臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢.ppt

1、臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢,主要內(nèi)容,1、標(biāo)本采集的意義和原則 2、標(biāo)本的運(yùn)送與拒收原則 3、各種標(biāo)本的采集 血液、骨髓標(biāo)本 尿液 糞便 痰及上呼吸道標(biāo)本 穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等） 膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本 生殖道標(biāo)本,標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)的一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，以反映機(jī)體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。,標(biāo) 本 采 集,標(biāo) 本 采 集,60%以上的實(shí)驗(yàn)誤差發(fā)生在分析前！標(biāo)本采集正確與否與檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有密切的關(guān)系! 因此，我們應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法。,標(biāo)本采集的意義,正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提,掌握正確的標(biāo)本采集方

2、法,為保證標(biāo)本的質(zhì)量，獲得陽(yáng)性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法、采集量和采集時(shí)間并應(yīng)及時(shí)送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時(shí)間。,基本原則,1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查 2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本 3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作 4.采樣后立即送檢 5.混有正常菌群標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng) 6.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。 7.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康?標(biāo)本的運(yùn)送原則,1、所有的標(biāo)本都必須立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2h內(nèi),保存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)24h. 2、最佳的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢. 3、對(duì)環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌

3、（對(duì)低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。,標(biāo)本的拒收原則,無(wú)標(biāo)簽、無(wú)檢驗(yàn)單不檢測(cè)，并與送檢的醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)系。 送檢延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。 送檢容器不當(dāng)或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。 標(biāo)本不符合要求不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗(yàn)要求的標(biāo)本.,臨床微生物檢驗(yàn)常見(jiàn)標(biāo)本,血液、骨髓標(biāo)本 尿液 糞便 痰及上呼吸道標(biāo)本 穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等） 膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本 生殖道標(biāo)本,一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集,血培養(yǎng)送檢指征,病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)，或同時(shí)具備以下幾種臨床表現(xiàn)時(shí)應(yīng)采集血培養(yǎng)。 1 、發(fā)熱（38）或低溫（3

4、6） 2 、寒戰(zhàn) 3 、白細(xì)胞增多（10109/L，特別有“核左移”時(shí)） 4 、粒細(xì)胞減少（成熟的多形核白細(xì)胞1109/L） 5 、血小板減少 6 、皮膚、粘膜出血 7 、昏迷 8 、多器官衰竭 9 、血壓降低 10 、呼吸加快 11、特殊情況：可疑新生兒敗血癥時(shí)，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)出細(xì) 菌，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。,血培養(yǎng)采集須知,應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集 ！ 對(duì)懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。 必須同時(shí)或間隔短時(shí)間內(nèi)采集套以上血培養(yǎng)標(biāo)本。,血培養(yǎng)采集容器,法國(guó)梅里埃公司血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)

5、瓶或安圖公司血培養(yǎng)瓶,血培養(yǎng)標(biāo)本采集方法,1、皮膚消毒 2、培養(yǎng)瓶消毒 ：(1) 用75酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。(2) 酒精作用60s。(3) 在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無(wú)菌紗布或棉簽清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。 3、血液注入血培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固 。,血培養(yǎng)采集次數(shù),成年患者：推薦同時(shí)采集套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙瓶雙臂同時(shí)采集血培養(yǎng)標(biāo)本）。 嬰幼兒患者：推薦同時(shí)采集次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。 原因： 血培養(yǎng)做1套的檢出率為65%。 做2套和3套檢出率的檢出率分別為80%和90%。 單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難臨床解釋。 在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)

6、，無(wú)需重復(fù)采取血培養(yǎng)。 兩個(gè)例外：細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥。,血培養(yǎng)采血量,成年患者：推薦采血量每瓶不少于5ml。 嬰幼兒患者：兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml，推薦采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量的1%）,注意事項(xiàng),1、嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。（最好在對(duì)側(cè)采集） 2、若同時(shí)抽取幾個(gè)項(xiàng)目的血標(biāo)本，一般注入容器的順序?yàn)椋貉囵B(yǎng)瓶抗凝管干燥試管. 動(dòng)作要迅速準(zhǔn)確，避免溶血。注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至檢驗(yàn)科細(xì)菌室 3、每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過(guò)多，以防過(guò)期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存（15-30），切勿放冰箱保存。,骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)檢查,采集部位：骨

