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文檔簡介

1、1,生物化學(xué) -緒 論,2,定義: 是研究活細(xì)胞和有機(jī)體中存在的各式各樣化學(xué)分子及它們所參與的化學(xué)反應(yīng)的一門學(xué)科。是在分子水平上研究生命分子基礎(chǔ),探討生命本質(zhì)。因此是一門研究生命化學(xué)的科學(xué)。,3,任務(wù): 在分子水平來描述和解釋活細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間的全部化學(xué)反應(yīng)及其與生命活動(dòng)的關(guān)系。具體研究生物體的分子結(jié)構(gòu)與功能、物質(zhì)代謝與調(diào)節(jié)及其在生命活動(dòng)中的作用。,4,對(duì)象: 生物-自然界中一切具有生命的物 質(zhì)(微生物、植物、動(dòng)物、人)。 醫(yī)學(xué): 對(duì)象是人,但是人體細(xì)胞內(nèi)一些基本生化過程,大多是由簡單生物大腸桿菌、酵母等)的研究中獲得。,5,內(nèi)容: 一人體組織細(xì)胞內(nèi)化學(xué)分子的組成、結(jié) 構(gòu)、特性及功能 人體的化學(xué)

2、組成: 水、生物大分子、無機(jī)鹽、其它,6,生物大分子: 生物體的物質(zhì)基礎(chǔ)。對(duì)生命活動(dòng)具有十分 密切且重要作用。所以研究生命,首先要 對(duì)這類分子的化學(xué)組成、含量進(jìn)行分析。,蛋白質(zhì)、核酸、糖、脂,7,生物體主要由這些元素組成: H、C、O、N、P、S、Na、Mg、Cl、K、Ca、Mn、Fe、Co、Cu、I、Zn 99% 以上是C、H、O、N 四種元素 化學(xué)元素 構(gòu)件分子 生物大分子 細(xì)胞 組織 器官 生物體,8,章節(jié): 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能 核酸的結(jié)構(gòu)與功能 酶- 具有催化化學(xué)反應(yīng)的特殊蛋白質(zhì) 維生素- 機(jī)體不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì) 這一部分內(nèi)容叫做 敘述生化,9,二人體各化學(xué)組分所進(jìn)行的化學(xué)變化 生命的

3、特征是新陳代謝(物質(zhì)代謝):維持生命現(xiàn)象正常運(yùn)動(dòng)。 生物體不斷地和外界環(huán)境進(jìn)行著物質(zhì)交換,同時(shí)體內(nèi)的各種化學(xué)組分又時(shí)刻進(jìn)行著化學(xué)變化及更新。,10,生物體內(nèi)代謝的兩個(gè)方面: 合成代謝:由較小的分子合成較大的分子。 分解代謝:由較大的分子降解為較小的分子。 在代謝過程中,伴隨著物質(zhì)之間的相互轉(zhuǎn)化及能量的產(chǎn)生及利用。 這一部分是生物化學(xué)的重點(diǎn) 動(dòng)態(tài)生化,11,章節(jié):,糖代謝- 人體能源物質(zhì)的來源 脂類代謝- 參與能量的供給及其其它的生理活動(dòng) 生物氧化- 能量的產(chǎn)生 氨基酸代謝- 氨的處理 核苷酸代謝- 核酸的構(gòu)件分子的形成,12,三遺傳信息的儲(chǔ)存、傳遞與表達(dá) 生物體有關(guān)代謝反應(yīng),功能等生命特征的體

4、現(xiàn)就是遺傳信息最終表達(dá)的結(jié)果。,生命中心法則,逆轉(zhuǎn)錄,13,章節(jié):,DNA的生物合成- 復(fù)制(遺傳物質(zhì)的傳代) RNA的生物合成- 轉(zhuǎn)錄(遺傳物質(zhì)的表達(dá)) 蛋白質(zhì)的合成 - 翻譯(遺傳物質(zhì)的表達(dá)) 基因表達(dá)調(diào)控,14,四、機(jī)能生化,肝的生物化學(xué),15,本次課程的安排,第一部分:重點(diǎn)介紹蛋白質(zhì)、核酸、酶及維生素的結(jié)構(gòu)、基本功能及這些物質(zhì)的一些特點(diǎn)(18學(xué)時(shí)) 第二部分:介紹四大物質(zhì)的代謝及相應(yīng)的能量代謝(本課程的難點(diǎn):20學(xué)時(shí)) 第三部分:遺傳性息是如何工作的(分子生物學(xué):8學(xué)時(shí)) 第四部分:機(jī)能生化(4學(xué)時(shí)) 總復(fù)習(xí):2學(xué)時(shí),16,本課程的考核,第一部分:平時(shí)成績(出勤、上課提問、上課練習(xí)等)

