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文檔簡介
1、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化,1.基 礎 回 扣 (1)酵母菌-實驗材料: 酵母菌是單細胞真核生物。 生長周期短,增殖速度快,世代不重疊 ,親代看不見子代, 即在子代出生之前親代就死了,(2)種群數量的變化 A種群數量的變化包括增長、波動、穩(wěn)定、下降等 B種群的數量變化有一定的規(guī)律。 在理想條件下,種群呈“J”型增長 。 在有限的環(huán)境下,種群呈“S”型增長。 種群數量的增長也受到許多環(huán)境因素: S”型曲線有一個K值 (如溫度、培養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產物等)的影響。.,(3)血球計數板 血球計數板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。 計數時,常采用樣方法。,
2、(4)探究性實驗 探究實驗設計時要遵循的原則: 科學性原則、可行性原則、對照原則、單一變量原則和平行重復原則。,培養(yǎng)液中酵母菌種群數量與時間的變化關系 (1)實驗原理(練習冊P57) 酵母菌生長周期短,增殖速度快且世代間不重疊, 種群的數量變化有一定的規(guī)律。 在理想條件下,種群呈“J”型增長, 在有限的環(huán)境下,種群呈“S”型增長。 在實驗室條件下,用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌,可以觀察酵母菌種群數量隨時間變化的情況。 計數 對于壓在小方格界線上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角計數。,(2)引出培養(yǎng)液配制、滅菌、接種和培養(yǎng)等步驟 1培養(yǎng)液配制和分裝:配制質量分數為5的葡萄糖溶液(葡萄糖20g,1000 mL
3、水),分裝到5個燒杯中(200mL/燒杯) 2滅菌:用高壓蒸汽滅菌鍋將培養(yǎng)液和取樣、計數時所用的滴管分別滅菌。貼標簽。 3接種:接種時要在酒精燈附近,用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液,往每個燒杯中加入。(注意滴加量不要太多,避免初始菌數過多) 4培養(yǎng):將燒杯置于 28的恒溫箱中培養(yǎng) 每天抽樣檢測,計數酵母菌數量 5.分析結果、得出結論,參考練習冊P58,1、如何計數?(課本68),P68 討論1、2、6,血球計數板的構造和使用,以計數酵母菌為例 (1)用血球計數板計數酵母菌懸液的酵母菌個數.(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數,以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,
4、一般稀釋10倍即可. (3)將血球計數板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數室上加蓋專用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數室內.,血球計數板的使用,(4)計數 計數: 1取樣,時間:每 天取樣時間大體一致,并要遵守無菌操作規(guī)范每次取樣前要試管振蕩搖勻 2然后用滴管吸取1滴培養(yǎng)液滴在已蓋在血球計數板網格上的蓋玻片的邊緣,待培養(yǎng)液自行滲入并充滿網格后, 3計數:再放在顯微鏡下進行細胞計數,后立即將數據填到記錄表格中。如記數時發(fā)現,細胞數較多,不易分辨,吸取的樣液應當稀釋。,(5)計數時,如果使用1
5、6格25格規(guī)格的計數室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數.如果規(guī)格為25格16格的計數板,除了取其4個對角方位外,還需再數中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數. (6)當遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數下方和左方線上的酵母細胞).(7)對每個樣品計數三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數.,3.計算公式 (1)16格25格的血球計數板計算公式:酵母細胞數/ml= 100小格內酵母細胞個數/100400104稀釋倍數 (2)25格x16格的血球計數板計算公式:酵母細胞數/ml= 80小格內酵母細胞個數/80400104稀釋倍數,4.血球計數板的清潔 血球汁數板使用后,用自來水沖洗,切勿用硬物洗刷,洗后自
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