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1、血細(xì)胞涂片檢查的內(nèi)容和注意事項(xiàng),2012年6月,血細(xì)胞涂片自身的特點(diǎn): 1涂片不易均勻:由于血液是混懸液,其中白細(xì) 胞、有核細(xì)胞、RBC、血小板的形態(tài)大小、比 重及生物活性和血漿成分等的不同和制片技術(shù)差 異、質(zhì)量分布不均勻性差異頗大。 2細(xì)胞分布和檢查的非隨機(jī)性: (1)細(xì)胞分類標(biāo)準(zhǔn)與觀念不一; (2)采樣和計(jì)數(shù)100200個(gè)白細(xì)胞的局限性; (3)細(xì)胞分布的生理變動(dòng); 3.與疾病的相關(guān)性; 4.室內(nèi)、室間分類不一致性,開展室間質(zhì)控也是促進(jìn)形態(tài)學(xué)提高重要手段,外周血涂片檢查及報(bào)告內(nèi)容: 1.WBC數(shù)及主要成分(即分類比例); 2.分類細(xì)胞比例及形態(tài)是否正常; 3.有無幼稚白細(xì)胞、幼紅細(xì)胞及異常
2、細(xì)胞情況; 4.成熟紅細(xì)胞形態(tài)(包括個(gè)體與群體、大小形態(tài)、異形)、色素狀態(tài)(中心淡染、低色素、高色素、多嗜性RBC)核殘余物及排列等情況; 5.血小板數(shù)量、形態(tài)、聚集性; 6.異常細(xì)胞、寄生蟲。,1.確診白血病。 2.貧血鑒別診斷的參考依據(jù)。 3.了解疾病感染的程度。 4.遺傳性疾病的血液依據(jù)。 5.提示血小板疾病。 6.診斷血液寄生蟲病 7.血液分析儀質(zhì)量的監(jiān)控。,形態(tài)學(xué)檢查的重要意義,染色:是識(shí)別細(xì)胞形態(tài)的重要標(biāo)記工序: 常規(guī)瑞氏-姬姆薩染色要點(diǎn):1要得到滿意、漂亮的血細(xì)胞染色標(biāo)本,新鮮涂片迅速染色是很重要的。 2染色液配制要合格; 3涂片切勿用甲醛固定(肝素抗凝),否則不著色;4染色的好
3、壞與染色液、緩沖液的質(zhì)量及比例、加液間隔時(shí)間、保持玻片染色液面的張力等染色技巧均有重大關(guān)系。染液要覆蓋涂膜面,再加緩沖液(1:2),其量要充足、混均,染色時(shí)間要充足。,一、白細(xì)胞檢查意義 1. 機(jī)體被感染的病因及感染程度。 2. 血液系統(tǒng)惡性疾病的診斷核療效評(píng)估。 3. 某些遺傳性疾病的診斷。如梅-罕氏綜合征 二、紅細(xì)胞檢查的意義 貧血的鑒別診斷 為某些疾病診斷提供依據(jù)。如MM、DIC、骨纖等 為瘧疾診斷提供重要依據(jù)。 三、血小板檢查意義 血小板疾病的診斷。 驗(yàn)證血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確程度,WBC形態(tài)學(xué)診斷技巧:1WBC數(shù)值準(zhǔn)確性估計(jì): (1)目前自動(dòng)化計(jì)數(shù)儀時(shí)有出現(xiàn)結(jié)果的偏差,低倍鏡觀察血涂片可以
4、粗略估WBC數(shù)值及分布。低倍視野WBC數(shù):正常35個(gè),增多6個(gè)以上,減低3個(gè)以下。 (2)WBC如推至片尾,分布不均,估計(jì)將有一定難度。較大的細(xì)胞如單核、異淋及中性粒細(xì)胞及不成熟細(xì)胞多在片尾,體部則多為較小的淋巴細(xì)胞,使分類造成偏差,所以分類部位在適當(dāng)調(diào)整。,2白細(xì)胞計(jì)數(shù)值限度分級(jí): (1)WBC正常范圍:4.010.0109/L; (2)WBC正常限度以下: 輕度減少(10.020.0109/L), 中度增多(20.040.0109/L), 明顯增多(40.080.0109/L) 極度增多(80.0109/L)。 以此與所測(cè)知WBC計(jì)數(shù)值作粗略對(duì)比,推斷WBC計(jì)數(shù)值的準(zhǔn)確性。 有核紅細(xì)胞單獨(dú)
