同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標本，有助于對比和結(jié)果解釋。靜脈導管采血時，不要棄去初段血，不要用抗凝劑沖洗。,3、采血量 成年患者推薦的采血量為每套不少于10ml，每瓶不少于5ml，最好為20ml血液，分注在2個血培養(yǎng)瓶（需氧瓶+厭氧瓶）內(nèi)。2套血培養(yǎng)（4個血培養(yǎng)瓶）應至少接種20ml血液。當培養(yǎng)的血量從2ml增加到20ml時，血培養(yǎng)的陽性率增加30

3、%50%，因為培養(yǎng)的血液量每增加1ml，陽性率增加3%5%，因此采血量與陽性檢出率呈正比關(guān)系。 用靜脈穿刺獲得的血量，成人和兒童不同。兒童，特別是新生兒很難獲得大量的血液，對嬰幼兒和兒童，一般靜脈采血15ml，當細菌濃度足夠高時，血液少于1ml也足以檢測菌血癥。標本量1ml，細菌量也增加，對于受感染的兒童每毫升血液的含菌量比成人多。,4、血培養(yǎng)套數(shù) 疑似菌血癥患者應至少采集2套血培養(yǎng)，最好為3套，每套血培養(yǎng)應包括1個需氧培養(yǎng)瓶和1個厭氧培養(yǎng)瓶。一個靜脈穿刺點只能采集一套血培養(yǎng)，采集2套血培養(yǎng)應選擇第2個靜脈穿刺點。嬰幼兒患者，推薦在不同部位同時采集2套。對感染性心內(nèi)膜炎和真菌血癥患者則應多次采

4、集。有研究表明：一套血培養(yǎng)的陽性率為65%，兩套血培養(yǎng)的陽性率為80%，三套血培養(yǎng)的陽性率為96%。,二、骨髓標本 正常人的骨髓是無菌的。若從患者骨髓中檢出細菌（排出污染），提示細菌性骨髓炎或菌血癥，敗血癥。常見病原菌同血液培養(yǎng)。 （一）標本采集 1、標本采集部位和時間 一般用骨髓穿刺針從髂骨采集骨髓標本。最好在用藥前、寒戰(zhàn)前或寒戰(zhàn)后1h發(fā)熱初期或高熱期采樣，陽性檢出率較高。 2、標本采集注意事項 嚴格無菌操作 標本采集后立即注入血培養(yǎng)瓶，送檢。,第二節(jié) 腦脊液標本 （一）標本采集 由臨床醫(yī)師以無菌操作作腰椎穿刺，抽取腦脊液23ml，盛于無菌容器中送檢。腦膜炎奈瑟菌離體后能產(chǎn)生自溶酶，迅速自溶

5、，肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌離體后也易死亡。因此，腦脊液無論涂片或培養(yǎng)，必須于采集后立即送檢，不宜將其置于冰箱保存，否則影響檢出率。,第三節(jié)呼吸系統(tǒng)標本 一、痰標本 （一）送檢指征 1、咳嗽 咳出的是膿性痰或鐵銹樣的痰。 2、咯血 獻血和痰中帶血等。 3、呼吸困難 呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛。 4、發(fā)熱 伴有白細胞以及中性粒細胞升高或C反應蛋白（CRP）明顯增高。,（二）標本采集 、采集時間 一般以晨痰為好；支氣管擴張癥患者清晨起床后進行體位引流，可采集大量痰標本。 2、標本采集方法 （1）自然咳痰法 在留取痰之前，用清水反復漱口，以減少常居菌的污染，應從氣管深部咳出痰，吐入無菌容器內(nèi)。 （2）

6、氣管鏡下采集法：在病灶附近用導管吸或用支氣管刷直接取得標本。 （3）氣管穿刺法：在環(huán)甲膜下穿刺抽取痰液，收集標本。,二、咽拭標本 （一）標本采集 用無菌棉試子輕輕擦拭患者鼻咽部粘膜，留取標本，置無菌試管內(nèi)送檢。,第四節(jié) 穿刺也標本 （一）標本采集 采用無菌方法，用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體（胸腔積液、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液或鞘膜液等）注無菌試管立即送檢。如懷疑厭氧菌感染，應做床邊接種。,第五節(jié) 泌尿、生殖道標本 一、尿液標本 （一）尿培養(yǎng)的臨床指征 以下任何一種情況時建議采集尿標本，進行細菌培養(yǎng)。 尿痛、尿急、尿頻等典型的尿路感染癥狀。 出現(xiàn)血尿和膿尿。 膀胱排空功能受損。 泌尿系統(tǒng)疾病手

7、術(shù)前。 留置導尿管時間太長，患者出現(xiàn)發(fā)熱。 尿常規(guī)中白細胞高或（或）亞硝酸鹽陽性。,（二）標本采集與運送 （1）女性：成年女性外陰部先以肥皂水清洗，再以無菌水沖洗，用無菌紗布擦拭，以手指將陰唇分開排尿，棄去前段尿，留取中段尿57ml于無菌試管內(nèi)。 （2）男性：翻轉(zhuǎn)包皮，用肥皂水清洗尿道口，用清水沖洗，留取中段尿。,（3）兒童、嬰兒：先以無菌生理鹽水棉球洗凈其外陰部或外生殖器，將無菌試管或瓶對準尿道口，以膠布固定于皮膚上，待尿排出后送檢。 （4）兩側(cè)腎盂尿：由?？漆t(yī)師采集，必須標明左右側(cè)標本，避免混淆而誤診。 （5）膀胱穿刺：此法用于厭氧菌培養(yǎng)。恥骨上皮膚經(jīng)碘酊消毒后，再以75%乙醇擦拭，用無菌

8、注射器作膀胱穿刺，吸取尿液后排去注射器內(nèi)的空氣，針頭插于無菌橡皮塞上送檢。 （6）尿標本采集應及時送檢，2h內(nèi)進行接種，否則應置48冰箱保存，冷卻保存標本時間不得超過8h。,二、生殖道標本 （一）標本采集 1、女性生殖道標本 由婦產(chǎn)科醫(yī)師用無菌棉拭采集陰道，宮頸分泌物。懷疑盆腔厭氧菌感染時，由婦產(chǎn)科醫(yī)師用注射器從陰道后穹處穿刺抽取標本，立即床邊接種于厭氧平板。 2、男性生殖道標本 翻轉(zhuǎn)包皮，用肥皂水清洗尿道口，清水沖洗，采集尿道口分泌物。采集前列腺液時，先沖洗尿道和膀胱，用手指從肛門內(nèi)按摩前列腺，使前列腺液溢出。,第六節(jié) 糞便標本 （一）標本采集 1、自然排便 采集自然排便后，挑取其膿血、粘液部分23g，液體糞便取絮狀物23ml，盛于滅菌容器內(nèi)或置于保存液（運送培養(yǎng)基）、增菌培養(yǎng)基中送檢。 2、直腸試子 對排便困難患者及嬰兒，可用直腸試子采取，即以無菌棉拭用保存液或生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)45cm（幼兒23cm）輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入卡布運送培養(yǎng)基內(nèi)或無菌試管內(nèi)送檢。,第七節(jié) 膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本 （一）標本采集 1、開放性膿腫和膿性分泌物 先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支滅菌棉試取潰瘍深處的分泌物后插入斯式運送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。一支為涂片檢查