《微生物實驗》課件.ppt

1、中心實驗室提供,微生物學(xué)實驗教學(xué)課件,Page 2,目 錄,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝和滅菌 實驗二 環(huán)境中微生物的檢測和菌落識別 實驗三 微生物的純種分離 實驗四 細(xì)菌染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗七 微生物顯微鏡直接計數(shù)法 實驗八 細(xì)菌芽孢染色法 實驗九 微生物生長量的測定和生長曲線的繪制 實驗十 物理、化學(xué)因素對微生物生長的影響 實驗十一 細(xì)菌鑒定中的生理生化反應(yīng) 實驗十二 食用菌菌種的分離和制種技術(shù) 實驗十三 環(huán)境中細(xì)菌分離鑒定綜合實驗,Page 3,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌,實驗?zāi)康?實驗原理

2、 實驗器材 實驗方法 注意事項 思考題,Page 4,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 實驗?zāi)康?明確培養(yǎng)基的配制原則； 掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟； 了解高壓蒸汽滅菌的基本原理及應(yīng)用范圍； 掌握高壓蒸汽滅菌技術(shù)，了解幾種常用滅菌方法。,Page 5,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 實驗原理,培養(yǎng)基是按照微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，用人工方法配制而成的一種基質(zhì)。 培養(yǎng)基的種類繁多，根據(jù)培養(yǎng)基的成分、物理性狀不同，可分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。 滅菌是指應(yīng)用物理或化學(xué)的方法，殺滅物體表面和內(nèi)部一切微生物營養(yǎng)體、芽孢和孢

3、子。有干熱滅菌法和濕熱滅菌法。,Page 6,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 實驗器材,藥品和試劑： 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、10NaOH溶液、10鹽酸溶液。 器材： 天平、藥匙、瓷缸、玻璃棒、電爐、 PH試紙、試管、三角瓶、分裝漏斗、牛皮紙、棉花、線繩、干燥箱、高壓鍋。,Page 7,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 實驗方法,培養(yǎng)基的制備過程：,若有不溶物則要求過濾,Page 8,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 實驗方法,Page 9,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 實驗方法,高壓蒸汽滅菌， 121滅菌20分鐘,Page 10,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 注意事項,稱取藥品時

4、嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙稱一種藥品； 蛋白胨極易吸濕，稱取動作要迅速； 配制固體培養(yǎng)基時，先將其他藥品加熱溶解到快沸時，再將稱好的瓊脂加入，繼續(xù)加熱至瓊脂完全熔化，要求不斷攪拌，以免糊底，并防止沸騰外溢； 分裝量根據(jù)試管大小和實際需要而定，固體培養(yǎng)基裝量約為管高的1/5，液體培養(yǎng)基約為管高的1/4，三角瓶不超過瓶體的1/2 ； 分裝時不要將培養(yǎng)基沾在管（瓶）口上，以免引起污染。,Page 11,實驗一 培養(yǎng)基的配置、分裝與滅菌 思考題,1.思考牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于何種培養(yǎng)基？ 2.為什么濕熱滅菌比干熱滅菌法更有效？,Page 12,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別,實驗?zāi)康?實驗原理 實

5、驗器材 實驗方法 實驗結(jié)果 注意事項 思考題,Page 13,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗?zāi)康?掌握各種微生物接種的基本操作技術(shù)； 初步了解周圍環(huán)境中微生物的分布狀況； 熟悉四大類微生物菌落的形態(tài)特征。,Page 14,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗原理,在我們周圍環(huán)境中存在著種類繁多、數(shù)量龐大的微生物，他們很小，人們用肉眼看不到，將他們在一定的溫度下培養(yǎng)一段時間，可繁殖成一個個肉眼可見的細(xì)胞群體，就可以進行鑒別。 接種是指在無菌操作條件下，將某種微生物的純種移接到適合微生物其生長的新鮮培養(yǎng)基中或生物體內(nèi)的一種操作過程。 實驗室常用的接種方法有斜面接種、穿刺接種、三點

