乙肝定量檢測試劑臨床意義.ppt

1、乙肝定量檢測試劑臨床意義,目錄,一、背景知識 二、乙肝感染的自然史 三、抗病毒藥物治療 四、HBsAg 五、Anti-HBs 六、HBeAg和Anti-HBe 七、Anti-HBc 八、臨床乙肝標(biāo)志物組合模式,一、背景知識,HBV感染可引起肝臟炎癥和纖維化，嚴(yán)重者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌，已經(jīng)成為嚴(yán)重的社會和公共衛(wèi)生問題。HBV 感染呈世界性流行，不同地區(qū)HBV 感染的流行強(qiáng)度不同，全世界共約3.5 億人感染HBV，每年死于HBV 感染所致的終末期肝病和肝癌的人數(shù)超過100萬。我國HBV 感染率較高，1-59 歲人群HBsAg攜帶率為7.18%，1-4歲人群HBsAg攜帶率為0.96%，與以前流

2、行病學(xué)調(diào)查結(jié)果相比，HBsAg攜帶率大幅下降。,二、乙肝的感染自然史,1、免疫耐受期：血清HBsAg和HBeAg陽性、HBV復(fù)制活躍、血清ALT正常、肝組織學(xué)無或輕微炎癥、無肝纖維化或進(jìn)展緩慢。圍產(chǎn)期和嬰幼兒時期感染者的免疫耐受期會持續(xù)多年，病情無明顯進(jìn)展，自發(fā)的HBsAg 清除率低。 2、免疫清除期：HBeAg陽性、HBV DNA水平降低、ALT水平反復(fù)波動、肝組織學(xué)有炎癥壞死、纖維化進(jìn)展程度較快。大部分HBV 感染者都會由免疫耐受期進(jìn)展為免疫清除期，這一時期自發(fā)的HBsAg 清除率增加。 3、非活動期：HBeAg 消失、出現(xiàn)抗HBe、HBV DNA 水平很低或檢測不到、ALT 正常、肝臟炎

3、癥減輕。此期患者發(fā)展為肝硬化和肝癌的風(fēng)險較低。 4、恢復(fù)期：非活動期HBV 感染者中，HBsAg 清除者臨床預(yù)后一般較HBsAg 持續(xù)陽性者好，肝臟炎癥和纖維化不斷改善。,三、慢性乙肝抗病毒治療,（一）抗病毒治療與乙肝標(biāo)志物檢測關(guān)系 抗病毒藥物治療的出現(xiàn)，使得乙肝標(biāo)志物的檢測試劑市場需求增加了很多，尤其是對于定量試劑的需求。時間分辨試劑主要就是針對乙肝抗病毒藥物治療應(yīng)用。 1. 治療前評估 2. 治療終點的確定：理想的、滿意的、基本的終點 3. 治療方案 4. 應(yīng)答預(yù)測 5. 治療監(jiān)測,（二）慢性乙型肝炎抗病毒治療目標(biāo) 最大限度地長期抑制或消除HBV，減輕肝細(xì)胞炎癥、壞死及肝纖維化，延緩和阻止

4、疾病進(jìn)展，減少和防止肝臟失代償、肝硬化、肝癌及其并發(fā)癥的發(fā)生，從而改善生活質(zhì)量并延長生存時間。,（三）慢性乙型肝炎抗病毒治療的藥物 目前，已有NUCs 及IFN 兩大類藥物用于慢性乙型肝炎（CHB）治療。 NCUs類（核苷（酸）類似物）：我國已批準(zhǔn)拉米夫定、阿德福韋酯、恩替卡韋及替比夫定用于CHB 治療。 IFN（干擾素）：可分為普通IFN及Peg- IFN。,目前已獲得普遍認(rèn)可的定量檢測臨床意義,治療24周時HBeAg水平下降可以預(yù)測HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換。HBsAg定量在預(yù)測獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答和HBsAg消失的作用有待進(jìn)一步研究證實。越來越多的研究提示早期病毒學(xué)應(yīng)答情況是預(yù)測耐藥發(fā)生率的重要

5、指標(biāo)，從而提出治療路線圖的概念。 治療中的監(jiān)測：治療期間應(yīng)至少每3個月檢測1次ALT、HBsAg和（ 或）HBV DNA；HBsAg 和HBeAg定量檢測的臨床意義及價值有待進(jìn)一步探討。 如發(fā)生HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換，須接受長期隨訪，因為有發(fā)生HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換逆轉(zhuǎn)或轉(zhuǎn)為HBeAg陰性CHB 的可能。 慢性乙型肝炎抗病毒治療專家共識,四、HBsAg,HBsAg HBsAg在HBV感染早期出現(xiàn)于病人血循環(huán)中，可持續(xù)數(shù)月，數(shù)年乃至終身，是診斷HBV感染最常用的指標(biāo)。 HBsAg定量有助于觀察病毒復(fù)制狀況和病變發(fā)展。HBsAg濃度與HBV DNA存在著相關(guān)性。高濃度的HBsAg常表示病毒的高復(fù)制水平

