experiment.ppt

1、1,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù),講授：劉學(xué)旭,2,醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué),前言,一個(gè) 、兩個(gè),中心,主題,3,一個(gè)中心,標(biāo)準(zhǔn)化,4,標(biāo)準(zhǔn)化,動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化,實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化,5,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,動(dòng)物實(shí)驗(yàn),兩個(gè)主題,6,動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化,飼養(yǎng)管理 （生產(chǎn)）,營(yíng) 養(yǎng) 基礎(chǔ),疾病預(yù)防 根本,選種,育種 關(guān)鍵,質(zhì)量控制,遺傳控制,微生物,寄生蟲(chóng)控制,環(huán)境控制,營(yíng)養(yǎng)控制,7,實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化,實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)驗(yàn)技術(shù),8,動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 通過(guò)生物學(xué)手段，研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的反應(yīng)、表現(xiàn)、發(fā)生、發(fā)展規(guī)律以及有關(guān)的技術(shù)問(wèn)題,并將結(jié)果推論到人的過(guò)程。,9,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)： 研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的各種條件、方法、技術(shù)，以保證取得科學(xué)的、完整的、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。,10,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的要

2、求.,1、科學(xué)性,2、經(jīng)濟(jì)性,3、倫理性,11,科學(xué)性要求,標(biāo)準(zhǔn)化的動(dòng)物,標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)條件,標(biāo)準(zhǔn)化的操作規(guī)程,12,經(jīng)濟(jì)性要求,動(dòng)物的選擇,實(shí)驗(yàn)方法的選擇,13,倫理性要求,動(dòng)物福利,3R原則,14,第一講 實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備 內(nèi)容:,1、實(shí)驗(yàn)條件的準(zhǔn)備,2、實(shí)驗(yàn)技術(shù)的準(zhǔn)備,3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備,15,第一節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)條件的準(zhǔn)備,一 動(dòng)物飼養(yǎng)條件的準(zhǔn)備 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需要一個(gè)觀察動(dòng)物反應(yīng)的飼養(yǎng)場(chǎng)所，既動(dòng)物觀察室。不同等級(jí)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，需要不同環(huán)境條件的動(dòng)物觀察室。,16,（一）普通動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察室環(huán)境設(shè)施條件要求 環(huán)境特點(diǎn):,1、開(kāi)放系統(tǒng),2、環(huán)境和微生物控等級(jí)較低,3、不能完全控制傳染因子。,17,（

3、二）清潔動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察室環(huán)境設(shè)施條件要求 環(huán)境特點(diǎn)：,1、屏障或半屏障系統(tǒng),2、所有實(shí)驗(yàn)用品經(jīng)滅菌處理,3、實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)出要嚴(yán)格按屏障系統(tǒng)操作規(guī)程操作,必需設(shè)備：超凈工作臺(tái),18,(三）SPF級(jí)以上動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察室環(huán)境設(shè)施條件要求 環(huán)境特點(diǎn)：,1、屏障系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)。,2、所有實(shí)驗(yàn)用品經(jīng)嚴(yán)格滅菌處理。,3、實(shí)驗(yàn)人員要嚴(yán)格按隔離系統(tǒng)操作規(guī)程操作。,19,清潔級(jí)和SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)設(shè)施,1、屏障系統(tǒng)飼養(yǎng)室,2、空氣層流架和IVC系統(tǒng),3、有過(guò)濾帽的飼養(yǎng)盒,20,二、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地的準(zhǔn)備,實(shí)驗(yàn)操作室,動(dòng)物手術(shù)室,細(xì)胞培養(yǎng)室,其他特殊觀察室,21,三、實(shí)驗(yàn)藥品、試劑的準(zhǔn)備,22,四、實(shí)驗(yàn)器械的準(zhǔn)備,實(shí)驗(yàn)器械準(zhǔn)備

4、得充分、適當(dāng)，有助于實(shí)驗(yàn)的順利完成。,不同類(lèi)型、部位的實(shí)驗(yàn)使用的實(shí)驗(yàn)器械種類(lèi)、數(shù)量不盡一致。,實(shí)驗(yàn)器械包括完成實(shí)驗(yàn)所需要的檢測(cè)儀器、實(shí)驗(yàn)時(shí)動(dòng)物的固定器械、動(dòng)物外科手術(shù)器械.,23,（一） 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的、要求、內(nèi)容不同而不同。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)檢查是否準(zhǔn)備就緒。,24,(二) 常用動(dòng)物外科手術(shù)器械,（三）手術(shù)器械的消毒 1、煮沸滅菌法、 2、 高壓蒸氣滅菌法 3、化學(xué)藥品滅菌法。,25,（四）敷料、手術(shù)巾、手術(shù)衣、帽、口 罩的消毒,26,五. 手術(shù)人員的準(zhǔn)備 為了保證無(wú)菌手術(shù)的進(jìn)行,手術(shù)人員應(yīng)作一系列的無(wú)菌的準(zhǔn)備。不管做什么等級(jí)動(dòng)物的手術(shù)，都應(yīng)該遵循無(wú)菌手術(shù)的基本原則。 （一）手術(shù)所需人數(shù)

5、（二）更衣 （三）手、臂的清潔和消毒,27,第二節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)的準(zhǔn)備,一 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)理論知識(shí)的準(zhǔn)備,（一）了解實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的基礎(chǔ)知識(shí) 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、家畜家禽及部分野生動(dòng)物。特別是要熟悉動(dòng)物的生物學(xué)特性，解剖生理結(jié)構(gòu)，這對(duì)開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究是十分有益的。,28,（二）掌握動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)和基本技能 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是一項(xiàng)系統(tǒng)的工作，涉及各種實(shí)驗(yàn)技術(shù)、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)手段、以及相關(guān)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。,29,二 、實(shí)驗(yàn)技能的準(zhǔn)備,全程預(yù)試驗(yàn)：演習(xí)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,局部預(yù)試驗(yàn)：訓(xùn)練技術(shù)難點(diǎn),預(yù)試驗(yàn).,30,第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇是醫(yī)學(xué)研究中首要考慮的問(wèn)題。選擇恰當(dāng)與否關(guān)系到課題的質(zhì)量，經(jīng)費(fèi)開(kāi)支，研