7、髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。 采集時(shí)間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期 當(dāng)骨髓炎時(shí)或長(zhǎng)期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng),二、尿液標(biāo)本的采集,尿液標(biāo)本的送檢指征,1 有典型的尿路感染癥狀； 2 肉眼膿尿或血尿； 3 尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細(xì)胞和/或亞硝酸鹽陽(yáng)性； 4 不明原因的發(fā)熱，無(wú)其他局部癥狀； 5 留置導(dǎo)尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱； 6 膀胱排空功能受損； 7 泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。,尿液標(biāo)本采集容器,無(wú)菌試管或無(wú)菌尿液標(biāo)本留取容器,尿液標(biāo)本采集方法,1、 清潔中段尿標(biāo)本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床后用肥皂水清洗會(huì)陰部，女性應(yīng)用手分開(kāi)大陰唇，男性應(yīng)翻上包皮，仔細(xì)清洗，再用清水沖洗尿道口周?chē)?/p>

8、，開(kāi)始排尿，將前段尿排去，插入性接取中段尿約10ml于無(wú)菌容器中，立即送檢，于一小時(shí)內(nèi)接種。該方法簡(jiǎn)單、易行，是最常用的尿培養(yǎng)標(biāo)本收集方法，但很容易受到會(huì)陰部細(xì)菌污染，應(yīng)由醫(yī)護(hù)人員采集或在醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下由患者正確留取。,尿液標(biāo)本采集方法,2 、恥骨上膀胱穿刺：使用無(wú)菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液，是評(píng)估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，但有一定的痛苦，病人難以接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集,尿液標(biāo)本采集方法,3 、直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對(duì)會(huì)陰部進(jìn)行清洗消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液?？蓽p少尿液標(biāo)本的污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道

9、的細(xì)菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。,尿液標(biāo)本采集方法,4 、小兒收集包：對(duì)于無(wú)控制能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會(huì)陰部菌群污染產(chǎn)生假陽(yáng)性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。如果檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時(shí)可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M(jìn)行復(fù)查。,尿液標(biāo)本采集方法,5、 留置導(dǎo)尿管收集尿液：利用留置導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)先消毒導(dǎo)尿管外部，按無(wú)菌操作方法用注射器穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液，操作時(shí)應(yīng)防止混入消毒劑，不能從收集袋中采集尿液。長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿患者，應(yīng)在更換新尿管時(shí)留取尿標(biāo)本。,注意事項(xiàng),嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，因?yàn)槟蛞簶?biāo)本的采集和培養(yǎng)中最大的問(wèn)題是污染

10、雜菌 通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢 多數(shù)藥物均通過(guò)尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行,三、糞便標(biāo)本的采集,糞便標(biāo)本的送檢指征,1 急性腹瀉：大便次數(shù)明顯增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)熱，大便性狀為粘液便或膿血便。 2 慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等癥狀。 3 無(wú)痛性大量水樣便或米泔樣稀便。 4 先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細(xì)菌性食物中毒所致。 5 抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長(zhǎng)期抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。 6 高熱驚厥：通常為中毒性痢疾，多見(jiàn)于嬰幼兒和小兒。,糞便標(biāo)本的采集容器,一次性無(wú)菌便盒,糞便標(biāo)本采集時(shí)間,1采樣原則 腹瀉病人應(yīng)在急性期采

11、集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好在用藥之前。 2沙門(mén)菌感染 腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便,糞便標(biāo)本采集方法,自然排便采集法 自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢 直腸拭子方法 如不易獲得糞便時(shí)，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無(wú)菌棉拭子用生理鹽水濕潤(rùn)后，插入肛門(mén)內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)取出，插入無(wú)菌試管內(nèi)送檢。,注意事項(xiàng),雖糞便含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無(wú)菌容器（一次性無(wú)菌平皿）。 為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液部分。,四、痰及上呼吸道標(biāo)本的采集,痰

12、標(biāo)本送檢指征,1 咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。 2 咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血。 3 呼吸困難 4 發(fā)熱 5 胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時(shí)，會(huì)發(fā)生胸痛。 *肺部感染的患者有2550可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時(shí)作血培養(yǎng)。,上呼吸道標(biāo)本送檢指征,1病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時(shí)，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。 2細(xì)菌性咽扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達(dá)39以上。 3 上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。,痰標(biāo)本和上呼吸道標(biāo)本采集容器,一次性無(wú)菌留痰盒 咽拭子或鼻咽拭子,痰及上呼吸道標(biāo)本 采集時(shí)間,痰：一般以晨痰為

13、好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。 咽拭標(biāo)本：時(shí)間上雖無(wú)嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜,痰標(biāo)本采集方法：,自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口水漱口，再以開(kāi)水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無(wú)菌痰懷內(nèi)送檢 小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢,上呼吸道標(biāo)本（咽拭子）采集方法：,采集上呼吸道標(biāo)本通常采用無(wú)菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開(kāi)水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子