6、，低濃度的HBsAg可能提示處于感染恢復(fù)期或反映病毒低復(fù)制或不復(fù)制。 在抗病毒治療中定量檢測HBsAg有助于判定療效。,五、Anti-HBs,Anti-HBs為HBV的中和抗體，有清除HBV，防止再感染的作用。接種乙型肝炎疫苗已經(jīng)成為目前國際國內(nèi)預(yù)防乙型肝炎病毒的共識。血清血標(biāo)記物抗-HBs是個體對乙型肝炎具有免疫力的指示。 定量檢測乙型肝炎病毒抗-HBs的含量可對接種疫苗的效果進(jìn)行評估，用于判定是否需要加強(qiáng)免疫，還可以評估普通人群免疫力?？?HBs定量檢測指示預(yù)防免疫接種的效果：如個體經(jīng)接種后定量檢測抗-HBs，抗-HBs10 mIU/ml，那么表明個體已獲得對乙型肝炎的免疫力；抗-HBs1

7、0 mIU/ml，表明個體還需注意日常防護(hù)與繼續(xù)接種。,六、HBeAg和Anti-HBe,HBeAg和抗HBe定量檢測在抗病毒治療中的重要意義主要體現(xiàn)在以下幾個方面： 抗病毒治療起點的選擇：2005年的慢性乙型肝炎防治指南中明確指出：治療前應(yīng)檢查病毒學(xué)標(biāo)志: 包括HBsAg、HBeAg、抗-HBe 和HBV DNA的基線狀態(tài)或水平。廣州南方醫(yī)院的臨床資料和國際上的資料還顯示，HBeAg定量對確定HBeAg陽性慢性乙肝患者的抗病毒起點（是否需要抗病毒治療）具有重要性。如果患者ALT2ULN，應(yīng)每個月檢查ALT和HBeAg，若HBeAg明顯下降，可能為自然轉(zhuǎn)化，不需抗病毒治療；若兩者持續(xù)升高，則應(yīng)

8、開始抗病毒治療。,抗病毒治療終點的選擇：指南同樣明確指出：抗病毒治療的三大治療終點之一就是：HBeAg/抗HBe血清學(xué)轉(zhuǎn)化。定量檢測HBeAg和抗HBe可以比較清楚地掌握這種變化的出現(xiàn)及其趨勢，有利于治療終點的確認(rèn)和治療對象的選擇。,療程的確認(rèn)和個體化治療方案調(diào)整：鑒于抗病毒治療費用相對昂貴（國內(nèi)目前每1療程約花費3萬元），而且對于那些未到治療終點提前結(jié)束治療的患者，常常出現(xiàn)病情的“反彈”和再治療效果不確定性的情況，制定治療方案和療程確定十分重要。專家們認(rèn)為對于治療后已出現(xiàn)應(yīng)答的患者，適當(dāng)延長維持治療時間有助于提高持續(xù)應(yīng)答率、減少復(fù)發(fā)概率。對于部分應(yīng)答患者，繼續(xù)治療或延長療程有助于提高HBeA

9、g血清轉(zhuǎn)換率。,治療過程中的監(jiān)測和預(yù)測：慢性乙型肝炎抗病毒治療過程中的監(jiān)測和隨訪是臨床實踐中的重要問題。療效監(jiān)測指標(biāo)應(yīng)包括ALT、HBVDNA或HBeAg，應(yīng)特別關(guān)注動態(tài)變化。研究表明，有治療應(yīng)答的患者一般先出現(xiàn)HBV DNA的下降，或HBeAg定量水平的下降。因此，HBV DNA和HBeAg定量是療效監(jiān)測中的重要指標(biāo)。治療24周時HBeAg水平下降可以預(yù)測HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換。 因為有發(fā)生HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換逆轉(zhuǎn)的可能，即由Anti-HBe陽性變?yōu)殛幮?。因而定量檢測Anti-HBe以監(jiān)測其變化趨勢，也有其臨床價值。,綜上所述，慢性乙肝抗病毒治療前、治療中和治療后隨訪都需要檢測病毒學(xué)指標(biāo)，包括