6、究途徑及方法的簡(jiǎn)繁，甚至影響到課題的成敗及研究結(jié)果的正確性。,31,一 選擇原則,（一）相似性原則 在醫(yī)學(xué)研究中選用那些生物學(xué)特性和解剖生理特點(diǎn)與人類(lèi)相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物更具有實(shí)際意義。,32,1、結(jié)構(gòu)和功能的相似性 在可能的情況下，盡量選用那些生物學(xué)特性和解剖生理特點(diǎn)與人類(lèi)相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。一般說(shuō)來(lái)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物愈高等，進(jìn)化程度愈高，其機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜，反應(yīng)就愈接近人類(lèi)。,33,2、年齡狀態(tài)的相似性 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命與人具有很大的差異，但都可以找到與人的生長(zhǎng)發(fā)育階段相對(duì)應(yīng)的時(shí)期。,34,3、群體分布的相似性 人類(lèi)群體屬于自然分布群體類(lèi)型。在以群體為研究對(duì)象的課題中，要考慮選擇與人類(lèi)群體基因型及表現(xiàn)型

7、分布類(lèi)型相似的動(dòng)物。,35,生態(tài)或健康狀況的相似性 在動(dòng)物的遺傳、環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)控制相同的情況下，其微生物控制和健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響就非常重要。 一般無(wú)菌動(dòng)物是飼養(yǎng)在超常生態(tài)環(huán)境條件的動(dòng)物，用于一些特殊的研究。 SPF動(dòng)物和清潔動(dòng)物是飼養(yǎng)在健康生態(tài)環(huán)境條件下的動(dòng)物，用于多數(shù)科學(xué)研究。,36,5. 疾病特點(diǎn)的相似性 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病能局部或全部地反映與人類(lèi)類(lèi)似的疾病過(guò)程和特點(diǎn)，可用于研究相關(guān)的人類(lèi)疾病。,37,操作實(shí)感的相似性 體型大的動(dòng)物用于外科手術(shù)或教學(xué)示教中比體型小的動(dòng)物在操作實(shí)感更接近人類(lèi)。,小香豬,38,（二）特殊性原則 1、動(dòng)物解剖、生理的特殊性 不同種系的動(dòng)物的解剖生理特

8、征既有共性又存在差異，充分利用這些共性和差異，并符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?，是保證實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。,39,2、對(duì)刺激反應(yīng)的特殊性 不同種系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)相同因素的刺激反應(yīng)既有共同性的一面，也存在一些特殊反應(yīng)，同樣的刺激對(duì)一些動(dòng)物敏感，但對(duì)另外一些動(dòng)物可能不敏感。因此在實(shí)驗(yàn)研究中選用那些有特殊反應(yīng)、對(duì)實(shí)驗(yàn)研究敏感的動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，也是保證實(shí)驗(yàn)成功的重要因素。,40,（三）標(biāo)準(zhǔn)化原則 標(biāo)準(zhǔn)化原則是指動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中選擇與課題研究的目的、內(nèi)容、水平相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。只有選用經(jīng)微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)、遺傳學(xué)、環(huán)境及營(yíng)養(yǎng)控制的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，才能排除生物因素、遺傳因素、環(huán)境及營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。,41,（四）規(guī)

9、格化原則 規(guī)格化原則是指選擇與實(shí)驗(yàn)要求一致的動(dòng)物規(guī)格。動(dòng)物的規(guī)格是指對(duì)動(dòng)物在年齡、體重、性別、生理及健康狀況等量和質(zhì)的規(guī)定。同種動(dòng)物不同的規(guī)格對(duì)外界刺激的反應(yīng)存在差異。,42,1、 不同的動(dòng)物年齡，有不同的生物學(xué)特性，對(duì)實(shí)驗(yàn)刺激的反應(yīng)也隨著年齡的不同而有明顯變化。,2 標(biāo)準(zhǔn)化的健康實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重與年齡一般呈正相關(guān)，選擇動(dòng)物時(shí)，可按體重選擇。,年齡,體重,43,3 同種動(dòng)物不同性別對(duì)外界刺激的反應(yīng)不一致。因此，一般而言，實(shí)驗(yàn)若對(duì)動(dòng)物性別無(wú)特殊要求，則宜選用雌雄各半。以避免由性別差異造成的差異。,4 、 動(dòng)物不同的生理狀態(tài)，機(jī)體對(duì)某些刺激的反應(yīng)有較大的差異。,性別,生理和健康狀況,44,（五） 經(jīng)

10、濟(jì)性原則 經(jīng)濟(jì)原則是指在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下，盡量選用容易獲得、價(jià)格便宜和飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)的動(dòng)物。,45,二 常用試驗(yàn)中動(dòng)物的選擇,46,毒理學(xué)研究中的選擇 在試驗(yàn)品毒性試驗(yàn)研究中，選擇何種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取決于該動(dòng)物對(duì)試驗(yàn)品的反應(yīng)，以及試驗(yàn)品在該動(dòng)物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄與人類(lèi)的異同程度。因此，作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，選擇動(dòng)物應(yīng)當(dāng)注意以下幾個(gè)方面的問(wèn)題。,47,1、不同種屬的動(dòng)物對(duì)試驗(yàn)品的毒性反應(yīng)有質(zhì) 與量的區(qū)別。同一試驗(yàn)品對(duì)不同種屬動(dòng)物 的毒性反應(yīng)是有差異的，甚至有本質(zhì)的不 同。因此在毒理研究中，選擇動(dòng)物時(shí)，應(yīng) 至少選擇兩種動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)且種屬差異越 大越好。一般應(yīng)選擇一種嚙齒類(lèi)動(dòng)物和一 種大動(dòng)物。,48,2