6、接種和液體接種。,Page 15,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗器材,菌種： 實驗室環(huán)境微生物、大腸桿菌、釀酒酵母、放線菌及霉菌。 培養(yǎng)基： 馬鈴薯固體培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、高氏一號固體培養(yǎng)基 其他： 無菌培養(yǎng)皿、無菌棉簽、火柴、超凈工作臺及恒溫培養(yǎng)箱。,Page 16,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗方法,斜面接種,Page 17,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗方法,液體接種,斜面,液體培養(yǎng)基,接種環(huán),將接種環(huán)送入液體培養(yǎng)基中時使環(huán)在液體與管壁接觸的地方輕輕磨擦，使菌體分散，然后塞上棉塞，再輕輕搖動均勻，即可培養(yǎng)。如果菌種是培養(yǎng)在液體培養(yǎng)基中時，一

7、般用移液管或滴管接種。,Page 18,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗方法,穿刺接種,用接種針挑取菌種后，插入固體培養(yǎng)基內(nèi)（不要刺到底部），再沿原路拔出。 此法用于厭氣性細(xì)菌接種、檢查細(xì)菌的運動能力。,Page 19,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗方法,平板接種,（1）斜面接平板 a.劃線法：見平板劃線分離法。 b.點種法：常用于觀察霉菌和酵母細(xì)胞，輕點在平板的表面（根霉點一點，曲霉、酵母可點3-4點）。 （2）平板接斜面 一般是將經(jīng)平板分散培養(yǎng)得到的單菌落接種到斜面，以便作鑒定或擴大培養(yǎng)、保存之用。,Page 20,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 實驗結(jié)果,環(huán)境

8、中微生物,放線菌,酵 母,細(xì) 菌,霉 菌,Page 21,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 注意事項,用于倒平板的培養(yǎng)基一定要徹底融化，否則會在所倒的平板培養(yǎng)基表面出現(xiàn)為融化的瓊脂快。而且，倒平板時的培養(yǎng)基溫度不能過高（5060為宜），否則會在皿蓋內(nèi)側(cè)形成較多的冷凝水或在凝固的平板表面形成許多冷凝水微滴，不利于單菌落的形成。 在無菌操作到平板的過程中，切忌用手抓、握三角瓶的瓶口處，以防灼熱的瓶口端燙傷手指。同時，手指上的微生物也會污染瓶的口端，造成嚴(yán)重的操作污染等。,Page 22,實驗二 環(huán)境中微生物的監(jiān)測與菌落識別 思考題,1。在高倍鏡或油鏡下如何區(qū)分放線菌的基內(nèi)菌絲和氣生菌絲? 2。

9、酵母菌的假菌絲是怎樣形成的?與霉菌的真菌絲有何區(qū)別?,Page 23,實驗三 微生物的純種分離法,實驗?zāi)康?實驗原理 實驗器材 實驗方法 實驗結(jié)果 注意事項 思考題,Page 24,了解平板劃線法分離菌種的基本原理及操作； 了解用澆注平板法和涂布平板法分離微生物純種的原理及操作。,實驗三 微生物的純種分離法 實驗?zāi)康?Page 25,實驗三 微生物的純種分離法 實驗原理,自然界中，絕大多數(shù)微生物都是混雜生活在一起的；必須從混雜的微生物類群中分離以得到只含有這一種微生物的純培養(yǎng)物，這種獲得純培養(yǎng)物的方法稱為微生物的分離與純化。 一般根據(jù)該微生物營養(yǎng)、培養(yǎng)特點、對某種抑制劑的耐受性不同及對某種環(huán)境

10、條件要求不同，制作或設(shè)置一些選擇性培養(yǎng)基及選擇性培養(yǎng)條件，再用稀釋涂布平板法或稀釋混合平板法或劃線法分離，純化該微生物，直至得到該純種菌株。,Page 26,實驗三 微生物的純種分離法 實驗器材,樣品：土樣 培養(yǎng)基： 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、豆芽汁培養(yǎng)基。 其它： 盛9mL無菌水的試管、盛90mL無菌水并帶有玻璃珠的三角瓶、無菌玻璃涂棒、無菌吸管、接種環(huán)、無菌培養(yǎng)皿。,Page 27,實驗三 微生物的純種分離法 實驗方法,稀釋平板法,圖14-1 從土壤中分離微生物操作過程,Page 28,實驗三 微生物的純種分離法 實驗方法,平板劃線分離法,交叉劃線法,連續(xù)劃線法,Pa

