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文檔簡介
1、河北省遷安一中高二生物 操作程序學案 新人教版例1 構建基因組DNA文庫時,首先雷分離細胞的 ( ) A、染色體DNA B、線粒體DNA C、總mRNA D、tRNA例2下列獲取目的基因的方法中需要模板的是() 從基因文庫中獲取目的基因利用PCR技術擴增目的基因反轉錄法通過DNA合成儀利用化學方法人工合成DNAA B C D【小結】獲得目的基因的方法:【變式】1下圖為利用生物技術獲得生物新品種的過程,據(jù)圖回答:(1)在基因工程中,AB為_技術,利用的原理是_,其中為_過程。(2)BC為抗蟲棉的培育過程,其中過程常用的方法是_。要確定目的基因(抗蟲基因)導入受體細胞后是否能穩(wěn)定遺傳并表達,需進行
2、檢測和鑒定工作,請寫出在個體生物學水平上的鑒定過程:_例3 如圖為某種質粒表達載體簡圖,小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoR、Bam H的酶切位點,ampR為青霉素抗性基因,tetR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動子,T為終止子,ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoR、Bam H在內的多種酶的酶切位點。據(jù)圖回答:(1)將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI酶切,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后,其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有_ _、_、_三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質粒,需要對這些連接產(chǎn)物進行_ _。(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞
3、進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是_ _;若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是_ (3)目的基因表達時,RNA聚合酶識別和結合的位點是_,其合成的產(chǎn)物是_。(4)在上述實驗中,為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時應選用的酶是_?!竞献魈骄俊繂幼雍推鹗济艽a子相同嗎?終止子和終止密碼子相同嗎?【變式】2下列哪項不是基因表達載體的組成部分()A啟動子 B終止密碼 C標記基因 D復制原點3日本下村修、美國沙爾菲和錢永健因在發(fā)現(xiàn)綠色熒光蛋白(GFP)等研究方面作出突出貢獻,獲得2
4、008年度諾貝爾化學獎。GFP在紫外光的照射下會發(fā)出綠色熒光。依據(jù)GFP的特性,你認為該蛋白在生物工程中的應用價值是()A作為標記基因,研究基因的表達 B作為標記蛋白,研究細胞的轉移C注入肌肉細胞,繁殖發(fā)光小白鼠 D標記噬菌體外殼,示蹤DNA路徑【鞏固提升】1某科學家從細菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy)基因a,通過基因工程的方法,將基因a與載體結合后導入馬鈴薯植株中,經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細胞中存在。下列有關這一過程的敘述不正確的是A獲取基因a的限制酶的作用部位是圖中的B連接基因a與載體的DNA連接酶的作用部位是圖中的C基因a進入馬鈴薯細胞后,可隨馬鈴薯DNA分子的復制而復制,傳給子代細胞
5、D通過該技術人類實現(xiàn)了定向改造馬鈴薯的遺傳性狀2人們試圖利用基因工程的方法,用乙種生物生產(chǎn)甲種生物的一種蛋白質。生產(chǎn)流程是:甲生物的蛋白質mRNA目的基因與質粒DNA重組導入乙細胞獲得甲生物的蛋白質下列說法正確的是()A過程需要的酶是逆轉錄酶,原料是A、U、G、CB要用限制性內切酶切斷質粒DNA,再用DNA連接酶將目的基因與質粒連接在一起C如果受體細胞是動物細胞,過程可用農(nóng)桿菌轉化法D過程中用的原料不含有A、U、G、C3 、螢火蟲能發(fā)光是因為螢火蟲體內可以通過熒光素酶催化的系列反應所產(chǎn)生的現(xiàn)象。如果熒光素酶存在于植物體內,也能使植物體發(fā)光,一直以來熒光素酶的唯一來源是從螢火蟲腹部提取的。但加利
6、福尼亞大學的一組科學家成功地通過基因工程實現(xiàn)了將熒光素酶基因導入到大腸桿菌體內,并在大腸桿菌體內生產(chǎn)熒光素酶。請你根據(jù)已知的知識回答下列有關問題:(1)提取目的基因通常有兩種途徑,提取該目的基因的方法最可能的途徑是_ (2)在該過程中需要多種酶的參與,其中包括_等。(3)下列可作為受體細胞的生物有(多選)( )A土壤農(nóng)桿菌 B結核桿菌 C噬菌體 D枯草桿菌(4)在此轉基因工程中,是由質粒承擔運載體的。在將體外重組DNA插入大腸桿菌體內之前通常要用_處理大腸桿菌,目的是_ (5)由于熒光素酶的特殊作用,人們一直設想將其基因作為實驗工具,將它和某一基因連接在一起導入植物體內,如固氮基因連接在一起導
7、入植物體內,判斷固氮基因是否導入的方法是 (6)與雜交育種、誘變育種相比,通過基因工程來培育新品種的主要優(yōu)點是_ 基因工程的基本操作程序 課時作業(yè)1、下列關于基因表達載體構建的相關敘述,不正確的是()A需要限制酶和DNA連接酶 B必須在細胞內進行C抗生素抗性基因可作為標記基因 D啟動子位于目的基因的首端2、基因工程技術也稱DNA重組技術,其實施必須具備的4個必要條件是()A工具酶、目的基因、運載體、受體細胞 B重組DNA、RNA聚合酶、內切酶、連接酶C模板DNA、信使RNA、質粒、受體細胞 D目的基因、限制性內切酶、運載體、體細胞3聚合酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。P
