高中生物第一章無(wú)茵操作技術(shù)實(shí)踐第一節(jié)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用名師精選教案蘇教版選修1

1、名校名 推薦微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用重點(diǎn)知識(shí)歸納及講解（一）微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及功能1、微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水五大類(lèi)。2、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子的來(lái)源及功能。（二）培養(yǎng)基的種類(lèi)及配制原則（三）無(wú)菌技術(shù)1、無(wú)菌技術(shù)的內(nèi)容(1) 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。(2) 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。(3) 已經(jīng)滅菌處理的材料用具不與周?chē)奈锲方佑|。(4) 實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。2、消毒方法(1) 煮沸消毒法：如在 100煮沸 5 6min。- 1 -名校名 推薦(2) 化學(xué)藥劑消毒法：如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源

2、。3、滅菌方法(1) 灼燒滅菌。(2) 干熱滅菌。(3) 高壓蒸汽滅菌。（四）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1、計(jì)算根據(jù)配方比例，計(jì)算配制一定量的培養(yǎng)基所需各種成分的用量。2、稱(chēng)量3、溶化4、滅菌5、倒平板思考：平板冷凝后，為什么要將平板倒置？- 2 -名校名 推薦平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（五）純化大腸桿菌1、平板劃線(xiàn)法通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線(xiàn)后，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體

3、，即菌落。思考：（ 1）為什么在操作的第一步以及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的- 3 -名校名 推薦數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。（ 2）在作第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)？劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)

4、條起始處要少，每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。2、稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一序列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。課外拓展細(xì)菌的芽孢為數(shù)不多的產(chǎn)芽孢細(xì)菌生長(zhǎng)到后期，在其菌體內(nèi)形成的厚壁、折光性強(qiáng)、具抗逆性的孢子芽孢。每個(gè)細(xì)菌一般只產(chǎn)生一個(gè)芽孢，所以芽孢不是細(xì)菌的繁殖型，絕大多數(shù)產(chǎn)芽孢細(xì)菌為革蘭氏陽(yáng)性桿菌，其中主要為好氧的芽孢桿菌屬和厭氧的梭菌屬。放線(xiàn)菌中的高溫放線(xiàn)菌屬（ therm

5、oactinomyces ）也能產(chǎn)芽孢。芽孢是代謝活性很低，對(duì)干燥、熱、化學(xué)藥物（酸類(lèi)）和輻射等具有高度抗性的休眠體。例如，在很難覓到生物的沙漠中就有大量枯草桿菌和巨大芽孢桿菌的芽孢。芽孢的抗逆性和休眠能力有助于產(chǎn)芽孢細(xì)菌渡過(guò)困境，故芽孢對(duì)產(chǎn)芽孢細(xì)菌的生存具有重要意義。了解芽孢還有重要的實(shí)踐意義：芽孢是細(xì)菌分類(lèi)鑒定中一項(xiàng)重要的形態(tài)特征；殺滅芽孢是制訂滅菌標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)：主要是以殺滅肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和嗜熱脂肪芽孢桿菌等強(qiáng)致病性病菌或高耐熱性細(xì)菌的芽孢為標(biāo)準(zhǔn)的；許多產(chǎn)芽孢細(xì)菌是強(qiáng)致病菌：例如，炭疽芽孢桿菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)梭菌等；有些產(chǎn)芽孢細(xì)菌可伴隨產(chǎn)生有用的產(chǎn)物，如抗生素短桿菌肽（gramicidin）、桿菌肽（ bacitracin）等。芽孢形成：產(chǎn)芽孢細(xì)菌通常在必需的養(yǎng)料（碳源/ 或氮源）耗盡而停止