5、,約占20% 第二部分:小測驗(yàn),約占30% 第三部分:期末考試,約占50%,17,蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能 蛋白質(zhì)(Protein)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)和一種具體的表現(xiàn)。研究生命的活動(dòng)必須了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。,18,含量: 約占人體固體成分的45%,是生物 體的基本組成成分之一。 分布:廣泛,幾乎所有的組織器官、細(xì)胞都 有蛋白質(zhì)存在。(目前所知約有10萬 種蛋白質(zhì)),19,第一節(jié) 蛋白質(zhì)的分子組成 一、蛋白質(zhì)的基本組成單位- 氨基酸 組成蛋白質(zhì)的主要元素: C(50-55%)、H(6-7%)、O(19-24%)、 N(13-19%)、S(0-4)、少量的金屬元素,20,比較經(jīng)典的測定蛋白質(zhì)含量的

6、方法: 凱氏定氮法:測定樣品中的含氮量,隨后通過計(jì)算得出蛋白質(zhì)量 蛋白質(zhì)量 = 含氮克數(shù)6.25,特點(diǎn):含N量比較穩(wěn)定,平均為16%,21,測的某一蛋白質(zhì)中氮的含量為5克,下面那個(gè)數(shù)值最接近于該蛋白質(zhì)的含量? 30克 60克 10克 50克 80克,22, 構(gòu)件分子:L-氨基酸 組成人體蛋白質(zhì)有20種編碼氨基酸,基本結(jié)構(gòu):,變化的側(cè)鏈,氨基,羧基,23,共同特點(diǎn): 除了甘氨酸(含C最少)脯氨酸(環(huán)狀亞氨酸)外,都具有-氨基、 -羧基 不同點(diǎn):-碳原子上的R(側(cè)鏈)基不同,24, 氨基酸的分類 化學(xué)分-脂肪族(15種)、芳香族(2種)、雜環(huán)(3種) 生物化學(xué)分-酸性(2種)、堿性(3種)、中性(

7、15種) 中性側(cè)鏈-中性極性、中性非極性 營養(yǎng)學(xué)分-營養(yǎng)必需與營養(yǎng)非必需氨基酸,25,26,天,27,28,-OH 羥基、 -SH 巰基、 -C=O 酰胺基 NH2 都是親水基團(tuán),29,30,特殊a.a:沒有遺傳密碼(非編碼a.a),而 是在蛋白質(zhì)生物合成后或合成過程 中從相應(yīng)的編碼氨基酸加工修飾形 成。 胱氨酸-由兩個(gè)半胱氨酸以二硫鍵形成 羥脯氨酸、羥賴氨酸-由賴氨酸和脯氨酸羥化形成,31,32, 氨基酸的理化性質(zhì): 1. 兩性解離與點(diǎn)等電點(diǎn)(pI),R CH COOH R CH COO- R CH COO- NH3+ NH3+ NH2,負(fù)離子 (pHpI),33,等電點(diǎn):,在某一pH溶液中

8、氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等,呈電中性時(shí),此溶液的pH為該氨基酸的等電點(diǎn) 酸性: pI 7.5 中性 pI 5.0 6.5,34,2. 紫外吸收特征(280nm),共軛雙鍵,蛋白質(zhì)定性,此吸收峰值與氨基酸的含量存在正比關(guān)系-定量,35,3. 茚三酮反應(yīng),-氨基 + 水合茚三酮,有色化合物 + RCHO + CO2,用分光光度法進(jìn)行定性、定量分析,藍(lán)紫色,36,思考題:,蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子是什么? 具有遺傳密碼編碼的氨基酸有幾種? 蛋白質(zhì)中那種元素含量穩(wěn)定,約占蛋白質(zhì)含量的百分之幾? 什么叫酸性氨基酸?有幾種?分別是-; 什么叫堿性氨基酸?有幾種?分別是-; 含硫的氨基酸有幾種?分別