11、ge 29,實驗三 微生物的純種分離法 實驗結(jié)果,Page 30,實驗三 微生物的純種分離法 注意事項,用于劃線的接種環(huán)，環(huán)柄宜長些（約10cm），環(huán)口應(yīng)十分圓滑，劃線時環(huán)口與平板間的夾角應(yīng)小些，動作要輕巧，以防劃破平板。 用于平板劃線的培養(yǎng)基，瓊脂含量宜高些（2%左右），否則會因平板太軟而被劃破。 平板不能倒的太薄，最好在使用前一天倒好。為防平板表面產(chǎn)生冷凝水，倒平板前培養(yǎng)基溫度不能太高。,Page 31,實驗三 微生物的純種分離法 思考題,1. 在你所實驗的三種培養(yǎng)基平板上長出的菌落屬于哪個類群？簡述它們的菌落形態(tài)特征。 2. 稀釋分離時，為什么要將融化的瓊脂培養(yǎng)基冷卻到4550左右才能傾

12、入裝有菌液的培養(yǎng)皿內(nèi)？ 3. 劃線分離時，為什么每次都要將接種環(huán)上多余的菌體燒掉？劃線為何不能重疊？ 4. 培養(yǎng)時為什么要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)？,Page 32,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用,實驗?zāi)康?實驗原理 實驗器材 實驗方法 實驗結(jié)果 注意事項 思考題,Page 33,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)和掌握顯微鏡油鏡的正確使用； 學(xué)習(xí)細(xì)菌制片和單染色技術(shù)； 觀察細(xì)菌的三種基本形態(tài)； 學(xué)習(xí)細(xì)菌的革蘭氏染色原理和方法。,Page 34,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗原理,1. 油鏡物鏡的工作原理,使用油質(zhì)作為玻片與接物鏡之間的介質(zhì)油浸系 可以增加顯微

13、鏡的放大倍數(shù) 可以增加視野的照明度 可以增大顯微鏡的分辨率,Page 35,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗原理,油鏡頭的識別和重要參數(shù),放大倍數(shù) 數(shù)值口徑 工作距離,Page 36,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗原理,2. 革蘭氏染色原理,G-菌的細(xì)胞壁中含有較多易被乙醇溶解的類脂質(zhì)，而且肽聚糖層較薄、交聯(lián)度低，故用乙醇脫色時溶解了類脂質(zhì)，增加了細(xì)胞壁的通透性，使初染的結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物易于滲出，結(jié)果細(xì)菌就被脫色，再經(jīng)復(fù)紅復(fù)染后就成紅色。 G+菌細(xì)胞壁中肽聚糖層厚且交聯(lián)度高，類脂質(zhì)含量少，經(jīng)脫色劑處理后反而使肽聚糖層的孔徑縮小，通透性降低，因此細(xì)菌仍保留初染時的顏色

14、。,Page 37,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗器材,活材料： 培養(yǎng)24小時的大腸桿菌金黃色葡萄球菌。 染色液和試劑： 結(jié)晶紫、碘液、95%酒精、石炭酸復(fù)紅 、蒸餾水、香柏油。 器材： 載玻片、接種杯、酒精燈、擦鏡紙、顯微鏡。,Page 38,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗方法,1. 革蘭氏染色 （1）涂片 （2）晾干 （3）固定 （4）結(jié)晶紫染色：加適量（以蓋滿細(xì)菌涂面）的結(jié)晶紫染色液染色1min；水洗：傾去染色液，用水小心地沖洗。 （5）媒染：碘液，媒染1min；水洗：用水洗去碘液。 （6）脫色：將玻片傾斜，連續(xù)滴加95%乙醇脫色1520s至流出液無色，立即水

15、洗。 （7）復(fù)染：滴加復(fù)紅復(fù)染1min；水洗：用水洗去涂片上的復(fù)紅染色液。 （8）晾干：將染好的涂片用吸水紙吸干。 （9）鏡檢：鏡檢時先用低倍，再用高倍，最后用油鏡觀察，并判斷菌體的革蘭氏染色結(jié)果。,Page 39,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗方法,2. 油鏡的使用方法 （1）用低倍鏡對光。最大光圈 （2）低倍鏡觀察（尋找觀察目標(biāo)）。適當(dāng)縮小光圈 （3）高倍鏡觀察（選取理想的觀察目標(biāo)）。 （4）油鏡觀察：高倍鏡觀察后- 上升鏡筒-油鏡轉(zhuǎn)至正下方，在載玻片上加一小滴油-小心地下降鏡筒使鏡頭浸在油里-用粗螺旋將鏡筒慢上升，尋找目標(biāo)（物象）用細(xì)螺旋調(diào)節(jié)，使物象清晰-觀察記錄。最大光圈