11、、通常情況下，動(dòng)物的進(jìn)化程度愈高， 對(duì)試驗(yàn)品毒性反應(yīng)愈敏感。,49,3、在選擇動(dòng)物規(guī)格方面，選擇未成年的動(dòng) 物、雌雄各半較為合適（對(duì)年齡有 特殊要求的除外）。生長(zhǎng)期動(dòng)物對(duì)毒 性反應(yīng)比老年動(dòng)物敏感。動(dòng)物的性 別不同對(duì)試驗(yàn)品的毒性反應(yīng)存在差異。,50,二 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的購(gòu)入 在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作中，動(dòng)物的購(gòu)入是一個(gè)重要的環(huán)節(jié)。在購(gòu)入動(dòng)物前，應(yīng)確定購(gòu)入動(dòng)物的種類(lèi)、品系、規(guī)格、數(shù)量及動(dòng)物微生物控制等級(jí)等。購(gòu)入動(dòng)物時(shí)應(yīng)注意以下幾個(gè)方面的問(wèn)題。,51,1、購(gòu)入或領(lǐng)取動(dòng)物前，應(yīng)檢查各項(xiàng)準(zhǔn)備工作是否就緒，如飼養(yǎng)動(dòng)物的器具、器材是否準(zhǔn)備好，飼養(yǎng)室的衛(wèi)生和消毒情況；此外，還應(yīng)檢查動(dòng)物的籠卡、實(shí)驗(yàn)記錄本、墊料、飼料

12、、秤等實(shí)驗(yàn)必須品是否準(zhǔn)備好。,52,2、購(gòu)入動(dòng)物時(shí)，應(yīng)向供應(yīng)單位及時(shí)索取動(dòng)物的遺傳背景、微生物背景、質(zhì)量合格證、動(dòng)物的年齡、體重等資料。,53,3、購(gòu)入動(dòng)物時(shí)，無(wú)論運(yùn)輸距離的遠(yuǎn)近，都應(yīng)考慮運(yùn)輸環(huán)境的溫度、濕度、飲食以及途中污染和窒息死亡等問(wèn)題。,54,4、購(gòu)入清潔級(jí)以上的動(dòng)物，應(yīng)采用帶有空氣過(guò)濾膜的無(wú)菌運(yùn)輸罐或帶過(guò)濾帽的籠盒運(yùn)輸，嚴(yán)格檢查其密封狀況。,55,5 、新購(gòu)進(jìn)的動(dòng)物不能直接進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室， 應(yīng)將動(dòng)物雌雄分開(kāi)，并分籠在隔離區(qū)飼養(yǎng) 一段時(shí)間，以便動(dòng)物得以恢復(fù)體能并適應(yīng) 新的環(huán)境。,56,6、無(wú)論購(gòu)入何種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，都應(yīng)同時(shí) 購(gòu)入相應(yīng)數(shù)量的飼料和墊料。,57,三、動(dòng)物模型準(zhǔn)備,58,（一）

13、概念 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類(lèi)疾病表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。 使用動(dòng)物模型是當(dāng)代生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)研究中一種便于認(rèn)識(shí)客觀事物的實(shí)驗(yàn)方法和手段。通過(guò)模型的研究可以有意識(shí)地改變那些在自然條件下不可能或不容易排除的因素，以觀察模型的反應(yīng)。,59,（二）使用動(dòng)物模型的意義 1、 避免在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來(lái)的 風(fēng)險(xiǎn)。 如：外傷、中毒、腫瘤和輻射病等。,60,2、應(yīng)用動(dòng)物模型可以隨時(shí)復(fù)制的特 點(diǎn)，得到平時(shí)臨床上不易見(jiàn)到的疾 病。 如： 放射病、毒氣中毒、烈性傳 染病、戰(zhàn)傷等。,61,3、用動(dòng)物提供的模型可以克服人類(lèi)某些疾病的潛伏期長(zhǎng)，病程長(zhǎng)和發(fā)病率低的缺點(diǎn)。 潛伏期長(zhǎng)的疾病：腫瘤、

14、慢性氣管炎、動(dòng) 脈粥樣硬化、遺傳病等。 發(fā)病率低的疾?。好庖咝浴⒋x性、內(nèi)分 泌和血液病等。,62,4、可以嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，排除各種干擾。 臨床上疾病較復(fù)雜，影響因素多，如：身患多種疾病、病人的年齡、性別、體重、遺傳、生活地區(qū)和規(guī)律，營(yíng)養(yǎng)狀況等各不相同。 動(dòng)物復(fù)制的疾病模型，可以選擇相同品種、品系、性別、年齡、體重，以及相同的質(zhì)量控制和飼養(yǎng)條件等。,63,5、 樣品收集方便。 收集動(dòng)物疾病模型的樣品不受時(shí)間和條件的限制，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要隨時(shí)采集。,64,（三） 動(dòng)物模型的分類(lèi) 1、 按產(chǎn)生的原因分類(lèi).,（1）誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型 （Experimental Animal Models）,（2

15、）自發(fā)性動(dòng)物模型 （Spontaneous Animal Models）,（3）轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型 (Transgenic animal,gene knock-out animal),65,誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型： 是指實(shí)驗(yàn)者使用物理的、化學(xué)的和生物 的致病因素作用于動(dòng)物造成動(dòng)物組織、器官 或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類(lèi)似人類(lèi)疾病 時(shí)的功能、代謝障礙或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變。,. 機(jī)械損傷、放射線損傷、氣壓、手術(shù)等 化學(xué)藥致癌、化學(xué)毒物中毒、強(qiáng)酸強(qiáng)堿燒 傷、某種有機(jī)成分的增加或減少導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng) 性疾病等。 細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)、生物毒素等 。,物理因素 :,化學(xué)因素 ：,生物因素 ：,復(fù)合因素 ：,