9、是-;,37,哪些氨基酸具有親水基團(tuán)? 哪些氨基酸具有疏水基團(tuán)? 哪些氨基酸沒有遺傳編碼的? 氨基酸處于等電點(diǎn)時(shí),其所帶的電荷為多少? 哪些氨基酸在280 nm波長下游紫外吸收?,38,第二節(jié) 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu) 一、肽鍵: 一個(gè)氨基酸的-氨基與另一個(gè)氨基酸 的-羧基脫水縮合而成CO NH,39,肽鍵是蛋白質(zhì)分子中最基本的化學(xué)鍵 肽鍵是共價(jià)鍵,比較牢固,40, 肽:氨基酸通過肽鍵相連的化合物 寡肽:10個(gè)氨基酸相連的肽 多肽:10個(gè)氨基酸相連的肽-多肽鏈 多肽是蛋白質(zhì)不完全水解產(chǎn)物,41,絲-甘-酪-丙-亮,主鏈:N-(末)端(H-)、C-(末)端(-OH) 側(cè)鏈:R基團(tuán),氨基酸殘基:肽鏈中的每

10、個(gè)氨基酸部分,42,谷氨酰半胱氨酰甘氨酸(谷胱甘肽GSH),肽的功能:構(gòu)成蛋白質(zhì) 生物活性肽-具有調(diào)節(jié)功能,43,氧化型和還原型兩種形式 功能:保護(hù)體內(nèi)含巰基的蛋白質(zhì)(酶)不被氧 化.體內(nèi)需要足夠的還原型GSH,保持 RBC膜的完整性 其它一些重要的肽類(生物活性肽),44,二、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu),一級(jí)結(jié)構(gòu)-基本結(jié)構(gòu) 多肽鏈中氨基酸殘基的排列順序。若分子中含有二硫鍵,一級(jí)結(jié)構(gòu)也包括生成二硫鍵的兩個(gè)半胱氨酸殘基的位置。,45,蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是區(qū)分不同蛋白質(zhì)最基本、最特征的結(jié)構(gòu),一極結(jié)構(gòu)是區(qū)別不同蛋白質(zhì)的最基本、最重要的標(biāo)志之一。因?yàn)?0種氨基酸排列順序不同,數(shù)量不同,總數(shù)不同,組合成不同的蛋白質(zhì)。

11、,46,基本鍵:(共價(jià)鍵-肽鍵、一些二硫鍵),一級(jí)結(jié)構(gòu)的氨基酸排列順序是由遺傳密碼決定。遺傳順序決定了氨基酸排列順序,而排列順序又決定了蛋白質(zhì)空間構(gòu)象,從而決定蛋白質(zhì)的功能。,47,1953年Sanger,最早被確定蛋白質(zhì)一極結(jié)構(gòu)是胰島素: A、B兩條肽鏈通過二硫鍵形成 A鏈:21個(gè)氨基酸殘基,B鏈:30個(gè)氨基酸殘基,48,49,三、蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)分子內(nèi)各原子圍繞某些共價(jià)鍵的旋轉(zhuǎn)而形成的各種空間排布及相互關(guān)系-構(gòu)象 各種蛋白質(zhì)的分子形狀、理化特性和生物學(xué)活 性主要取決與蛋白質(zhì)特定的構(gòu)象 蛋白質(zhì)構(gòu)象可人為地分成二極、三極、四級(jí),50, 蛋白質(zhì)的二極結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)多肽鏈主鏈氨基酸殘基折