16、,Page 40,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 實驗結(jié)果,革蘭氏陽性球菌,革蘭氏陰性桿菌,Page 41,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 注意事項,觀察完畢，上升鏡筒，轉(zhuǎn)動油鏡物鏡偏位。用干凈擦鏡紙擦去鏡頭上的油跡，再取用二甲苯擦去鏡頭上殘留的香柏油，最后再用一張干凈的擦鏡紙擦去殘留在鏡頭上的二甲苯。 革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是酒精脫色。脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌；脫色時間過短，革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間還受涂片厚薄及乙醇用量等因素影響。 染色過程中勿使染色液干涸。水沖洗后，吸去玻片上的殘水，以免影響染色效果。 選用幼齡的細(xì)菌。菌齡太老、死亡或

17、自溶常使革蘭氏陽性菌轉(zhuǎn)呈陰性反應(yīng)。,Page 42,實驗四 細(xì)菌的染色法和光學(xué)顯微鏡的使用 思考題,你認(rèn)為那些環(huán)節(jié)會影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性？其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么？如何使你的染色結(jié)果可信？,Page 43,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定,實驗?zāi)康?實驗原理 實驗器材 實驗方法 實驗結(jié)果 注意事項 思考題,Page 44,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 實驗?zāi)康?了解并掌握細(xì)菌總數(shù)的測定方法 了解大腸菌群數(shù)量與水質(zhì)狀況的關(guān)系,Page 45,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 實驗原理,飲用水是否合乎標(biāo)準(zhǔn)，通常通過水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)來確定。細(xì)菌總數(shù)

18、是指1毫升水樣在普通瓊脂培養(yǎng)基中，3724小時培養(yǎng)后所生長的菌落數(shù)。 一般規(guī)定，1毫升自來水的總菌數(shù)不得超過100個。,Page 46,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 實驗器材,普通瓊脂培養(yǎng)基； 無菌空瓶；滅菌水；滅菌培養(yǎng)皿、吸管、 試管； 自來水、池水、河水或湖水。,Page 47,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 實驗方法,1水樣的采取 自來水：先將自來水龍頭用火焰燒灼3min滅菌，再開放水龍頭使水流5 min后，以滅菌三角燒瓶接取水樣，以待分析。 池水、河水或湖水：應(yīng)取距水面1015 cm的深層水樣，先將滅菌的帶塞玻璃瓶，瓶口向下浸人水中，然后翻轉(zhuǎn)過來，除去玻璃

19、塞，水即流人瓶中，盛滿后，將瓶塞蓋好，再從水中取出，最好立即檢查，否則需放入冰箱中保存。,Page 48,2. 稀釋樣品的取樣和傾注平皿,每個稀釋度 做兩個平皿,傾注平皿,將涼至46營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動平皿，混合均勻。,操作要求：無菌操作,Page 49,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 實驗方法,培養(yǎng)及計數(shù) 培養(yǎng)條件：倒置于361溫箱內(nèi)培養(yǎng)482h 菌落計數(shù)：以30300為界，具體情況具體分析（詳見P320）,規(guī)律： 不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比（同一稀釋度的二個平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近），即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少，稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。 如出現(xiàn)逆反現(xiàn)

20、象，則應(yīng)視為檢驗中的差錯不應(yīng)作為檢樣計數(shù)報告的依據(jù)。,Page 50,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 實驗結(jié)果,計算水中總細(xì)菌數(shù)量,Page 51,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 注意事項,水樣采集后，應(yīng)速送回實驗室測定，若來不及測定應(yīng)放在4冰箱存放，若無低溫保藏條件，應(yīng)在報告中注明水樣采集和測定的間隔時間。一般較清潔的水可在12h內(nèi)測定，污水須在6h內(nèi)結(jié)束測定。,Page 52,實驗五 微生物的間接計數(shù)法水中細(xì)菌總數(shù)的測定 思考題,1。通過對自來水樣品中細(xì)菌總數(shù)的測定，你認(rèn)為此樣品是否符合國家飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)？ 2。你所檢測的水源的水污染情況如何？,Page 53

