銀杏葉提取物對(duì)小鼠離體小腸平滑肌收縮特性的影響.ppt

1、銀杏葉提取物對(duì)小鼠離體小腸平滑肌收縮特性的影響,銀杏Ginkgo biloba Lin，別名公孫樹,系銀杏科。銀 杏屬落葉喬木，是中國(guó)的特種植物，70的銀杏資源產(chǎn)于中國(guó)。,銀杏提取物(Extract of Ginkgo biloba,Egb)作為一種天然藥物，其藥性溫和，療效肯定，毒副作用極小，其單體成分復(fù)雜，包括黃酮類化合物、銀杏內(nèi)酯和白果內(nèi)酯等，據(jù)報(bào)道有抑制血小板活化因子、擴(kuò)張血管、抗氧化、調(diào)血脂等作用，對(duì)于心血管疾病、腎病綜合征、糖尿病、血管性癡呆等具有很好療效。,對(duì)小鼠離體腸管具有解痙攣?zhàn)饔茫部烧{(diào)節(jié)或?qū)褂蓛?nèi)毒素引起的腸動(dòng)力紊亂。目前Egb制劑已被廣泛應(yīng)用于臨床。本實(shí)驗(yàn)旨在通過Egb

2、灌流離體小腸標(biāo)本，觀察記錄不同濃度Egb對(duì)小鼠離體腸道平滑肌的影響，探討銀杏黃酮對(duì)腸道平滑肌的作用機(jī)制。,【實(shí)驗(yàn)原理】,胃腸道的運(yùn)動(dòng)受到自主神經(jīng)系統(tǒng)和分布于胃腸道管壁內(nèi)神經(jīng)叢的支配，離體小腸平滑肌盡管失去了外來神經(jīng)的支配，但壁內(nèi)神經(jīng)叢仍然存在，因此在一定程度上離體小腸段能獨(dú)立地進(jìn)行胃腸功能的調(diào)控。 小腸平滑肌自動(dòng)節(jié)律收縮活動(dòng)就是由于位于縱行肌與環(huán)行肌之間的Cajal間質(zhì)細(xì)胞(Interstitial Cell of Cajal,ICC)產(chǎn)生的慢波節(jié)律而起步的。而這種自發(fā)活動(dòng)的產(chǎn)生和傳導(dǎo)易受到神經(jīng)遞質(zhì)、離子環(huán)境、胃腸激素等生物活性物質(zhì)和藥物的影響。,ICC產(chǎn)生一種起搏電流觸發(fā)的慢波電流，屬于L2

3、型Ca2+電流，因此平滑肌的舒縮依賴于細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化。 平滑肌收縮活動(dòng)可因胞內(nèi)Ca2+濃度的降低而減弱，反之增強(qiáng)。肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加主要通過胞內(nèi)鈣庫的釋放和胞外攝入兩個(gè)途徑。但Ca2+內(nèi)流過量則會(huì)引發(fā)胞內(nèi)鈣離子超負(fù)荷而導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的損害。,【實(shí)驗(yàn)材料及方法】,1、實(shí)驗(yàn)材料 1.1 動(dòng)物；小鼠一只（由動(dòng)物中心提供） 1.2 藥物；銀杏葉提取物用生理鹽水配置成1% 10% 25%三個(gè)濃度的溶液 1.3 儀器；常用手術(shù)器械 恒溫平滑肌槽 張力換能器 bl-420生物信號(hào)處理系統(tǒng) 1.4 試劑；臺(tái)式液, 試驗(yàn)方法 2.1 小鼠離體小腸平滑肌標(biāo)本的制備 取健康小鼠，禁食二十四小時(shí)，

4、敲死，沿腹部中線切開，取出小腸，置于盛有室溫臺(tái)式液的燒杯中，清除腸內(nèi)容物，將其剪成2-3厘米的腸段作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本 2.2 收縮活動(dòng)的記錄方法 將標(biāo)本的一端固定于L型鉤上，置于盛有20ml臺(tái)式液的平滑肌槽中，另一端連接張力換能器，持續(xù)通混合氣體（0.95+0.05co2，每秒1-2個(gè)氣泡），溫度（37+0.5），張力負(fù)荷2g，,平衡0.5h,待系統(tǒng)穩(wěn)定后，開始試驗(yàn)。 2.3 銀杏葉提取物對(duì)小腸平滑肌自主收縮活動(dòng)的影響 待小腸收縮曲線穩(wěn)定后，依次加入銀杏葉提取物(1% 10% 25%)不同濃度的溶液，加藥間隔時(shí)間為5分鐘，觀察銀杏葉提取物對(duì) 小鼠小腸平滑肌自發(fā)收縮活動(dòng)的影響并記錄每次加入銀杏葉提取物后平滑肌收縮曲線的變化,【預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論】,不同濃度的銀杏葉提取物能夠不同程度的影響小腸平滑肌自發(fā)性收縮 低濃度和中濃度的EGB對(duì)離體小腸平滑肌有興奮作用，隨濃度增加，低濃度EGB的興奮程度成降低趨勢(shì)，中濃度的EGB的興奮程度呈升高趨勢(shì);高濃度的EGB引發(fā)抑制效應(yīng)，隨濃度增加抑制程度降低。,【注意事項(xiàng)】 加藥以前，應(yīng)先準(zhǔn)備好更換用的臺(tái)式液 上述藥