12、疊卷曲形成的局部肽鏈的空間結(jié)構(gòu)。,51,(2)主鏈原子局部空間排布的基本形式: -螺旋、-折疊、-轉(zhuǎn)角、不規(guī)則卷曲 維系鍵: 氫鍵等非共價(jià)鍵,-螺旋,-折疊,-轉(zhuǎn)角,52,-螺旋(helix): 肽鏈中的某段局部盤曲成螺旋,是二極結(jié)構(gòu)中最穩(wěn)定的一種結(jié)構(gòu)- 球狀蛋白質(zhì)構(gòu)象中最常見的形式。,53,特征: 螺旋方向N C 右手螺旋 每個(gè)螺旋圈平均為3.6個(gè)氨基酸殘基, 每個(gè)殘基跨距為0.15nm,每個(gè)螺距為3.60.15=0.54nm,R側(cè)鏈位于螺旋的外側(cè) 螺旋穩(wěn)定: 依賴與 C=O 和 -NH-間形成的氫鍵,54,-折疊 與-螺旋相比,比較伸展,呈鋸齒狀??伤苄员?螺旋大。,55,兩個(gè)-折疊結(jié)構(gòu)平

13、行排布,以氫鍵維系。,-片層 ( - pleated sheet structure):,56,順向平行:N端、C端方向一致 逆向平行:N端、C端方向相反(穩(wěn)定),57,-轉(zhuǎn)角(- turn): 肽鏈結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的一種1800的轉(zhuǎn) 折。第一個(gè)氨基酸的 C=O與隔幾個(gè)氨基酸殘基(一般為4個(gè))的-NH-之間形成氫鍵。比-螺旋更緊密,在球狀蛋白質(zhì)中多見。,58,不規(guī)則卷曲: 蛋白質(zhì)中一些沒有特別規(guī)則的卷曲。是蛋白質(zhì)分子的特征性二級(jí)結(jié)構(gòu)(蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的重要部位),二級(jí)結(jié)構(gòu)主要靠非共價(jià)鍵中的氫鍵維系它的穩(wěn)定性,59, 蛋白質(zhì)的三極結(jié)構(gòu) 整個(gè)蛋白質(zhì)多肽鏈在二極結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步折 疊、盤曲形成球狀、橢圓

14、、棒狀、釬維狀等不同形 狀的蛋白質(zhì)分子。包括了整條多肽鏈種全部氨基酸 原 子(主鏈、 側(cè)鏈上的所有原子)的排布。,60,組成:核心多為疏水基團(tuán),表面是親水基團(tuán),61,結(jié)構(gòu)域的形狀: 大多類似“口袋”、“洞穴”狀 這些結(jié)構(gòu)域與蛋白質(zhì)活性有直接關(guān)系,是蛋白質(zhì)的活性部位- 功能域。,結(jié)構(gòu)域:肽鏈中某些局部的二級(jí)結(jié)構(gòu)匯集在一 起,形成發(fā)揮生物學(xué)功能的特定區(qū)域,62,穩(wěn)定和維系三極結(jié)構(gòu)的鍵:,疏水鍵是維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的最主要的鍵,63,大多數(shù)蛋白質(zhì)是有一條多肽鏈組成,相對(duì)穩(wěn)定的三級(jí)結(jié)構(gòu)是特征性的空間結(jié)構(gòu),是蛋白質(zhì)分子最顯著的特征之一。 一級(jí)結(jié)構(gòu)不同 - 形成的三級(jí)結(jié)構(gòu)不同 -生理功能不同,三極結(jié)構(gòu)與蛋

15、白質(zhì)活性的關(guān)系: 具有活性的蛋白質(zhì)絕大多數(shù)有三極結(jié)構(gòu)。,64,蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu) 兩條或兩條以上具有獨(dú)立的三極結(jié)構(gòu)的肽鏈通過非共價(jià)鍵相連聚合而成。 亞基:在蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)中每一條具有獨(dú)立三極 結(jié)構(gòu)的多肽鏈,單獨(dú)存在時(shí)不具有活性。 幾個(gè)亞基結(jié)構(gòu)可以相同,也可以不同。,65,66,維系鍵:鹽鍵、疏水鍵、氫鍵 Hb:4個(gè)亞基組成 兩個(gè)亞基、兩個(gè)亞基,67,血紅蛋白不同層次的結(jié)構(gòu),68,思考題,蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分幾個(gè)層次? 蛋白質(zhì)各個(gè)層次結(jié)構(gòu)的定義 亞基出現(xiàn)在蛋白質(zhì)的哪一結(jié)構(gòu)中? 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中有哪些共價(jià)鍵和非共價(jià)鍵?這些鍵分別維系蛋白質(zhì)的哪一層次的結(jié)構(gòu) 肽和肽鍵的含義是什么?,69,第三節(jié) 蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)和功