16、多種因素誘導(dǎo).,67,自發(fā)性動(dòng)物模型： 是指在自然情況下所形成的疾病模型或者經(jīng)有意識(shí)的人工處置發(fā)生的疾病，并能穩(wěn)定遺傳給后代的疾病模型。包括人工培育的突變系和近交系的各種疾病模型。 如：無(wú)胸腺裸鼠、高血壓大鼠、肥胖癥小鼠等。,68,需要指出： 1、以上兩種動(dòng)物模型各有其優(yōu)缺點(diǎn)。其優(yōu) 缺點(diǎn)只是相對(duì)的。 2、很多疾病模型可用不同方式獲得。,69,3、不同方法復(fù)制的動(dòng)物模型在發(fā)病機(jī)理和 疾病內(nèi)在特征方面存在著各自的特點(diǎn)。 4、大部分自發(fā)性動(dòng)物模型是通過(guò)人為定向 培育而成的，與人類(lèi)自然發(fā)生的疾病在 很多方面有差異。,70,轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型： 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：是指用基因工程技術(shù)將外源目的基因通過(guò)生殖

17、細(xì)胞或早期胚胎導(dǎo)入胚胎染色體基因組內(nèi)，使之穩(wěn)定整合并能傳給后代的一類(lèi)動(dòng)物。 基因敲除動(dòng)物：是指用相應(yīng)的分子生物學(xué)技術(shù)將結(jié)構(gòu)已知但功能未知的基因去除，或用其他序列相近的基因?qū)⑵淙〈囊活?lèi)動(dòng)物。,71,2、 按實(shí)驗(yàn)所用對(duì)象分類(lèi).,（1）整體動(dòng)物模型,（2） 離體器官，組織動(dòng)物模型,（3）細(xì)胞株動(dòng)物模型,72,（四） 動(dòng)物模型的設(shè)計(jì)原則 1、相似形 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型應(yīng)盡可能地相似于人類(lèi)疾病。 如：大鼠的自發(fā)性高血壓。 復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)，應(yīng)注意動(dòng)物的選擇,73,2、 重復(fù)性 理想的動(dòng)物模型應(yīng)該是可以重復(fù)的。 保證動(dòng)物模型具有重復(fù)性的措施.,（1）選用標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,（2）選用標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)施,（3）保

18、證復(fù)制因素的一致性,74,3、 可靠性 復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)可靠地反映人類(lèi)疾病， 疾病的主要癥狀和體征明顯，不能出現(xiàn)與實(shí) 驗(yàn)無(wú)關(guān)的疾病。 注意動(dòng)物的選擇和動(dòng)物的質(zhì)量,75,4、 適用性和可控性 疾病模型應(yīng)盡量考慮在今后臨床上的應(yīng)用和 便于控制其發(fā)展，以利于研究。 如：雌激素終止大、小鼠早期妊娠的模型無(wú)實(shí) 用性。 動(dòng)物+制模因子=結(jié)果散發(fā)或死亡 無(wú)法控 制模型的發(fā)展方向和速度，無(wú)價(jià)值。,76,5、 易行性和經(jīng)濟(jì)性 復(fù)制動(dòng)物模型應(yīng)盡量做到方法簡(jiǎn)單、 容易，合乎經(jīng)濟(jì)的原則。,77,（五） 影響動(dòng)物模型制作的因素,78,1、致模因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影響： 致摸因素的劑量及在相關(guān)動(dòng)物上的反應(yīng)影響動(dòng)物模型的復(fù)

19、制。 因此造模時(shí)應(yīng)注意.,（1）致模因素的選擇,（2） 致模因素的劑量,（3）致模因素與模型的相關(guān)信息,79,2、動(dòng)物因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影響,（1）動(dòng)物種類(lèi)的影響,（2）動(dòng)物品系的影響,（3） 年齡和體重的影響,（4）性別因素的影響,（5） 生理狀態(tài)和健康因素影響,80,動(dòng)物種類(lèi)的影響： 不同種的動(dòng)物存在許多不同的特點(diǎn)，動(dòng)物種類(lèi)選擇不當(dāng)將影響動(dòng)物模型的復(fù)制。,81,動(dòng)物品系的影響： 同種不同品系的動(dòng)物對(duì)致模因素的反應(yīng)不 一致。,82,年齡和體重的影響： 動(dòng)物的壽命差異較大，解剖生理特征和反應(yīng)隨年齡而明顯變化，一般幼齡動(dòng)物比成年動(dòng)物敏感，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，選擇相應(yīng)年齡的動(dòng)物復(fù)制模型（健康動(dòng)物年齡

20、與體重有相關(guān)性）。,83,性別因素的影響： 同種、同品系，不同性別的動(dòng)物，對(duì)某些反應(yīng)不一致。,84,生理狀態(tài)和健康因素影響: 動(dòng)物處在不同的生理狀態(tài)和不同的健康狀況對(duì)致模因素的反應(yīng)差異很大。 如：肝功能衰竭動(dòng)物模型，不能選用患嚴(yán) 重球蟲(chóng)病的家兔，因球蟲(chóng)病影響肝功能。,85,3、實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影 響 （1）實(shí)驗(yàn)季節(jié) 不同季節(jié)，動(dòng)物對(duì)某些反應(yīng)可能不一致，對(duì)跨季節(jié)的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)可能產(chǎn)生影響。,86,（2）晝夜不同的影響 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體溫、血糖、基礎(chǔ)代謝的、內(nèi)分泌等隨晝夜的不同呈有節(jié)律的變化，在復(fù)制模型時(shí)要注意晝夜不同對(duì)模型的影響。,87,（3）麻醉深度的影響 不同的麻醉藥、劑量對(duì)動(dòng)物麻醉