5、計(jì)數(shù):有核紅細(xì)胞個(gè)/100個(gè)WBC,RBC形態(tài)學(xué)在檢驗(yàn)中易被忽視,觀察RBC形態(tài),一般以外周血涂片較為可靠。RBC形態(tài)與排列(如重疊、緡錢狀)與涂片技術(shù)、涂片部位及厚薄有很大關(guān)系。這點(diǎn)在鏡檢時(shí)應(yīng)予注意。即是合格涂片,RBC形態(tài)依然與涂片部位及厚薄等多種因素有關(guān):如取涂片中心區(qū)域,RBC中心淡染,多1/3細(xì)胞面積大小; 取自涂片薄處或尾部,RBC形態(tài)誤給人以“球形”,失去雙凹盤形,中心淡染消失,所謂類球形改變; 取厚片或制片干燥過慢,RBC未攤開,收縮變形,甚至出現(xiàn)人工中心染色過淡等; 取厚片RBC則重疊堆積,呈假“緡錢狀”,不便查清形態(tài); 玻片不清潔,油脂過多或骨髓脂肪過多,制片干燥不快,RB
6、C則會(huì)形成人工的中心淡染區(qū)或空白區(qū)。,外周血血小板形態(tài)學(xué)診斷技巧:1血小板數(shù):形態(tài)及聚集性,血涂片也是估計(jì)Plt計(jì)數(shù)主要依據(jù)。根據(jù)RBC正常500萬/ul:Plt正常值1020萬/ul=RBC:Plt=50:1(2)個(gè),一個(gè)油鏡視野RBC數(shù)約RBC200個(gè):PLT48個(gè),計(jì)數(shù)1020個(gè)油鏡視野Plt數(shù)(分別計(jì)數(shù)正常和巨大異常Plt數(shù))平均每個(gè)油鏡視野Plt數(shù)如若4個(gè)相當(dāng)于10萬/ul;8個(gè)相當(dāng)20萬/ul;2個(gè)相當(dāng)5萬/ul; 1個(gè)相當(dāng)2.5萬/ul。由于巨大和異常的PLT自動(dòng)化的儀器不能計(jì)數(shù),造成誤差。,(一):外周血涂片檢查步驟:1肉眼觀察:涂片面膜大小、厚薄是否適中,染色好壞。 2低倍鏡
7、觀察全貌: (1)涂片及染色是否合適;(2)了解白細(xì)胞數(shù)(可大體校對(duì)WBC直接計(jì)數(shù)是否正確); (3)了解白細(xì)胞大致分布及其各階段大致比例,特別要注意由于涂片過力,把WBC及成熟粒細(xì)胞大多推于片尾部位,造成分類比值誤差。片尾有無異常細(xì)胞。 (4)選擇具有代表性的細(xì)胞鏡檢區(qū)域。,3油鏡觀察:進(jìn)行WBC分類計(jì)數(shù),觀察細(xì)胞形態(tài)、比例、有無巨大或異常細(xì)胞。 (1)血涂片對(duì)WBC總數(shù)準(zhǔn)確性估計(jì):從低倍及油鏡中估計(jì)WBC數(shù)及其分布。一般區(qū)分WBC數(shù)幾個(gè)等級(jí)(油鏡視野中WBC密度、分散無重疊)。參見WBC形態(tài)診斷技巧節(jié)段。 (2)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù):血中主要兩大比例的中性成熟粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞及其他小比例細(xì)胞是否屬正常范圍及形態(tài)有無異常。 (3
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