16、能之間的關(guān)系, 一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,蛋白質(zhì)只有具有空間結(jié)構(gòu)才具有活性,而空間結(jié)構(gòu)是根據(jù)肽鏈中氨基酸殘基排列順序、數(shù)量和種類決定。 不同的一極結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì),功能也不同,70,1.蛋白質(zhì)分子中“關(guān)鍵部位”氨基酸殘基改變,會(huì)影響到它的功能,甚至造成疾病。 - 分子病:蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變,從而引起其功能的異?;騿适Ф斐傻募膊?。 如HbS: 鏈第6位谷氨酸換成纈氨酸,71,鐮刀形紅細(xì)胞貧血,HbS,N-val his leu thr pro glu glu C(146),HbS 肽鏈,HbA 肽 鏈,N-val his leu thr pro val glu C(146),血紅蛋白溶解度降低 氧分壓

17、低的外周毛細(xì)管中易沉淀并凝集 紅細(xì)胞破裂溶血、運(yùn)氧功能低下,72,天然狀態(tài),有催化活性,尿素、 -巰基乙醇,去除尿素、 -巰基乙醇,非折疊狀態(tài),無活性,核糖核酸酶,形成一級(jí)結(jié)構(gòu)的二硫鍵破壞后,生物學(xué)活性喪失。,73,2. 蛋白質(zhì)分子中“非關(guān)鍵部位”的一些氨基酸殘基的改變或缺失,不會(huì)影響蛋白質(zhì)分子的生物活性。 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)序列并不完全一樣,但只要參與活性區(qū)域形成的某些氨基酸的位置不變,將不會(huì)影響到蛋白質(zhì)功能。,74,不同種屬來源的胰島素 一級(jí)結(jié)構(gòu)不完全相同,但與特定的空間結(jié)構(gòu)形成有關(guān)的氨基酸殘基完全一樣。 51個(gè)氨基酸殘基中24個(gè)一樣,半胱氨酸殘 基的數(shù)目及位置不變,發(fā)揮功能相同。,75, 蛋

18、白質(zhì) 空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,蛋白質(zhì)具有空間結(jié)構(gòu)才具有功能,不同空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)功能不同 機(jī)體一些代謝調(diào)節(jié)- 可以通過改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象引發(fā)其功能的變化,76,四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)具有別構(gòu)作用: 生理性小分子作用與某些具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)(酶),與其活性中心以外的部位(別位)結(jié)合,引起蛋白質(zhì)(酶)的構(gòu)象發(fā)生輕微的變化,分子變得疏松或緊密,活性也發(fā)生變化(有到無、無到有、升高、降低)。,Hb是一個(gè)比較典型的可調(diào)節(jié)蛋白質(zhì) 有兩種天然的構(gòu)象: T(緊密型):與O2親和力低,不易與O2結(jié)合。 R(松弛性):與O2親和力高,易與O2結(jié)合,78,思考題,蛋白質(zhì)非關(guān)鍵部位的氨基酸改變,是否對(duì)蛋白質(zhì)功能產(chǎn)生影響 蛋白

19、質(zhì)關(guān)鍵部位的氨基酸改變,是否對(duì)蛋白質(zhì)功能產(chǎn)生影響。 分子病主要是指蛋白質(zhì)哪一層次結(jié)構(gòu)發(fā)生問題 別構(gòu)作用主要發(fā)生在蛋白質(zhì)幾級(jí)結(jié)構(gòu)上。,79,第四節(jié) 蛋白質(zhì)的分類,按組成分類,單純蛋白質(zhì):組分中只有氨基酸 結(jié)合蛋白質(zhì):組分中除了氨基酸外,還有些非 蛋白部分(輔基),種類:核蛋白、糖蛋白、脂蛋白、磷蛋白、 金屬蛋白、色蛋白(HB),80,按分子形狀分類,球狀蛋白:整個(gè)分子盤卷成球形或橢圓形,大多 是胞漿或體液中的蛋白質(zhì)。 纖維狀蛋白:分子構(gòu)象成長釬維形,大多是一些 結(jié)構(gòu)蛋白,不溶水。,81,按功能分類,活性蛋白:大多易溶于水,體內(nèi)自身代謝更新 快,有廣泛的生理性功能(酶、蛋 白激素、運(yùn)輸和儲(chǔ)存蛋白)