21、效果有差異，這種差異會(huì)影響模型的復(fù)制。,88,（4）手術(shù)技巧的影響 手術(shù)熟練，將減少對(duì)動(dòng)物的刺激，損傷和出血能提高模型的成功率。,89,（5）實(shí)驗(yàn)給藥的影響 給藥途徑、劑量和熟練程度不同會(huì)對(duì)造模產(chǎn)生影響。,90,（6）對(duì)照組對(duì)造模的影響 對(duì)照是檢測(cè)模型是否成功的重要手段。,91,4、環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型的影響,環(huán)境因素是影響造模及其實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素，居住條件、光照、噪聲、氨濃度、溫度、濕度、氣流速度等任何一項(xiàng)都不容忽視. 營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型，特別是長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)，影響顯著，應(yīng)予以重視。造模過(guò)程中應(yīng)注意給水量充分和給予符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的飲水。,92,（六）動(dòng)物模型的制作 1、制模前的準(zhǔn)備工作

22、。 2、制模動(dòng)物的選擇。 3、制模材料的選擇。 4、制模方法的確定。 5、制模環(huán)境的確定。 準(zhǔn)備就緒，開(kāi)始制模。,93,實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作就緒，接下來(lái)開(kāi)始作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，下堂課講實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的基本技術(shù)和方法。,94,第三講 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的基本技術(shù)和方法,95,第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定 抓取與固定是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù)，其目的是使動(dòng)物保持在安靜的狀態(tài)下，順利地進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。 不同種類(lèi)的動(dòng)物的抓取與固定方法不盡一致。 同種動(dòng)物不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)內(nèi)容，抓取與固定方法也可以不同。 不同實(shí)驗(yàn)者的操作習(xí)慣上也存在差異。,96,一、小鼠 （一）、抓取 用右手拇指和食指的指腹抓住尾部中央提起或用兩手捧起。,97,（二）

23、、固定 1、徒手固定 （1）將小鼠提起放在飼養(yǎng)盒蓋子上，輕輕向后拉住。（2）用左手拇指和食指抓住頸、背部中央皮膚。,98,（3）翻轉(zhuǎn)抓住頸背部的左手，右手拉住鼠尾再用 左手的小指壓住尾根部，使整個(gè)小鼠呈一條直線。,99,2、固定板（器）固定 （1）將小鼠麻醉后，用細(xì)繩捆住小鼠四肢。 （2）準(zhǔn)備一個(gè)15-20cm，邊緣釘有5個(gè)釘子 的方木板。 （3）將四肢用細(xì)繩固定在木版兩側(cè)的釘子 上，在上顎切 齒處用細(xì)繩 固定在木版前方的釘子上。,100,固定板固定適用于大多數(shù)動(dòng)物手術(shù)。 小鼠固定器適用于尾靜脈注射。,101,二、大鼠和地鼠 （一）抓取 1、 周齡較小的大鼠和地鼠，可以像小鼠一樣抓住尾部提起。

24、,102,2、周齡較大的大鼠可張開(kāi)左手虎口，迅速將拇、食指插入大鼠的腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身體中段，并將其保持仰臥位，然后調(diào)整左手拇指的位置，緊抵在下頜骨上即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作 。,103,注意： 操作者第一次抓取大鼠時(shí)，最好戴防護(hù)手套； 不能捉提尾尖，也不能長(zhǎng)時(shí)間將大鼠懸在空中。,104,（二）固定 1、徒手固定：對(duì)體重較小的大鼠可用拇指、食指捏住大鼠耳部及頸部皮膚，余下三指緊捏住背部皮膚，置于掌心，調(diào)整好大鼠在手中的姿勢(shì)即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。如：灌胃、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射等實(shí)驗(yàn) 。,105,2、固定板固定：方法與小鼠固定板固定相同， 只是需選擇更大一些的固定板。 3、固定器

25、（盒）固定：方法與小鼠固定器（盒） 固定相同，只是固定器較小鼠的大。同樣適用 于大鼠尾靜脈注射。,106,三、豚鼠 （一）抓取 抓取幼齡豚鼠時(shí)，用兩手捧起；成熟豚鼠可以用左手大把抓起。,107,注意： 豚鼠性情溫和，一般不傷人，但膽小易驚，易造 成自傷。抓取時(shí)，不能太粗野，更不能抓腰腹部， 在操作過(guò)程中，如果豚鼠掙扎，手不要越握越緊， 否則會(huì)造成豚鼠呼吸困難，甚至死亡。,108,（二）固定 1、徒手固定：用左手的食指和中指放在豚鼠 頸背部?jī)蓚?cè)，拇指和無(wú)名指放在肋部，分別用手指挾住左右前肢抓起，然后反轉(zhuǎn)左手，用右手的拇指和無(wú)名指挾住右后肢，用中指和無(wú)名指挾住左后肢，使鼠體成為一條直線。,109,

26、2、固定板（器）固定：與大、小鼠，豚鼠固 定板固定基本一致。,110,四、實(shí)驗(yàn)兔 （一）抓取 抓住頸背部皮膚及兩耳提起，并用左手托住兔腹部或臀部，使其重量主要落在左手上。,111,注意： 家兔溫順，一般不會(huì)咬人，但腳爪較銳利，要 防止被抓傷。另外抓取時(shí)不能只提兔耳或四肢， 也不能用單手只抓頸背部皮膚。,112,（二）固定 1、徒手固定：用一只手抓住兔的頸背部皮膚，另一只手抓住兔的兩后肢，固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。,113,也可以坐在椅子上用一手抓住兔頸背皮膚和兩耳，大腿挾住兔的后半身，用另一只手抓住兩前肢將兔固定。此固定方法適用于腹腔、肌肉注射，及經(jīng)口給藥。,114,2、固定盒固定 ：此固定方法適用于頭

