干式生化與濕式生化比較.ppt

1、干化學(xué)法和濕化學(xué)兩種生化分析系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果評(píng)價(jià)及統(tǒng)一,為什么要評(píng)價(jià)和統(tǒng)一？,第一部分,背景,檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)迅速發(fā)展，臨床檢驗(yàn)工作量加 大，臨床實(shí)驗(yàn)室逐步規(guī)?；?、自動(dòng)化、多樣化、新的儀器設(shè)備與方法不斷引進(jìn)更新。 為了同時(shí)滿足急診和住院部檢測(cè)工作的需要，本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)存在干化學(xué)法和濕化學(xué)兩種不同的生化分析檢測(cè)系統(tǒng)。 解決檢測(cè)結(jié)果的溯源性及和其它檢測(cè)系統(tǒng)的可比性，準(zhǔn)備參加國家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可。,同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同檢測(cè)系統(tǒng)之間檢測(cè)結(jié)果的一致性及可比性； 同一檢測(cè)項(xiàng)目在同一醫(yī)院可能得到差異比較大或完全不同的檢測(cè)結(jié)果； 同一患者同一檢測(cè)項(xiàng)目在不同醫(yī)院可能得到差異比較大或完全不同的檢測(cè)結(jié)果。,疑問,不利影響,檢驗(yàn)質(zhì)量遭到異議

2、醫(yī)療糾紛 醫(yī)療事故的發(fā)生,不同檢測(cè)系統(tǒng)的統(tǒng)一勢(shì)在必行！,怎樣評(píng)價(jià)和統(tǒng)一？,第二部分,評(píng)價(jià)依據(jù),美國全國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS)制定的 標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)方案 EP9-A文件用患者樣品進(jìn)行方法對(duì)比及偏倚評(píng)估 EP9-A1文件 （1995年第一版） EP9-A2文件 （2002年第二版）,實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備,1.確定實(shí)驗(yàn)方法（Y）和比較方法（X） 實(shí)驗(yàn)方法（Y）=強(qiáng)生950干化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng) 比較方法（X）AU640濕化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),對(duì)儀器進(jìn)行一次完整的保養(yǎng)，確認(rèn)儀器處于良好的狀態(tài)。 應(yīng)準(zhǔn)備同一批號(hào)足夠的試劑盒。 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程都必須有分析過程的質(zhì)量控制 弄清每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的可報(bào)告范圍。,2.比較方法（X ）檢測(cè)系

3、統(tǒng)的準(zhǔn)備,熟悉儀器操作及保養(yǎng)程序。 應(yīng)準(zhǔn)備好足夠的干片，每個(gè)產(chǎn)品要求是同一 批號(hào)。 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程都必須有分析過程的質(zhì)量控制 進(jìn)行精密度實(shí)驗(yàn)。（不能實(shí)現(xiàn)精密度要求的，應(yīng)首先解決問題再做以下實(shí)驗(yàn)）,3.實(shí)驗(yàn)方法（Y ）檢測(cè)系統(tǒng)的準(zhǔn)備,方法對(duì)比實(shí)驗(yàn),（方法和結(jié)果）,標(biāo)本的選擇,標(biāo)本必須充分地表現(xiàn)病人的種類和實(shí)驗(yàn)室所研究的范圍。比較研究結(jié)果的好壞直接取決于使用的標(biāo)本。 適當(dāng)?shù)臉?biāo)本對(duì)分析至關(guān)重要，比較理想的是用新鮮的血清，并在兩個(gè)小時(shí)內(nèi)同時(shí)用新分析儀和比較方法進(jìn)行分析。 必要是可以選擇冷凍的標(biāo)本。但注意：如果利用貯存的標(biāo)本，必須用比較方法重新測(cè)定這些標(biāo)本。并且兩種方法的標(biāo)本貯存和處理應(yīng)該保持一致。 質(zhì)控

4、血清不能提供和實(shí)際病人標(biāo)本同樣的信息（由于不同的基質(zhì)效應(yīng)，不同的同工酶等等。）,樣本來源 臨床上“典型”病人標(biāo)本，不要使用溶血或其它含有干擾此方法組份的樣本。 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本數(shù) 40份,實(shí)驗(yàn)樣品,測(cè)定標(biāo)本,每天隨機(jī)抽取5份樣本，共測(cè)定8天。 每個(gè)標(biāo)本分別用干化學(xué)法和濕化學(xué)法測(cè)定，分別測(cè)定2次。 按順序1-5進(jìn)行測(cè)定，再按相反順序5-1重復(fù)測(cè)定。,病人樣本檢驗(yàn)結(jié)果表1,分析數(shù)據(jù)過程,刪除超出可報(bào)告范圍以外的數(shù)據(jù) 初步數(shù)據(jù)檢查 線形回歸 計(jì)算預(yù)期偏差及其可信區(qū)間,數(shù)據(jù)的刪除,EP9-A文件規(guī)定，不使用超出可報(bào)告范圍以外的數(shù)據(jù)。 刪除超出可報(bào)告范圍以外數(shù)據(jù)，再繼續(xù)數(shù)據(jù)的處理。,初步數(shù)據(jù)檢查過程,方法內(nèi)雙份