21、,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察,實驗?zāi)康?實驗原理 實驗器材 實驗方法 實驗結(jié)果 注意事項 思考題,Page 54,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗?zāi)康?學(xué)會用插片法培養(yǎng)放線菌的制片方法。,掌握用顯微鏡觀察放線菌個體形態(tài)特征的方法。,學(xué)會與掌握霉菌的三點接種法。,掌握用顯微鏡觀察青霉的形態(tài)特征。,Page 55,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗原理,放線菌的形態(tài)特征是菌種選育和分類的重要依據(jù) 放線菌的菌絲體由基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲組成 放線菌的菌絲體可沿著培養(yǎng)基與蓋玻片的交界線蔓延生長，易黏附在蓋玻片上，從而獲得直觀標(biāo)本插片法,Page 56,實驗六 放線菌和真

22、菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗原理,Page 57,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗原理,插片法：,Page 58,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗原理,三點接種法的優(yōu)點在同皿中獲得3個重復(fù)的菌落；在三個彼此相鄰的菌落間形成一些菌絲體稀疏且較透明的狹窄區(qū)域，該區(qū)域的氣生菌絲僅分化出少數(shù)子實體，故能在低倍鏡下觀察到菌絲的自然著生狀態(tài)和子實體的形態(tài)特征,Page 59,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗原理,三點接種：,青霉的菌落,Page 60,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗器材,1. 菌種：鏈霉菌，青霉 2. 培養(yǎng)基：高氏一號瓊脂培養(yǎng)基 3. 器皿：培養(yǎng)皿，蓋

23、玻片，載玻片，顯微鏡等,Page 61,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗方法,放線菌的培養(yǎng)與觀察：,倒平板：每皿約20mL培養(yǎng)基,先插片后接種：接種線長蓋玻片的一半，在蓋玻片兩端留有空白,培養(yǎng)：28，37d,鏡檢：在載玻片上滴一滴水，有菌絲的一面朝上，低高倍鏡觀察,Page 62,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗方法,霉菌的培養(yǎng)與觀察：,倒平板：每皿約15mL培養(yǎng)基,三點接種,培養(yǎng)：28，37d,鏡檢：做水片，低高倍鏡觀察,Page 63,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 注意事項,鏡檢時特別注意放線菌的基內(nèi)菌絲、氣生菌絲的粗細(xì)和色澤差異。 放線菌的生長速度較慢，培養(yǎng)周

24、期較長，在操作中應(yīng)特別注意無菌操作，嚴(yán)防雜菌污染。 若將培養(yǎng)后的蓋玻片用0.1%美藍液染色后再做鏡檢，則效果更好。,Page 64,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗結(jié)果,在高倍鏡下尋找放線菌的基內(nèi)菌絲、氣生菌絲及孢子絲 在低倍鏡下尋找霉菌的整個形態(tài)特征 在高倍鏡下詳細(xì)觀察霉菌的分生孢子、小梗、分生孢子梗等,Page 65,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 實驗結(jié)果,青 霉,Page 66,實驗六 放線菌和真菌的培養(yǎng)和形態(tài)觀察 思考題,1. 在顯微鏡的高倍鏡下如何區(qū)分放線菌的基內(nèi)菌絲和氣生菌絲？ 2. 用插片法制備放線菌的標(biāo)本，其主要優(yōu)點是什么？可否用此法培養(yǎng)與觀察其他幾類微生物，

25、應(yīng)作哪些改進，為什么？,Page 67,實驗?zāi)康?實驗原理 實驗器材 實驗方法 實驗結(jié)果 注意事項 思考題,實驗七 微生物顯微鏡直接計數(shù)法,Page 68,實驗七 微生物顯微鏡直接計數(shù)法 實驗?zāi)康?了解顯微鏡計數(shù)的原理； 學(xué)習(xí)并掌握使用血球計數(shù)板進行微生物直接計數(shù)的方法。,Page 69,實驗七 微生物顯微鏡直接計數(shù)法 實驗原理,利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是微生物實驗 中一種十分重要的常用微生物計數(shù)方法。此法的優(yōu)點是 直觀、快速，不論微生物的生理狀況如何，都可以在顯 微鏡下一一計數(shù)。由于此法得到的是活菌和死菌的總和，故又稱為總計數(shù)法。,Page 70,實驗七 微生物顯微鏡直接計數(shù)法 實驗原理,血球計數(shù)板是一塊特制的載玻片，其上四條縱槽構(gòu)成了三個平臺，中間的平臺又被一短橫槽隔成兩半，每一邊的平臺上各刻有一個方格網(wǎng)，每個方格網(wǎng)共分成9個大方格