27、、耳部位實(shí)驗(yàn)。,115,3、固定板（臺(tái)）固定 ：此固定方法可使兔俯臥、仰臥或側(cè)臥固定，適宜于兔頭、頸、軀干手術(shù)及其它實(shí)驗(yàn)操作。,116,五、實(shí)驗(yàn)犬 （一）抓取 對(duì)未經(jīng)馴服和調(diào)教的外購(gòu)犬抓取時(shí)，可用特 制的長(zhǎng)柄鐵鉗夾住犬的頸部，由另一人用布帶 或粗繩縛其嘴，并將布帶、繩固定在狗耳后頸 部，防止脫落 。 注意： 狗性情兇惡、咬人，特別是對(duì)陌生人有攻擊 性。對(duì)剛購(gòu)入的狗要特別小心，避免被其咬傷。 在縛嘴時(shí)，動(dòng)作要迅速，捆綁松緊要適中。,117,（二）固定 實(shí)驗(yàn)臺(tái)固定：用特制的長(zhǎng)柄鐵鉗夾住犬的頸 部后，麻醉動(dòng)物。將麻醉的犬放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上， 再用粗棉帶（繩）固定四肢于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。并將 犬舌拉出。此固定方法仰

28、臥位適用于口腔、頸、 胸、腹、四肢等部位的實(shí)驗(yàn)，俯臥位適用于腦、 背部位的實(shí)驗(yàn)。,118,119,不管采用哪種抓取與固定方法，都應(yīng)遵守的基本原則是： 1.保證實(shí)驗(yàn)人員的安全。 2.防止動(dòng)物意外損傷，禁止采取粗暴的動(dòng)作。 因此在抓取與固定動(dòng)物時(shí)，應(yīng)了解動(dòng)物的生活習(xí)性，生理解剖結(jié)構(gòu)，體重、體型，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容確定動(dòng)物的抓取與固定方法。,120,第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)與標(biāo)記 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，當(dāng)使用的動(dòng)物數(shù)或?qū)嶒?yàn)分組數(shù)大于1時(shí)，需要對(duì)動(dòng)物個(gè)體間或組間區(qū)別開(kāi)來(lái)，就需進(jìn)行編號(hào)與標(biāo)記。因此編號(hào)與標(biāo)記的目的就是動(dòng)物個(gè)體與組別的識(shí)別。,SD大鼠,121,標(biāo)記的方法很多，良好的標(biāo)記方法應(yīng)滿(mǎn)足：號(hào)碼清楚、持久、簡(jiǎn)便易認(rèn)和適用

29、，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)動(dòng)物的刺激小，標(biāo)記物對(duì)動(dòng)物無(wú)毒性。編號(hào)方法無(wú)定法，原則是使實(shí)驗(yàn)者能夠識(shí)別動(dòng)物個(gè)體和組別?，F(xiàn)介紹幾種常用的標(biāo)記和編號(hào)方法。,122,染色法,（一）染色法：是用化學(xué)試劑在動(dòng)物身體明顯部位如被毛、四 肢等處進(jìn)行涂染，以涂染的部位或顏色來(lái)區(qū)別 不同個(gè)體、組別，是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中最常用、最容易掌握的方法。,123,家兔針刺法,（二）針刺法：用人工針刺的方法，在動(dòng)物無(wú)體毛或明顯部位 ，如耳、面鼻和四肢部位，拔去被毛，人工針刺 號(hào)碼，刺后涂以酒精黑墨即可。此方 法適用于兔及大、中型動(dòng)物。,124,（三）打耳孔法：用動(dòng)物編號(hào)的耳孔機(jī)直接在動(dòng)物耳朵上打孔或打成缺口編號(hào)，也可用剪刀將耳緣成缺口，根據(jù)

30、孔或缺口的位置、數(shù)量來(lái)標(biāo)記 動(dòng)物個(gè)體的方法。常用于實(shí)驗(yàn)豬的標(biāo)記。,125,（四）標(biāo)簽號(hào)牌法：用塑料、金屬或木等材料制成號(hào)牌固 定在動(dòng)物身體某一部位或飼養(yǎng)圈、籠上，以標(biāo)識(shí)動(dòng)物個(gè)體、組別的方法。如耳標(biāo)簽、戴項(xiàng)圈、戴腳圈等。常用于大 動(dòng)物的標(biāo)記。,126,第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥途徑與方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法主要有：注射法和胃腸給藥法兩種，此外還有用于皮膚的涂布給藥法和用于呼吸道的吸入給藥法。,裸鼠,127,一. 注射分為： 皮內(nèi)注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、靜脈注射、腦膜下注射、腦內(nèi)注射、胸腔內(nèi)注射、 腰椎內(nèi)注射、關(guān)節(jié)腔注射和心內(nèi)注射。,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?dòng)物種類(lèi)、藥物類(lèi)型選擇給藥途

31、徑和方法，若是臨床前藥物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，給藥方法應(yīng)與人的給藥途徑一致。,128,129,130,131,二.胃腸給藥法分為： 自動(dòng)口服給藥 灌胃給藥 直腸給藥。,132,表 常用動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積* 動(dòng)物種類(lèi) 體重（g） 最大容積 小鼠 30 1.0 25-30 0.8 20-24 0.5 大鼠 300 8.0 250-300 6.0 200-249 4.0-5.0 100-199 3.0 豚鼠 300 6.0 . 250-300 4.0-5.0 家兔 3500 200 2500-3500 150 2000-2400 100 貓 3000 100-150 2500-3000 50-80

32、犬 10,000-15,000 200-500,133,134,第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液和尿液的采集,一 動(dòng)物血液的采集方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液的采集方法有很多。 （一） 按采血部位不同可分為： 眼部采血、耳部采血、心臟采血、大血管采血及尾部采血等。,小香豬,135,（二）按采血使用的手段不同可分為： 鼠尾刺血、剪尾采血、眼眶靜脈叢采血、心臟采血、斷頭采血、頸靜（動(dòng)）脈采血、腹主動(dòng)（靜）脈采血、耳緣剪口采血、耳靜脈采血、后肢外側(cè)小隱靜脈、前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈采血、翼下采血等。 采血時(shí)，應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的種類(lèi)，檢驗(yàn)項(xiàng)目、方法及需采血量確定采血的部位和方法。,136,137,138,139,140,表 常用動(dòng)物的最