10、HBeAg和抗Hbe定量檢測。有了這些資料，就可以清楚患者的基線情況，掌握患者抗病毒治療過程中的變化，在隨訪中它有助于了解是否出現(xiàn)持續(xù)應(yīng)答，或者復(fù)發(fā)及其趨勢，有利于深入研究抗病毒治療應(yīng)答的各種規(guī)律，以便制定有效經(jīng)濟(jì)的個體化抗病毒治療方案。也即HBeAg和抗HBe定量檢測在慢性乙肝抗病毒治療中具有重要的科學(xué)意義及經(jīng)濟(jì)價值。 目前臨床廣泛使用的是半定量檢測試劑（如ABBOTT Laboraties的微粒子酶免分析法(MEIA) 和Roche的化學(xué)發(fā)光法等產(chǎn)品）尚缺少免疫學(xué)定量檢測試劑，被批準(zhǔn)的只有意大利 DiaSorin S.p.A的乙型肝炎病毒e抗原定量檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）。,七、Anti-

11、HBc,抗-HBc是HBV感染后首先出現(xiàn)的標(biāo)志抗體，是流行病學(xué)調(diào)查的標(biāo)志。HBcAg較HBsAg有更強(qiáng)的免疫原性，因而抗-HBc較抗-HBs產(chǎn)生早得多、有高得多的血清水平、長久得多的時間。在急性期幾乎在所有感染個例都可檢出抗-HBc，有時是唯一的血清標(biāo)記物。無論肝病是否存在或病毒是否已清除，抗-HBc可持續(xù)存在數(shù)十年。國外一些地區(qū)以抗-HBc篩檢HBV感染供血，認(rèn)為是最靈敏的血清學(xué)試驗。研究表明HBV感染者抗-HBc陽性率在95%以上。,抗-HBc在乙型肝炎病毒感染發(fā)病早期即能在血液中檢測出，而且持續(xù)時間長，因此檢測乙肝抗-HBc對疾病的診斷及治療具有重要意義。 對篩選供血血源、阻斷乙型肝炎的

12、傳播具有重要的參考價值。乙型肝炎核心抗體分為抗-HBc-IgG和抗-HBc-IgM，前者低滴度時作為既往感染的指標(biāo)，用于乙型肝炎流行病學(xué)的調(diào)查，高滴度時作為乙型肝炎病毒感染的指標(biāo)；后者出現(xiàn)于新感染早期，是乙型肝炎早期診斷的指標(biāo)，同時也是乙型肝炎急性感染和復(fù)制活躍的指標(biāo)。,HBV復(fù)制時，HBcAg表達(dá)于肝細(xì)胞內(nèi)，血清中檢測不到游離的HBcAg，但其特異性抗體即抗-HBc可陽性，間接反映HBV復(fù)制，是反映肝細(xì)胞受到HBV侵害的一種指標(biāo)。抗-HBc出現(xiàn)于急性乙型肝炎的急性期，恢復(fù)后可持續(xù)數(shù)年或更長，滴度則逐漸下降?？?HBc在慢性活動性乙型肝炎炎癥期時也往往呈陽性反應(yīng)，其出現(xiàn)較早，在HBV感染的窗口

13、期，抗-HBc-IgM是唯一能檢出的特異性HBV指標(biāo)，在臨床上，對窗口期的急性乙型肝炎病毒感染者，尤其需要進(jìn)行抗-HBc-IgM檢測，以提高乙型肝炎的檢出率。,八、臨床組合模式,乙肝五項少見模式分析,單一HBsAg： 主要見于急性HBV感染的最早期，一般隨之出現(xiàn)HBeAg和IgM的Anti-HBc。通常的慢性HBV感染中，HBsAg和Anti-HBc并存者約占95%，HBV慢性感染中不出現(xiàn)Anti-HBc是少見的。單一的HBsAg的異常表現(xiàn)主要由于Anti-HBc的缺失。,HBsAg和Anti-HBs并存： 在HBV感染恢復(fù)期中約有3%的個例可同時檢出HBsAg和Anti-HBs,然后HBsA

14、g消失而Anti-HBs水平逐漸升高。在慢性HBV感染者中約3%-5%兩者共存，出現(xiàn)Anti-HBs并不表明HBsAg的清除和感染的恢復(fù)，可能由于： 1.前后感染兩種亞型HBV，或HBsAg與其抗體之間僅有低親和性反應(yīng)； 2.S基因變異，其編碼的HBsAg抗原性改變，原型Anti-HBs不能將其清除； 3. 干擾素治療中出現(xiàn)Anti-HBs血清轉(zhuǎn)換，也因S基因的變異，而未能清除HBsAg。 4.HBV疫苗接種者中也有少數(shù)個例雖有正常的Anti-HBs應(yīng)答，但仍能感染決定簇變異的免疫逃逸病毒株，從而出現(xiàn)與HBsAg共存的現(xiàn)象。,HBeAg和Anti-HBe并存： 一般是處于乙肝e抗原和e抗體轉(zhuǎn)換時期，e抗原和e抗體以抗原抗體復(fù)合物的狀態(tài)共存。Anti-HBe試劑檢測時，血樣中的抗原抗體復(fù)合物同樣可以結(jié)合至包被板上，起到了競爭效果。因而