5、數(shù)據(jù)中離群值的檢查 數(shù)據(jù)作圖 線形相關(guān)的目測(cè)檢查 方法間離群點(diǎn)的檢查 X值合適范圍的檢查,計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)化（相對(duì)）的絕對(duì)差值均值 DXi = DXi /N,方法內(nèi)離群值的檢查過程,計(jì)算絕對(duì)差值 DXi=Xi1-Xi2,計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)化（相對(duì)）的絕對(duì)差值 DXi =Xi1-Xi2/ Xi,計(jì)算絕對(duì)差值均值 DX=DXi/N,以絕對(duì)差值均值DX、DY的4倍為可接受限，若絕對(duì)差值（DX或DY）超出此限，則附加計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)化的絕對(duì)差值。 以標(biāo)準(zhǔn)化的絕對(duì)差值均值DXi 、DYi 的4倍作為標(biāo)準(zhǔn)化的絕對(duì)差值的檢測(cè)界限，若超過此限則為離群值。 排除離群點(diǎn)數(shù)不能超過樣品總數(shù)的2.5%。,離群點(diǎn)判斷規(guī)則,方法內(nèi)離群值的檢查結(jié)果

6、表2,雙份測(cè)定平均值的散點(diǎn)圖：Yi Xi,數(shù)據(jù)作圖散點(diǎn)圖,全部結(jié)果的散點(diǎn)圖： Yij Xi,偏倚圖（雙份測(cè)定平均值之差） （Yi Xi ） Xi,數(shù)據(jù)作圖偏倚圖,偏倚圖（每次測(cè)定與平均值之差） （ Yij Xi ） Xi,1.當(dāng)比較方法X為參考方法,偏倚圖（雙份測(cè)定平均值之差） （Yi Xi ） （ Xi + Yi ） /2,數(shù)據(jù)作圖偏倚圖,偏倚圖（每次測(cè)定與平均值之差） （ Yij Xi ） （ Xi + Yi ） /2,2.當(dāng)比較方法X不是參考方法,線性相關(guān)的目測(cè),線性關(guān)系滿意 進(jìn)行下一步。 線性部分太窄，每種方法線性部分必須分別檢查，找到非線性原因。,存在明顯非線性相關(guān),高濃度區(qū),低濃度

7、區(qū),余下 線性區(qū),截去非線 性數(shù)據(jù),替換被 排除樣品,非線性,非線性,是否包含醫(yī)學(xué)上 有意義濃度范圍,確實(shí)如此,重新分析 數(shù)據(jù),計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)化（相對(duì)）的絕對(duì)差值均值 E =Eij /2N (N=40),方法間離群值的檢查過程,計(jì)算絕對(duì)差值 Eij=Yij-Xi,計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)化（相對(duì)）的絕對(duì)差值 Eij =Yij-Xi/ Xi,計(jì)算絕對(duì)差值均值 E=Eij/2N (N=40),N,i,2,j,N,2,i,j,相關(guān)分析X最適范圍實(shí)驗(yàn),X變量存在誤差會(huì)影響相關(guān)系數(shù)r ，但如果數(shù)據(jù)X范圍足夠?qū)?，那么這個(gè)誤差對(duì)于回歸分析的影響被認(rèn)為很小。,r=,(Xij X )2,(Yij Y )2,(Xij X )(Yij

8、Y ),X=Xij/2N (N=40),Y=Yij/2N (N=40),如果r0.975（或r2 0.95 ），則認(rèn)為X范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。X的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給以適當(dāng)補(bǔ)償，并且簡(jiǎn)單的線性回歸可以用來評(píng)價(jià)斜率和截距。 如果r2 0.95 ，那么必須通過分析另外一些樣品以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列。,回歸分析,直線方程式：y=mx+b y比較方法的結(jié)果 xVitros方法的結(jié)果 b直線的y 軸截距 m直線的斜率,通過散點(diǎn)圖的數(shù)據(jù)點(diǎn)，可以用線性回歸分析 找出“最好”的適配的直線方程式。,截距（b）測(cè)定了恒定誤差。理想值0 斜率（m）測(cè)定了比例誤差。理想值1,回歸分析的解釋,結(jié)果評(píng)價(jià)

9、,偏差的評(píng)價(jià)方案,數(shù)據(jù)滿足最適范圍檢查 數(shù)據(jù)均勻離散分布,數(shù)據(jù)不滿足最適范圍檢查 使用分步偏差計(jì)算平均偏差,1.用線性回歸方程評(píng)價(jià),3.用分步殘量程序評(píng)價(jià),2.用分步偏差程序評(píng)價(jià),數(shù)據(jù)存在精密度變化 用分步偏差計(jì)算分步的殘余值,殘量：一個(gè)給定的數(shù)據(jù)點(diǎn)與回歸線之間在Y軸方向測(cè)定出的差別，成為此點(diǎn)的殘量。 殘量Rij = Yij Yij = Yij (a+b Xij ） 評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)差（the Standard Error of the Estimate）SEE，又稱殘量的標(biāo)準(zhǔn)差，是測(cè)定圍繞回歸線的離散度，也即是Sy.x。,殘量及其標(biāo)準(zhǔn)差,Sy.x=(YijYij )/(2N-2),則68%的點(diǎn)應(yīng)預(yù)期落在1Sy.x內(nèi) 95%應(yīng)在2Sy.x內(nèi) 而99.7%應(yīng)在3Sy.x內(nèi)。,1.如果回歸直線的變異是呈正態(tài)分布,2.Sy.x測(cè)定了隨機(jī)誤差。理想值0 Sy.x 值較大，可能意味著：,一種或兩種方法的較差的精密度 兩種方法之間的不同特性 對(duì)Sy.x 解釋的前提是每個(gè)方法均有較好精密度。,1.在給定的醫(yī)學(xué)決定水平Xc，預(yù)期偏差Bc 的估計(jì)可按下式計(jì)算：,計(jì)算預(yù)期偏差,Bc=a+（b-1）Xc,2.Bc的95可信范圍（在Xc的真正偏差）可按下式計(jì)算：,Low High=