33、大安全采血量 動(dòng)物種類(lèi) 最大安全采血量 （ml） 最小致死采血量（ml） 小鼠 0.1 0.3 大鼠 1 2 豚鼠 5 10 家兔 10 40 狗 50 300 猴 15 60,141,二、 尿液采集 （一）、 代謝籠采集 代謝籠的特點(diǎn)是能將動(dòng)物排泄的大小便分開(kāi)，達(dá)到采集尿液的目的。此法常用于大鼠、小鼠、豚鼠、兔等中小型動(dòng)物的尿液采集。 （二）、導(dǎo)尿法采集 在動(dòng)物的尿道或輸尿管內(nèi)插一根塑料導(dǎo)管采集尿液。此法適用于兔、犬、貓等。,142,第五節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉就是用物理或化學(xué)的方法，使動(dòng)物全身或局部暫時(shí)痛覺(jué)消失或遲鈍，以利于實(shí)驗(yàn)操作。,比格犬,143,（一）全身麻醉：指麻醉藥通

34、過(guò)呼吸道吸入，靜脈、肌肉或腹腔注射，使動(dòng)物產(chǎn)生短時(shí)間的意識(shí)喪失，痛覺(jué)消失，肌肉松弛和反射抑制等中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制現(xiàn)象。分為吸入麻醉和注射麻醉。 1吸入麻醉 指揮發(fā)性麻醉劑經(jīng)動(dòng)物呼吸道吸入體內(nèi)從而產(chǎn)生麻醉效果的方法。常見(jiàn)的吸入麻醉劑有乙醚。,一麻醉類(lèi)型及方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉分為全身麻醉和局部麻醉兩種類(lèi)型。,144,（1） 步驟與方法： 1） 準(zhǔn)備容器: 小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:5000ml標(biāo)本瓶1個(gè) ,10ml試管或離心 管1個(gè).如鼠類(lèi) 中型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:適當(dāng)大小的玻璃箱1個(gè),試管或離心管 1個(gè)如貓、兔 大體形動(dòng)物:麻醉口罩 .如犬,145,2）操作步驟: 放入揮發(fā)性麻醉劑-放入動(dòng)物-密閉4-6分鐘-麻醉-實(shí)驗(yàn)

35、-小容器追加麻醉.,146,(2)吸入麻醉的注意事項(xiàng)： A、容器密封性。 B、防止麻醉窒息和過(guò)量。 C、適時(shí)追加麻醉。,147,2.注射麻醉 ： 通過(guò)注射的方法，將麻醉劑注入 動(dòng)物的體內(nèi)，使動(dòng)物進(jìn)入麻醉狀態(tài) 的方法。常用的注射方法有靜脈注 射、肌肉注射和腹腔注射等。,148,1）準(zhǔn)備器械: 注射器,（1） 步驟與方法：,149,2).注射麻醉方法： 腹腔注射：固定動(dòng)物-頭下位-腹部后1/3 處靠外側(cè)。 靜脈注射：固定動(dòng)物-血管-注射 肌肉注射：固定動(dòng)物-肌肉發(fā)達(dá)-注射,150,(2).注射麻醉的注意事項(xiàng)： A、腹腔注射時(shí)使動(dòng)物的頭處于低位，使內(nèi) 臟向上腹移動(dòng)，可避免注射時(shí)傷及內(nèi)臟。 B、 靜脈

36、注射必須緩慢，過(guò)快會(huì)引起麻醉 意外。 C、 肌肉注射應(yīng)在肌肉較發(fā)達(dá)的部位注射 ，有利于麻醉劑的吸收。 腹腔注射、肌肉注射和靜脈注射麻醉動(dòng)物各有優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)根據(jù)麻醉劑的特性，動(dòng)物解剖特點(diǎn)選擇方法簡(jiǎn)單，麻醉效果好的注射方法。,151,常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全身麻醉藥及用法和劑量,152,153,154,第六節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外科操作技術(shù),兔,155,一術(shù)前準(zhǔn)備 術(shù)前準(zhǔn)備是否充分、周到是手術(shù)是否能夠順利完成的關(guān)鍵。術(shù)前準(zhǔn)備工作很多，但主要包括手術(shù)動(dòng)物的準(zhǔn)備；手術(shù)器械的準(zhǔn)備、手術(shù)時(shí)所用藥品的準(zhǔn)備；手術(shù)室的準(zhǔn)備。,156,二術(shù)中基本操作技術(shù),(一） 術(shù)部被毛的去除 在實(shí)驗(yàn)外科操作技術(shù)中，對(duì)已麻醉、固定就緒的動(dòng)物首先要作的就

37、是對(duì)術(shù)部被毛的去除，以免影響術(shù)部的消毒、手術(shù)操作和創(chuàng)口術(shù)后愈合。 常用的被毛去除方法有剪毛法、剃毛法和脫毛法。,157,常用的脫毛劑配方： 配方1：硫化鈉8g溶于100ml水中。 配方2：硫化鈉肥皂粉淀粉的比例為 317，加水調(diào)成糊狀。 配方3：硫化鈉10g加生石灰15g溶于100ml 水中。 配方4：硫化鈉8g、淀粉7g、糖4g、甘油 5g、硼紗1g、水75g，共100g，調(diào)成 糊狀。,158,一 術(shù)后護(hù)理 影響動(dòng)物手術(shù)成敗的因素很多，如動(dòng)物的選擇、動(dòng)物的健康狀況、麻醉、手術(shù)熟練程度、術(shù)后動(dòng)物的護(hù)理等，其中術(shù)后護(hù)理至關(guān)重要。動(dòng)物由于受到麻醉及手術(shù)的影響，使原來(lái)平衡的機(jī)體、機(jī)能狀態(tài)發(fā)生一系列的