20、。 非活性蛋白:代謝更新慢,一些起保護(hù)、支持 功能的結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)(角蛋白、膠原 蛋白),82,第三節(jié) 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì),一、蛋白質(zhì)兩性解離特性與結(jié)構(gòu)的關(guān)系,蛋白質(zhì)是由兩性的氨基酸組成,所以也具有兩性解離的特性。,在不同的pH條件下,這些基團(tuán)可解離成帶正電荷或帶負(fù)電荷。,83,蛋白質(zhì)在溶液中的解離和帶電荷的狀況是受溶液中的H+影響 這種兩性解離的性質(zhì)可以在溶液中起緩沖作用,(pHpI),84,不同的蛋白質(zhì)一極結(jié)構(gòu)不同,氨基酸的數(shù)量、種類不同,電離基團(tuán)不同,pI不同。,蛋白質(zhì)的等電點(diǎn): 當(dāng)溶液處于某一pH值時(shí),蛋白質(zhì)分子所帶正負(fù)電荷相同,即凈電荷為零,此時(shí)溶液的pH值為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。,85,利用

21、這一特性,將混合的蛋白質(zhì)固定在同一個(gè)pH上,置于一個(gè)支持物上,利用電泳法將混合蛋白質(zhì)分離開來。,86,二、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì),大分子,屬膠體顆粒。 表面有親水基團(tuán),易溶于水 兩個(gè)因素: 水化膜:極性的親水基團(tuán)多分布在蛋白質(zhì)分子 表面, 與周圍的水分子結(jié)合,在蛋白質(zhì)顆粒表面形成 一層水膜。 電荷:蛋白質(zhì)分子表面的親水基團(tuán)能解離或結(jié)合H+, 使其表面帶有一定的凈電荷。,87,功能:水化膜的形成,可防止蛋白質(zhì)分子間因碰撞而 互相聚集 成更大的顆粒,保持蛋白質(zhì)溶液的 穩(wěn) 定性,防止溶液中蛋白質(zhì)的沉淀析出。,88,實(shí)驗(yàn)技術(shù)-透析: 利用蛋白質(zhì)的大分子不能透過一種半透膜,去除小分子,達(dá)到純化蛋白質(zhì)的目的。

22、離心:超速離心。沉淀大分子蛋白質(zhì) 沉降系數(shù)(S):單位力場中沉降速度,與分子量、分子形狀、分子密度、溶劑密度有關(guān),89,三、紫外吸收特征: 蛋白質(zhì)在紫外280nm處有最大吸收峰(主要是蛋白質(zhì)分子中含有酪氨酸、色氨酸殘基),可用于蛋白質(zhì)含量測定,90,四、蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固,變性- 在某些理化因素作用下(超聲波、高 溫、紫外線、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑 等)蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的非共價(jià)鍵斷, 空間結(jié)構(gòu)破壞,引起理化性質(zhì)改變, 生物活性喪失一極結(jié)構(gòu)未破壞) 。,91,日常生活中例子:,變性蛋白質(zhì)的特性: 1. 活性喪失 2. 溶解度降低(內(nèi)部的疏水基團(tuán)暴露,使蛋白質(zhì) 容易沉淀) 3. 黏度增加。 4.易被酶水解,肽鏈構(gòu)象由卷曲變?yōu)樯煺梗逆I暴露。,92,復(fù)性:絕大多數(shù)蛋白質(zhì)變性后不能恢復(fù)活性。 有些蛋白質(zhì)如變性時(shí)間短,變性程度 輕,在合適

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