8、CR過程一般經(jīng)歷下述30多次循環(huán):95下使模板DNA變性、解鏈55 下復性(引物與DNA模板鏈結合)72 下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關PCR過程的敘述中不正確的是()A變性過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn)B復性過程中引物與DNA模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則完成C延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸DPCR與細胞內DNA復制相比所需酶的最適溫度較高4、我國中科院上海生化所合成了一種具有鎮(zhèn)痛作用而又不會像嗎啡那樣使病人上癮的藥物腦啡肽多糖(類似于人體中的糖蛋白)。在人體細胞中糖蛋白必須經(jīng)過內質網(wǎng)和高爾基體的進一步加工才能形成。如果
9、要采用基因工程和發(fā)酵工程技術讓微生物來生產(chǎn)腦啡肽多糖,應該用下列哪種微生物作受體細胞()A大腸桿菌 B酵母菌 CT4噬菌體 D大腸桿菌質粒5、上海醫(yī)學遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉基因牛。他們還研究出一種可大大提高基因表達水平的新方法,使轉基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍,標志著我國轉基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標又邁進了一大步。以下與此有關的敘述中,正確的是()A人白蛋白基因開始轉錄時,在DNA聚合酶的作用下以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAB所謂“提高基因表達水平”是指設法使牛的乳腺細胞中含有更多的人白蛋白基因C人們只能在轉基因牛的乳汁中獲取到人白蛋白,是因為人白蛋白
10、基因只在轉基因牛的乳腺細胞中是純合的,在其他細胞中則是雜合的D如果人白蛋白基因的序列是已知的,可以用化學方法合成該目的基因6、PCR技術擴增DNA,需要的條件是()目的基因引物四種脫氧核苷酸耐高溫的DNA聚合酶mRNA核糖體能量AB C D7、下列關于基因表達載體的構建描述錯誤的是()A基因表達載體的構建是基因工程的核心B基因表達載體的構建包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因等部分C目的基因就是指編碼蛋白質的結構基因 D構建的基因表達載體都是相同的8、基因工程中科學家常采用細菌、酵母菌等微生物作為受體細胞,原因是()A結構簡單,操作方便 B繁殖速度快 C遺傳物質含量少、簡單 D性狀穩(wěn)定,變異
11、少9、下列關于目的基因導入受體細胞的描述不正確的是()A基因槍法導入植物體細胞的方法比較經(jīng)濟有效 B顯微注射技術是轉基因動物中采用最多的方法C大腸桿菌最常用的轉化方法是:使細胞的生理狀態(tài)發(fā)生改變D農(nóng)桿菌轉化法是將目的基因導入植物細胞最常用的方法10、在基因工程的操作過程中,獲得重組質粒不需要()DNA連接酶同一種限制酶RNA聚合酶具有標記基因的質粒目的基因4種脫氧核苷酸A B C D11、下列有關PCR技術的敘述正確的是A.作為模板的DNA序列必須不斷的加進每一次的擴增當中B.作為引物的脫氧核苷酸序列必須不斷的加進每一次的擴增當中C.反應需要的DNA聚合酶必須不斷的加進反應當中D.反應需要的D
12、NA連接酶必須不斷的加進反應當中12、下列關于基因工程的敘述,錯誤的是()A目的基因和受體細胞均可來自動、植物或微生物B限制性核酸內切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達13、不屬于目的基因與運載體結合過程的是 ( )A用一定的限制酶切割質粒露出黏性末端B用同種限制酶切割目的基因露出黏性末端C. 將重組DNA導入受體細胞中進行擴增D將切下的目的基因插入到質粒切口處14、下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題:限制酶Ba
13、mH IHind EcoR ISma I識別序列及切割位點ATCCCCTAGCTTTTCGATTCCTTACCGGGGCC(1)一個圖l所示的質粒分子經(jīng)Sma 切割前后,分別含有_個游離的磷酸基團。(2)若對圖中質粒進行改造,插入的Sma 酶切位點越多,質粒的熱穩(wěn)定性越_。(3)用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒,不能使用Sma 切割,原因是 _ (4)與只使用EcoR 相比較,使用BamH 和Hind 兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止 (5)為了獲取重組質粒,將切割后的質粒與目的基因片段混合,并加入_酶。(6)重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 (7)為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉運蛋白基因,將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體,然后在_的培養(yǎng)基中培養(yǎng),以完成目的基因表達的初步檢測。學案答案變式 解析:在基因工程中
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