38、變化，機(jī)體的一些功能可能受到不同程度的影響。因此，為確保動(dòng)物手術(shù)達(dá)到預(yù)期的目的，應(yīng)對(duì)手術(shù)動(dòng)物施以良好的術(shù)后護(hù)理，并對(duì)術(shù)后動(dòng)物發(fā)生的各種情況作及時(shí)處理。,159,(一) 術(shù)后動(dòng)物的特點(diǎn) 1 體溫下降：麻醉和手術(shù)都可使動(dòng)物體溫 有不同程度的降低。麻醉時(shí)間越長(zhǎng)，下 降越明顯。 2 疼痛：動(dòng)物蘇醒夠常見(jiàn)的問(wèn)題是疼痛。 動(dòng)物因疼痛會(huì)出現(xiàn)行動(dòng)異常、嘶叫、飲 食異常、心率加快、循環(huán)衰竭等。,160,3食欲下降或喪失：大部分手術(shù)后的動(dòng)物 因疼痛而食欲下降，有的動(dòng)物因手術(shù)使 采食功能喪失，如口腔內(nèi)手術(shù)。 4. 術(shù)部易感染：術(shù)后動(dòng)物飼養(yǎng)在環(huán)境衛(wèi)生 惡劣的室內(nèi)，極易引起術(shù)部感染。,161,(二）術(shù)后動(dòng)物對(duì)環(huán)境的要求

39、 術(shù)后動(dòng)物對(duì)的飼養(yǎng)環(huán)境溫暖、清潔、安靜、光線柔和。 1、環(huán)境溫暖：麻醉和手術(shù)的動(dòng)物體溫都有不同程度的下降，而低體溫休克是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后死亡的一個(gè)重要的原因，因此手術(shù)后動(dòng)物飼養(yǎng)室溫宜高些，以25-30為佳。輔以清潔、柔軟的鋪墊物，也是手術(shù)后動(dòng)物保溫的較好辦法。,162,2、環(huán)境衛(wèi)生：手術(shù)后動(dòng)物飼養(yǎng)室的環(huán)境衛(wèi)生應(yīng)達(dá)到或超過(guò)手術(shù)前動(dòng)物對(duì)環(huán)境衛(wèi)生的要求標(biāo)準(zhǔn)。 環(huán)境衛(wèi)生差，易引起動(dòng)物手術(shù)部位的感染、化膿，甚至死亡。普通動(dòng)物環(huán)境要求無(wú)塵粒、無(wú)蚊蠅，對(duì)環(huán)境常消毒，經(jīng)常更換動(dòng)物的鋪墊物。動(dòng)物室的通風(fēng)設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)良好，室內(nèi)氨濃度不宜過(guò)高。,163,3、線柔和、無(wú)噪音：手術(shù)后動(dòng)物室的光線宜 暗淡些，切忌強(qiáng)光照明，若要觀察

40、動(dòng)物可 借助手電筒或局部光源。術(shù)后觀察動(dòng)物時(shí)， 動(dòng)作宜輕，嚴(yán)禁大聲喧嘩或出現(xiàn)尖銳的撞 擊聲。,164,(三) 術(shù)后動(dòng)物的其它護(hù)理措施 術(shù)后未蘇醒的動(dòng)物： 1保持呼吸道的暢通， 2、鎮(zhèn)痛 3、獨(dú)籠飼養(yǎng),165,第七節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法,C57小鼠,166,處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)遵循動(dòng)物安樂(lè)死的基本原則。 安樂(lè)死是從人道主義和動(dòng)物保護(hù)角度，在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的同時(shí)，盡快使動(dòng)物無(wú)痛苦死去的方法。,167,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死方法很多，常用的安樂(lè)死方法有： 1.頸椎脫臼法 2.空氣栓塞法 3.急性放血法 4.斷頭法藥物法等,168,1頸椎脫臼法 頸椎脫臼法常用于小鼠、大鼠，也用于沙鼠、豚鼠、兔。,2空氣栓塞法 主要用于

41、大動(dòng)物的處死,3.急性放血法 常用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、貓、犬等。,四.斷頭法 主要適用于小鼠、大鼠等小動(dòng)物。,169,第八節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意外的發(fā)生與對(duì)策,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意外是指在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，因各種因素導(dǎo)致的非實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物損傷，如:動(dòng)物質(zhì)量等級(jí)下降、發(fā)病、機(jī)體損傷、死亡等。,170,一、動(dòng)物運(yùn)輸意外,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生的意外丟失、 質(zhì)量等級(jí)下降、感染病原微生物、死亡等。,171,1）動(dòng)物意外丟失.對(duì)策:運(yùn)輸動(dòng)物時(shí),認(rèn)真檢查動(dòng)物運(yùn)輸過(guò)程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)，精心準(zhǔn)備運(yùn)輸籠具,避免籠具破損。,2）動(dòng)物質(zhì)量等級(jí)意外下降.對(duì)策:運(yùn)輸清潔級(jí)以上的動(dòng)物時(shí)，應(yīng)采用帶有空氣過(guò)濾膜的無(wú)菌運(yùn)輸罐或帶過(guò)濾帽的籠盒運(yùn)輸。,4）動(dòng)物死亡,發(fā)生與對(duì)策,172,3）意外感染病原微生物 .對(duì)策:運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)，防止來(lái)源不明動(dòng)物進(jìn)入，并能有效防止外部微生物侵襲和污染。不從疫區(qū)引進(jìn)動(dòng)物，在非疫區(qū)引進(jìn)動(dòng)物時(shí)，動(dòng)物不經(jīng)過(guò)或