14、通過(guò)舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜,注意事項(xiàng),1 采集標(biāo)本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。 2 做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標(biāo)本若不能及時(shí)送檢，應(yīng)放4冰箱保存，以免雜菌生長(zhǎng)。 3 作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時(shí)痰液，以提高陽(yáng)性檢出率。,五、穿刺液標(biāo)本,穿刺液標(biāo)本,采集時(shí)間：當(dāng)懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后1-2日采集 采集容器：無(wú)菌容器 采集方法：采用無(wú)菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體，注入無(wú)菌試管立即送檢,注意事項(xiàng)：,如果用于檢測(cè)細(xì)菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-3

15、0分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保存，否則會(huì)使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素迅速自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌 。,注意事項(xiàng)：,如果只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查 穿刺時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作 作腦脊液培養(yǎng)時(shí)，建議同時(shí)作血培養(yǎng),注意事項(xiàng)：,為了防止穿刺液的凝固，最好在無(wú)菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液 盡可能采集更多的液體，至少1ml,六、膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本,膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集,開(kāi)放性膿腫和膿性分泌物 先以無(wú)菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無(wú)菌棉拭子拭取潰瘍深處的分泌物后插入無(wú)菌試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用 大面

16、積燒傷的創(chuàng)面分泌物 用無(wú)菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無(wú)菌試管內(nèi)送檢 封閉性膿腫 消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器抽取，將膿液注入無(wú)菌試管內(nèi)送檢,注意事項(xiàng)：,不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4保存；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外 用藥前采集標(biāo)本，嚴(yán)格無(wú)菌采樣,七、生殖道標(biāo)本,生殖道標(biāo)本檢驗(yàn),生殖道標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結(jié)核菌培養(yǎng)；解脲支原體、沙眼衣原體、淋菌的培養(yǎng)；淋菌涂片；細(xì)菌性陰道病相關(guān)檢測(cè)、真菌涂片,生殖道標(biāo)本送檢指征,1 皮膚黏膜損害：原發(fā)損害可有斑疹、丘疹、結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、糜爛、潰瘍等。繼發(fā)損害由原發(fā)損害演變而來(lái)，有萎縮或斑痕等，患者可出現(xiàn)疼痛或瘙癢癥狀。 2 全身癥狀：

17、多數(shù)無(wú)全身癥狀。偶有發(fā)熱、乏力、食欲不振等。 3 男性生殖系統(tǒng)表現(xiàn) 4 女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn) 5 疑為下列疾病時(shí)需送檢標(biāo)本：前庭大腺膿腫、外陰陰道念珠菌病、細(xì)菌性陰道病、急性子宮頸炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、產(chǎn)褥期感染。,生殖道標(biāo)本采集容器,無(wú)菌試管、男性拭子、女性拭子,生殖道標(biāo)本采集方法,1 尿道分泌物 男性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，采取從尿道口溢出的膿性分泌物或用無(wú)菌男性拭子插入尿道內(nèi)24厘米取出分泌物。如無(wú)膿液溢出，可從陰莖的腹面向龜頭方向按摩，促使分泌物溢出。 女性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道，或從尿道的后面向前按摩，使分泌物

18、溢出。無(wú)肉眼可見(jiàn)的膿液，可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子，采集標(biāo)本。,生殖道標(biāo)本采集方法,2 巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后壓迫腺體，使分泌物溢出。 3 陰道分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，用滅菌女性拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物培養(yǎng)或涂片鏡檢。 4 宮頸分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，先用無(wú)菌棉球擦取宮頸口分泌物；用女性拭子插入宮頸管2厘米采取分泌物，轉(zhuǎn)動(dòng)并停留1020秒鐘，讓拭子充分吸附分泌物，或用去針頭的注射器吸取分泌物，置入滅菌試管內(nèi)送檢 。,生殖道標(biāo)本采集方法,5 宮頸內(nèi)容物：羊膜腔感染時(shí)可經(jīng)腹壁羊膜腔穿刺抽取羊水或經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進(jìn)行病原體檢測(cè)。 6 前列腺按摩液：用前列腺按摩法采集前列腺液。 7 精液：受檢者應(yīng)在5天以上未排精，清洗尿道口，采用手淫法或體外排精法，射精于滅菌容器內(nèi)送檢。,生殖道標(biāo)本采集方法,8 潰瘍分泌物：先用生理鹽水清洗患處，用滅菌棉拭子取其邊緣或其基底部的分泌物，置滅菌試管內(nèi)送檢。 9 組織標(biāo)本：將組織研磨成細(xì)菌勻漿接種液體培養(yǎng)基。,生殖道標(biāo)本采集注意事項(xiàng),應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集。,細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本采集注意事項(xiàng)